植物病原细菌特点及形状

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作者简介：彭炜 (1955-)，四川省资中县人，研究员，主要从事植物保护专业教学、科研及行政管理等工作。Email:pengwei6@

植物细菌性病害和病原细菌分类研究进展

彭 炜

（四川省农业管理干部学院，中国成都 610072）

摘 要 迄今为止已经描述的植物病原细菌约有30个属和650个种，其中我国记录的细菌约150种以上。本文主要讨论植物病原细菌分类的历史演变与发展，简要描述生产上造成显著危害的黄单胞菌属、假单胞菌属、欧文氏菌属、土壤杆菌属、棒形杆菌属及支原体等6类主要细菌及其所致病害，并对已经发现并证实的植物细菌性病害种类作出粗略的统计，这些数据对于研究植物病原细菌的系统分类学和植物病害信息数据库查询系统具有重要的参考价值。

关键词：植物细菌性病害；细菌分类；种类/属；真细菌；植原体

Advances in classification of plant bacterial diseases and the

pathogenic bacteria

Peng Wei

Sichuan College of Agricultural Administration and Sciences, Chengdu, China

Abstract. About 650 species of plant pathogenic bacteria in 30 genera have been reported

around the world amongst which 150–200 species have been recorded in China. In the present

paper we review the historic development in plant bacterium classifiction and bacterial disease

植物保护第３２卷第６期（２００６）ＰＬＡＮＴ　ＰＲＯＴＥＣＴＩＯＮ　Ｖｏ１．３２　Ｎｏ．６（２００６）　

几冲常用植物病原细菌分　方法　

尹燕妮，　黄艳霞，　葛芸英，　郭坚华　

（南京农业大学农业部病虫监测与治理重点开放实验室，南京２１００９５）　

摘要植物病原细菌（ｐｈｙｔｏｂａｃｔｅｒｉａ）是植物上一类重要的病原菌，这些细菌能引起多种农作物、经济作物、花卉、树　木及牧草上的病害。它的快速检测是病害防治、预测预报及植物检疫必不可少的重要工作。其中，以ＰＣＲ为基础　的分子检测技术的进步使植物病原细菌的检测更快速、灵敏和可靠。本文对近年来植物病原细菌分子检测技术进　行介绍，尤其是应用广泛的ＩＴＳ－ＰＣＲ（ｉｎｔｅｒｇｅｎｉｃ　ｔｒａｎｓｃｒｉｂｅｄ　ｓｐａｃｅ－ＰＣＲ）、ＡＲＤＲＡ（ａｍｐｌｉｆｉｅｄ　ｒｉｂｏｓｏｍａｌ　ＤＮＡ　ｒｅｓｔｒｉｃ—　ｔｉｏｎ　ａｎａｌｙｓｉｓ—ＰＣＲ）、ｒｅｐ－ＰＣＲ（ｒｅｐｅｔｉｔｉｖｅ　ＤＮＡ￣ＰＣＲ）和实时荧光定量ＰＣＲ（ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ　ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ　ＰＣＲ）技术，旨在促　进我国植物病原细菌研究的快速发展。　

关键词植物病原细菌；分子检测；ＰＣＲ　中图分类号Ｓ　４３２．４２　

Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ　ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ　ｆｏｒ　ｓｅｖｅｒａｌ　ｃｏｍｍｏｎｌｙ　ｕｓｅｄ　ｐｈｙｔｏｂａｃｔｅｒｉａ　

Ｙｉｎ　Ｙａｎｎｉ，Ｈｕａｎｇ　Ｙａｎｘｉａ，Ｇｅ　Ｙｕｎｙｉｎｇ，Ｇｕｏ　Ｊｉａｎｈｕａ　

（Ｋｅｙ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｏｆ　Ｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇ　ａｎｄ　Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｐｌａｎｔ　Ｄｉｓｅａｓｅｓ　ａｎｄ　Ｐｅｓｔｓ，Ｍｉｎｉｓｔｒｙ　ｏｆ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ，Ｎａｎｊｉｎｇ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｊｉｎｇ　２１００９５，Ｃｈｉｎａ）　

