德国HUMANIMTEC抗核抗体谱检测项目实施建议书

抗核抗体谱检测试剂盒（磁微粒化学发光法)适用范围：分别用于体外定量测定人血清中抗SSA抗体IgG，抗核糖体P蛋白IgG抗体，抗SSB抗体IgG，抗nRNP/Sm免疫球蛋白G抗体（IgG），抗Sm抗体IgG，抗着丝点抗体IgG，抗Scl-70抗体免疫球蛋白G(IgG)，抗Jo-1抗体IgG，抗双链DNA IgG抗体，抗组蛋白抗体（IgG），抗核小体IgG抗体，抗线粒体2型（M2）抗体IgG ，抗PM-Scl 抗体免疫球蛋白G（IgG），抗增殖细胞核抗原（PCNA）抗体IgG的含量。

1. 产品规格及其划分说明项目名称 组分名称 主要成分 包装规格及装量25测试/盒50测试/盒100测试/盒SSA （抗SSA抗体IgG）SSA校准品（1,2,3）含抗SSA抗体浓度为2、20、200RU/ml的pH 7.4±0.1Tris缓冲液1ml/瓶×3瓶1ml/瓶×3瓶1ml/瓶×3瓶SSA质控品（1,2）含抗SSA抗体两个浓度水平(30±9RU/ml、100±20RU/ml)pH 7.4±0.1Tris缓冲液1ml/瓶×2瓶1ml/瓶×2瓶1ml/瓶×2瓶SSA试剂1含生物素标记的SSA抗原的pH 7.4±0.1磷酸1.5ml/瓶×1瓶3ml/瓶×1瓶6ml/瓶×1瓶盐缓冲液SSA 试剂2 碱性磷酸酶标记的抗人IgG抗体的pH 7.2±0.1的Tris缓冲液3ml/瓶×1瓶6ml/瓶×1瓶12ml/瓶×1瓶SSA 试剂MpH 7.5±0.1的Tris缓冲液配制的链酶亲和素结合着的磁性微粒1.5ml/瓶×1瓶3ml/瓶×1瓶6ml/瓶×1瓶P0（抗核糖体P蛋白IgG抗体）） P0校准品（1,2,3）含抗核糖体P蛋白抗体浓度为g 、20、200 RU/ml的pH 7.4±0.1Tris缓冲液1ml/瓶×3瓶1ml/瓶×3瓶1ml/瓶×3瓶P0质控品（1,2）含抗核糖体P蛋白抗体两个浓度水平(30±9RU/ml、100±20RU/ml)的pH 7.4±0.1Tris缓冲液1ml/瓶×2瓶1ml/瓶×2瓶1ml/瓶×2瓶P0试剂1生物素标记的P0抗原的pH 7.4±0.11.5ml/瓶×1瓶3ml/瓶×1瓶6ml/瓶×1瓶磷酸盐缓冲液P0试剂2 碱性磷酸酶标记的抗人IgG抗体的pH 7.2±0.1的Tris缓冲液3ml/瓶×1瓶6ml/瓶×1瓶12ml/瓶×1瓶P0试剂MpH 7.5±0.1的Tris缓冲液配制的链酶亲和素结合着的磁性微粒1.5ml/瓶×1瓶3ml/瓶×1瓶6ml/瓶×1瓶SSB（抗SSB抗体IgG） SSB校准品（1,2,3）含抗SSB抗体浓度为2、20、200RU/ml的pH 7.4±0.1Tris缓冲液1ml/瓶×3瓶1ml/瓶×3瓶1ml/瓶×3瓶SSB质控品（1,2）含抗SSB抗体两个浓度水平(30±9RU/ml、100±20RU/ml)的pH 7.4±0.1Tris缓冲液1ml/瓶×2瓶1ml/瓶×2瓶1ml/瓶×2瓶SSB试剂1生物素标记的SSB抗原的pH 7.4±0.1磷酸盐缓冲液1.5ml/瓶×1瓶3ml/瓶×1瓶6ml/瓶×1瓶SSB试剂2 碱性磷酸酶标记的抗人IgG抗体的pH 7.2±0.1的Tris缓冲液3ml/瓶×1瓶6ml/瓶×1瓶12ml/瓶×1瓶SSB试剂MpH 7.5±0.1的Tris缓冲液配制的链酶亲和素结合着的磁性微粒1.5ml/瓶×1瓶3ml/瓶×1瓶6ml/瓶×1瓶nRNP/Sm （抗nRNP/Sm免疫球蛋白G抗体（IgG）） nRNP/Sm校准品（1,2,3）含抗nRNP/Sm抗体浓度为2、20、200 RU/ml的pH 7.4±0.1Tris缓冲液1ml/瓶×3瓶1ml/瓶×3瓶1ml/瓶×3瓶nRNP/Sm质控品（1,2）含抗nRNP/Sm抗体两个浓度水平(30±9RU/ml、100±20RU/ml)的pH 7.4±0.1Tris缓冲液1ml/瓶×2瓶1ml/瓶×2瓶1ml/瓶×2瓶nRNP/Sm试剂1生物素标记的nRNP/Sm抗原的pH 7.4±0.1磷酸1.5ml/瓶×1瓶3ml/瓶×1瓶6ml/瓶×1瓶盐缓冲液nRNP/Sm 试剂2 碱性磷酸酶标记的抗人IgG抗体的pH 7.2±0.1的Tris缓冲液3ml/瓶×1瓶6ml/瓶×1瓶12ml/瓶×1瓶nRNP/Sm 试剂MpH 7.5±0.1的Tris缓冲液配制的链酶亲和素结合着的磁性微粒1.5ml/瓶×1瓶3ml/瓶×1瓶6ml/瓶×1瓶Sm（抗Sm 抗体IgG）Sm校准品（1,2,3）含抗Sm抗体浓度为2、20、200RU/ml的pH 7.4±0.1Tris缓冲液1ml/瓶×3瓶1ml/瓶×3瓶1ml/瓶×3瓶Sm质控品（1,2）含抗Sm抗体两个浓度水平(30±9RU/ml、100±20RU/ml)的pH 