PE200系列高效液相色谱仪简介

高效液相色谱仪组成
高效液相色谱仪是一种广泛应用于分析化学、生物化学、环境分析
等领域的仪器设备，它能够快速准确地分离各种化学成分并进行定量
分析。

下面是高效液相色谱仪的组成部分：
1.液相泵
液相泵是高效液相色谱仪中的重要组成部分之一，主要作用是将溶液
按计划流量输送到色谱柱中，为后续的分离和分析提供必要的支持。

2.进样器
进样器是将待测样品导入到高效液相色谱仪系统中的部件，其结构一
般由进样针、进样器、样品瓶等组成，它能够自动化地进行定量或定
体积的进样操作。

3.色谱柱
色谱柱是高效液相色谱仪中的核心部件之一，它能够根据不同的化学
性质对待测样品进行快速准确的分离，常用的色谱柱包括反相色谱柱、离子交换柱、凝胶柱等。

4.检测器
检测器是高效液相色谱仪中的另一个重要组成部分，通常包括紫外可
见检测器、荧光检测器、电化学检测器等，它能够对分离后的化合物
进行快速灵敏的检测和定量分析。

5.色谱数据系统
色谱数据系统是高效液相色谱仪中的一款软件程序，它能够实现对色谱分离和检测数据的自动采集、处理和分析，从而实现自动化分析。

总的来说，高效液相色谱仪的组成部分非常复杂，但是只有这些部分综合作用才能达到高效、准确地分离和检测化合物的目的。

高效液相色谱仪（3台）高效液相色谱仪（3台）详细配置：1. 高效液相色谱主机（包含四元低压梯度泵，自动进样器，柱温箱）1套2. 二极管阵列检测器1台3. 样品瓶微量进样瓶300个4. 色谱柱2根5. 色谱工作站软件1套6. 电脑（带刻录机）打印机1套7、不间断电源（3KW/1H）重要参数及指标：1.液相色谱部分：泵系统：四元泵系统1.1每台流量范围：0.001-10.000 mL/min1.2最大压力≥40 Mpa1.3脉动：±0.1MPa(水,1.0ml/min输液时)1.4流量精度：≤0.06%RSD1.5梯度精密度：≤0.15%RSD，流速为0.2和1.0ml时1.6 溶剂数：4种1.7在线脱气：二极管阵列检测器1.1波长范围：190－800nm；1.2波长精密度：±0.1nm；1.2灯：氘灯、钨灯；1.3波长准确度：＜1nm；1.4噪声：<±1.0×10-5Au(254nm)；1.5基线漂移：<±8.0×10-4Au/h(254nm)；自动进样器：1.1交叉污染：0.004%1.2进样体积：0.01~100 μl1.2进样准确度：±1％1.3进样量精密度：0.2％RSD以下1.4试样处理数：1.5ml瓶≥96个。

1.5样速度：10μL进样量≤20秒柱温箱：1.1温控范围：室温~80℃1.3温控精度：±0.5℃1.4 柱容量：≥3根(300mm色谱柱)色谱软件：1.1中文，可容Windows XP或Vista或Win7系统；1.2具有3D扫描功能，能做纯度分析，光谱匹配度分析1.3可自动进行数据采集和后处理，具有系统适应性软件，计算分离度、理论塔板数、拖尾因子、容量因子、信噪比等。

1.4可提供适时分析条件参数和分析结果，在线监测和采集泵压力变化数据。

1.5可使用PDF、EXCEL等格式输出实验结果。

第21卷第5期2005年5月农业工程学报T ran sacti on s of the CSA E V o l .21　N o.5M ay 2005超高压提取西洋参皂苷的工艺研究陈瑞战,张守勤※,王长征,窦建鹏,吴　华,张玲玲(吉林大学生物与农业工程学院,长春130025)摘　要:研究在常温下超高压提取西洋参根中皂苷的最佳提取工艺。

