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液相色谱仪日常维护及常见故障解决PPT课件

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液相色谱仪日常维护及常见故障解决精品PPT课件

液相色谱仪日常维护及常见故障解决精品PPT课件
流动相内含有空气 - 脱气处理 检测池内有气泡 - 冲洗检测池或在检测池出口接一段内径0.009“的
管子(此法只适用于耐压检测器 !!!) 色谱柱内有未洗脱尽的组份 - 洗脱色谱柱. 系统有漏液之处 - 检漏并处理 电噪声 - 去除噪声源, 信号线屏蔽, 检查系统接地状况 检测器光源灯能量低 - 更换光源灯 检测池污染 - 冲洗检测池
逻辑判断及处理
化学品
*色谱柱/保护柱 *溶液 *样品
问题
环境
*电源 *地线 *温度 *湿度
*清洁程度
机器
*泵 *进样器 *检测器 *数据处理单元
液相色谱仪器出现故障可以从多方面入手
1.从部件的运转情况推测，如压力、流速的变化 2.从色谱图的异常情况推测，如出峰时间、峰形 3.从数据结果中分析
典型故障分析及实例基线噪声
流动池污染后，会造成灵敏度下降、 噪声加大，应避免脏的样品进入流动 池。定期使用异丙醇冲洗系统对保持 流动池性能有一定好处。
更换氘灯。
二、液相色谱仪故障分析
能引起HPLC发生问题的潜在因素:
工作环境 流动相 进样器 在线过滤器 色谱柱 数据处理装置
电源及地线 泵 保护柱 连接管路 检测器 操作
一、液相色谱仪日常维护及注意事项
1 流动相 2 脱气机（在线） 3 泵（单元、二元、四元） 4 进样器（手动、自动） 5色谱柱 6 检测器(VWD/DAD/FLD/RID…)
1 流动相
溶剂 乙睛
水 环己烷 己烷 甲醇 乙醇 乙醚 二氯甲烷 氯仿 四氯化碳 四氢呋喃 甲苯
UV截止波长（nm） 190 190 195 200 210 210 220 220 240 265
色谱柱保护
色谱柱的再生
进行色谱柱再生时，应使用一个廉价的泵，我们建议最好不使用您的高效液相色 谱仪上的泵。

岛津液相色谱仪维护教材1 PPT

岛津液相色谱仪维护教材1 PPT
尺寸
0.1 mmI.D. x 1.6 mmO.D. 0.3 mmI.D. x 1.6 mmO.D. 0.5 mmI.D. x 1.6 mmO.D. 0.8 mmI.D. x 1.6 mmO.D.
管线材料
不锈钢 (可用于所有连接) 能承受几千 kgf/cm2 压力 酸性或高浓度盐环境中易腐蚀 (尤其在pH小于2时)
岛津液相色谱仪维护教材1
第一部分
液相色谱故障排除经验 液相色谱常见问题
液相色谱简易流程图
溶剂
进样器 输液泵
色谱柱 柱温箱
检测器 废液
数据处理
1
储液瓶
2
脱气机
3
泵单元
4 手动进样器
5
色谱柱
6
检测器
7
废液瓶
1.等度系统
2.低压梯度系统
1
储液瓶
2
脱气机
3
低压梯度单元
4
泵单元
5
混合器
6
自动进样器
7
色谱柱
大家应该也有点累了，稍作休息
大家有疑问的，可
日常保养
-做好平常的保养可以有效的降低故障的发生率 -做好平常的保养可以延长仪器的使用寿命
常做的保养 —保证仪器的使用环境（经常清洁仪器，尤其是灰尘） —泵的保养（使用缓冲盐时要清洗柱塞，水和盐不要长期 保存在泵里） —进样器要经常清洗，避免污染物吸附或堵塞管路 —尽量进行样品前处理 —色谱柱要定期清洗，保证柱效及使用寿命 —系统中不要长期保存水和盐，长时间不用时应将仪器所 有部分全部更换为70％以上的甲醇，避免细菌的滋生及 盐的析出。
PEEK (可用于所有连接) 能承受高达 250 kgf/cm2压力 可在整个pH范围(pH 1-14)内使用 不适用于高溶解性溶剂如氯仿等

