上海海洋大学--水产动物遗传育种中心

慢性氨氮胁迫对“新吉富”罗非鱼幼鱼生长及血清生化指标的影响唐首杰; 刘辛宇; 吴太淳; 赵金良【期刊名称】《《水产科学》》【年(卷),期】2019(038)006【总页数】8页(P741-748)【关键词】氨氮; “新吉富”罗非鱼; 生长; 血清生化指标【作者】唐首杰; 刘辛宇; 吴太淳; 赵金良【作者单位】上海海洋大学农业农村部淡水水产种质资源重点实验室水产科学国家级实验教学示范中心水产动物遗传育种中心上海市协同创新中心上海201306【正文语种】中文【中图分类】S965.125氨是硬骨鱼类氮代谢的主要终产物[1]，约占含氮分泌物总量的75%～90%[2]。

水中氨的含量通常以总氨氮来评价，总氨氮包括非离子氨(NH3)和离子铵非离子氨与离子铵的相对比例与水体的温度、pH、盐度、溶解氧等密切相关[3]。

非离子氨是一种易溶于脂类的中性分子，其毒性是离子铵的300～400倍[4]。

大部分硬骨鱼对非离子氨的毒性较为敏感，高含量非离子氨的急性毒性能引起鱼类抽搐、昏迷甚至死亡等[5-6]，即使是低含量非离子氨的慢性毒性也会对鱼类产生多种不良影响，如降低鱼类的生长速度[7-9]，损伤鱼类的鳃、肝脏和肾脏组织[10]，降低鱼体免疫力，增加细菌的易感性[11]。

因此，氨氮是鱼类的主要环境胁迫因子之一。

“新吉富”罗非鱼(Oreochromis niloticus)是上海海洋大学以1994年引入的尼罗罗非鱼“GIFT”品系第3代为基础群体(F0)，历经10年系统选育而成的罗非鱼新品种(登记号GS01-001-2005)[12]，至2016年已选育至第20代(F20)。

目前，该品种已成为我国罗非鱼养殖业的主养品种之一。

但随着罗非鱼集约化养殖密度的提高，养殖水体中残饵、粪便等不断累积，致使部分地区罗非鱼长期处于较高含量氨氮的养殖环境中，从而导致其生长性能下降，影响了罗非鱼养殖效益[13]。

鉴于此，在选育系F20的基础上，研究氨氮对“新吉富”罗非鱼的慢性毒性效应，探索氨氮的慢性胁迫机制已成当务之急。

基因组学与应用生物学，2020年，第39卷，第10期，第444丨-4448页研究报告Research Report花鲈7Y7?基因表达和功能分析庞微1赵紫维1申亚伟1李军2,3陈晓武4,5#1上海海洋大学,水产科学国家级实验科教示范中心，上海,201306; 2中国科学院海洋研究所实验海洋生物学重点实验室，青岛，266071; 3青 岛海洋科学与技术国家实验室，海洋生物学与生物技术功能实验室，青岛，266237; 4上海海洋大学，上海水产养殖工程技术研究中心，上海，201306; 5上海海洋大学，水产动物遗传育种中心上海市协同创新中心,上海，201306* 通信作者，***************.cn摘要花鲈是中国重要的海水鱼，它可以在河口或淡水中生长。