7.4±0.1Tris缓冲液1ml/瓶×2瓶1ml/瓶×2瓶1ml/瓶×2瓶Sm试剂1生物素标记的Sm抗原的pH 7.4±0.1磷酸盐缓冲液1.5ml/瓶×1瓶3ml/瓶×1瓶6ml/瓶×1瓶Sm试剂2 碱性磷酸酶标记的抗人IgG抗体的pH 7.2±0.1的Tris缓冲液3ml/瓶×1瓶6ml/瓶×1瓶12ml/瓶×1瓶Sm试剂MpH 7.5±0.1的Tris缓冲液配制的链酶亲和素结合着的磁性微粒1.5ml/瓶×1瓶3ml/瓶×1瓶6ml/瓶×1瓶着丝点(CENP-B)（抗着丝点抗体IgG）着丝点(CENP-B校准品（1,2,3）含抗着丝点(CENP-B)抗体浓度为2、20、200RU/ml的pH 7.4±0.1Tris缓冲液1ml/瓶×3瓶1ml/瓶×3瓶1ml/瓶×3瓶着丝点(CENP-B质控品（1,2）含抗着丝点(CENP-B)抗体两个浓度水平(30±9RU/ml、100±20RU/ml)的pH 7.4±0.1Tris缓冲液1ml/瓶×2瓶1ml/瓶×2瓶1ml/瓶×2瓶着丝点(CENP-B生物素标记的着丝点(CENP-B)抗原的1.5ml/瓶×1瓶3ml/瓶×1瓶6ml/瓶×1瓶试剂1 pH 7.4±0.1磷酸盐缓冲液着丝点(CENP-B 试剂2 碱性磷酸酶标记的抗人IgG抗体的pH 7.2±0.1的Tris缓冲液3ml/瓶×1瓶6ml/瓶×1瓶12ml/瓶×1瓶着丝点(CENP-B 试剂MpH 7.5±0.1的Tris缓冲液配制的链酶亲和素结合着的磁性微粒1.5ml/瓶×1瓶3ml/瓶×1瓶6ml/瓶×1瓶Scl-70（抗Scl-70抗体免疫球蛋白G(IgG)） Scl-70校准品（1,2,3）含抗Scl-70抗体浓度为2、20、200RU/ml的pH 7.4±0.1Tris缓冲液1ml/瓶×3瓶1ml/瓶×3瓶1ml/瓶×3瓶Scl-70质控品（1,2）含抗Scl-70抗体两个浓度水平(30±9RU/ml、100±20RU/ml)的pH 7.4±0.1Tris缓冲液1ml/瓶×2瓶1ml/瓶×2瓶1ml/瓶×2瓶Scl-70试剂1生物素标记的Scl-70抗原的1.5ml/瓶×1瓶3ml/瓶×1瓶6ml/瓶×1瓶pH 7.4±0.1磷酸盐缓冲液Scl-70试剂2 碱性磷酸酶标记的抗人IgG抗体的pH 7.2±0.1的Tris缓冲液3ml/瓶×1瓶6ml/瓶×1瓶12ml/瓶×1瓶Scl-70试剂MpH 7.5±0.1的Tris缓冲液配制的链酶亲和素结合着的磁性微粒1.5ml/瓶×1瓶3ml/瓶×1瓶6ml/瓶×1瓶Jo-1（抗Jo-1抗体IgG）Jo-1校准品（1,2,3）含抗Jo-1抗体浓度为2、20、200RU/ml的pH 7.4±0.1Tris缓冲液1ml/瓶×3瓶1ml/瓶×3瓶1ml/瓶×3瓶Jo-1质控品（1,2）含抗Jo-1抗体两个浓度水平(30±9RU/ml、100±20RU/ml)的pH 7.4±0.1Tris缓冲液1ml/瓶×2瓶1ml/瓶×2瓶1ml/瓶×2瓶Jo-1试剂1生物素标记的Jo-1抗原的pH 7.4±1.5ml/瓶×1瓶3ml/瓶×1瓶6ml/瓶×1瓶0.1磷酸盐缓冲液Jo-1试剂2 碱性磷酸酶标记的抗人IgG抗体的pH 7.2±0.1的Tris缓冲液3ml/瓶×1瓶6ml/瓶×1瓶12ml/瓶×1瓶Jo-1试剂MpH 7.5±0.1的Tris缓冲液配制的链酶亲和素结合着的磁性微粒1.5ml/瓶×1瓶3ml/瓶×1瓶6ml/瓶×1瓶dsDNA （抗双链DNA IgG 抗体 dsDNA校准品（1,2,3）含抗dsDNA抗体浓度为10、100、800 IU/ml的pH 7.4±0.1Tris缓冲液1ml/瓶×3瓶1ml/瓶×3瓶1ml/瓶×3瓶dsDNA质控品（1,2）含抗dsDNA抗体两个浓度水平（300±30IU/ml、600±60IU/ml）的pH 7.4±0.1Tris缓冲液1ml/瓶×2瓶1ml/瓶×2瓶1ml/瓶×2瓶dsDNA试剂1生物素标记的dsDNA抗原的1.5ml/瓶×1瓶3ml/瓶×1瓶6ml/瓶×1瓶pH 7.4±0.1磷酸盐缓冲液dsDNA试剂2 碱性磷酸酶标记的抗人IgG抗体的pH 7.2±0.1的Tris缓冲液3ml/瓶×1瓶6ml/瓶×1瓶12ml/瓶×1瓶dsDNA试剂MpH 7.5±0.1的Tris缓冲液配制的链酶亲和素结合着的磁性微粒1.5ml/瓶×1瓶3ml/瓶×1瓶6ml/瓶×1瓶组蛋白（His）（抗组蛋白抗体（IgG）组蛋白（His）校准品（1,2,3）含抗组蛋白（His）抗体浓度为2、20、200 RU/ml的pH 7.4±0.1Tris缓冲液1ml/瓶×3瓶1ml/瓶×3瓶1ml/瓶×3瓶组蛋白（His）质控品（1,2）含抗组蛋白（His）抗体两个浓度水平(30±9RU/ml、100±20RU/ml)的pH 