探讨了不同提取溶剂、溶剂浓度、提取压力、溶剂与原料比、提取时间等因素对皂苷得率的影响,确定了超高压提取西洋参根中皂苷的最佳条件,并将超高压提取法与热回流提取、微波提取、超声提取、超临界CO 2萃取等提取法进行了比较。

超高压提取西洋参根中皂苷的最佳提取条件:70%乙醇水溶液为提取溶剂,提取压力为200M Pa ,溶剂与原料比为50∶1,提取时间为2m in 。

超高压提取西洋参根中皂苷具有提取得率高、时间短、能耗低等优点,可用于中药有效成分的提取。

关键词:超高压;提取;西洋参;皂苷中图分类号:O 62335;TQ 036+.4 文献标识码:A 文章编号:100226819(2005)0520150205陈瑞战,张守勤,王长征,等.超高压提取西洋参皂苷的工艺研究[J ].农业工程学报,2005,21(5):150-154.Chen R u izhan ,Zhang Shouqin ,W ang Changzheng ,et al .T echno logical p rocess of u ltrah igh 2p ressu re ex tracti on ofsapon in s from P anax qu inquef olius [J ].T ran sacti on s of the CSA E ,2005,21(5):150-154.(in Ch inese w ith English ab stract )收稿日期:2004211225　修订日期:2004204225基金项目:国家自然科学基金资助项目(30472135)作者简介:陈瑞战(1967-),男,副教授,博士研究生,研究方向为药物有效成分提取。

高效液相色谱仪主要组成高效液相色谱仪（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）是一种在化学分析中广泛使用的分离技术，主要用于分离和测定样品中的化合物。

HPLC是液相色谱的一种进化形式，相比传统的液相色谱，其分离效率更高，分离速度更快。

下面将介绍HPLC的主要组成部分。

1.液相输送系统：液相输送系统由溶剂供应、进样、混合和泵送过程组成。

其中，溶剂供应单元负责提供所需的溶剂，通常由一个贮液瓶和一组输送管道组成。

进样器用于将待分析样品注入到流动相中，常见的进样方式有汽缸进样和自动进样器。

混合器用于混合不同的溶剂以得到所需的流动相。

泵送单元负责将混合好的流动相通过色谱柱进行分离。

2.色谱柱：色谱柱是HPLC中最为重要的部分，用于分离样品中的化合物。

色谱柱是由特定的填充材料填充而成，填充材料可以根据待分离样品的性质选择不同的类型，如反相色谱柱、离子交换色谱柱等。

色谱柱通常由不锈钢、玻璃或硅胶等材料制成。

在色谱柱两端，通常会安装一些连接件，如高压接头和柱连器，以确保柱与其他部件的连接牢固。

3.检测器：检测器用于检测色谱柱流出的化合物，并将其转化为可以被记录和分析的电信号。

常见的HPLC检测器包括紫外可见光检测器、荧光检测器、质谱检测器等。

不同的检测器可以对不同类型的化合物进行特异性检测。

4.数据处理系统：数据处理系统用于记录、处理和分析HPLC实验得到的数据。

数据处理系统通常由计算机和相关的软件组成。

计算机负责与HPLC仪器的其他部件进行通信，并将检测到的信号转化为数字数据。

软件则用于对数据进行处理和分析，如峰识别、峰面积积分和定量分析等。

5.控制系统：控制系统用于控制整个HPLC仪器的运行。

控制系统通常由一个控制面板和相应的控制器组成，用于设置和调节液相输送系统、检测器和数据处理系统的参数。

通过控制面板，用户可以设置流速、柱温、检测器波长等参数，以满足不同的分析要求。

高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上，引用了气相色谱的理论，在技术上，流动相改为高压输送(最高输送压力可达4.9107Pa);色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成，从而使柱效大大高于经典液相色谱(每米塔板数可达几万或几十万);同时柱后连有高灵敏度的检测器，可对流出物进行连续检测。