体色是鱼类重要的 生物学特征，与鱼或鱼肉的外观有密切关系，影响其市场价值。

酪氨酸酶(tyrosinase,TYR)是黑色素合成的关 键酶。

本研宄克隆了花鲈基因，其包括完整开放阅读框1 620bp,编码539个氨基酸，分子量为61.1 kD,理 论等电点为6.04。

花鲈T Y R有丨9个氨基酸编码的信号肽，一个跨膜结构域。

花鲈基因还含有2个保守 的结构域:EGF-Iike结构域和铜离子结合区域，还有6个保守的组氨酸位点。

系统进化分析表明花鲈7Y/?与 大黄鱼(LaHmic/u/tys有着较高的同源性，物种间亲缘关系与其传统分类地位一致。

蛋白质结构预测也表明花鲈T Y R的三维结构具有典型的酪氨酸酶特征，包括酪氨酸结构域和铜离子结合的氨基酸位点。

PCR 结果显示花鲈7Y/?主要在鳃、脾、皮肤、胃盲囊、中肾、头肾和伪鳃中表达。

在胚胎期发育中，7T/?从原肠期开 始表达。

本研宄结果说明花鲈7Y7?不仅和黑色素的合成有关，也可能参与其它生理活动以及花鲈早期胚胎 发育，为进一步研究鱼类7Y/?的功能和进化提供理论依据。

关键词花鲈,717?基因，序列分析，蛋白质结构Expression and Function Analysis of TYR from Lateolabrax maculatusPang Wei 1Zhao Ziwei 1Shen Yawei 1Li Jun23Chen Xiaowu4,5*1National Demonstration Center for Experimental Fisheries Science Education, Shanghai Ocean University, Shanghai, 201306; 2 CAS Key Laboratory of Experimental Marine Biology, Institute of Oceanology, Chinese Academy of Sciences, Qingdao, 266071; 3 Laboratory for Marine Biology and Biotechnology, Qingdao National Laboratory for Marine Science and Technology, Qingdao, 266237; 4 Shanghai Engineering Research Center of Aqua­culture, Shanghai Ocean University, Shanghai, 201306; 5 Shanghai Collaborative Innovation for Aquatic Animal Genetics and Breeding, Shanghai O- cean University, Shanghai, 201306*Correspondingauthor,***************.cnDOI: 10.13417/j.gab.039.004441Abstract L a teo la b ra x maculatus is an important marine fish in China.It can grow in estuary and fresh water. Body color is an important biological feature of fish,it is also closely related to the appearance of live fish or fish meat product,and affected its market value.Tyrosinase (TYR)is the key enzyme in melanin synthesis.The L. maculatus TYR (Lm-TYR)gene was cloned and analyzed in this study.The gene includes 1 620 bp open reading frame,coding539 amino acid.The protein has a predicted molecular mass of61.1 kD and theoretical isoelectric point is6.04. Lm-TYR has a 19 amino acids putative signal peptide at the N terminal and a transmembrane region at the C-terminal end.The Lm-TYR gene family contains two conserved domain:EGF-like domain and copper ion binding domain.The protein has6 conserved histamine sites.Phylogenetic analysis showed that the Lm-TYR gene基金项目：本研究由现代农业产业技术体系专项资金资助项目(CARS-47)和中国科学院海洋研究所实验海洋生物学重点实验 室幵放课题(No. KF2017NO2)共同资助引用格式：Pang W.，Zhao Z.W., Shen Y.W., Li J., and Chen X.W., 2020, Expression and function analysis of 7T7? frommac"/ato, Jiyinzuxue Yu Yingyong Shengwuxue (Genomics and Applied Biology), 39(10): 4441-4448 (庞澂，赵紫维，申亚伟，李军，陈晓武，2020,花鲈7T/?基因表达和功能分析，基因组学与应用生物学，39(10): 4441-4448)4442 基因组学与应用生物学was classified to a subfamily of teleost with high homology with Larimichthys crocea.The genetic relationship between species is consistent with their traditional taxonomic status.Protein structure prediction indicated that the three-dimensional structure of gastric caecum has typical TYR protein characteristics,including tyrosine domain and two copper ion-binding sites.RT-PCR showed that Lm-TYR was mainly expressed in gill,spleen,skin,gastric caecum,kidney,head kidney and pseudobranch.During embryonic development,Lm-T}R gene is expressed from the gastrula stage.The results showed that the tyrosinase was not only involved in the synthesis of melanin,but also involved in other physiological activities and early embryonic development.This paper lays a foundation for further research on the function of fish TYRs.Keywords Lateolabrdx rmicuhuus,Tyrosinase,Sequence analysis,Protein structure鱼体色由色素细胞存在的数量、性质以及分布决 定，黑色素细胞是最常见和最保守的一类。

《水产动物遗传育种学水产动物遗传育种学》》入学考试大纲一、考试说明《水产动物遗传育种学》为上海海洋大学水产与生命学院动物遗传育种与繁殖专业的考试科目，主要考察学生对水产动物遗传育种学及其相关学科的基本理论的掌握程度，内容包括孟德尔遗传、基因定位、性别决定、伴性遗传、数量性状遗传、基因与基因组、杂交育种、多倍体育种及雌核发育等。

