麻疹诊断标准及处理原则
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皮肤科麻疹患者诊治常规麻疹由麻疹病毒引起,此病毒抵抗力不强,对干燥、日光、高温均敏感。
对一般消毒剂也敏感。
主要经飞沫通过呼吸道而传染。
好发于5岁以下儿童,但6个月以内的婴儿由于从母体获得抗体,免疫力尚未消失,故不易感染。
病后有终生免疫。
本病全年均可发生,但以冬春季为多,用减毒的麻疹疫苗作预防注射,近年来麻疹发病率显著下降。
【诊断依据】1.临床表现(1)潜伏期9~11天,发生高热,眼结膜充血、羞明、分泌物增多。
流涕,呈黏液脓性,咳嗽,有时出现呕吐、腹泻。
在第二白齿对侧的颊黏膜上出现Koplik斑。
(2)起病后第4天开始发疹,先出现于耳后、发际、颜面,后迅速蔓延到颈部、上肢、躯干及下肢,为一种玫瑰色的斑丘疹,压之褪色,疹盛时可互相融合,疹间皮肤正常。
皮疹在2~5天内出全。
(3)出疹时有高热,中毒症状加重,颈淋巴结和肝、脾可肿大。
出疹5~7天后,体温下降,全身中毒症状减轻,皮疹按出疹顺序逐渐消退,消退后留有棕褐色色素沉着斑并有细小的糠秕状脱屑,整个病程约2周。
2.实验室检查在前驱期鼻咽拭子涂片用Wright染色,可见有多核巨细胞,尿沉淀中有巨细胞及胞质内包涵体的单核细胞。
3.病理在皮疹及Koplik斑处,有局灶性角化不全、角化不良及海绵形成,真皮内有少量淋巴细胞浸润。
【鉴别诊断】需与某些病毒性发疹性疾病相鉴别,如风疹、传染性红斑、幼儿急疹、埃可病毒疹、小儿丘疹性肢端皮炎。
【治疗方法】1.卧床休息,给予易消化、营养丰富的饮食。
保持眼、鼻、口腔及皮肤清洁。
2.对咳嗽、高热、惊厥等症状,给予对症治疗。
3.为了防止继发细菌感染可给予抗生素。
麻疹诊断标准麻疹是一种由麻疹病毒引起的急性、高度传染性疾病,主要通过飞沫传播。
麻疹的早期症状包括发热、咳嗽、流涕和结膜炎,随后出现白色斑点的 Koplik斑,最终全身皮肤出现红疹。
麻疹对儿童和成人都有一定的危害,因此及时准确地诊断麻疹至关重要。
下面将介绍麻疹的诊断标准,以便医务人员能够及时识别和处理该疾病。
一、临床表现。
1. 发热,麻疹患者在发病初期会出现高热,体温可达39℃以上。
2. 咳嗽、流涕和结膜炎,患者在发热的同时会出现咳嗽、流涕和结膜炎等呼吸道症状。
3. Koplik斑,在发热和呼吸道症状出现后,口腔黏膜上会出现白色斑点,称为Koplik斑,是麻疹早期的特征性表现。
4. 皮疹,发热3-7天后,患者全身皮肤会出现红色丘疹性皮疹,通常从耳后开始向面部、颈部、躯干和四肢蔓延。
二、实验室检查。
1. 血清麻疹抗体检测,通过血清学检测,可发现麻疹病毒特异性IgM抗体阳性,有助于确诊。
2. 病毒分离和鉴定,从患者的呼吸道分泌物或尿液中分离出麻疹病毒,或通过PCR技术检测麻疹病毒核酸。
三、流行病学史。
1. 接触史,患者是否有接触过麻疹患者或疑似病例。
2. 疫情流行地区,患者是否来自或曾到过麻疹疫情流行地区。
四、诊断注意事项。
1. 对于典型病例,根据临床表现和流行病学史即可做出诊断。
2. 对于非典型病例,需要结合实验室检查结果进行综合分析,排除其他类似疾病。
总结,麻疹的诊断主要依据临床表现、实验室检查和流行病学史。