液相色谱仪日常维护及常见故障解决PPT课件

液相色谱仪日常维护及常见故障解决PPT课件

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22
逻辑判断及处理
化学品
*色谱柱/保护柱 *溶液 *样品
问题
环境
*电源 *地线 *温度 *湿度
*清洁程度
机器
*泵 *进样器 *检测器 *数据处理单元
.
23
液相色谱仪器出现故障可以从多方面入手
1.从部件的运转情况推测，如压力、流速的变化 2.从色谱图的异常情况推测，如出峰时间、峰形 3.从数据结果中分析
.
24
典型故障分析及实例基线噪声
流动相内含有空气 - 脱气处理
检测池内有气泡 - 冲洗检测池或在检测池出口接一段内径0.009“的 管子(此法只适用于耐压检测器 !!!)
色谱柱内有未洗脱尽的组份 - 洗脱色谱柱.
系统有漏液之处 - 检漏并处理
电噪声 - 去除噪声源, 信号线屏蔽, 检查系统接地状况
1，新的脱气机或新的管路；
2，更换了溶剂，尤其是缓冲盐与 有机相之间、两个不相容流动 相之间的互换时；
3，输液泵关闭了一段时间，或使 用挥发性溶剂混合物。
4，完成上述操作后，打开清洗阀， 用大流量冲洗，5ml/min。
.
10
3泵
出口球阀BOV 阻尼器/压力传感器
主动输入阀AV 梯度比例阀
溶剂瓶
清洗阀Purge Valve
柱塞杆Piston
泵驱动
.
11
二元泵工作原理
Purge valve
Mixer
Damper
Waste
Inlet valve
Outlet valve
Inlet valve
Outlet valve
A
B
.
12
泵的注意事项
1，溶剂的过滤、脱气；

液相色谱常见问题及其对策-三PPT课件

液相色谱常见问题及其对策-三PPT课件
堵塞
检查进样针头是否堵塞、进样阀是否 损坏、管路是否畅通等，采取相应措 施进行疏通或更换。
泄漏
检查接口是否松动、密封垫是否老化 、管路是否破损等，及时紧固或更换 相关部件。
其他辅助设备故障处理
柱温箱故障
检查温度传感器是否损坏、加热 元件是否正常工作、控温系统是 否稳定等，根据情况进行维修或
更换。
脱气机故障
考虑方法的回收率、精密度、准确性和操作简便性等因素。
对于复杂样品，可能需要采用多种前处理方法的组合。
避免干扰物质引入
使用高纯度的试剂和清洁的容器和设备，以减少干扰 物质的影响。
在前处理过程中，要注意避免引入干扰物质，如试剂 中的杂质、容器和设备的污染等。
对于可能引入干扰物质的步骤，要进行严格的控制和 验证。
流动相通过固定相时，与固定相 发生作用（吸附、分配、离子交 换等），使各组分在两相间的分
配系数发生变化。
反复多次利用上述过程，各组分 在移动速度上产生较大的差别， 被分离成单个组分依次从柱内流
出。
系统组成及功能
进样系统
将样品注入色谱柱。
检测系统
检测色谱柱流出物 的组分及含量。
输液系统
提供稳定、可调的 流动相流速。
自动化前处理技术可以减少人为操作误差和样品交叉污染的风险。
在使用自动化前处理技术时，要注意设备的维护和校准，确保设备的正常运行和准确性。
06 环境条件改善举措
实验室温湿度控制要求
1 2
温湿度对液相色谱仪器的影响
过高或过低的温度和湿度可能导致仪器性能不稳 定、色谱柱效降低等。
温湿度控制标准
建议将实验室温度控制在20-25℃，相对湿度保 持在40%-60%之间。