1．参考教材《遗传学》（第三版），朱军主编，中国农业出版社。

《现代遗传学》（第二版），赵寿元、乔守怡主编，高等教育出版社。

《鱼类育种学》（第二版），楼允东主编，中国农业出版社。

《水产动物育种学》，范兆廷主编，中国农业出版社。

2．考试内容比例经典遗传学内容70％，育种学内容30％，共计100分。

二、考试内容（一）遗传的细胞学基础1．染色体的形态和数目2．细胞的有丝分裂和减数分裂3．配子形成和受精（二）孟德尔遗传1．分离定律和独立分配定律2．遗传学数据的统计分析3．孟德尔定律的补充和发展（三）连锁遗传和性连锁1．连锁与互换2．交换值的测定及基因定位3．性别决定与性连锁（四）遗传物质的改变1．染色体结构变异2．染色体数目变异3．基因突变（五）基因与基因组1．基因的概念及其发展2．基因组的DNA 序列组成3．转座因子及其结构特性4．基因组研究进展（六）细胞质遗传1．细胞质遗传的特点2．叶绿体遗传3．线粒体基因及遗传（七）数量遗传1．数量遗传特点2．遗传率估算3．近交系数计算（八）群体遗传与进化1．群体的基因频率和基因型频率2．哈迪-魏伯格定律3．影响群体遗传平衡的因素（九）选择育种1．选择育种的原理2．育种性状的选择3．选择育种的方法（十）杂交育种1．杂交育种的基本原理2．杂种优势的利用（十一）多倍体育种1．多倍体产生的机制2．多倍体诱导的方法 (十二雌核发育1．雌核发育二倍体诱发2．雌核发育二倍体的鉴定（十三）育种实践中的标记技术1．遗传标记概述2．分子标记的类型和原理3．分子标记在育种中的应用4．人工标记。

2018.4我国是水产养殖业大国，水产动物寄生虫病是影响水产养殖业经济效益的重要因素。

其中，危害性较大的水产动物寄生虫有车轮虫、指环虫等，目前还未有很好的药物能从源头上进行根治。

对此，笔者实验室针对这一现状，研制出了一种以净化水质来防治寄生虫的水产类渔药，实验效果显著。

现介绍如下，供基层鱼病防治技术人员和养殖户参考。

一、基本情况随着养殖水质不断恶化，近年来车轮虫病发病频率越来越高，给渔业生产造成了巨大威胁。

车轮虫病呈现的特点是发病早、来势猛；经常有杀不绝、范围广、危害大的特点，遍及全国各地养殖区，特别是广东、广西、江苏、上海、浙江、湖北和湖南等地，一年四季均有发生，能够引起病鱼大批死亡主要是在4－7月，每年使渔业生产遭受不少损失。

指环虫病一直是水产养殖中的最常见病害之一，主要寄生在鱼类鳃部，在全国各地均有发生，危害各种淡水鱼。

发病有两个高峰期，分别为3－4月和11月至次年1月，适宜温度为20～25℃，主要靠虫卵及幼虫传播，大量寄生易引起鱼类苗种死亡，造成经济损失。

目前市面上对寄生虫的防治药物种类较多，也很繁杂，但或多或少存在致畸、药物残留严重、耐药性的产生以及污染环境等缺陷，为此开发一种安全高效的杀虫药已刻不容缓。

二、药物简介笔者实验室经过反复实验论证，最后确定渔药中主要成分包括环烷酸铜1.0%、氯化钠6.0%、壬基酚聚氧乙烯醚1.25%、聚氧乙烯失水山梨醇单油酸酯0.8%、十二烷基硫酸钠0.4%、壬基酚聚氧乙烯醚硫酸钠0.15%、月桂氮酮0.65%、杀虫单15.25%、杀虫双33.5%、甲醇2.25%、水38.75%。

简易制备方法如下：将杀虫单、杀虫双、氯化钠溶解于水中，环烷酸铜、壬基酚聚氧乙烯醚、聚氧乙烯失水山梨醇单油酸酯、十二烷基硫酸钠、壬基酚聚氧乙烯醚硫酸钠、月桂氮酮、甲醇混合，将上述两溶液混合即可。

三、药效检测实验一，车轮虫药效实验。

取市场上两类杀虫药物即车轮指环净和神农168与本品进行药效对比，新型渔药(实施例1)为甲组，车轮指环净为乙组，神农168为丙组。

动物营养学报2014，26（5）：1174-1179C hi ne s e J our nal of A ni m al N ut r i t i ond o i ：10.3969/j .i ssn .1006-267×.2014.05.007钾在水产动物中的生理作用和营养代谢功能朱伟星1，2雎 敏1，2何亚丁1，2陈晓明1，2钟国防1，2华雪铭1，2*（1.上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室，上海201306；2.上海市水产养殖工程技术研究中心，上海201306）摘 要：钾是水产动物机体内的常量元素，也是维持生命不可或缺的必需物质。

它在生物体的生理活动方面起着十分重要的作用，包括维持细胞电压、改变细胞膜电位和产生神经冲动。

另外，钾还在氧化还原调节、酸碱平衡和新陈代谢过程中扮演着关键的角色。

不同水产动物对钾的需求量不同，钾缺乏或者过量都会对动物机体产生不利的影响。

本文主要针对钾在水产动物中的生理作用和营养代谢方面的功能展开综述。

关键词：钾；水产动物；生理作用；营养需求中图分类号：S963 文献标识码：A 文章编号：1006-267X （2014）05-1174-06收稿日期：2013-12-18基金项目：国家海洋可再生能源专项资金项目（N o.S H ME 2011S W02）；上海高校知识服务平台上海海洋大学水产动物遗传育种中心（Z F 1206）作者简介：朱伟星（1987—），男，安徽铜陵人，硕士研究生，从事水产动物营养生理研究。