一、特点：1.高压：液相色谱法以液体为流动相(称为载液)，液体流经色谱柱，受到阻力较大，为了迅速地通过色谱柱，必须对载液施加高压。

一般可达150～350×105Pa。

2. 高速：流动相在柱内的流速较经典色谱快得多，一般可达1～10ml/min。

高效液相色谱法所需的分析时间较之经典液相色谱法少得多，一般少于1h 。

3. 高效：近来研究出许多新型固定相，使分离效率大大提高。

4.高灵敏度：高效液相色谱已广泛采用高灵敏度的检测器，进一步提高了分析的灵敏度。

如荧光检测器灵敏度可达10-11g。

另外，用样量小，一般几个微升。

5. 适应范围宽：气相色谱法与高效液相色谱法的比较：气相色谱法虽具有分离能力好，灵敏度高，分析速度快，操作方便等优点，但是受技术条件的限制，沸点太高的物质或热稳定性差的物质都难于应用气相色谱法进行分析。

而高效液相色谱法，只要求试样能制成溶液，而不需要气化，因此不受试样挥发性的限制。

对于高沸点、热稳定性差、相对分子量大(大于400 以上)的有机物(这些物质几乎占有机物总数的75% ～80% )原则上都可应用高效液相色谱法来进行分离、分析。

据统计，在已知化合物中，能用气相色谱分析的约占20%，而能用液相色谱分析的约占70～80%。

二、性质及原理：高效液相色谱按其固定相的性质可分为高效凝胶色谱、疏水性高效液相色谱、反相高效液相色谱、高效离子交换液相色谱、高效亲和液相色谱以及高效聚焦液相色谱等类型。