7.4±0.1Tris缓冲液1ml/瓶×2瓶1ml/瓶×2瓶1ml/瓶×2瓶 组蛋白生物素标记的组蛋 1.5ml/瓶3ml/瓶×16ml/瓶×1（His）试剂1白（His）抗原的pH 7.4±0.1磷酸盐缓冲液×1瓶 瓶 瓶组蛋白（His）试剂2 碱性磷酸酶标记的抗人IgG抗体的pH 7.2±0.1的Tris缓冲液3ml/瓶×1瓶6ml/瓶×1瓶12ml/瓶×1瓶组蛋白（His）试剂MpH 7.5±0.1的Tris缓冲液配制的链酶亲和素结合着的磁性微粒1.5ml/瓶×1瓶3ml/瓶×1瓶6ml/瓶×1瓶核小体（Nuc）（抗核小体IgG抗体）核小体（Nuc）校准品（1,2,3）含抗核小体（Nuc）抗体浓度为2、20、200 RU/ml的pH 7.4±0.1Tris缓冲液1ml/瓶×3瓶1ml/瓶×3瓶1ml/瓶×3瓶核小体（Nuc）质控品（1,2）含抗核小体（Nuc）dsDNA抗体两个浓度水平(30±9RU/ml、100±20RU/ml)的pH 7.4±0.1Tris1ml/瓶×2瓶1ml/瓶×2瓶1ml/瓶×2瓶缓冲液核小体（Nuc）试剂1 生物素标记的核小体（Nuc）抗原的pH 7.4±0.1磷酸盐缓冲液1.5ml/瓶×1瓶3ml/瓶×1瓶6ml/瓶×1瓶核小体（Nuc）试剂2 碱性磷酸酶标记的抗人IgG抗体的pH 7.2±0.1的Tris缓冲液3ml/瓶×1瓶6ml/瓶×1瓶12ml/瓶×1瓶核小体（Nuc）试剂MpH 7.5±0.1的Tris缓冲液配制的链酶亲和素结合着的磁性微粒1.5ml/瓶×1瓶3ml/瓶×1瓶6ml/瓶×1瓶线粒体2型（M2）（抗线粒体2型（M2）抗体IgG） 线粒体2型（M2）校准品（1,2,3）含抗线粒体2型（M2）抗体浓度为2、20、200 RU/ml的pH 7.4±0.1Tris缓冲液1ml/瓶×3瓶1ml/瓶×3瓶1ml/瓶×3瓶线粒体2型（M2）质控品（1,2）含抗线粒体2型（M2）抗体两个浓度水平(30±9RU/ml、100±1ml/瓶×2瓶1ml/瓶×2瓶1ml/瓶×2瓶pH 7.4±0.1Tris缓冲液线粒体2型（M2）试剂1 生物素标记的线粒体2型（M2）抗原的pH 7.4±0.1磷酸盐缓冲液1.5ml/瓶×1瓶3ml/瓶×1瓶6ml/瓶×1瓶线粒体2型（M2）试剂2 碱性磷酸酶标记的抗人IgG抗体的pH 7.2±0.1的Tris缓冲液3ml/瓶×1瓶6ml/瓶×1瓶12ml/瓶×1瓶线粒体2型（M2）试剂MpH 7.5±0.1的Tris缓冲液配制的链酶亲和素结合着的磁性微粒1.5ml/瓶×1瓶3ml/瓶×1瓶6ml/瓶×1瓶PM-Scl（抗PM-Scl抗体免疫球蛋白G （IgG）） PM-Scl校准品（1,2,3）含抗PM-Scl抗体浓度为2、20、200RU/ml的pH 7.4±0.1Tris缓冲液1ml/瓶×3瓶1ml/瓶×3瓶1ml/瓶×3瓶PM-Scl质控品（1,2）含抗PM-Scl抗体两个浓度水平(30±9RU/ml、100±1ml/瓶×2瓶1ml/瓶×2瓶1ml/瓶×2瓶pH 7.4±0.1Tris缓冲液PM-Scl试剂1生物素标记的PM-Scl抗原的pH 7.4±0.1磷酸盐缓冲液1.5ml/瓶×1瓶3ml/瓶×1瓶6ml/瓶×1瓶PM-Scl试剂2 碱性磷酸酶标记的抗人IgG抗体的pH 7.2±0.1的Tris缓冲液3ml/瓶×1瓶6ml/瓶×1瓶12ml/瓶×1瓶PM-Scl试剂MpH 7.5±0.1的Tris缓冲液配制的链酶亲和素结合着的磁性微粒1.5ml/瓶×1瓶3ml/瓶×1瓶6ml/瓶×1瓶PCNA（抗增殖细胞核抗原（PCNA）抗体IgG）PCNA校准品（1,2,3）含抗PCNA抗体浓度为2、20、200RU/ml的pH 7.4±0.1Tris缓冲液1ml/瓶×3瓶1ml/瓶×3瓶1ml/瓶×3瓶PCNA质控品（1,2）含抗PCNA抗体两个浓度水平(30±9RU/ml、100±1ml/瓶×2瓶1ml/瓶×2瓶1ml/瓶×2瓶pH 7.4±0.1Tris缓冲液PCNA试剂1生物素标记的PCNA抗原的pH 7.4±0.1磷酸盐缓冲液1.5ml/瓶×1瓶3ml/瓶×1瓶6ml/瓶×1瓶PCNA试剂2 碱性磷酸酶标记的抗人IgG抗体的pH 7.2±0.1的Tris缓冲液3ml/瓶×1瓶6ml/瓶×1瓶12ml/瓶×1瓶PCNA试剂MpH 7.5±0.1的Tris缓冲液配制的链酶亲和素结合着的磁性微粒1.5ml/瓶×1瓶3ml/瓶×1瓶6ml/瓶×1瓶2. 性能指标2.1外观试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏；磁分离试剂摇匀后为均匀悬浊液，无明显凝集；液体组分应澄清，无沉淀或絮状物；包装标签应清晰，易识别。

