分子生物学常用仪器技术介绍
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分子生物学实验室仪器使用说明书一、引言分子生物学实验室仪器的使用是进行基因研究和分析的重要环节,正确的仪器操作和维护对于保证实验结果的准确性具有至关重要的作用。
本说明书旨在提供对分子生物学实验室仪器的正确使用方法和维护技巧的指导,以确保实验室工作的顺利进行。
二、常用仪器1. 基因扩增仪基因扩增仪是分子生物学实验室常用的仪器之一,其中最常见的是PCR仪。
以下是PCR仪的使用步骤:- 将待扩增的DNA模板、引物和试剂添加至PCR管或96孔板中;- 根据所需的扩增程序,在PCR仪面板上设置合适的温度和时间参数;- 启动PCR仪,开始扩增;- 扩增结束后,及时取出试管或孔板,并进行下一步实验操作。
2. 凝胶电泳仪凝胶电泳仪主要用于观察DNA、RNA或蛋白质的迁移情况以及分子大小的测定。
以下是凝胶电泳仪的使用步骤:- 准备所需的琼脂糖凝胶,并注入到电泳槽中;- 将待检测的样品混合液加入到电泳槽中的样品孔中;- 在电泳槽两侧连接正负极电源,并设置合适的电压和时间参数;- 启动电源,进行电泳;- 电泳结束后,取出凝胶,进行染色或进一步分析。
3. 离心机离心机用于分离混合物中的固体颗粒和液体,是分子生物学实验室必备的仪器之一。
以下是离心机的使用步骤:- 将待离心的样品均匀加入离心管中,并保持离心管的平衡;- 将离心管放入离心机转盘的相应位置,并注意转盘的平衡;- 根据离心速度和时间要求,设置合适的参数;- 启动离心机,开始离心过程;- 离心结束后,小心取出离心管,注意避免离心管的倾斜或颠倒。
三、常见问题及处理方法1. 仪器出现异常- 若仪器出现异常操作或显示异常,应首先检查是否按照正确的使用步骤进行操作;- 仔细阅读仪器说明书,查看是否存在使用特殊注意事项;- 若仍无法解决问题,及时联系仪器维修人员进行检修。
2. 仪器维护- 每次使用仪器后,应进行基本的清洁和消毒,保持仪器干净整洁;- 定期检查仪器是否正常,如电源是否接触良好,仪器表面是否有明显损坏等;- 根据仪器的要求,及时更换耗材和维护配件。
qpcr仪工作原理qPCR仪是一种用于检测和定量PCR反应的仪器。
它通过测量PCR反应体系中的荧光信号来确定反应体系中的模板DNA的数量。
本文将介绍qPCR仪的工作原理及其在分子生物学研究中的应用。
qPCR仪的工作原理主要包括PCR反应、荧光信号检测和数据分析三个步骤。
PCR反应是qPCR仪的基础。
PCR(聚合酶链式反应)是一种体外扩增DNA的方法,通过反复进行循环性的DNA变性、引物结合和DNA 合成,最终使目标DNA序列得以扩增。
在qPCR仪中,PCR反应通常包括预变性、扩增和终止三个阶段。
预变性阶段的目的是将DNA样本中的双链DNA变性为单链DNA,使其能够与引物结合。
扩增阶段是核酸链合成的主要阶段,此时引物与目标DNA序列结合并进行扩增。
终止阶段则是为了结束扩增反应并保持PCR产物的稳定性。
荧光信号检测是qPCR仪的关键步骤。
在PCR反应过程中,荧光染料与PCR产物结合并发出荧光信号。
常用的荧光染料有SYBR Green和TaqMan探针等。
SYBR Green是一种亲核染料,可以与DNA结合并发出荧光信号。
TaqMan探针则是一种双标记探针,其5'末端连接着荧光染料,3'末端连接着一个荧光淬灭剂。
TaqMan探针与PCR产物结合时,淬灭剂被切断,从而释放出荧光信号。
qPCR仪通过检测荧光信号的强度来确定PCR产物的数量。