医务人员在诊断麻疹时应综合分析患者的症状和实验室检查结果,及时采取隔离措施,防止疾病的传播。
希望本文所述的麻疹诊断标准能够帮助医务人员更好地识别和处理麻疹病例,保障公众健康。
麻疹诊疗方案第1篇麻疹诊疗方案一、背景麻疹是由麻疹病毒引起的急性呼吸道传染病,具有高度传染性。
为规范麻疹的诊断和治疗,提高防治效果,保障人民群众身体健康,根据我国相关法律法规及卫生政策,结合目前麻疹疫情特点和防治需求,特制定本诊疗方案。
二、诊断1. 流行病学史(1)患者近期内有与麻疹病例接触史;(2)患者所在地区近期内有麻疹病例报告。
2. 临床表现(1)发热:体温≥38.5℃,持续≥3天;(2)皮疹:自耳后、颈部开始,蔓延至全身,呈现充血性斑丘疹,疹间皮肤正常;(3)咳嗽、流涕、结膜炎、口腔麻疹黏膜斑等症状。
3. 实验室检查(1)血常规:白细胞总数降低,淋巴细胞相对增多;(2)血清学检测:麻疹IgM抗体阳性;(3)病原学检测:鼻咽拭子、尿液等标本中分离到麻疹病毒。
三、治疗1. 一般治疗(1)隔离治疗:患者应隔离至出疹后5天,有并发症者延长至出疹后10天;(2)卧床休息,保持室内空气流通,注意保暖;(3)保持皮肤清洁,避免抓挠,预防感染;(4)加强营养,补充水分和电解质。
2. 对症治疗(1)高热:可给予物理降温或适量使用退热药物,如布洛芬、对乙酰氨基酚等;(2)咳嗽:给予镇咳药物,如喷托维林、右美沙芬等;(3)结膜炎:使用抗生素眼药水或眼膏,如左氧氟沙星、红霉素等;(4)口腔黏膜斑:保持口腔清洁,使用盐水或硼酸溶液漱口。
3. 病原治疗(1)抗病毒治疗:可选用利巴韦林、阿昔洛韦等药物;(2)免疫治疗:可使用免疫球蛋白、干扰素等药物。
4. 并发症治疗(1)肺炎:根据病原体及病情给予抗生素治疗;(2)脑炎:给予抗病毒、降低颅内压、激素治疗等;(3)心衰、呼衰等严重并发症:及时给予相应治疗。
四、预防1. 麻疹疫苗接种:按照我国免疫规划,为儿童及易感人群进行麻疹疫苗接种;2. 加强疫情监测,早期发现、报告和处理病例;3. 预防病例传播,加强患者隔离,做好个人防护;4. 提高公众对麻疹的认识,加强健康教育。
五、结语本诊疗方案旨在为临床医生提供麻疹诊断、治疗和预防的参考依据,在实际工作中,应根据患者具体情况和医疗条件,合理选择治疗方案,确保患者得到及时、有效的救治。
麻疹一、定义麻疹是由麻疹病毒引起的呼吸道传染病,传染性强,表现为发热、咳嗽、流涕、眼结合膜炎、口腔麻疹粘膜斑及皮肤的斑丘疹。
二、诊断要点:1临床症状①全身皮肤出现红色斑丘疹。
②发热(38℃或更高)。
③咳嗽或上呼吸道卡他症状,或结合膜炎。
④起病早期(一般于病程第2~3日)在口腔颊粘膜见到麻疹粘膜斑(Koplik氏斑)。
⑤皮肤红色斑丘疹由耳后开始向全身扩展,持续3天以上呈典型经过。
2流行病学史与确诊麻疹的病人有接触史,潜伏期6~18天。
3实验室诊断①一个月内未接种过麻疹减毒活疫苗而在血清中查到麻疹IgM抗体。
②恢复期病人血清中麻疹IaG抗体滴度比急性期有4倍或4倍以上升高,或急性期抗体阴性而恢复期抗体阳转。
③从鼻咽部分泌物或血液中分离到麻疹病毒(附录A),或检测到麻疹病毒核酸。
三、鉴别诊断(一)风疹:多见于幼儿,中毒症状及呼吸道炎症轻,起病1~2天即出疹,为细小稀疏淡红色斑丘疹,1~2天退疹,无色素沉着及脱屑。