高效液相色谱仪器故障的诊断与维修-ppt课件.ppt

高效液相色谱仪器故障的诊断与维修-ppt课件.ppt

峰变宽 漏夜
故障排除 增加浓度 使系统到达平衡 检查进样器 使用柱温箱
检查漏夜的位置并维修
出现两个或多个未被完 选择其它色谱条件以改善分离
全分离的物质的峰
效果
检测器时间常数太大 使用较小的时间常数
ppt课件
11
4.峰分叉
现象
判断
柱性能下降
保护柱失效
故障排除 更换色普柱 换柱芯
峰分叉
色谱柱或保护柱被污染 清洗柱或保护柱，必要时更换
检测池被污染或有气体
用甲醇或其他强极性的溶剂冲 洗流通池
ppt课件
21
现象
判断
故障排除
测定的波长选择有误 基线漂移
使用分光光度计说明背景吸收， 如背景值高，说明流动相含有 紫外吸收化合物导致基线漂移。 使用的流动相应在紫外截止波 长以外，或更换溶剂
系统泄漏
检查并进行维修
样品中有强保留的物质 用强度合适的溶剂清洗色谱柱
判断
故障排除
样品前处理时产生降解 用标准品对照、检查样品处理过
或混入杂质
程，换新样品
色谱图出 现鬼峰 前一次进样的洗脱物
增加分析时间或梯度洗脱、提高 流速、如问题仍存在，两次进样 间用强溶剂冲洗色谱柱
注射器脏
清洗注射器、冲洗进样口
ppt课件
15
现象
判断
故障排除
流动相被污染
清洗溶剂贮液瓶、清洗溶剂入 口过滤器、使用HPLC级试剂
衡
统平衡
室温不稳
基线漂移 流动相污染或分解
使用柱温箱、将系统置于恒温、 空气对流小的环境
清洗溶剂贮液瓶、清洗溶剂入 口过滤器、使用HPLC级试剂
流动相脱气不充分
脱气重新平衡系统

HPLC安捷伦高效液相使用维护常见问题PPT课件

HPLC安捷伦高效液相使用维护常见问题PPT课件

启动液相色谱仪器的流程
流动相冲洗系统
水相走A、D泵，有机 相走B、C泵，可防止
缓冲盐析出
流动相配制后，先使用过滤装置过滤，然后超声15min，排除气泡干扰。流速 1ml/min，使用流动相冲洗系统至少30min，待基线平稳即可进行下一步操作。
进样测定 具体操作如下：点击“序列”-“序列表”-输入相关信息确定（样品瓶、样品 名称、方法名称-TEST、进样次数、进样量）-“开始序列”。待进样结束后， 进行下一步操作。 注意：在进样前，最好用100%甲醇进行洗针，以防进样针中残留的其它样品 影响实验结果。
稳定性考察： 取同一份供试品溶液，分别于不同时间进样测定（如0、2、4、6、8、10、12、 24h）。
HPLC色谱柱
数据处理系统
自动进样器 色谱泵
检测器
废液
第5页/共42页
一些商品化仪器
流动相
脱气装置
四元泵
样品盘 柱温箱 检测器
第6页/共42页
溶剂
棕色玻璃瓶会避免藻类的生长。 经常过滤溶剂以免其中微粒永久性阻塞毛细管。
第7页/共42页
启动液相色谱仪器的流程
开启HPLC系统各个设备的电源
打开泵、自动进样器、检测器电源，打开计算机启动 “1260联机工作站”，待
标准加样回收---已知浓度样品中加入药品
数据要求： 在规定范围内，至少用9个测定结果
进行评价。例如，设计3个不同浓度，每个 浓度各分别制备3份供试品溶液，进行测定。
第27页/共42页
分析方法的建立及验证
绝对回收率=提取回收率/（1－基质效应），HPLC中基质效应为0 1.绝对回收率=提取回收率=萃取回收率，是用药品加血浆经萃取处理后的进 样峰面积除以该药品溶液直接进样峰面积的比值，一般来说，该比值不可能 超过100%，能做到80%就不错了。以前国家对绝对提取率还有些要求，现在 随着lc-ms的应用，最低定量限已经能做到很低，也就不需要再对绝对回收率 提具体要求，只要相对回收率满意就可以。--生物样品：用于筛选提取溶剂， 可以低但要稳定 2.相对回收率=方法学回收率，是血浆处理后的进样峰面积代入血浆标准曲 线，计算所得浓度除以真实血样浓度.该比值在100%左右.一般要求高、中浓 度点在15%以内，低浓度点可适当放宽。--内标的相对回收率值与绝对回收 率要求类似 (1)举例：10ng A药加入1ml空白血浆（10ng/ml），经萃取处理后用0.5ml流动 相复溶，进样所得峰面积8000;配制对照溶液（浓度10ng/0.5ml=20ng/ml）， 进样所得峰面积假设为10000.那么萃取回收率为8000/10000=80%.