数据分析是qPCR仪的关键环节。
qPCR仪会记录下PCR反应过程中荧光信号的变化,并将这些数据转化为扩增曲线。
扩增曲线可以反映PCR反应的动力学过程,包括指数增长期、平台期和饱和期。
通过分析扩增曲线的形状和荧光信号的阈值,可以计算出PCR产物的初始数量。
此外,还可以根据不同的数据处理方法,如绝对定量法和相对定量法,来计算目标DNA的相对表达水平或绝对拷贝数。
qPCR仪在分子生物学研究中有着广泛的应用。
首先,它可以用于基因表达分析。
通过比较不同样品中目标基因的表达水平,可以研究基因的调控机制和功能。
实验一分子生物学实验室常用仪器设备简介.第一篇:实验一分子生物学实验室常用仪器设备简介.实验一分子生物学实验室常用仪器设备简介一、实验目的熟悉分子生物学实验室常用仪器并熟练使用二、实验原理1、恒温气浴摇床:用于对温度和振荡频率有较高要求的细菌培养,发酵,杂交,生化反应及酶和组织研究等。
2、超净工作台:用于分子生物学无菌操作。
3、低温台式高速离心机:用于分离纯化DNA和蛋白质等,如基因片段的分离,蛋白酶的沉淀和回收等。
4、微量移液管:是连续可调的,计量和转移液体的专用仪器,其装有直接读数容量计。
有多种规格:①0.5-10μL②10-100μL③20-200μL④100-1000μL。
5、电泳仪:用于确定大分子物质的分子量以及鉴定物种亲缘关系的仪器。
6、PCR仪:用于目的基因的扩增,是一对寡糖核苷酸引物结合到正负DNA链上的靶序列两侧,从而酶促合成拷贝数为百万倍的靶序列DNA片段。
主要用于基础研究和应用研究等领域。
7、灭菌锅:用于细菌和细胞培养及核酸等有关实验使用的试剂,器皿及实验用具的严格灭菌。
三、实验仪器恒温气浴摇床、超净工作台、低温台式高速离心机、微量移液管、灭菌锅、PCR仪、电泳仪。
四、实验步骤(一)、恒温气浴要穿的使用:1、样品瓶牢固放入弹簧夹中2、接通电源开关,仪器进入准备状态3、参数设定,(设定温度、时间、转速等参数)4、按启动键仪器开始工作,按暂停键可暂停托盘的旋转;5、按电源键,显示屏显示消失,关闭电源总开关(二)、超净工作台的使用1、使用工作台时,先经过清洁液浸泡的纱布擦拭台面,然后用消毒剂擦拭消毒。
2、接通电源,提前30分钟打开紫外灯照射消毒,处理净化工作区内工作台表面积累的微生物,15分钟后,关闭紫外灯,开启送风机。
3、工作台面上,不要存放不必要的物品,以保持工作区内的洁净气流不受干扰。
4、操作结束后,清理工作台面,收集各废弃物,关闭风机及照明开关,用清洁剂及消毒剂擦拭消毒。
Sebia全自动凝胶电泳仪的临床应用随着生物技术的不断发展,分子生物学在临床诊断和治疗中的应用越来越广泛。
其中,全自动凝胶电泳仪作为一项重要的技术,为临床应用提供了强有力的支持。
本文将重点介绍Sebia全自动凝胶电泳仪及其在临床应用中的优势。
Sebia全自动凝胶电泳仪是一种高效、自动化的分子生物学分析仪器,主要应用于DNA、RNA和蛋白质的分析。
该仪器具有高分辨率、高灵敏度和高重复性的特点,能够提供准确、可靠的检测结果。
疾病诊断:全自动凝胶电泳仪能够通过对特定基因的表达水平进行分析,帮助医生对疾病进行早期诊断和预后判断。
例如,通过对肺癌、乳腺癌等肿瘤相关基因的表达水平进行检测,有助于医生对患者的病情进行准确诊断。
药物筛选:全自动凝胶电泳仪可以用于药物筛选过程中,通过对药物作用靶点的检测和分析,筛选出具有潜在疗效的药物。
这有助于缩短药物研发周期,提高药物研发效率。