抗核抗体谱12项检测在系统性红斑狼疮中的临床意义曹梦杰【摘要】探讨抗核抗体谱12项检测在系统性红斑狼疮诊断的临床意义.将我院自2014年6月～2016年12月间收治的系统性红斑狼疮患者83例作为研究对象,同时选择67例其他风湿性关节炎患者以及63例健康人群作为对照组,采集患者血清进行抗核抗体谱检测,使用间接免疫荧光法和蛋白印迹法检测患者的抗核抗体和抗核抗体谱等12种抗体,分析比较三组患者抗核抗体谱12项存在的差异.研究组患者抗核抗体阳性率为89.16％,显著高于其他风湿性疾病组32.84％和健康人群组4.73％;健康人群组12项抗核抗体谱结构均为阴性,研究组的双链DNA抗体、抗核小体抗体、抗nRNP抗体、抗Sm抗体、抗组蛋白抗体和抗核糖核酸P蛋白抗体阳性水平显著优于其他风湿性疾病组,差异显具有统计学意义(P<0.05).抗核抗体谱12项检测对系统性红斑狼疮的诊断具有重要的临床意义,多项指标联合观察可提高诊断的准确率和特异性,可推广使用.【期刊名称】《现代诊断与治疗》【年(卷),期】2017(028)021【总页数】2页(P4025-4026)【关键词】系统性红斑狼疮;抗核抗体;抗核抗体谱;临床诊断【作者】曹梦杰【作者单位】河南理工大学第一附属医院,河南焦作 454150【正文语种】中文【中图分类】R593.241系统性红斑狼疮（Systemic Lupus Erythematosus，SLE）属于临床上常见的自身免疫性疾病，主要表现为累及全身多个脏器的自身免疫反应，患者体内会缠身自身抗体，本病的发病机制尚未研究清楚，分析可能与遗传和外界环境因素有关，此外，与患者体内DNA甲基化、组蛋白修饰等调控作用有一定的相关性［1］。