耳后、枕后、颈部淋巴结肿大是其显著特点。
(二)幼儿急疹:多见于 2岁以内婴幼儿,骤发高热,上呼吸道症状轻微,患儿精神好,高热持续3~5天骤退,热退时或退后出疹,无色素沉着,亦不脱屑,是木病的特征。
(三)猩红热:前驱期发热,咽痛,起病1~2天内出疹,皮疹为针头大小,红色斑点状斑疹或粟粒疹,疹间皮肤充血,皮肤弥漫性潮红,压之退色,退疹时脱屑脱皮,白细胞总数及中性粒细胞明显升高。
(四)肠道病毒感染:柯萨奇病毒及埃可病毒感染常发生皮疹。
多见于夏秋季,出疹前有发热,咳嗽、腹泻,偶见粘膜斑,常伴全身淋巴结肿大,皮疹形态不一,可反复出现,疹退不脱屑,无色素沉着。
(五)其它:应与败血症、斑疹伤寒、药物疹、传染性单核细胞增多症相鉴别。
四、治疗(一)一般治疗及护理:1.呼吸道隔离患者应在家隔离、治疗至出疹后5天。
有并发症患者应住院隔离治疗,隔离期延长5天。
2.保持室内温暖及空气流通,给予易消化营养丰富的流质或半流质饮食,水分要充足;保持皮肤及眼、鼻、口、耳的清洁,用温热水洗脸,生理盐水漱口;用抗生素眼膏或眼药水保护眼睛,防止继发感染。
麻疹患者的护理汇报人:日期:•麻疹概述与诊断•麻疹患者护理原则•并发症预防与处理措施目录•心理护理与家庭支持•预防接种与健康教育推广01麻疹概述与诊断麻疹是一种由麻疹病毒引起的急性呼吸道传染病,主要通过飞沫传播。
麻疹患者通常会出现发热、咳嗽、流鼻涕、眼睛充血、口腔麻疹黏膜斑等症状,皮肤上会出现红色斑丘疹,并按照特定的顺序扩散至全身。
麻疹定义及症状症状麻疹定义根据患者的临床症状和流行病学史,结合实验室检测结果进行诊断。
诊断依据需要与其他具有类似症状的疾病进行鉴别,如风疹、猩红热等。
鉴别诊断诊断依据与鉴别诊断麻疹患者是唯一的传染源,病毒存在于患者的口、鼻、咽、气管和支气管分泌物中。
传染源主要通过飞沫传播,也可通过直接接触感染者的呼吸道分泌物或病毒污染的物体表面传播。
传播途径人群普遍易感,但免疫系统较弱的人群更容易感染。
易感人群麻疹在全年均可发病,但主要在春季和冬季出现流行高峰。
流行特征麻疹流行病学特点02麻疹患者护理原则保持室内空气流通保持室内空气新鲜经常开窗通风,避免使用空气清新剂或香水等刺激性物质。
控制室内温度和湿度保持适宜的室内温度和湿度,避免过冷或过热。
避免拥挤避免过多的人在同一个房间内,以减少病毒传播的风险。
提供清淡易消化的食物,如稀粥、面条、蔬菜等。
避免油腻、辛辣、生冷等刺激性食物。
饮食清淡易消化充足的水分摄入营养支持鼓励患者多喝水,以保持充足的水分摄入。
根据患者的营养状况和医生的建议,给予适当的营养支持,如补充维生素、矿物质等。
030201饮食调整与营养支持保持皮肤清洁干燥,避免用手抓挠皮肤,以免引起感染。
皮肤护理保持口腔清洁,可用淡盐水漱口或使用口腔清洁剂。
口腔护理保持床单、衣物等物品的清洁卫生,及时更换污染的衣物和床单。
清洁卫生皮肤护理与清洁卫生03并发症预防与处理措施并发症类型及表现如肺炎、支气管炎等,表现为咳嗽、咳痰、发热等症状。
如腹泻、呕吐等,表现为食欲不振、恶心、呕吐等症状。
麻疹诊断标准
麻疹是一种高度传染性的病毒性疾病,常见于儿童和青少年。
为了确诊麻疹,医生需要根据一定的诊断标准进行判断。
以下是麻疹诊断标准:
1.临床表现:患者出现发热、咳嗽、流涕、结膜炎等症状,随后出现皮疹,皮疹从头部开始,逐渐向四肢躯干扩散,持续3-5天。
2.实验室检查:血清学检测可检测到麻疹病毒特异性IgM抗体,或者通过病毒分离和PCR检测来确诊。
3.流行病学史:患者有与麻疹病毒接触史或者在流行区域居住或旅行史。
以上三个条件中,满足第一个条件是最为重要的,因为麻疹的临床表现非常典型,一旦出现皮疹,就可以基本确定为麻疹。
但是,为了排除其他疾病的可能性,医生还需要进行实验室检查和了解患者的流行病学史。
麻疹的诊断需要综合考虑临床表现、实验室检查和流行病学史等因素,只有在满足以上三个条件的情况下,才能确诊为麻疹。
及时诊断和治疗,可以有效地控制麻疹的传播和发展。
急诊急性尊麻疹诊疗常规
急性荨麻疹是食物、药物、植物、动物、空气中的致敏物、体内感染灶等致敏原引起的急性变态反应,除皮肤发生风团外,还可以发生过敏性休克等严重情况。
【诊断标准】
1.急性发作,有接触过敏原的历史。
2.皮肤突然出现大量风团,瘙痒剧烈,风团面积大小不等,红色或苍白色。
3.胃肠道黏膜受累时出现腹痛、恶心、呕吐等,呼吸道黏膜受累时出现呼吸困难,甚至窒息。
4.严重时可合并过敏性休克。
5.外周血嗜酸性粒细胞增多。
【治疗原则】
1.取出致敏原。
2.及时应用抗组胺药物。
3.病情严重时应用皮质激素。
4.出现消化道或呼吸道症状时给予对症治疗。
5.出现过敏性休克时进行抗休克治疗。
麻疹诊断标准及处理原则GB 15983—1995根据中华人民共和国传染病防治法及中华人民共和国传染病防治法实施办法制定本标准;1 主题内容与适用范围本标准规定了麻疹的诊断标准和处理的原则;本标准适用于各级、各类医疗、卫生、保健机构和人员对麻疹病人的诊断、报告和处理的应用;2 诊断原则麻疹是由麻疹病毒引起的呼吸道传染病,传染性强,在麻疹减毒活疫苗普遍应用后,不但存在症状典型的麻疹,而且存在症状不典型的病人,前者可根据临床表现结合流行病学作出诊断,后者需根据血清麻疹抗体的检测或麻疹病毒的分离阳性作出诊断;3 诊断标准3.1 临床症状3.1.1 全身皮肤出现红色斑丘疹;3.1.2 发热38℃或更高;3.1.3 咳嗽或上呼吸道卡他症状,或结合膜炎;3.1.4 起病早期一般于病程第2~3日在口腔颊粘膜见到麻疹粘膜斑Koplik氏斑;3.1.5 皮肤红色斑丘疹由耳后开始向全身扩展,持续3天以上呈典型经过;3.2 流行病学史与确诊麻疹的病人有接触史,潜伏期6~18天;3.3 实验室诊断3.3.1 一个月内未接种过麻疹减毒活疫苗而在血清中查到麻疹lgM抗体;3.3.2 恢复期病人血清中麻疹IgG抗体滴度比急性期有4倍或4倍以上升高,或急性期抗体阴性而恢复期抗体阳转;3.3.3 从鼻咽部分泌物或血液中分离到麻疹病毒附录A,或检测到麻疹病毒核酸;3.4 病例分类3.4.1 疑似病例具备3.1.1 加3.1.2条者,或同时伴有3.1.3条者;3.4.2 临床诊断病例疑似病例加3.1.4条或3.1.5条或3.2条;3.4.3 确诊病例疑似病例加3.3.1条或3.3.2条或3.3.3条;具有任何一项临床症状加3.3.1条或3.3.2条或3.3.3条;4 处理原则4.1 病人的隔离与治疗发现疑似或诊断病例,应立即隔离,隔离期直至出疹后5天;并发肺炎者延长隔离期至出疹后10天;对病人进行对症治疗和防治并发症;4.2 