用不同类型的高效液相色谱分离或分析各种化合物的原理基本上与相对应的普通液相层析的原理相似。

其不同之处是高效液相色谱灵敏、快速、分辨率高、重复性好，且须在色谱仪中进行。

高效液相色谱仪的基本构造和工作原理一、概述高效液相色谱（HPLC）是一种广泛应用于化学、制药、食品、环保等领域的重要分离分析技术。

其通过高压泵推动流动相通过色谱柱，实现样品中各组分的分离，并通过检测器对分离后的组分进行检测。

本文将详细介绍高效液相色谱仪的基本构造和工作原理。

二、基本构造1. 流动相储存器：用于储存流动相，通常为高压密封容器，可确保流动相的纯度和稳定性。

2. 高压泵：为色谱分离提供动力，推动流动相通过色谱柱。

高压泵应具有稳定的输出压力和流量，以保证色谱分离的效果。

3. 色谱柱：是HPLC的核心部件，用于分离样品中的各组分。

色谱柱内部填充有固定相，不同组分在固定相和流动相之间的分配系数不同，从而实现分离。

4. 检测器：用于检测色谱柱流出的组分。

常见的检测器有紫外-可见光检测器、荧光检测器、电导检测器等，可根据不同物质的吸收、发射或电导特性进行检测。

5. 记录仪：用于记录检测器的信号，生成色谱图。

记录仪应具有高灵敏度和线性响应范围。

6. 进样器：用于将样品注入色谱柱。

进样器应具有微量进样功能，且进样操作简便、快速。

7. 数据处理系统：用于处理记录仪记录的信号，进行色谱峰识别、定量和定性分析等。

数据处理系统应具有强大的数据处理能力和友好的用户界面。

8. 废液收集器：用于收集色谱分离过程中产生的废液，确保实验环境的整洁和安全。

三、工作原理高效液相色谱仪的工作原理基于色谱分离原理。

在色谱分离中，流动相携带样品通过固定相，不同组分在固定相和流动相之间的分配系数不同，导致组分在两相之间的传递速度不同，从而实现各组分的分离。

在HPLC中，高压泵提供动力，推动流动相通过色谱柱，实现快速、高效的分离。

同时，检测器对分离后的组分进行检测，记录仪记录检测信号，最终由数据处理系统对色谱图进行分析和处理。

四、高效液相色谱仪的操作流程1. 准备工作：检查仪器各部件是否正常，确保流动相储存器、色谱柱、检测器等部件的连接完好。

高效液相色谱仪技术指标1、名称：高效液相色谱仪2、主要用途：用于药品等有机化合物的定量定性分析3、一般规格和配置：3.1运行环境温度：4℃-55℃3.2运行环境湿度：5%-95%RH3.3工作电压：220+5% V4、主要技术指标和规格：4.1四元梯度泵4.1.1串联双柱塞泵，自动柱塞清洗装置，在线真空脱气机*4.1.2配置主动入口阀*4.1.3要求具有连续自动可变冲程和自动溶剂压缩因子校正功能。

4.1.4流速范围：0.001~10.0mL/min, 0.001mL/min 步进*4.1.5流速精密度：0.075%-0.1%RSD .4.1.6流速准确度：±1%或10uL/min4.1.7压力脉动：< 1%4.1.8操作压力：0~400 bar4.1.9梯度组成精密度：<0.2% RSD4.1.10梯度准确度±0.5%不随压力变化4.1.11梯度延迟体积：800-1100ul4.1.12重线性﹤0.15%不随压力改变4.1.13压力补偿：自动4.1.13高压二元系统4.2自动进样器*4.2.1要求采用高压、阀进样技术，通过微型计量泵精确控制取样体积4.2.2除具有编程进样功能外，还要求具有柱前衍生、柱前样品自动稀释、自动混合等复杂进样功能。

*4.2.3进样范围：0.1~100ul任意体积精确进样，无需更换定量环*4.2.4进样精度：<0.25%RSD4.2.5 pH 范围：1.0~9.54.2.6样品容量：100位*4.2.7样品残留：<0.05%4.3柱温箱*4.3.1控温原理：半导体加热、制冷*4.3.2控温范围：室温下10℃~90℃4.3.3控温速率：室温加热至40℃，5min；40℃降温至20℃，10min*4.3.4控温精度：±0.15℃4.3.5控温准确度：±0.5℃*4.3.6柱容量：30cm×34.4可编程紫外检测器4.4.1光源：氘灯4.4.2波长范围：190～600nm4.4.3实时信号：1 个实时信号4.4.4波长精度：1nm*4.4.5基线噪音：±0.75×10-5AU at 254nm（1ml/min甲醇条件下）4.4.6基线漂移：3×10-4AU at 254nm（1ml/min甲醇条件下）*4.4.7波长校正：内置氧化钬滤光片自动校正4.4.8线性范围：>2AU4.5化学工作站4.5.1硬件要求：酷睿2/1.8G以上，1G内存，160G硬盘，DVD-RW，WIN XP操作系统，17〞液晶显示器，激光打印机，网络接口卡。

超高效液相色谱仪技术参数原装进口1. 工作条件1.1 电源：220V，50Hz1.2 操作环境 15˚C-28˚C1.3 湿度：20-80%2.技术参数*2.1 二元高压泵结构：四压力传感器，数控直线驱动色谱双泵。

四个压力传感器能够准确的监控泵系统的压力，并对泵做出相应调整，保证流量精度的重复性和稳定性。

（需在投标文件中提供泵结构示意图予以证明并加盖仪器制造商公章，并标明四压力传感器示意图位置和真实位置）。

2.1.1 泵类型：数控直线驱动色谱双泵2.1.2 泵输出压力：≥20000 psi*2.1.3 泵驱动马达：≥42.1.4 柱塞杆与马达联接方式：刚性直连*2.1.5 泵压力传感器数量：≥42.1.6 1-4路溶剂任意混合2.1.7可配内置溶剂选择阀，扩展到9路溶剂#2.1.8 真空脱气:六通道在线真空脱气机#2.1.9 流量：最小流量范围≥0.0100，最大流量范围≤2.000mL/min，以0.001mL/min 为增量*2.1.10 最大操作压力：≥17,800psi（须提供厂家英文官方原版指标及应用证明文件，并加盖仪器制造商公章。