遗传病诊断:全自动凝胶电泳仪能够对基因突变进行检测,帮助医生对遗传病进行诊断。
例如,通过对地中海贫血基因的检测,有助于医生对地中海贫血进行诊断。
微生物鉴定:全自动凝胶电泳仪可以用于鉴定细菌、病毒和其他微生物。
通过对微生物的基因组进行分析,有助于医生确定感染源,为感染性疾病的诊断和治疗提供依据。
血液分析:全自动凝胶电泳仪可以用于血液分析,帮助医生对血液疾病进行诊断。
例如,通过对血红蛋白、白细胞和血小板等血液成分的分析,有助于医生对贫血、白血病和血小板减少等疾病进行诊断。
优势:全自动凝胶电泳仪具有自动化、高分辨率和高灵敏度等优势,能够提供准确、可靠的检测结果。
该仪器操作简便,能够大大缩短检测时间,提高检测效率。
局限性:全自动凝胶电泳仪的价格较高,限制了其在临床的广泛应用。
该技术的灵敏度和特异性受限于检测样本的质量和数量,需要严格控制样本采集和处理的各个环节。
Sebia全自动凝胶电泳仪作为一种高效的分子生物学分析仪器,在临床应用中具有广泛的前景。
分子生物学科耗材及仪器
以下是一些常见的分子生物学科耗材及仪器:
1. 实验耗材:
- 移液器和吸头:用于准确量取液体。
- 离心管和离心机:用于分离和沉淀细胞、核酸和蛋白质等。
- 培养皿和培养箱:用于细胞培养和微生物培养。
- PCR 管和 PCR 仪:用于聚合酶链式反应(PCR)实验。
- 电泳槽和电泳仪:用于核酸和蛋白质的电泳分离。
- 试剂瓶和移液器:用于储存和分配试剂。
- 一次性手套和实验服:用于保护实验人员的安全。
2. 实验仪器:
- 紫外可见分光光度计:用于测定核酸和蛋白质的浓度。
- 凝胶成像系统:用于观察电泳结果。
- 实时荧光定量 PCR 仪:用于定量检测基因表达。
- 离心机:用于分离和沉淀细胞、核酸和蛋白质等。
- 移液器:用于准确量取液体。
- 生物安全柜:用于处理危险的生物样本,提供安全的实验环境。
这些耗材和仪器是分子生物学实验中常用的工具,它们的选择和使用将取决于具体的实验需求和研究目的。
在进行分子生物学实验时,正确选择和使用合适的耗材及仪器是确保实验成功和结果准确性的重要因素。
实验一分子生物学实验室常用仪器及使用事实证明,在科学飞速发展的今天,无论从事哪个领域的研究,要想突破,除了有良好的理论基础外,更重要的是依赖于先进的技术和优良的仪器设备以及良好的研究环境。
一个标准的分子生物学实验室除了具有一般生物学实验室的常规仪器设备外,还具有一些特殊用途的仪器,这些仪器一般较精密,价格昂贵。
下面介绍这些仪器的使用方法和注意事项。
一、冷冻离心机低温分离技术是分子生物学研究中必不可少的手段。
基因片段的分离、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物样品的分离制备实验中都离不开低温离心技术,因此低温冷冻离心机成为分子生物学研究中必备的重要仪器。
在国内,有多个厂家生产冷冻离心机,本实验室的高速冷冻离心机为GL-20G-Ⅱ型(上海安亭),落地式。
配有角式转头:6×50ml、12×10ml和12×1.5ml。
极限转速20000rpm。
1. 安装与调试离心机应放置在水平坚固的地面上,应至少距离10cm以上且具有良好的通风环境中,周围空气应呈中性,且无导电性灰尘、易燃气体和腐蚀性气体,环境温度应在0~30℃之间,相对湿度小于80%。
试转前应先打开盖门,用手盘动转轴,轻巧灵活,无异常现象方可上所用的转头。
转子准确到位后打开电源开关,然后用手按住门开关,再按运转键,转动后立即停止,并观察转轴的转向,若逆时针旋转即为正确,机器可投入使用。