液相色谱仪日常维护及常见故障解决共72页文档

液相色谱仪日常维护及常见故障解决共72页文档
液相色谱仪日常维护及常见故障解决
56、极端的法规，就是极端的不公。 ——西 塞罗 57、法律一旦成为人们的需要，人们 就不再 配享受 自由了 。—— 毕达哥 拉斯 58、法律规定的惩罚不是为了私人的 利益， 而是为 了公共 的利益 ；一部 分靠有 害的强 制，一 部分靠 榜样的 效力。 ——格 老秀斯 59、假如没有法律他们会更快乐的话 ，那么 法律作 为一件 无用之—西塞 罗
31、只有永远躺在泥坑里的人，才不会再掉进坑里。——黑格尔 32、希望的灯一旦熄灭，生活刹那间变成了一片黑暗。——普列姆昌德 33、希望是人生的乳母。——科策布 34、形成天才的决定因素应该是勤奋。——郭沫若 35、学到很多东西的诀窍，就是一下子不要学很多。——洛克

高效液相色谱故障排除1.ppt

高效液相色谱故障排除1.ppt

柱外效应的影响
检查毛细管连接
色谱柱和检测器之间有漏； 检测器的检测池过大
检查是否有漏；使用小的检测池
色谱柱温度太低； 流动相的黏度太高
连接用的毛细管太长； 柱外死体积太大
提高色谱柱温度
使用内径较细的较短的毛细管连 接； 检查柱外死体积
色谱柱柱效下降
使用较小粒径填料的色谱柱； 更换色谱柱
探索色谱新领域，默克与您共同努力！
色谱柱过载
将样品稀释
柱外效应的影响
检查毛细管连接
2002-9
探索色谱新领域，默克与您共同努力！
解决问题
峰形展宽
2002-9
可能原因
色谱柱或预柱被污染或不合适
解决办法
更换色谱柱或预柱
色谱柱“过载”或进样体积过大 减少进样体积；稀释样品
溶解样品的溶剂选用不当
用流动相溶解样品
缓冲溶液的浓度太稀
使用浓度稍高的缓冲溶液或者 换用其它的缓冲溶液
色谱柱的滤网堵塞
更换滤网；使用柱前过滤系统； 将样品过滤
柱外效应的影响； 死体积
检查毛细管连接
色谱柱有“塌陷”、短流或断流
更换色谱柱； 使用性质较温和的分离条件
2002-9
探索色谱新领域，默克与您共同努力！
解决问题
出现双重峰或 分叉峰
可能原因
样品体积过大； 色谱柱过载
溶解样品的溶剂选用不当
色谱柱有“塌陷”、短流或 断流
溶剂中的杂质会导致出现“鬼峰”，特别是梯度解吸时
2002-9
注意： 只能使用色谱级的溶剂! 不能使用旧的或未经过滤的缓冲溶液
探索色谱新领域，默克与您共同努力！
溶剂
溶剂混合产生的问题
流动相中所使用的不同溶剂必须互溶