#2.1.11 梯度模式：线性、步进、凹线、凸线四种类型2.1.12 柱塞清洗：自动，可编程2.1.13 流量精度：+/-0.02min SD,（全流速范围内）,不随反压变化2.1.14 流速准确度：±1.0%2.1.15 梯度准确度：± 0.5%，不随反压变化2.1.16 梯度精度：±0.15%RSD，不随反压变化#2.1.17缓冲盐浓度和pH值调节：自动配置缓冲盐浓度和自动调节pH值2.1.17.1配置方式:自动比例混合2.1.17.2计算方式:梯度曲线2.1.17.3 pH精度: ±0.012.2 自动进样器系统2.2.1密封在线针进样2.2.2 耐压: 18,000psi2.2.3 进样模式：任意体积直接注射进样2.2.4 样品瓶数：≥90 位2.2.5 进样精度：<0.3%RSD#2.2.6 样品交叉污染度：<0.001%2.2.7 进样体积：0.1-50μL，以0.1μL 为增量2.2.8 进样线性度：>0.9992.2.9 自动进样循环时间：<30 秒2.3 柱温箱及色谱柱2.3.1 温度范围：室温以上 5℃-90℃，增量：0.1℃2.3.2加热方式:电加热2.3.3 预热方式：主动式2.3.4 色谱柱颗粒度：≤1.7 um2.3.5 色谱柱与柱温箱上带有使用信息记录装置2.4紫外/可见光检测器*2.4.1波长范围：190～700nm2.4.2波长准确度：±1nm2.4.3测量范围：0.0001～4.0000AUFS2.4.4基线噪音：6.0×10-6 AU,2.4.5基线漂移: ≤5.0x10-4AU/hr/℃2.4.6线性范围：2.5AU2.4.7吸收范围：0.0001 to 4.0000 AUFS2.4.8光源：氘灯，寿命2000小时2.4.9采样频率：80Hz2.4.10流通池：光导全反射流动池, 池长：10mm, 池体积：500nL (分析池) 2.4.11流通池耐压：1000psi2.5荧光检测器2.5.1激发波长：200 to 890 nm2.5.2发射波长：210 to 900 nm2.5.3数据采集模式：2维、3维2.5.4波长准确度：±3nm*2.5.5灵敏度：S/N > 1000 (水的拉曼光谱）2.5.6信号范围：0.001 to 10，000EU2.5.7流通池：< 10ul，长轴向设计2.5.8光源：汞/弧氙灯，寿命1000小时2.5.9采样频率：80Hz*2.6黄曲霉毒素分析包2.6.1黄曲霉毒素专用检测池。

⏹高效液相色谱High Performance Liquid Chromatography型号：Agilent 1100生产厂家：美国安捷伦四元梯度泵：流速范围：0.001～10.00ml/min,可以以0.001ml/min为增量；流速精度：≤0.15%RSD；适用pH范围：1.0～12.5；操作压力：0～40MPa。

检测器●光电二极管阵列检测器：波长范围：190～950nm；光源：氘灯和汞灯；波长准确度：≤1nm；光谱分辨率：1.2nm。

●荧光检测器：光源：氙灯；水的拉曼光谱：≥400；激发波长：200～700nm；发射波长：280～900nm；波长重现性：±0.25nm；波长准确度：±3nm；流通池：8uL。

●示差折光检测器：RI范围：1.00～1.75 RIU；温度控制：5～55°C；基线噪音：±1.5×10-9RIU；漂移：≤±2.0×10-7RIU/hr。

在有机化学、生化、医学、药物临床、化工、食品卫生、环保监测、商检和法检等方面都有广泛的应用，可以从一些复杂的混合物中排除干扰物质，并分析其中微量成分。

放置地点：实验楼114负责人：王晴联系电话：55191648⏹全自动不锈钢发酵罐Automatic Stainless Steel Fermenter型号：L1523生产厂家：瑞士比欧微生物发酵工业是一个重要的工业部门，其产品广泛应用于医药、食品、化工、环境等领域，发酵罐是发酵工业的核心设备。