对易感者的应急措施4.2.1 对病人周围未发病的易感人群可实施麻疹减毒活疫苗的应急接种,应急接种覆盖面宜广,实施时间要尽早,应在接触病人的3日内接种;4.2.2 与病人密切接触者中年幼、体弱或具有麻疹减毒活疫苗接种禁忌症者的易感人群,可注射含有高价麻疹抗体的人丙种血浆或胎盘球蛋白制剂作被动免疫附录B;4.2.3 与病人密切接触而未接种过麻疹疫苗的易感儿童应检疫21天;4.3 麻疹的免疫预防对易感儿童实行麻疹减毒活疫苗普种,是预防本病的首要措施;常规免疫初免定为8月龄进行,根据人群对麻疹免疫力的监测,当免疫力减低时应进行疫苗再免疫;为提高麻疹疫苗免疫接种的成功率应保证活疫苗的冷链保藏和运输,并接种足够的剂量; 附录A病原学诊断方法补充件A1 病毒分离从病人呼吸道或血液采集标本分离病原体;A1.1 标本收集宜在皮疹出现前,柯氏斑出现时采集标本;将灭菌棉棒稍蘸液体2%牛血清Eagle液,反复涂抹患者咽部数次,然后将棉棒浸于上述标本液1~1.5mL中反复挤压,标本液中加入10倍常规用量的青、链霉毒各1000u/mL及制霉菌素50μg/mL;加肝素抗凝的血液白细胞中也可分离病毒; A1.2 接种取0.1~0.2mL标本液接种于生长在试管中的单层原代人胚肾细胞或其他原代细胞如人羊膜、人胚肺、猴肾等或人二倍体细胞或传代细胞如B95a细胞上,37℃1h后弃液,再加入含双倍常规抗生素量的细胞维持液1mL,37℃培养;并设未接种标本的空白对照培养;A1.3 观察细胞病变一般7天左右出现融合巨细胞病变,待细胞病变占全部细胞75%以上时+++,冰冻融化三次,低速沉淀后取上清液留作毒种;若未见病变需连续盲传三代,每次培养观察二周,如仍不出现病变则为阴性;A1.4 毒株鉴定用已知麻疹病毒免疫血清观察能否与新毒株起作用,传统采用中和试验法;A2 病毒核酸检测利用分子杂交技术或多聚酶联试验PCR技术测定病毒核酸;附录B人丙种球蛋白制剂被动免疫参考剂量补充件B1 种类丙种球蛋白简称“丙球”,是一种人工被动免疫制剂;目前供应的“丙球”有人血浆丙种球蛋白HGG和胎盘丙种球蛋白PGG两种,前者是从健康人的血浆中提取,后者是从健康产妇胎盘血提取;含有高价麻疹抗体的丙球可用于麻疹被动免疫;B2 接种对象与麻疹病人密切接触者中年幼、体弱或具有麻疹减毒活疫苗接种禁忌症者的易感人群;B3 用法和剂量对麻疹接触者的被动免疫,强调接触后立即注射,注射越早预防效果越好;接触后5天内采用足量丙球,可达到不发病目的;5天后注射只能起到减轻症状作用;常用10%人血丙种球蛋白,剂量为0.2mL/kg体重,或人胎盘血丙种球蛋白,剂量为0.5mL/kg体重,采用肌肉注射;其免疫作用一般只能维持2~4周;附录C血清学诊断方法参考件C1 血凝抑制试验C1.1 原理猴红细胞上有麻疹病毒受体,遇麻疹病毒可产生凝集现象;若将抗体与病毒血凝素预先温育后再加入红细胞则不产生凝集,称为血凝抑制;定量血凝素与不同稀释度抗体血清作用后能完全抑制血凝的最高血清稀释度,即为抗体效价;C1.2 主要材料C1.2.1 血凝板6×12或8×12个圆形孔,孔底光滑的U形板;C1.2.2 稀释棒或定量移液器稀释棒为优质不锈钢制成,尖端分数瓣,瓣间容量应精确为0.025mL,稀释棒应标化后使用;定量移液器选用25μL;C1.2.3 