2. 操作程序(1)插上电源,待机指示灯亮;打开电源开关,调速与定时系统的数码管显示的闪烁数字为机器工作转速的出厂设定,温控系统的数码管显示此时离心腔的温度。
(2)设定机器的工作参数,如工作温度,运转时间,工作转速等。
(3)将预先平衡好的样品放置于转头样品架上,关闭机盖。
(4)按控制面板的运转键,离心机开始运转。
在预先设定的加速时间内,其运速升至预先设定的值。
(5)在预先设定的运转时间内(不包括减速时间),离心机开始减速,其转速在预先设定的减速时间内降至零。
分子生物学实验室的常规仪器设备及有关操作一、验室的常规仪器、设备(一) 温度控制系统:1。
冰箱: 根据药品、试剂及多种生物制剂保存的需要,必须具备不同控温级别的冰箱,最常使用的有:4℃、—20℃、-80℃冰箱。
4℃适合储存某些溶液、试剂、药品等。
—20℃适用于某些试剂、药品、酶、血清、配好的抗生素和DNA、蛋白质样品等。
-80℃适合某些长期低温保存的样品、纯化的样品、特殊的低温处理消化液等的保存。
0-10℃的冷柜适合低温条件下的电泳、层析、透析等实验。
2.液氮罐:有些实验材料、某些器官组织、细胞株、菌株及纯化的样品等,要求速冻和长期保存在超低温环境下,就需要一个液氮罐(—196℃)具有经济、省力和较好地保持细胞生物学特性的优点。
3.培养箱:37℃恒温箱用于细菌的固体培养和细胞培养。
CO2培养箱适用于培养各种细胞,可恒定地提供一定量的CO2(通常5%),用来维持培养液的酸度(pH值)。
37℃恒温空气摇床可进行液体细菌的培养。
4。
水浴锅:用于保温。
25—100℃水浴摇床可用于分子杂交试验,各种生物化学酶反应等试验的保温。
25—100℃水浴箱用于常规试验。
5。
烘箱:主用于烘干实验器皿,有些需要温度高些,有些需要温度低些.用于RNA方面的实验用具,需要在250℃烤箱中烘干,有些塑料用具只能在42-45℃的烤箱中进行烘干。
(二)水的净化装置:随着分子生物学的飞速发展,许多实验对水纯度的要求越来越高.1. 蒸馏水皿:单蒸水常难以满足实验要求。
双蒸水、三蒸水配液,许多实验要去离子水。
多次蒸馏水可除去水中挥发性杂质,不能完全除去水中溶解的气体杂质(Mn2+、Cu2+、Zn2+、Fe3+、Mo(Ⅵ))。
2。
离子交换器:去离子水-用离子交换法制取的水,称去离子水。
去离子效果好,但不能除去水中的非离子型杂质,其中常含有微量的有机物(树脂等)。
3.超纯水:用蒸馏水、离子交换水、反渗透纯水做为供水,磁铁耦合齿轮泵作用使水循环。
《分子生物学》实验讲义实验一分子生物学实验基础知识及常用仪器介绍实验二质粒DNA分离纯化实验三琼脂糖凝胶电泳实验四聚合酶链反应(PCR)检测质粒DNA实验五限制酶切鉴定质粒DNA实验一分子生物学实验基础知识及常用仪器介绍一、实验目的了解分子生物学实验特点,了解分子生物学实验室常用设备及基本实验操作。
二、实验内容1.分子生物学实验知识⑴严格操作规程分子生物学实验一般比较复杂,如所用试剂多、操作步骤多、实验时间长等,因此为保证实验效果,在实验室中一定要有整体观念,严格按照操作规程进行。
⑵耐心细致操作实验中不能急于求成,特别是对于初入门者,应反复操作,积累经验。
⑶习惯微量操作在分子生物学实验中,试剂的用量往往很少,常常细到1ul液体、ug或ng固体,这是平常肉眼很难看到的,所以刚刚接触实验的人往往感到不习惯,总是担心要取的东西能否看到、准不准确,操作的样品会不会丢失,总是想加大反应体积,以为越多越好。
这些观念都是错误的。