目前临床诊断SLE以1997年美国风湿病学会修订的诊断标准作为指南，本研究将我院近两年半收治的SLE患者83例作为研究对象，分析抗核抗体谱和抗核抗体的指标，观察抗核抗谱12项检测在临床上诊断SLE的意义。

抗核抗体谱检测的临床意义抗核抗体（ANA）谱检测是一种用于评估自身免疫性疾病的常规实验室检查。

它是通过检测患者体液中的抗核抗体来评估机体免疫系统是否存在异常反应。

这种抗体可以识别和攻击自身组织中的核成分，如染色质、DNA和RNA，从而引发不同类型的自身免疫疾病。

抗核抗体谱检测的临床意义是非常重要的，因为它可以帮助医生确定疾病的类型、判断疾病的严重程度和预测疾病的发展趋势。

下面将详细介绍抗核抗体谱检测的临床意义。

首先，抗核抗体谱检测可以帮助医生确定疾病的类型。

许多自身免疫性疾病都与抗核抗体的产生有关。

根据不同的抗核抗体的阳性与阴性结果，可以判断疾病的类型。

例如，抗双链DNA抗体（anti-dsDNA）被认为是系统性红斑狼疮（SLE）的特异性抗体，其阳性结果往往与SLE相关。

另外，抗Sm抗体（anti-Sm）是SLE的特异性抗体，而抗核糖体P抗体（anti-nRNP）则与混合性结缔组织病（MCTD）相关。

通过抗核抗体谱检测，医生可以根据不同的抗体结果对疾病进行区分和诊断。

其次，抗核抗体谱检测可以评估疾病的严重程度。

一些抗核抗体的阳性结果与疾病的活动性和程度相关。

例如，抗Sm抗体的阳性结果与SLE的活动性和严重程度密切相关。

抗dsDNA抗体的水平升高也与SLE的肾脏损害的存在和严重程度相关。

通过检测这些特定的抗核抗体可以帮助医生评估疾病的活动情况和预测疾病的进展。

另外，抗核抗体谱检测可以预测疾病的发展趋势。

一些研究发现，特定的抗核抗体的阳性结果可以预测疾病的进展和预后。

例如，抗Sm抗体的阳性结果与SLE的预后不良相关，而抗dsDNA抗体的阳性结果与SLE的肾脏损害的发生和预后有关。

抗核抗体谱检测可以提供关于疾病进展和预后的重要信息，帮助医生制定个体化的治疗方案和监测疾病的进展。

此外，抗核抗体谱检测还可以帮助医生进行分子分型。

抗核抗体的阳性结果可用于确定不同的分子分型。

这对于选择合适的治疗方案和预测治疗效果非常重要。

抗核抗体（ANA）谱日期:2007-10-03 来源: 转载作者:管理员抗核抗体（antinuclear antibodies;ANA）是一组对细胞核内的DNA，RNA，蛋白或这些物质的分子复合物的自身抗体。

按其核内各个分子的性能不同可将各ANA区分开来，如：抗DNA抗体、抗组蛋白抗体、抗非组蛋白抗体、抗核仁抗体等。

每一大类又因不同抗原特性而再分为许多种类。

因此ANA在广义上是一组各有不同临床意义的自身抗体，更确切的名称应为抗核抗体谱。

ANA 主要存在于风湿病，是风湿病常用的筛查项目。

测定本抗体的方法有间接免疫荧光法（IFA）、放射免疫法（Farr法）、ELISA、血凝法等，我国的临床工作者多采用前两种方法，尤其是IFA法，免疫荧光法测定杭核抗体常见有以下几种图形：（1）均质型：核质染色均匀一致，这种染色型常与抗组蛋白和抗DNA抗体有关；（2）斑点型：核质染色呈斑点状，抗可提取性核抗原（ENA）抗体常呈这种染色型；（3）周边型：荧光染色围绕在核膜周围，它与抗DNA抗体有关；（4）核仁型：仅有核仁染色，具有抗4-6sRNA抗体呈现这种染色型；（5）着丝点型：在体外培养的细胞株（喉癌细胞）在核分裂相期时，可见到荧光染色的着丝点排列成特殊图型，而在鼠肝做底物中看不到此类图型，而被遗漏。

抗核抗体的分类由于核抗原不同，有多种不同的ANA1、抗DNA抗体：抗DNA抗体有抗双链DNA（ds-DNA）和抗单链(ss-DNA)抗体之分。

抗ds- DNA 抗体与SLE的关系密切，且随疾病的活动度而升降，病情好转者其滴度多下降甚或转阴。

抗ss- DNA抗体则与抗ds-DNA不同，可在多种疾病出现，包括一些非自身免疫性疾病，如细菌和病毒感染，故在临床上实用价值不大。

而抗ds-DNA抗体被认为是SLE所特有。

抗DNA的自身抗体在SLE发病中起一定作用。

在一些SLE患者，DNA大分子存在于循环中或粘附于多种器官的微血管结构，这些循环或器官原位抗原型DNA均可与循环自身抗体发生反应，形成免疫复合物，激活炎症系统，在一些器官如肾脏，肺和脑组织引起免疫复合物介导的疾病，导致组织损伤。

抗核抗体谱检测临床意义抗核抗体（ANA），是包含多种不同临床意义的一系列自身抗体，靶向的抗原包括：DNA、可提取核抗原（ENA）、RNA、核糖核蛋白（RNP）。

主要分为以下：抗DNA抗体（如抗ss-DNA抗体、抗ds-DNA抗体）。

抗组蛋白抗体(AHA)：抗H1、抗H2A、抗H2B、H3、抗H4抗体等（药物性狼疮的阳性率达95%以上，常见的药物有肼苯达嗪、异烟肼及氯丙嗪）。

抗非组蛋白抗体：ENA抗体谱（抗Sm抗体、抗RNP 抗体、抗SSA/Ro抗体、抗SSB/La抗体、抗Mi-2抗体、抗Ku抗体、抗Scl-70抗体、抗Jo-1抗体）。

抗核仁抗体：抗PM-Scl抗体、抗Th/To抗体、抗U3-RNP、抗4-6-S-RNA抗体等。

抗其它细胞成分抗体（PCNA）。

何时检测ANA：高验前概率的患者：存在SLE(如光敏性、胸膜炎)、SSc(雷诺现象、皮肤改变)或干燥综合征(Sjögren's disease, SjD，难以解释的眼干口干)的临床证据时，根据ANA结果很容易诊断。

如果患者的症状、体格检查和实验室结果提示有较大或很大概率为以下一种或多种诊断，适合检测ANA：ü关节出现持续性炎症，伴有骨骼及关节疼痛、肿胀、僵硬、活动受限。

早晨起床时关节感觉僵硬，在活动后减轻，称为“晨僵”。

ü肌肉疼痛、红肿、无力，甚至萎缩，做精细动作困难。

ü皮肤出现明显红斑、皮疹，光照后情况加重。

皮肤出现硬化，触觉异常，对温度的感觉出现异常，黏膜处可能出现反复发作的溃疡。

ü全身多器官损伤，出现乏力、发热、虚弱、贫血、血细胞减少、蛋白尿等症状。

如果不加选择地检测ANA，大多数阳性结果可能反映假阳性，还可能干扰医生的正确诊断。

假阳性情况：肺疾病：如特发性肺纤维化、特发性肺动脉高压；慢性感染：如寄生虫、结核杆菌感染等；肝病：如活动性肝炎、酒精性肝病等；血液系统疾病：如白血病、骨髓瘤等；其他系统疾病：如器官移植后、终末期肾病、I型糖尿病等。