L1523型发酵罐是瑞士比欧公司生产的实验室专用发酵罐，采用原位灭菌方式，配备有pH、溶氧、温度、消泡电极和专用控制器，可实现参数设定、显示和发酵过程全自动控制，运行稳定、参数采集方便可靠。

该设备适用于微生物好氧发酵和细胞培养的小型试验和科学研究。

罐体：玻璃罐体，12.8升总体积，8.6升工作体积。

驱动：交流变频马达，转速范围100~1500转/分。

高效液相色谱仪使用说明1. 型号：LC-10AT 产地日本岛津。

2. 用途：高效液相色谱法只要求样品能制成溶液, 不受样品挥发性的限制,流动相可选择的范围宽,固定相的种类繁多,因而可以分离热不稳定和非挥发性的、离解的和非离解的以及各种分子量范围的物质。

与试样预处理技术相配合，HPL C 所达到的高分辨率和高灵敏度，使分离和同时测定性质上十分相近的物质成为可能，能够分离复杂相体中的微量成分。

随着固定相的发展, 有可能在充分保持生化物质活性的条件下完成其分离。

由于HPL C具有高分辨率、高灵敏度、速度快、色谱柱可反复利用, 流出组分易收集等优点,因而被广泛应用到生物化学、食品分析、医药研究、环境分析、无机分析等各种领域。

高效液相色谱仪与结构仪器的联用是一个重要的发展方向。

3. 测定原理高效液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。

储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相) 内, 由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数, 在两相中作相对运动时, 经过反复多次的吸附- 解吸的分配过程, 各组分在移动速度上产生较大的差别, 被分离成单个组分依次从柱内流出, 通过检测器时, 样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来。

4. 使用方法4.1 系统组成：本系统由1个LC-10ATvp溶剂输送泵、Rheodyne 7725i手动进样阀、SPD-10Avp紫外-可见检测器、色谱数据工作站和电脑等组成，另外还包括打印机、不间断电源等辅助设备。

4.2 准备4.2.1 准备所需的流动相，用合适的0.45μm滤膜过滤，超声波脱气20min。

4.2.2 根据待检样品的需要更换合适的洗脱柱（注意方向）和定量环。

4.2.3 配制样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制），用合适的0.45μm滤膜过滤。

3.2.4 检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常，特别注意输液管道内是否有气泡。

高效液相色谱仪参数1.工作条件1.1 电源：220V，50Hz电源1.2 环境温度：4-55˚C1.3 环境湿度：<95%2.技术参数2.1 四元梯度泵2.1.1 工作原理：串联式双柱塞往复泵，自动连续可变冲程20-100ul，主动电磁阀控制，配置柱塞清洗附件2.1.2 流量范围：0.001ml/min~10.0ml/min，递增率0.001ml/min*2.1.3 流量精度：<0.070%RSD2.1.4 压力脉动：在整个压力范围内，1ml/min流量时，<1%2.1.5 混合精度：0.20%SD*2.1.6最高耐压： 600bar2.2四通道真空在线脱气机2.2.1通路： 42.2.2最大流速： 10ml/min2.3 可降温柱温箱2.3.1 柱温范围：室温下10-85˚C2.3.2 温度稳定性：<+0.15˚C2.3.3 温度准确度：+0.5˚C*2.3.4 柱容量：30cm柱四根2.4 自动进样器2.4.1进样体积：0.1 –100 μL，以0.1 μL 递增（耐压 60 MPa）2.4.2进样重复性：<0.25 % RSD of peak areas from <5 μL to 100 μL2.4.3最大操作压力：600 bar2.4.4样品位数：132 个x 2 mL 瓶2.4.5交叉污染：≤ 0.004 % (40 ppm)2.4.6单次进样周期：≤18 秒（在抽排速度为200 μL/min，进样体积为1 μL 时测定）2.5 可变波长紫外检测器2.5.1波长范围：190～600nm2.5.2波长精度：1nm2.5.3基线噪音：±0.25⨯10-5AU at 230nm （单波长检测）±0.80⨯10-5AU at 230nm and 254 nm (双波长检测)2.5.4基线漂移：1⨯10-4AU/h at 254nm （1mL/min甲醇）2.5.5线性范围：>2.5AU。

