钙检测试剂盒(邻甲酚酞络合铜比色法)

钙检测试剂盒(邻甲酚酞络合铜比色法)简介：钙(Calcium)是一种金属元素，常温下呈银白色晶体，动物的骨骼、蛤壳、蛋壳都含有碳酸钙。

检测生命体钙含量，主要通过检测钙离子浓度实现的。

Leagene 钙检测试剂盒(邻甲酚酞络合铜比色法)是利用溶液中钙离子在碱性条件下能与邻甲酚酞络合铜(OCPC)结合，生成蓝红色的络合物，加入镁离子螯合剂，去除镁离子背景干扰。

通过分光光度计检测575nm 处吸光度值，根据公式计算出总钙含。

该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

组成：操作步骤(仅供参考)：1、 (选做)制备样品：① 血浆、血清样品：血浆、血清按照常规方法制备，可以直接用于本试剂盒的测定，-20℃冻存，用于Ca 的检测。

②细胞或组织样品：取恰当细胞或组织进行匀浆，低速离心取上清，-20℃冻存，用于Ca 的检测。

高浓度样品：如果样品中含有较高浓度的Ca ，可以使用ddH 2O 稀释，不宜使用普通蒸馏水稀释。

④(选做)样品准备完毕后可以用BCA 蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便于后续计 算单位蛋白重量组织或细胞内的Ca 含量。

2、 Ca 检测：选用经稀盐酸处理及去离子水清洁的的干燥试管或者一次性无菌聚乙烯离心管，按下表操作。

编号 名称TC1026 50T Storage试剂(A): 钙标准(2.5mmol/L) 1ml 4℃ 试剂(B): Ca Assay buffer 50ml RT 避光 试剂(C): OCPC 显色液 50ml 4℃ 避光 试剂(D): ddH 2O 10mlRT 使用说明书1份加入物(ml)空白管 标准管 测定管 ddH 2O0.025 — — 钙标准(2.5mmol/L) — 0.025 — 待测样品——0.025Ca显色工作液 2.0 2.0 2.03、混匀，室温静置，分光光度计575nm处检测，比色杯光径1.0cm，以空白管调零，读取各管吸光度。

计算：血清、血浆中钙计算公式：钙(mmol/L)=(A测定/A标准)×2.5组织中钙计算公式：钙(mmol/mg)=(A测定/A标准)×2.5/待测样品蛋白浓度(mg/L)参考区间：健康成年人血清钙浓度：2.1-2.6mmol/L儿童血清钙浓度：2.25-2.67mmol/L注意事项：1、溶血样本对检测有干扰，尽量避免采用溶血样本。

《临床生物化学与检验》实验教学大纲编写单位：西安医学院医学技术系临床生化与免疫病原检验教研室编写时间：2008年6月20日教务处印制2008年6月20日一、实验课程简介二、实验教学内容与基本要求（一）、实验项目名称：生化检验基本实验技术[实验目的]1. 掌握吸量管、加样器、分光光度计的使用；2. 掌握实验报告的内容及书写格式；3. 熟悉混匀技术、标准曲线的绘制，临床生物化学实验室守则。

[实验教学基本要求]1. 学会生化检测的简单操作；2. 学习标准曲线制作及其意义。

[实验内容提要]1. 吸量管及加样器的使用；2. 分光光度计的使用；3. 混匀技术；4．标准曲线的绘制。

[实验类型]验证性[实验学时]：3学时[实验使用的主要仪器]1．试剂 3%的CuSO4溶液、蒸馏水2．器材 721/723分光光度计、吸量管、加样器（二）、实验项目名称：血清蛋白测定[实验目的]1. 掌握双缩脲法测定血清总蛋白、溴甲酚绿法测定血清清蛋白基本原理及操作；2. 熟悉血清蛋白测定的临床意义、注意事项；3．了解测定血清蛋白特点。