抗核抗体谱检测试剂盒（条带免疫印迹法）适用范围：用于体外定性检测人血清中的抗Mi-2、Ku、nRNP/Sm、Sm、SSA/60kd、SSA/52kd、SSB、 Scl-70、PM/Scl、Jo-1、CENP B、PCNA、dsDNA、核小体、组蛋白、P0和AMA M2的IgG抗体。

1.1. 包装规格20人份/盒（型号为ANA-17-A；ANA-15M-A；ANA-15K-A；ANA-13-A；ANA-12-A；ANA-9N-A；ANA-9D-A；ANA-8N-A；ANA-8D-A；ANA-7-A；ANA-5-A）其中，各型号检测项目如下：抗原膜条包被抗原型号说明见表2（不同产品型号包被不同抗原组合）表2抗原膜条包被抗原型号说明2.1. 外观2.1.1. 试剂盒外部包装盒应整洁，各组分应齐全完整，文字符号标识清晰，所有试剂瓶密闭，无漏液。

2.1.2. 样本缓冲液为无色或淡黄色澄清液体；浓缩洗液（10×）为无色澄清液体；酶结合物（10×）为无色或淡黄色澄清液体；底物液为淡黄色澄清液体。

2.2. 净含量液体试剂装量不小于标示值。

2.3. 膜条宽度膜条宽度不低于1.8mm。

2.4. 临界值及重复性抗核抗体谱企业参考品各检测项目临界值浓度均为15U/ml（dsDNA为75IU/ml）。

阳性参考品各检测项目抗体浓度均为20U/ml（dsDNA为100IU/ml），检测10次，结果的阳性率为100%，反应结果一致；阴性参考品各检测项目抗体浓度均为10U/ml（dsDNA为50IU/ml），检测10次，结果的阴性率为100%，反应结果一致。

2.5. 批间差抽取三个批次的试剂盒，每个批次按临界值及重复性的检验方法检测，各浓度反应结果应一致，应符合临界值及重复性的要求。

2.6. 稳定性效期稳定性：试剂盒有效期为2～8℃保存18月，取有效期满1个月内试剂盒，检测应符合2.4的要求。

ＥＮＡ检测对诊断系统性红斑狼疮的临床应用【关键词】抗核抗体谱线性免疫分析法;狼疮细胞;系统性红斑狼疮系统性红斑狼疮(SLE)诊断主要依靠临床表现，而在疾病早期临床表现较为明显，为达到早期诊断和治疗的目的。

以达到提高疗效，控制及延缓病情发展、减轻患者痛苦，临床需要能早期诊断的实验室指标，而LE细胞的检查恰是在患者早期就诊、无药物影响的情况下进行的检测，阳性率极高。

这对SLE的早期诊断提供了有利的实验室指标、争取到治疗的有利时间，同时联合可提取性核抗原（ENA）多种自身抗体的检测，能够更好地观察病情发展，结合临床表现为指导治疗起到有力的辅助作用。

现对48例SLE患者及40例健康体检合格者血液采用ENA抗体检测及红斑狼疮（SLE）细胞玻片法检测，并对结果进行回顾性分析，将实验报告如下。

1 材料和方法1．1 材料来源48例SLE患者均来至南京中国医学科学院皮肤病研究所和江西省皮肤病院门诊和住院患者。

时间为2004年1月至2007年6月，其中男5例，女43例，年龄13～54岁，平均32．2岁，均符合82年在ARA(美国风湿学会)修订的SLE分类标准；对照组为我院健康体检合格者40例，其中男4例，女36例，年龄为18～51岁，平均35．1岁。

1．2 仪器、试剂和方法1．2．1 标本的采集所采的被检标本均为空腹不抗凝血2～3 ml，以2 500 r/min速度离心15 min分离血清，加样时无纤维、气泡或其他物质。

1．2．2 ENA检测采用德国IMTEC公司生产的抗核抗体谱线性免疫分析试剂进行检测，检验方法采用线性免疫分析法(LIA)，并严格按我室SOP标准文件进行操作。

①膜条与稀释的患者血清(1∶101)在20~25℃室温下共同孵育45 min，样本中的特异性抗体与膜条上的抗原结合。

孵育完成后经过3次洗涤除去未结合的蛋白;②在膜条上加入辣根过氧化物酶标记抗人IgG二抗检测此结合抗体进行第二次孵育，45 min后洗涤3次除去未结合的蛋白;③加入无色的底物液，此结合抗体表现为兰色免疫复合物。

抗核抗体谱检测（免疫印迹法）1 目的熟悉自身免疫性疾病抗核抗体谱检测标准操作规程，以便于更加规范化的操作，提高免疫检验质量，保证结果的准确性。

2 适用范围适用于免疫室内自身免疫性疾病抗核抗体谱检测3 职责检验科主任负责组织人员制定自身免疫性疾病抗核抗体谱检测标准操作程序，免疫室组长负责组织人员具体实施。

4 该SOP变动程序本标准程序的变动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，，并报经下述人员批准签字：专业组长、科主任。

5原理该欧蒙印迹法试剂盒用于体外定性检测血清或血浆中的人抗nRNP、Sm、SS-A（天然SS-A 和Ro-52）、SS-B、Scl-70、PM-Scl、Jo-1、CENP B、PCNA、dsDNA、核小体、组蛋白、核糖体P蛋白和AMA M2等14种不同抗原IgG类抗体。