只有定时定量加入液体,才能保证实验成功,所以平时应加以练习,逐渐建立微量操作的观念才能解决好问题。
⑷防止实验污染分子生物学实验的对象主要是核酸,不同生物材料的DNA和DNA之间,不同的样品之间,核酸酶等蛋白酶与核酸之间,产物与反应物之间都有可能造成污染,最终导致实验的失败。
故要从所用试剂、仪器设备、耗材及操作人员等方面进行防止污染的操作。
⑸正确处理试剂分子生物学实验中对试剂的要求十分严格,包括试剂的等级、配制、除菌储备等各方面均有严格要求。
⑹注意实验安全分子生物学实验中,操作者常会接触一些对人体有害的试剂,必须实验安全要求进行实验操作,否则会给实验室甚至整个人类带来巨大的危害。
2.分子生物学实验常用仪器介绍⑴微量取液器⑵水纯化装置(离子交换器、超纯水装置)⑶离心机(低速、高速、超速)⑷电泳装置(电泳仪、电泳槽)⑸灭菌设备(高压蒸汽灭菌锅、过滤除菌器)⑹超净工作台⑺PCR仪⑻凝胶成像系统(紫外分析仪、核酸凝胶电泳图谱的记录)⑼温度控制设备(冷冻设备、培养箱、水浴箱、烤箱)⑽其它设备(紫外可见分光光度计、微波炉、凝胶干燥器、真空干燥仪)3.分子生物学基本实验操作⑴基因组DNA的分离与纯化(核酸浓度和纯度测定)⑵真核细胞mRNA的分离与纯化⑶质粒DNA的提取⑷PCR基因扩增实验⑸限制性内切酶酶切实验⑹DNA重组技术⑺DNA转移技术⑻DNA测序:化学法、双脱氧链终止法⑼核酸探针的制备技术:末端标记、PCR法制探针、非放射性探针⑽分子杂交技术:Southern印迹、Northern印迹和Western印迹4.微量移液器的使用可调节微量移液器标准操作程序(适用的液体:水、缓冲液、稀释的盐溶液和酸碱溶液):⑴调节数字至所需体积;⑵装上吸嘴(不同规格的移液器用不同的吸头),注意气密性);⑶按到第一档,垂直进入液面几毫米;⑷缓慢松开控制按钮(否则液体进入吸头过速会导致液体倒吸入移液器内部吸入体积减少);⑸停顿1s后将吸嘴提离开液面;⑹平稳按压打出液体。
生物化学实验中的仪器与设备生物化学实验中,仪器与设备的使用起着至关重要的作用。
通过科学而精确的操作,能够获得可靠的实验结果,进而推动生物化学研究的发展。
本文将介绍几种常见的生物化学实验仪器与设备,并探讨它们在实验中的应用。
一、分光光度计分光光度计是生物化学实验中常见的仪器之一。
它通过测量溶液对特定波长光的吸收或透过来确定溶液的浓度。
分光光度计的工作原理是通过将可见光或紫外光通过溶液中,利用光的吸收作用来计算溶液的浓度。
在DNA测定、蛋白质浓度测定等实验中,分光光度计被广泛应用。
二、离心机离心机是一种常见的生物化学实验仪器,它通过离心力将样品内的细胞、碎片或其他颗粒物质沉淀到管底,从而分离出上清液和沉淀物。
离心机在细胞培养、离心沉降、蛋白质提取等实验中发挥着重要的作用。
三、电泳仪电泳仪是生物化学实验中不可或缺的仪器之一。
它通过电场作用将带电的生物分子(例如DNA、蛋白质)在凝胶中移动,从而实现对这些分子的分离和分析。
电泳仪广泛应用于DNA分析、蛋白质分析等实验中。
四、pH计pH计是一种用于测量溶液酸碱性的仪器。
生物化学实验中,酸碱性的精确控制对于诸多实验至关重要。
pH计通过测量溶液中氢离子的浓度来确定溶液的酸碱性。
在酶活性研究、酸碱反应等实验中,pH计的使用是不可或缺的。
五、实时荧光定量PCR仪实时荧光定量PCR仪是分子生物学和遗传学研究中重要的仪器之一。
它通过荧光信号的检测来监测DNA的扩增过程,从而定量分析初始DNA的含量。
实时荧光定量PCR仪在基因表达分析、病原体检测等领域有着广泛的应用。
六、冷冻离心机冷冻离心机是一种用于生物样品冷冻离心的仪器。