此帖与GC版的对应，是为了让大家更好的学习和了解LC主要内容包括：1.高效液相色谱法（HPLC）的概述2. 高效液相色谱基础知识介绍（1——13楼）3. 高压液相色谱HPLC发展概况、特点与分类4. 液相色谱的适用性5.应用高效液相色谱法（HPLC）的概述以高压液体为流动相的液相色谱分析法称高效液相色谱法（HPLC）。

其基本方法是用高压泵将具有一定极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂泵入装有填充剂的色谱柱，经进样阀注入的样品被流动相带入色谱柱内进行分离后依次进入检测器，由记录仪、积分仪或数据处理系统记录色信号或进行数据处理而得到分析结果。

由于高效液相色谱法具有分离效能高、选择性好、灵敏度高、分析速度快、适用X围广（样品不需气化，只需制成溶液即可）、色谱柱可反复使用的特点，在《中国药典》中有50种中成药的定量分析采用该法，已成为中药制剂含量测定最常用的分析方法。

高效液相色谱法按固定相不同可分为液-液色谱法和液-固色谱法；按色谱原理不同可分为分配色谱法（液-液色谱）和吸附色谱法（液-固色谱）等。

目前，化学键合相色谱应用最为广泛，它是在液－液色谱法的基础上发展起来的。

将固定液的官能团键合在载体上，形成的固定相称为化学键合相，不易流失是其特点，一般认为有分配与吸附两种功能，常以分配作用为主。

C18（ODS）为最常使用的化学键合相。

根据固定相与流动相极性的不同，液-液色谱法又可分为正相色谱法和反相色谱法，当流动相的极性小于固定相的极性时称正相色谱法，主要用于极性物质的分离分析；当流动相的极性大于固定相的极性时称反相色谱法，主要用于非极性物质或中等极性物质的分离分析。

在中药制剂分析中，大多采用反相键合相色谱法。

系统组成：（一）高压输液系统由贮液罐、脱气装置、高压输液泵、过滤器、梯度洗脱装置等组成。

1.贮液罐由玻璃、不锈钢或氟塑料等耐腐蚀材料制成。

贮液罐的放置位置要高于泵体，以保持输液静压差，使用过程应密闭，以防止因蒸发引起流动相组成改变，还可防止气体进入。

高效液相色谱仪操作规程
一、目的：
制定PENELSON200型高效液相色谱仪操作规程，便于操作者正确操作。

二、适用范围：
适用于PENELSON200型高效液相色谱仪的操作。

三、责任者：
PENELSON200型高效液相色谱仪的操作人员。

四、过程：
1、检查仪器的各部件连接是否正确。

2、接通电源，依次打开泵、柱温箱、检测器、积分仪的开关钮，按规定要求设定流速、流动相、检测波长。

3、启动泵，将流动相泵入液相色谱仪。

4、待基线平稳后，即可将经0.45um微孔滤后的试液就入进样阀中,随时记录色谱柱的压力、基线情况，通过与积分仪相连的打印机打印图谱和峰面积及计算结果。

5、供试液检测完毕后，根据供试液、流动相的具体情况选择不同的溶剂，进行洗柱，不少于3小时，最后用甲醇冲洗30分钟。

6、待色谱柱、检测器洗涤干净后，依次关闭打印机、积分仪、检测器、柱温箱及泵的开关钮，最后关闭稳压电源。

7、为保护检测器，一般在洗柱时，关掉检测器电源。