Ａｂｓｔｒａｃｔ　Ｐｈｙｔｏｂａｃｔｅｒｉａ　ａｒｅ　ｗｉｄｅｓｐｒｅａｄ　ａｎｄ　ｅｃｏｎｏｍｉｃａｌｌｙ　ｉｍｐｏｒｔａｎｔ　ｐｌａｎｔ　ｐａｔｈｏｇｅｎｓ．Ｔｈｅｓｅ　ｂａｃｔｅｒｉａ　ｃａｕｓｅ　ｓｅｖｅｒｅ　ｄｉｓｅａｓｅｓ　ｏｎ　ｍａｎｙ　ｉｍｐｏｒｔａｎｔ　ｐｌａｎｔｓ　ｓｕｃｈ　ａｓ　ｆｉｅｌｄ　ｃｒｏｐｓ，ｅｃｏｎｏｍｉｃａｌｌｙ　ｉｍｐｏｒｔａｎｔ　ｃｒｏｐｓ，ｆｌｏｗｅｒｓ，ｔｒｅｅｓ，ａｎｄ　ｐａｓｔｕｒｅ．　Ｒａｐｉｄ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐｈｙｔｏｂａｃｔｅｒｉａ　ｐｒｏｖｉｄｅｓ　ａ　ｂｅｔｔｅｒ　ｆｒａｍｅｗｏｒｋ　ｆｏｒ　ａｄｄｒｅｓｓｉｎｇ　ｉｍｐｏｒｔａｎｔ　ｐｌａｎｔ　ｄｉｓｅａｓｅ　ｐｒｏｂｌｅｍｓ　ｒｅｌａｔｅｄ　ｔＯ　ｄｉａｇｎｏｓｉｓ　ａｎｄ　ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｄｉｓｅａｓｅｓ，ａｎｄ　ｕｌｔｉｍａｔｅ　ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ　ｏｆ　ｄｉｓｅａｓｅ　ｒｉｓｋｓ．Ｔｈｅ　ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ－ｄｒｉｖｅｎ　ａｄｖａｎｃｅｓ　ｉｎ　ＰＣＲ－ｂａｓｅｄ　ｍｅｔｈｏｄｓ　ｍａｋｅ　ｔｈｅ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｂａｃｔｅｒｉａｌ　ｐａｔｈｏｇｅｎｓ　ｍｏｒｅ　ｒａｐｉｄ，ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ　ａｎｄ　ｒｅｌｉａｂｌｅ．Ｉｎ　ｔｈｉｓ　ｐａｐｅｒ，ｔｈｅ　ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ　ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ　ｗｅｒｅ　ｉｎｔｒｏｄｕｃｅｄ。ｅｓｐｅｃｉａｌｌｙ　ＩＴＳ－ＰＣＲ，ＡＲＤＲＡ，ｒｅｐ－ＰＣＲ　ａｎｄ　ｒｅａｌ　ｔｉｍｅ　ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ　ＰＣＲ　ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ．Ｉｔ　ｗａｓ　ａｉｍｅｄ　ｔＯ　ｐｒｏｍｏｔｅ　ｔｈｅ　ｒｅｓｅａｒｃｈ　ｏｆ　ｐｈｙｔｏｂａｃｔｅｒｉａ　ｉｎ　Ｃｈｉｎａ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ　ｐｌａｎｔ　ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ　ｂａｃｔｅｒｉａ；　ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ＰＣＲ　

２０１０年１２月第３１卷第６期湛江师范学院学报ＪＯＵＲＮＡＬＯＦＺＨＡＮＪＩＡＮＧＮＯＲＭＡＬＣＯＬＬＥＧＥＤｅｃ．，２０１０Ｖ０１．３ｌＮＯ．６

植物病原细菌群体感应机制及其应用

欧阳乐军１”，黄真池１，沙月娥１”，曾富华１’孙，卢向阳２

（１．湛江师范学院生命科学与技术学院．广东湛江５２４０４８；２．湖南农业大学生物科学与技术学院。湖南长沙４１０１２８）

摘要：群体感应是细茵群体行为的一种调控机制．自然界中的很多细茸都有这种能力，即分泌一种或多种信号分子，通过这些信号分子的密度来感知茵群密度．胡ｔ４ｔ－－系列相应靶基因的表达．目前．已在许多革兰氏阳性茵和阴性茵中发现了群体感应系统．调控基因的表达．该文综述了细茵群体感应系统的研究进展及其应用．关键词：群体感应；自体诱导物；细茵中图分类号：Ｑ９４５．８文献标识码：Ａ文章编号：１００６－－４７０２（２０１０）０６－－０１１８－－０５