在生物化学实验中,冷冻离心机被广泛用于富集样品中的蛋白质、RNA或DNA等。
冷冻离心机通过低温离心过程中控制冷却系统,可以防止样品中的目标分子被降解。
七、质谱仪质谱仪是一种用于分析复杂混合物成分的仪器。
它通过将分子样品分解成带电离子,并通过测量带电离子的质量和相对丰度来确定样品中各种成分的含量和结构。
分子生物学领域常用的实验室仪器介绍分子生物学领域是现代生命科学的重要分支之一,它研究的是生物分子层面的生命过程,旨在深入揭示生命的本质和机制。
而在分子生物学研究中,实验室仪器则是不可或缺的工具,它们不仅可以帮助研究者进行实验操作,还能够提高实验结果的可靠性和精度。
本文将为大家介绍分子生物学领域常用的实验室仪器。
一、PCR扩增仪PCR(聚合酶链式反应)扩增技术是分子生物学领域中最常用的实验技术之一,是通过对核酸单链进行不断反复的扩增,从而获得足够多的样品用于后续的实验研究。
PCR扩增仪是一种能够精确控制温度并产生稳定温度的设备,它可以通过快速升温和降温的方式对PCR反应的反应体系进行加热和冷却,以满足PCR反应各个步骤所需的不同温度条件。
根据不同的实验需求,PCR扩增仪通常有单块、双块和四块等不同规格型号。
二、电泳仪电泳是一个常见的探测和分离生物分子的方法,尤其在DNA和RNA分子的研究中应用广泛。
电泳仪则是进行电泳实验的设备。
电泳仪根据不同的实验需求、对样品大小和数量的要求,可以选择垂直电泳仪、平板电泳仪、毛细管电泳仪、聚丙烯酰胺凝胶等不同类型的电泳仪。
其中,聚丙烯酰胺凝胶电泳仪是目前应用最广泛的电泳仪之一,它可以以高效、稳定和可重复的方式对生物分子进行分离、检测和纯化。
三、荧光定量PCR仪荧光定量PCR(实时PCR)技术是PCR技术的一种延伸,它通过检测PCR反应过程中荧光信号的变化动态监测扩增产物的累积情况,从而实时定量测定PCR反应产物的含量。
荧光定量PCR仪是荧光定量PCR技术实验的核心设备,它通过荧光信号的强度或增长速率来定量PCR反应物质的含量。
荧光定量PCR仪可根据实验数量和复杂程度的不同分为单通道和多通道两种类型。
四、显微镜生物显微镜是分子生物学领域中经常使用的设备,它主要用于观察、研究和记录细胞和组织样品的结构和形态特征,以及细胞间和分子间的相互作用和动态过程。
在生物领域中广泛应用多种类型的显微镜如荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、超高分辨率显微镜等。
临床分子生物学检验常用仪器与技术
临床分子生物学检验常用仪器与技术包括多种常规和高级技术,如PCR、RT-PCR、Western blot、Northern blot、Southern blot、ELISA、DNA测序、基因芯片等。
其中,PCR和RT-PCR是检验DNA和RNA的基础技术,可用于检测病原体、遗传病、肿瘤等。
Western blot、Northern blot和Southern blot是分别用于检测蛋白质、RNA和DNA 的技术,可用于分析基因表达、筛选基因、检测突变等。
ELISA是一种用于检测抗原或抗体的技术,可用于诊断感染性疾病、自身免疫性疾病等。
DNA测序和基因芯片是高级技术,可用于研究基因组学、转录组学、生物信息学等。
这些技术的应用使得临床分子生物学检验更加精准、快速和高效,为疾病的诊断、治疗和预防提供了更多的手段和可能性。
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