E -m a i l ：z w x3236@126.c om *通讯作者：华雪铭，副教授，硕士生导师，E -m a i l ：xm hua @s hou.e du.c n钾作为动物的必需矿物元素，其含量在动物体内高于0.01%，是一种常量元素。

同时它也是动物体内仅次于钙和磷的第三大矿物元素。

钾在参与营养物质消化、维持机体电解质平衡以及提高水产动物生长和繁殖性能等方面发挥着重要作用。

收稿日期：2023-04-28基金项目：国家自然科学基金青年基金项目（31902348）作者简介：王瑞睿（1996—），女，布依族，硕士，研究方向为虾蟹性别决定与性别分化机制，E-mail：rrww28@广东农业科学2023，50（7）：156-163Guangdong Agricultural SciencesDOI:10.16768/j.issn.1004-874X.2023.07.016王瑞睿，马克异. 罗氏沼虾Doublesex 基因的原核表达与蛋白纯化［J］. 广东农业科学，2023，50（7）：156-163.罗氏沼虾Doublesex 基因的原核表达与蛋白纯化王瑞睿1,2，马克异3（1. 上海海洋大学 农业农村部淡水水产种质资源重点实验室，上海 201306；2. 上海海洋大学水产动物遗传育种中心上海市协同创新中心，上海 201306；3. 中国水产科学研究院东海水产研究所，上海 200090）摘 要：【目的】Doublesex 属于DMRT 基因家族成员之一，在控制性别特异性分化中起关键作用。

克隆罗氏沼虾（Macrobrachium rosenbergii ）Doublesex 基因（MrDsx ）的开放阅读框序列，构建重组质粒并诱导其表达，纯化获取罗氏沼虾重组蛋白MrDsx，可为后续开展罗氏沼虾 M rDsx 基因的功能研究提供基础数据。

【方法】基于罗氏沼虾MrDsx 的开放阅读框序列，通过特异PCR 产物与表达载体pET-32a（+）连接，获得重组质粒 p ET-32a-MrDsx ，将其转化大肠杆菌 BL21（DE3）感受态细胞，构建罗氏沼虾MrDsx 基因的原核表达细胞。

利用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）对阳性转化细胞进行诱导表达，并以SDS-PAGE 电泳，Western blot 和质谱分析检测诱导表达的重组蛋白。

【结果】以罗氏沼虾性腺cDNA 为模板，利用MrDsx 基因的特异引物，PCR 扩增获得了约660 bp 大小的单一DNA 条带。

中国水产科学 2014年3月, 21(2): 275−282 Journal of Fishery Sciences of China研究论文收稿日期: 2013-06-24; 修订日期: 2013-09-28.基金项目: 现代农业产业技术体系专项资金(CARS-49-4B); 上海市高校知识服务平台上海海洋大学水产动物遗传育种中心资助资助项目(ZF1206).作者简介: 郭金涛(1989−), 男, 硕士研究生, 从事水产动物遗传育种与繁殖研究. E-mail: guojt-4451@ 通信作者: 赵金良, 教授. E-mail: jlzhao@DOI: 10.3724/SP.J.1118.2014.00275尼罗罗非鱼(♀)×萨罗罗非鱼(♂)杂交后代F 1、F 2形态性状的 遗传与变异郭金涛1, 赵金良1, 甘远迪1, 罗明坤1, 李思发1, 叶卫2, 符云2, 陈辉崇21. 上海海洋大学 农业部淡水水产种质资源重点实验室, 上海 201306;2. 广东省淡水名优鱼类种苗繁育中心, 广东 番禺 511453摘要: 通过6个可数性状、10个可量性状及24个框架性状, 比较分析了尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus ♀)×萨罗罗非鱼(Sarotherodon melanotheron ♂)杂交后代F 1、F 2形态性状的遗传与变异特征, 方差分析结果表明, 除臀鳍棘数相同外, 杂交F 1、F 2的可数性状数目相近, 位于尼罗罗非鱼与萨罗罗非鱼之间; 杂交F 1体长/全长、框架参数D 3-5/全长、D 6-8/全长、尾柄长/全长、D 5-7/全长、D 8-10/全长等参数显著大于萨罗罗非鱼, 体厚/全长、体高/全长、D 1-6/全长、D 3-4/全长、尾柄高/全长等参数显著大于尼罗罗非鱼; 杂交F 2的16个可量、框架性状与杂交F 1间无显著差异, 而头长/全长、D 5-6/全长、D 7-8/全长、D 9-10/全长等参数显著大于杂交F 1, 躯干长/全长、尾柄长/全长、D 1-2/全长、D 5-7/全长、D 7-9/全长等参数显著小于杂交F 1。