一般认为细胞与细胞之间信息交流只在多细胞生物中发生，而作为单细胞生物的细菌不存在信息交流

的现象．２０世纪６０年代一种海洋费氏弧菌（Ｖｉｂｒｉｏｆｉｓｃｈｅｒｉ）的发光现象引起了科学家的兴趣，Ｎｅａｌｓｏｎ

等［１３在１９７０年首次报道了该菌茵体密度与生物发光呈正相关，该发光现象受细菌本身的群体感应调节系统

所控制．１９９４年，Ｆｕｑｕａ首先提出群体感应（ｑｕｏｒｕｍｓｅｎｓｉｎｇ，ＱＳ）的概念Ｌ２］，其定义是指在特定环境中，细菌

产生并向环境中释放特定的细胞外信号分子，随着个体密度的增大，信号分子积累到一定密度时，诱发细菌

产生独特的、多样的群体行为，这一现象称为细菌的群体感应［３叫］．现在发现许多细菌利用该系统调控体内

特定的功能，如根瘤菌与植物共生［５］、蓝细菌中异形胞的分化［６］、芽胞杆菌中感受态与芽胞的形成［７］、根癌农

杆菌中Ｔｉ质粒融合转移‘副、病原细菌胞外酶与毒素产生【。。、生物膜（Ｂｉｏｆｉｌｍ）形成［１引、色素产生［１１１、抗生素

植物病原细菌的分离、纯化及鉴定

1实验目的及意义

植物病原菌的分离、鉴定是植物病理学实验最基本的操作技术之

一，通过本实验，要求掌握植物病原菌分离培养、纯化鉴定的一般原则

和方法。

2实验材料及准备

2.1 实验材料：新发病的植物组织

2.2 培养基准备（LB培养基）：胰蛋白胨1%，NaCl 1%，酵母浸粉

0.5%，pH7.0-7.2，121℃灭菌20 min，备用。

2.3 实验用具：载玻片、盖玻片、酒精灯，手术剪，镊子，培养皿

（Φ9cm），斜面培养基，灭菌水，1% NaClO，打火机。

3 实验方法及步骤

3.1 植物样品的采集

选取发病初期植株，样本尽量保持完整，至少包含病健交界处；将

样品放入纸袋保存或邮寄，并做好记录；需要分离的标本应尽快完成分

离工作（1-5d），长期保存需压干，未压干的标本勿装塑料袋。

3.2 发病组织的显微检查

准备好洁净的载玻片、盖玻片和水；取小的整块标本洗净、晾干/

吸干；切取约2×4mm大小病健交界组织；从上述组织中切取尽可能薄的

小片平放在载玻片上；加一滴水，盖好盖玻片，防止气泡；先用低倍镜

(4×，10×)检查，看到白色、半透明、雾状的喷菌现象；换用40倍物镜

观察，看到杆状、透明、活动的菌体，证明的确为细菌性病害。

3.3 病原物的分离和培养

选取镜检有喷菌现象的组织进行划线分离：所取组织用自来水洗净，吸干；（以下进入超净工作台操作）将植物组织剪成1×4mm的大

小，1%的次氯酸钠消毒2-10min，灭菌水洗2-3次；将组织从病斑处剪碎

放入约0.5-1ml水中，并让组织碎块在水中浸泡5-15min，让细菌释放到

灭菌水中；取病汁液1-3环，在LB平板上划线。28℃温箱中培养，每天

观察菌落生长情况并记录：菌落长出的时间、菌落大小、颜色、形态。

3.4 病原物的纯化和保存

3-4 d后选取生长量较多且形态一致的菌落，LB平板上划线纯化。

若仍然生长不纯，则需多次纯化。划菌采用三线法。挑取纯化后的单菌

落移入斜面生长，每菌移3管。24小时后从斜面上再次转移菌体，并且保存该病原菌。