[实验教学基本要求]1. 学会血清蛋白测定的手工操作；2. 树立准确检测的概念。

[实验内容提要]1.双缩脲法测定血清总蛋白；2.溴甲酚绿法测定血清清蛋白。

[实验类型]验证性[实验学时]：3学时[实验使用的主要仪器]1．试剂 70g/L蛋白标准液、双缩脲试剂、溴甲酚绿试剂、40g/L清蛋白标准液2．器材 721/723分光光度计、吸量管、加样器、水浴箱（三）、实验项目名称：醋酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白质[实验目的]1. 掌握CAM电泳分离血清蛋白原理，操作过程（点样、电泳条件的选择、染色、漂洗、等过程）；2. 熟悉电泳仪装置过程，支持物平衡，区带的定量分析方法3．了解电泳中出现脱尾现象的原因及纠正方法。

[实验教学基本要求]1. 学会CAM电泳的操作（点样、电泳条件的选择、染色、漂洗过程）；2. 学会洗脱法进行区带的定量分析。

血清钙Ca比色法测定1 检验目的指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。

2 实验原理在碱性条件下，加入8-羟基喹啉能防止镁和铁的干扰钙离子的测定情况下，Ca2+和邻甲酚酞络合酮形成紫色复合物钙 +O-CPC 碱性环境钙－O-CPC复合物其钙离子与邻甲酚酞络合酮复合物的颜色与钙浓度成正比，可用利用其吸光度的变化来测定钙离子的含量。

3 标本采集3.1 病人准备：无特殊要求。

3.2 类型：血清、肝素血浆或尿液。

3.3 标本存放：血清/血浆稳定性：20～25℃保存可稳定7天；4～8℃保存可稳定3周；-20℃保存可稳定8个月。

尿液稳定性：20～25℃保存可稳定2天；4～8℃保存可稳定4天；-20℃保存可稳定3个月；对24h尿液标本加浓盐酸10ml，并加热标本，使草酸钙溶解。

3.4 标本运输：室温条件下运输3.5 标本拒收标准：细菌污染的不能做测定。

4. 实验材料：4.1 试剂：上海罗氏诊断产品有限公司CA试剂盒,国械注进20142405056YZB/GER 5724-2014）4.1.1 试剂组成R1 氨基乙醇缓冲液:1mol/L，pH10.6R2 邻甲酚酞络合酮:0.3mmol/L;8－羟基喹啉:13.8mmol/L;盐酸:122mmol/L4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。

4.1.3 试剂稳定性与贮存：15－25°C下保存期限：见试剂标签上的有效期机上稳定期：42天。

4.1.4 变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。

4.2 校准品：使用罗氏多项生化校准品提供的Ca校准品对自动分析仪进行校准。

4.3 质控品：使用正常值、病理值复合控制品。

5 仪器AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪。

6 操作步骤6.1 样品的准备：将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。

6.2 试剂的检测：仪器开机后，检查各种试剂的位置，体积等确认无误后方可进行测定。

常规营养成分的测定1．鲜重：鲜活的植物采集后立即称重的重量。

本试验是，马饲喂的草料在一定风干基础上，短时间内收集后称重。

2．风干重：采集的草料在65℃的电热恒温鼓风干燥箱中，在一定的大气压下进行烘干，损失游离水分，至恒重，剩余的即为风干物，称重。

3．干物质：试验样品在105±2℃的电热恒温鼓风干燥箱中，在一定的大气压下进行烘干，失去水分，至恒重，剩余的即为干物质。

4．有机物：是有机化合物的简称，通常把含碳元素的化合物叫做有机化合物，简称有机物。

实验一、干物质含量的测定目的：掌握饲料中吸附水的测定方法及饲料总水分的计算。

（一）原理试验样品在105±2℃的电热恒温鼓风干燥箱中，在一定的大气压下烘干，直至很重，烘后失去水分，剩余的即为干物质。

（二）仪器设备分析天平：感量0.0001g；实验室用样品粉碎机；分析筛：孔径0.45mm（40目）；电热式恒温烘箱：可控制温度为105±2℃；称样皿：玻璃或铝质（铝盒）、直径40mm以上、高25mm以下；干燥器：用氯化钙（干燥试剂）或变色硅胶作干燥剂。