定量滴管或定量移液器滴管用玻璃制成或磨口玻璃管上安一个注射器针头制成定量滴头,垂直控制滴下每滴量为0.025mL;C1.2.4 尖底小试管形如离心管,便于血清的吸取;C1.3 麻疹血凝素的制备C1.3.1 粗血凝素的制备选择血凝性状良好的麻疹毒株接种到生长旺盛,形态良好的原代细胞人羊膜、猴肾等、人二倍体细胞或传代细胞KB.MERN.FL.BHK等;接种病毒剂量根据病毒滴度而定;原代人羊膜细胞接种病毒后培育于37℃,约在2~3周出现血凝素后每隔3~5天收获上清液,换以新鲜的维持液培养;如此反复培养数次收获上清液,最后一次将细胞连同培养液置-30℃以下冻化后,沉淀去细胞残渣,数次收获的上清液即为血凝素;原代猴肾细胞、二倍体细胞及传代细胞接种麻疹病毒后,病变发展较快,待病变达“++++”并有50%病变细胞脱落时,将细胞连同培养液置-30℃以下反复冻融三次,低速沉淀后取上清液即为血凝素;血凝素效价应在1∶32以上,置-30℃保存备用;C1.3.2 血凝素的处理取一定量粗血凝素放入三角瓶或试管中,加入5%吐温-80Tween-80并使其最终浓度为0.125%,室温振荡5min,再加入与粗血凝素等量的乙醚分析纯,用力充分振荡12min,然后,移入沉淀管内以2000r/min离心10min,小心吸出下部水层,将乙醚排尽至无乙醚味时为止,即为本试验用之血凝素;加青霉素100u、链霉素100μg,置4℃保存;C1.4 猴红细胞悬液的配制选择与麻疹血凝索凝集效价高的猴子,静脉采血置阿氏A1sever液中阿氏液量为猴红细胞的4倍,4℃保存,一般可用二周;用前以生理盐水洗三次,最后一次经2000r/min离心10min,弃上清,压积的猴红细胞用生理盐水配成1%浓度用于试验;C1.5 血清处理血清分离后取0.1mL,加等量生理盐水于56℃水浴30min灭活,每管加入0.1mL经2000r/min 离心10min处理的压积猴红细胞1滴,充分摇匀后,4℃过夜,次日吸取上清液测定此时血清稀释度为1∶2;C1.6 血凝素滴定C1.6.1 效价滴定血凝板1~10孔各加生理盐水0.025mL,于第1孔加血凝素0.025mL,混匀后从第1孔移1滴0.025mL至第2孔,如此倍比稀释至第9孔1∶2~512,第10孔不加血凝索作为红细胞对照;每孔各加1滴0.025mL1%猴红细胞,振匀后静置37℃1h读结果,血凝达十十时的血凝素最高稀释度为其效价,即1个血凝单位;正式试验时采用2个单位血凝索;C1.6.2 单位滴定按上述效价将血凝素稀释成2u如血凝素效价为1∶128,稀释成1∶64、1u、1/2u、1/4u,各孔中用生理盐水倍比稀释,再加1滴等量的1%猴红细胞,振匀后,置37℃1h判定结果,应出现“++++、+++、++、+、-”之凝集方能用于试验;C1.7 血凝抑制试验在微孔U形底血凝板中进行;第2~9孔每孔加生理盐水0.025mL,第9孔为血清对照;第1、2及9孔各加1∶2处理好的血清0.025mL,从第2孔开始稀释使血清充分混匀后,再放入下一孔倍比稀释至第8孔;第1~8孔各加2u血凝素1滴,第9孔加生理盐水1滴;振匀后置37℃30min;然后每孔加1%猴红细胞1滴,振匀后置37℃1h判定结果;判定结果时应先将血凝板倾斜待血清对照孔内的红细胞自由下滑呈泪滴状时即读结果;红细胞下滑与对照相同者为完全抑制;完全抑制的血清最高稀释度即抗体的效价;血清对照不应出现凝集否则判断时应慎重或再吸收;C2 