实验膜条上平行包被了这些高度纯化的抗原。

在第一次温育时，已稀释的血清与实验膜条反应。

如果标本阳性，特异性的IgG（也包括IgA和IgM）与相应抗原结合。

为检测已结合的抗体，加入酶标抗人IgG（酶结合物）进行第二次温育，然后加入酶底物，以产生可观察的颜色反应。

6标本采集及实验标本要求采取静脉血2-3ml，待分离血清后，离心（1500-3000转/分）15分钟，待测。

随机静脉血2ml，分离血清备用。

也可使用EDTA、肝素或柠檬酸盐抗凝血浆。

稳定性：标本宜新鲜，无污染，避免溶血，避免反复冻融，不可用NaN3防腐。

7标本存放：待检患者标本于2-8 C可稳定14天，稀释后的标本应在同一个工作日内检测。

8标本运输：2-8℃密闭运输。

9标本拒收条件：蛋白变性标本，标本中含有颗粒物质，细菌污染，严重溶血或脂血标本不能做测定。

10试剂附:nRNP/Sm：小牛和兔胸腺提取物，经亲和层析纯化的天然U1-nRNP。

Sm：牛脾脏和胸腺提取物，经亲和层析纯化的天然Sm。

SS-A：牛脾脏和胸腺提取物，经亲和层析纯化的天然SS-A。

Ro-52：重组的Ro-52（52kDa），相应的人cDNA用杆状病毒系统在昆虫细胞中表达。

抗核抗体谱检测的临床诊断意义ISSN1007—8738细胞与分子免疫学杂志(ChinJCellMolImmuno1)201127(论着?抗核抗体谱检测的临床诊断意义1017文章编号:1007—8738(2011)09—1017一O2何蕊,徐兰峰,宋秀军,陈舒,江其生(第二炮兵总医院中心实验室,北京100088;锦州市中心医院检验科,辽宁锦州121000)[摘要]目的:分析抗核抗体线性免疫印迹分析法(ANA—LIA)和抗核抗体问接免疫荧光法在自身免疫性疾病临床的诊断价值.方法:ANA—uA使用德国IMTEC公司IMTEC—HumanGmbH抗核抗体谱试剂检测;抗核抗体用间接免疫荧光法检测.结果:用间接免疫荧光法检测抗核抗体300例,用免疫印迹法检测抗核抗体谱263例,ANA荧光法与ANA—uA免疫印迹法检测阳性结果无显着性差异(P&gt;0.05);30例同时进行ANA,ANA.LIA检测,结果一致率73.3%;ANA—LIA漏检率20%,错检率6.7%.结论:以间接免疫荧光法检测抗核抗体缺乏特异性,而抗核抗体谱免疫印迹法具有高特异性,但存在着较高的漏检率,因此在临床实际应用中将两种方法联合应用,检测效果更好.[关键词]自身免疫性疾病;抗核抗体;间接免疫荧光法;免疫印迹法[中图分类号]R593.2[文献标识码]B抗核抗体(anti-nuclearantibody,ANA)是对细胞核抗原具有不同特异性的自身抗体的总称.ANA一般分为可提取核抗原(extractablenuclearantigen,ENA)抗体和不可提取性抗原抗体和胞质抗原抗体.ANA和ENA抗体的检测,对胶原病,尤其是SLE,与SLE密切相关的混合结缔组织病,及其他风湿性疾病的诊断具有重要意义.目前临床常用的抗核抗体检测方法为间接免疫荧光法,其灵敏度很高.但同时存在着抗原成分复杂,无法作为自身免疫疾病的标志性抗体,其临床诊断存在一定难度j.本实验应用线性免疫印迹分析法(ANAlinearimmunoblot assay,ANA-LIA),将与自身免疫性疾病相关的特异性抗体dsDNA抗体,核小体抗体,StuD1抗体,核糖体P蛋白抗体组蛋白抗体,U1snRNP抗体,SSA/60KD抗体,SSA/52KD抗体,SSB抗体,Scl-70抗体,抗着丝点抗体,Jo-1抗体印迹于硝化纤维素膜上,一定浓度的血清与其孵育,使其特异性抗体被硝化纤维素膜捕获并经辣根过氧化酶标记的抗人IgG收稿日期:2010—12—20;接受日期:2011—01一l8作者简介:何蕊(1979一),女,北京人,主管技师,硕士Tel*************;E—mail:*******************徐兰峰(1973一),男,辽宁锦州人,主管技师,硕士Tel*************;E—mail:*******************同为第1作者Correspondingauthor二抗染色,从而达到检测目的.同时采用间接免疫荧光法检测抗核抗体做以比较.1材料和方法1.1材料采集2009—01/2010—12来院初诊263例患者,对其进行与自身免疫疾病相关的12项抗核抗体:dsDNA抗体,核小体抗体,SmD1抗体,核糖体P蛋白抗体组蛋白抗体,U1snRNP抗体,SSA/60KD抗体,SSA/52KD抗体,SSB抗体,Scl-70抗体,抗着丝点抗体,Jo一1抗体的检测.同时以该期间来院就诊的300例患者进行抗核抗体荧光法检测,其中30例同时进行上述两种检验方法检验.所有研究对象均空腹采血,4℃2500r/min离心10min,分离血清直接检测.1.2方法1.2.1抗核抗体谱免疫印迹法检测使用德国IMTEC公司IMTEC—HumanGmbH抗核抗体谱试剂盒,抗原与特异性抗体经过3步反应:膜条与稀释的病人血清共同孵育45min,样本中的特异性抗体与膜条上的抗原结合.