（三）测定步骤1.试验样品的处理：样品（草样，粪样）用60-180目孔径的粉碎机进行粉碎，分装到封口带中，将空气排出，每个样品约200g，放入阴凉干燥处保存。

2.将铝盒称样皿（铝盒）洗净后，编号，置于105±2℃的电热恒温鼓风干燥箱干燥6h，至恒重。

取出置于干燥器中，冷却至室温。

用感量为0.0001g的电子天平称重，记录为W0。

3.样品（草样，粪样）准确称取1g（精确到0.0002g），放入铝盒中，记录为W1，每个样品做一个平行。

然后置于105±2℃的电热恒温鼓风干燥箱中干燥6h，至恒重。

取出置于干燥器中，冷却至室温。

用感量为0.0001g的电子天平称重，记录为W2。

（四）测定结果计算计算公式：干物质含量（%）干物质含量（%）=W2-W0×100% W1-W0公式中：W0：铝盒重（g）W1：铝盒重+样重（g）W2：铝盒重+干燥后样重（g）思考题：1.测定水分时应该注意哪些问题？2.某种饲料半干样本的105℃干物质为90%，该饲料70℃干物质为32%，计算该种饲料新鲜时干物质的含量？实验二、有机物的测定实验目的：掌握饲料中粗灰分的测定方法，并用以测定各类饲料中粗灰分含量。

Millipore- 1.00858页码 1 的 9The life science business of Merck operates as MilliporeSigma in the US化学品安全技术说明书按照GB/T 16483、GB/T 17519编制版本6.2修订日期18.09.2022打印日期18.09.2022最初编制日期19.07.2017SDS 编号Millipore - 1.00858产品编号Millipore - 1.00858钙测试预装试剂盒第1部分：化学品及企业标识1.1 产品标识产品名称: 钙测试预装试剂盒Calcium Cell Test Method: photometric 10 -250 mg/l Ca14 - 350 mg/l CaO25 - 624 mg/l CaCO₃ Spectroquant®产品编号: 1.00858产品编号: 100858品牌: Millipore1.2 安全技术说明书提供者的详情制造商或供应商名称: Sigma-Aldrich (Shanghai) Trading Co.Ltd.509 Renqing RoadZhangjiang High Tech East Park, PudongSHANGHAI201201 SHANGHAICHINA西格玛奥德里奇（上海）贸易有限公司上海市浦东新区仁庆路509号10幢邮政编码：201201默克股份两合公司64271 达姆施塔特德国Millipore - 1.00858 页码 2 的 9The life science business of Merck operates as MilliporeSigma in the USPhone:+49(0)6151 72-2440电话号码 : +86 21 6141-5566 传真: +86 21 6141-55671.3 应急咨询电话紧急联系电话: +86 532 838890901.4 物质或混合物的推荐用途和限制用途已确认的各用途 : 分析用试剂这是此产品概括的物质安全资料表(SDS),如需第16项中所列的每一成分完整的物质安全资料表(SDS),请浏览我们的网站.第2部分：危险性概述2.1 GHS 危险性类别易燃液体 (类别 3), H226 金属腐蚀物 (类别 1), H290严重眼睛损伤/眼睛刺激性 (类别 2A ), H319 生殖毒性 (类别 1B ), H360本部分提及的健康说明（H-)全文请见第16部分。

兽医临床诊断学实验教学大纲Lele was written in 2021《兽医临床诊断学》实验教学大纲1.课程属性：必修2.实验属性：非独立设课3.学时：总学时40，理论学时20，实验学时20。