麻疹被动血球凝集试验C2.1 原理以红细胞为载体,挂上抗原,根据抗原抗体反应的原理,用已知抗原检测未知抗体的一种血清学方法;C2.2 试剂保存于4℃,在有效期内使用C2.2.1 麻疹致敏血球:冻干制品,加入5mL1%兔血清盐水轻轻旋摇,使成均匀悬液后即可使用; C2.2.2 对照血球:冻干制品,加入2.5mL1%兔血清盐水;C2.2.3 麻疹阳性参考血清:冻干制品,加入0.2mL1%兔血清盐水溶解后为原倍血清;已经56℃灭活,试验前,同待测血清相同方法经醛化血球吸附;C2.2.4 10%醛化血球5mL/支:用生理盐水洗3次后,再用盐水还原至5mL;C2.2.5 兔血清:冻干制品,用生理盐水1mL溶解,即为原倍血清;C2.3 检测程序C2.3.1 待测血清处理:经56℃30min灭活的血清0.05mL,加等量10%醛化血球,37℃1h或4℃过夜,上清为1∶2倍稀释血清;C2.3.2 效价测定:血清在V型微量血凝板上,作倍比稀释,稀释度从1∶2到1∶1024,每孔0.025mL稀释血清,加1%致敏血球0.025mL,充分振摇后,置37℃1h;判定结果,以发生“++”凝集的最高稀释度的倒数为血清的滴度;C2.3.3 设下列对照:致敏血球对照:1%兔血清盐水+致敏血球,结果不凝集;阳性血清对照:方法同待测血清;其测定的效价,应在已知浓度士1个滴度范围内;待测血清对照:1∶2稀释的待测血清十对照血球;结果不凝集;C3 酶联免疫吸附法检测麻疹IgG抗体ELIsA间接法C3.1 原理将麻疹抗原包被于固相载体上,加上待检血清,再用酶标抗抗体间接检出特异性抗体;C3.2 材料C3.2.1 聚苯乙烯酶标板;C3.2.2 麻疹阴性和阳性血清;C3.2.3 麻疹抗原;C3.2.4 抗人IgG辣根过氧化物酶结合物;C3.2.5 酶底物:邻苯二胺及过氧化氢H下标始2O下标终2;C3.3 操作程序C3.3.1 用pH9.6碳酸盐缓冲液稀释麻疹抗原与未感染麻疹病毒的细胞抗原对照抗原;C3.3.2 于40孔聚苯乙烯板的单排孔与双排孔分别加入0.1mL/孔的麻疹抗原与对照抗原;右下最后一孔不加任何抗原作为空白对照,4℃过夜;C3.3.3 以0.05%吐温-20生理盐水NS-T洗板三次,倒去洗液;C3.3.4 在血凝板中以2%牛血清NS-T将待测血清稀释成1∶200、1∶800、1∶3200、1∶12800四个稀释度,每个稀释度加麻疹抗原与对照抗原各1孔0.1mL,下同,轻轻振摇后置37℃1~2h; C3.3.5 以Ns-T洗三次,倒去洗液后每孔加入以2%牛血清NS-T稀释的抗人IgG辣根过氧化物酶结合物0.1mL空白对照不加,置37℃1~2h;C3.3.6 以NS-T洗三次,倒去洗液后加邻苯㶌氝櫰넔䃩꒞š띓氂♱ᒑ=癳ꪪꪪ体䥌遄ᴤ⁂紅뀋簴㣐ꪪₐ昂퐽糱ᣐ漼⋋㕙ゐ섡ꪪ가가✪묀떐⢐縲벱밯⣐ꪪ쐉㗌ₐ옒뱭⣐茇㓌㔇ₐイ㰯㣐뜰ϸ뗃ゐ蜚ꪪ粰ᣐ缏맚徐对照孔开始显淡黄色时即用2mol/L硫酸终止,每孔加50μLC3.3.7 用空白对照孔调零点,以酶标仪492nm测定各孔光密度OD值;OD值不足0.05者按0.05计;凡同一稀释度下麻疹抗原孔OD值/对照抗原孔OD值>2.1即P/N为阳性;阳性之最高稀释度的倒数即为该血清的抗体效价;<1∶200者视为阴性;C3.3.8 