孵育完成后用洗液3次洗涤,每次洗涤10min除去未结合的蛋白;在膜条上加入稀释100倍的辣根过氧化酶标记抗人IgG二抗检测此结合抗体进行第2次孵育45rain,之后洗涤3次除去未结合蛋白;加入无色TMB底物染色,经蒸馏水充分冲洗终止反应,待膜干燥后,将实验结果与试剂盒提供的uA特异判读卡比较,判定结果.1.2.2抗核抗体荧光法检测使用日本博尔迈公司荧光检测试剂盒,经2步反应:稀释的病人血清与载玻片上Hep.2细胞共同孵育30min,洗液洗涤10min,洗涤3次去除未结合血清抗体;加入FITC标记的抗人IgG共同孵育30rain,洗液洗涤10min,洗涤3次,荧光显微镜镜下观察.2结果2.1ANA荧光法与ANA.LIA检测结果ANA荧光法与ANA—uA分别检测300例与263例患者血清抗核抗体谱(表1,图1),两种方法检出的阳性率无显着性差异(P&gt;0.05).表1ANA荧光法与ANA—L【A法检测患者血清抗核抗体谱结果2.230例同时进行ANA,ANA?LIA检测结果的比较30例中结果一致的22例中,10例为全阳性,12例为全阴性,一致率73.3%;结果不一致的8例中,ANA荧光法检测为阳性,ANA—uA检测阴性的6例,漏检率20%,ANA荧光法检lO18ISSN1007—8738测为阴性,ANA—uA检测阳性2例,错检率6.7%(表2).一惜10ⅡANA荧光法ANA—LiA免疫印迹法图1ANA荧光法与ANA.uA法检测患者血清抗核抗体谱结果比较表2两种方法检测患者血清抗核抗体谱结果3讨论抗核抗体为细胞内所有抗原成分的自身抗体总称,包括核酸和核蛋白抗体.其靶抗原分布在细胞核,细胞质,细胞骨架及细胞分裂周期.以间接免疫荧光法检测抗核抗体存在着缺乏特异性的弊端,只能作为自身免疫性疾病的过筛性检验.抗核抗体谱中的12项抗体针对自身免疫性疾病都具有诊断意义:抗dsDNA抗体对于诊断系统性红斑狼疮(SLE)有较高特异性,尤其针对活动期SLE患者中低度较高,该抗体可以作为SLE的活动性和治疗效ChinJCellMolImmuno1)2011.27(9果检测指标;抗SM抗体主要在SLE中出现,对于经治疗后回顾性诊断的患者有帮助;抗nRNP抗体有助于鉴别结缔组织和非结缔组织病.抗SSA和SSB抗体多见于干燥综合征患者,抗SSA抗体敏感性较强,抗SSB抗体特异性较高,二者联合检测提高了ss的诊断率;抗Scl-70抗体多见于进行性系统性硬化患者,而局限型硬化症不出现;抗Jo一1抗体见于多肌炎,与合并肺间质纤维化相关J.但同时抗核抗体谱免疫印迹法也存在着较高的漏检率,其原因分析为,该谱只含有与常见自身免疫疾病相关的12项抗核抗体,而并不代表全部抗核抗体.此外,该免疫印迹法也存在一定的错检率,这有可能与血清处理不当,产生非特异性吸附.目前该方法已做适当调整,在血清免疫吸附前,使用脱脂奶以去除非特异性吸附,从而避免错检.参考文献:[1]刘凤,蒋火刚,金桂荣.抗核抗体谱的检测在自身免疫性疾病诊断中的应用[J].临床医学与临床,2010,7(7):622—623.[2]龚岚.抗ENA抗体与抗核抗体的相关性[J].职业与健康,2010,26(3):356—367.[3]姜烈君,罗焰芳.间接免疫荧光法和免疫印迹法检测113例系统性红斑狼疮患者抗核抗体谱结果分析[J].内科,2008,3(4):546—547.[4]车文英,谭延国,韦希明.312例抗核抗体与抗细胞核细胞浆抗体谱检测结果的分析[J].中国实验诊断学,2008,12(8):1031—1033.[5]邹敏,李珉珉,黄尚宝,等.丙肝病毒感染者血清抗核抗体与IL-2l的检测[J].细胞与分子免疫学杂志,2010,26(5):471—472◆●◆●◆◆¨●◆1◆◆4P"ll"4P◆●●1川◆1◆◆n川◆1◆ll●14t,,◆1●1,◆1,◆,,◆,11,◆◆11,●◆●◆41-¨¨●(上接1016页)[5]李世荣,薛海斌,薛峰,等.CD4CD25FOXP3调节性T细胞在肺癌患者外周血中的表达及意义[J].山东医药,2008,48(44):63—64.[6]刘淑真,任海朋,殷晓燕,等.流式细胞仪检测晚期肺癌患者外周血CD4CD25调节性T细胞的临床意义[J].潍坊医学院学报,2010,32(5):386—388.[7]华琪.不同麻醉和镇痛方法对肺癌根治术患者T细胞亚群变化的影响[J].细胞与分子免疫学杂志,2009,25(11):1038—1039.[8]邹静,刘斌,陈雪华,等.肺癌患者外周血T淋巴细胞亚群变化特点及临床意义[J].中国免疫学杂志,2010,26(11):1016—1020.[9]薛江楠,王春艳,张晓姝,等.肿瘤患者外周血中抑制性受体LAIR.1表达升高[J].细胞与分子免疫学杂志,2008,24(4):373—377.。