4.实验应开学期：第6学期5.先修课程：家畜解剖与组织胚胎学、家畜生理学、家畜病理学、动物生物化学等一、课程的性质与任务兽医临床诊断学实验课是在学习临床诊断理论课的基础上进行的一个实践性环节，本课程的教学任务是让学生运用已学过的理论知识进行验证性的实验，加深对临床诊断理论课程中基本理论知识的理解，实地训练学生理论知识的运用能力、实验操作技能、诊断仪器的使用能力、实验资料或数据的处理和分析能力。

二、实验目的与基本要求本实验课配合理论教学，通过实验从实践中进一步学习，掌握和运用学过的临床检查方法及症状鉴别诊断知识，初步具备对畜禽的群发病和多发病进行诊断、采取综合措施的能力。

学生必须完成的基本要求：实验准备；能利用各种检查方法熟练对动物各系统进行检查；能熟练对血、粪及尿进行常规检查；能利用各种治疗方法对动物进行治疗；整理及分析实验资料或数据；写出实验报告。

三、实验考核方式及方法考核方式：考查；实验成绩评分办法或标准：出勤、课堂纪律、动手能力和实验报告等。

四、实验项目一览表兽医临床诊断学实验项目一览表序号实验项目名称实验类型实验要求适用专业学时１２３４５６７８９１０临床常见的几种诊疗器械超声诊断（一）超声诊断（二）粪便的检验（一）粪便的检验（二）血液检查（一）血液检查（二）血液检查（三）尿液的检验（一）尿液的检验（二）验证性验证性验证性验证性验证性验证性验证性验证性验证性验证性必做必做必做必做必做必做必做必做必做必做动物医学动物医学动物医学动物医学动物医学动物医学动物医学动物医学动物医学动物医学２２２２２２２２２２五、实验项目的具体内容实习一临床常见的几种诊疗器械１、本次实验的目的和要求认识几种诊疗器械并了解其在临床上的用途；掌握操作中的注意事项；２、实验内容或原理乳导管、穿刺针、三棱针、三用套管针、听诊器、叩诊器、阴道扩张器及电池式照明器、胃导管及漏斗、灌药瓶、耳夹子、金属注射器（拆卸、消毒与安装）、连续注射器、血球分类记数仪３、需用的仪器和试剂无４、实验步骤无５、教学方式讲授及示范为主６、考核要求以出勤、听课表现、动手能力、实验报告等为主要考核内容。

钙测定试剂盒（邻甲酚酞络合酮法）
适用范围：本试剂盒用于体外定量检测人血清中钙离子的含量。

1.1包装规格：
试剂1：100ml×1；试剂2：100ml×1。

1.2组成成份：
试剂1：邻甲酚酞络合酮 0.16mmol/L，8-羟基喹啉 6.89mmol/L；
试剂2：2-氨基-2甲基-正丙醇 3.5mol/L。

2.1 外观：均为澄清溶液，外包装完整。

2.2 净含量：不少于标示值。

2.3 试剂空白吸光度：A≤0.6（波长575nm，光径10mm）。

2.4 分析灵敏度：浓度为2.5mmol/L时,吸光度变化△A≥0.10。

2.5 线性区间
2.5.1线性相关系数：[1.00，
3.75]mmol/L范围内，线性相关系数r≥ 0.990。

2.5.2线性偏差：[1.00，1.25]mmol/L时，绝对偏差不超过±0.125mmol/L；(1.25，
3.75]mmol/L时，相对偏差不超过±10%。