每次实验应作已知效价的阳性及阴性血清对照;C4 酶联免疫吸附法检测麻疹IgM抗体抗体捕捉ELISA法C4.1 原理利用包被在固相载体上的抗人IgMμ链抗体,捕捉待检血清中的IgM,再用麻疹病毒抗体和已知的酶标麻疹病毒抗体去检测血清中IgM是否为抗麻疹抗体;利用底物使酶显色而测知;C4.2 材料C4.2.1 聚苯乙烯40孔或96孔板;C4.2.2 抗人IgMμ链抗体;C4.2.3 麻疹病毒抗原和正常对照抗原;C4.2.4 抗麻疹病毒抗体单克隆或多克隆;C4.2.5 酶标抗麻疹病毒抗抗体抗麻疹病毒抗体和酶标抗麻疹病毒抗抗体也可用酶标抗麻疹病毒抗体代替;C4.2.6 酶底物:邻苯二胺及过氧化氢;C4.2.7 已知的麻疹IgM抗体阳性和阴性血清;C4.2.8 包被液:0.05mol/L碳酸盐缓冲液pH9.6;无水碳酸钠159mg碳酸氢钠293mg,使用不超过2周蒸馏水加至100mLC4.2.9 洗涤液NS-T:0.85%盐水的吐温液;氯化钠17g吐温20 1.0mL蒸馏水加至2000mLC4.2.10 稀释液为5%牛血清的NS-T液;C4.2.11 邻苯二胺及过氧化氢底物液;先配柠檬酸磷酸缓冲液PH5.0:磷酸氢二钠18.41g柠檬酸5.1g蒸馏水加至1000mL,分小瓶冰冻保存临用时配底物液:邻苯二胺OPD 4mg柠檬酸磷酸缓冲液10mL30%H下标始2下标终O下标始2下标终5mLC4.3 操作C4.3.1 包被抗人IgMμ链抗体,每孔100μL;C4.3.2 37℃过夜,倒掉液体,用10%牛血清NS-T液120μL封闭;C4.3.3 37℃1h后倒去封闭液,洗三次;C4.3.4 加待测血清1∶100稀释,即1μL待测血清加100μL稀释液每孔100μL;每份血清加2孔或4孔,37℃,2h后洗三次;C4.3.5 加麻疹抗原于1孔或2孔中,每孔100μL;另1孔或2孔中加正常对照抗原,4℃过夜后,洗三次;C4.3.6 加麻疹单克隆抗体每孔100μL,37℃1.5h后倒去抗体,洗三次;C4.3.7 加酶标记的抗鼠抗体,每孔100μL,37℃1.5h后倒去抗鼠抗体,洗4次,扣干;C4.3.6与C4.3.7二步,亦可用加酶标抗麻疹单克隆或多克隆抗体一步所取代,每孔加100μL,37℃水浴2h,洗三次再扣干;C4.3.8 加底物,一般为邻苯二胺过氧化氢H下标始2下标终O下标始2下标终,每孔100μL,37℃10~20min;C4.3.9 加终止酶的反应液即2mol/L硫酸,50μL/孔,判定结果;C4.4 结果的判定C4.4.1 肉眼判定法:待检血清与麻疹抗原孔呈明显的棕色反应,正常对照抗原孔不或微显色,两者能用肉眼明显察觉者即为阳性;C4.4.2 用酶标仪的492nm光源测光密度OD值,血清的P/N≥2.1时为阳性P为待测血清与麻疹抗原作用的OD值,N为待测血清与正常对照抗原作用的OD值;在用待测血清与已知麻疹阴性血清作对比时,则P为待测血清与麻疹抗原作用后的OD值,N 为标本阴性血清与麻疹抗原作用后的OD值;附加说明:本标准由中华人民共和国卫生部提出;本标准由浙江医科大学传染病研究所、中国预防医学科学院病毒学研究所负责起草;本标准主要起草人刘克洲、张礼璧;本标准由卫生部委托卫生部传染病监督管理办公室负责解释;。