2.6 精密度
2.6.1重复性：重复测定质控血清，变异系数（CV）≤
3.0%。

2.6.2批间差：用质控血清测试3个不同批号的试剂，相对极差≤5.0%。

2.7 准确度：测定国家标准物质，相对偏差在±5.0%范围内。

2.8 稳定性：试剂盒在2℃～25℃避光贮存有效期为18个月。

保存至有效期末进行测定，试验结果满足2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7的要求。

钙测定试剂盒（邻甲酚酞络合酮法）适用范围：本试剂用于体外定量测定人血清钙的含量。

1.1型号规格
产品组成：
2.1 外观
2.1.1 试剂1为黄色透明液体，无混浊，无未溶解物。

2.1.2 试剂2为无色透明液体，无混浊，无未溶解物。

2.1.3 校准品为无色透明液体，无浑浊，无未溶解物。

2.1.4 标签内容清晰，字迹牢固不易脱落。

2.2 试剂装量
液体试剂的净含量不少于标示值。

2.3 试剂空白吸光度
A≤0.30（光径1.0cm，570nm±20nm 波长）。

2.4 分析灵敏度
测定2.5mmol/L样本，吸光度变化在0.500～0.875范围内。

2.5 线性区间
2.5.1 [0.4,
3.75]mmol/L。

在规定的线性范围内，测定值与样本浓度值的相关系数（r）应不低于0.990。

2.5.2 [0.4，1.0]mmol/L范围内，线性绝对偏差应不超过±0.1mmol/L；(1.0，
3.75]mmol/L范围内，线性相对偏差应不超过±10%。

2.6 精密度
2.6.1 重复性
变异系数CV≤3.0%。

2.6.2 批间差
批间差≤5.0%。

2.7 准确度
相对偏差在±5.0%范围内（测试国家标准物质GBW09152）。

2.8 稳定性
原装试剂2℃～8℃保存，有效期12个月，有效期满后2个月内测定结果应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1、和2.7要求。

临床生化常用‎的色原及检测‎波长Toos 545nm苯酚（对氯苯酚）505nmNAD（P）H指示系统，波长340n‎m，项目：ALT、AST、GLUC己糖‎激酶法、C K、UREA、LDH等。

苯衍生物类，波长400-410nm，如ALP、GGT、CHE等。

过氧化物酶指‎示系统，项目：TG、TCH、HDL-C、LDL-C、UA等。

可见光波长及‎其互补色：可见光波长及‎其相应被吸收‎的颜色依次为‎：红色（630～700nm）、橙色（600～630nm）、黄色（570～600nm）、绿色（500～570nm）、蓝色（435～500nm）、紫色（400～435nm）。

★540nm：1. 双缩脲测蛋白‎：所有蛋白质分‎子都含有肽键‎。

在碱性溶液中‎，肽键与铜离子‎结合，生成蓝紫色化‎合物，在540nm‎处吸光度与肽‎键的数量呈正‎比关系，可以计算蛋白‎质含量。

2. 染料结合法测‎脑脊液蛋白：在柠檬酸存在‎的酸性条件下‎，伊红Y燃料离‎解成阴离子型‎，染料的黄色消退，使试剂空白吸‎光度降低；另外，蛋白质多肽链‎中的精氨酸、组氨酸、赖氨酸和色氨‎酸残基，离解生成带－NH3+基团，与染料阴离子‎的羧基和酚基‎借静电吸引而‎结合成红色蛋‎白燃料复合物‎，其540nm‎处吸光度大小‎与蛋白质浓度‎呈比例。

★628nm：1. 溴甲酚绿法测‎血清白蛋白：在PH4.2的缓冲液中‎，白蛋白分子带‎正电荷，与带负电荷的‎溴甲酚绿（BCG）生成蓝绿色复‎合物，在波长628‎n m处有吸收‎峰。

复合物的吸光‎度与白蛋白浓‎度成正比。

★603nm：1. 溴甲酚紫法（BCP）测血清白蛋白‎：BCP溶于P‎H5.2的醋酸缓冲‎液中，呈黄色。

当它与白蛋白‎结合后转变为‎绿色的符合物‎，在波长603‎出有最大吸收‎峰。

★650nm：1. 磷钨酸法测黏‎蛋白：以0.6mol/L过氯酸沉淀‎血清中蛋白质‎时，黏蛋白不被沉‎淀，仍存留在滤液‎中，再加磷钨酸使‎黏蛋白沉淀，然后以酚试剂‎测定沉淀物中‎蛋白质的含量‎。