液相色谱日常维护PPT课件

液相色谱日常维护PPT课件
密封圈
柱塞杆
泵头清洗管路 流动相
HPLC Business Dept Shimadzu Corporation
故障：密封圈磨损导致密封不良
现象：系统压力波动大或漏夜
措施：更换密封圈
注意点： 1）流动相输送量达120L时，
应更换密封圈 2）更换前，新密封圈用异丙醇
浸泡15 min 3）拆卸泵头前，柱塞杆复位
日常维护
更换氘灯（紫外检测器）
• 判断氘灯能量： 设定220nm波长，检查参比池能量，如能量
低于800，需更换氘灯。
HPLC Business Dept Shimadzu Corporation
（P－SET）
日常维护
线路过滤器
线路过滤器 压力传感器
流动相
ห้องสมุดไป่ตู้
排液阀
故障：堵塞 现象：系统压力波动大或压力
偏高 措施：5％稀硝酸，超声波清洗 判断依据：关闭排液阀，断开出
口管路，设定流速1mL/min， 如压力>3kgf/cm2，则堵塞。
HPLC Business Dept Shimadzu Corporation
再用蒸馏水清洗
HPLC Business Dept Shimadzu Corporation
日常维护
单向阀
T泵：串联式往复泵
D泵：并联式往复泵
HPLC Business Dept Shimadzu Corporation
日常维护
单向阀结构
宝石球
抛光面
球座 流动相
HPLC Business Dept Shimadzu Corporation
液相色谱日常维护
HPLC Business Dept Shimadzu Corporation

安捷伦液相色谱仪日常和维护和故障诊疗培训课件

安捷伦液相色谱仪日常和维护和故障诊疗培训课件
8
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之 处，请联系网站或本人删除。
Agilent 1100/1200 在线脱气机日常维护,故障诊断
防止堵塞溶剂过滤器
污染的溶剂或溶剂瓶里的藻类生长将会缩短溶剂过滤器的使用寿命，并且影 响泵的运行。这在水溶剂或磷酸盐缓冲液 (pH 4 至 7) 中尤其如此。下 列建议 将会延长溶剂过滤器的使用寿命并维持泵的运行。
Agilent 四元／二元/单元泵日常维护,故障诊断
如何更换活塞杆密封圈
26
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之 处，请联系网站或本人删除。
Agilent 四元／二元/单元泵日常维护,故障诊断
Agilent 1100/1200 系列泵使用须知
27
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入口主动阀
new style
Cartridge 8
出口单向阀
old style
12
3
4
Outlet Ball Valபைடு நூலகம்e
冲洗阀
7
5
Purge Valve
6
Active Inlet Valve
(common to all except 1050)
23
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1100/1200 HPLC 日常维护 & 故障诊断
Agilent 1100/1200系列 HPLC
工作原理 日常维护 故障诊断 技术支持＆服务流程
安捷伦科技有限公司 生命科学与化学分析仪器部
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280（220） 285
在使用紫外检测器时，所 用波长与所用溶剂的截止 波长接近（或低于截止波 长）时，容易产生噪音干 扰，从而影响检测结果。
所以在使用紫外检测器时 ，所用波长应至少比所用 溶剂的截止波长大20nm以 上。
生色团 羰基（酮） 羰基醛 羧基 酰胺 次乙基 亚次乙基 睛 硝基
分子式 RR‘C=O RHC=O RCOOH RCONH2 RCH=CHR RC=CR RC=N RNO2
实例 丙酮 乙醛 醋酸 乙酰胺 乙烯 乙炔 乙睛 硝基甲烷
最大吸收波长（nm） 271 293 271 208 193 173 <160 271
溶剂、PH、温度等都会影响生色团的 最大吸收峰的强度和位置。
2 脱气机
目的
排除溶解在流动相中的氧气和 氮气
脱气方法： 氦气脱气 回流加热脱气 真空脱气 超声脱气
Outlet valve
A
B
泵的注意事项
4 进样器
过滤样品，确保样品中不含固体颗粒 用流动相或比流动相弱的溶剂溶解样品 进样量尽量小
样品完全溶解在流动相中
样品没有完全溶解
六通阀
手动进样器
手动进样阀 - 六通阀
Sample Syringe
Load
To Waste
To Column
From Pump
基线漂移
梯度系统 - 溶剂A于溶剂B的ABS值相差大 - 试用另种溶剂或使用基线扣除 法
色谱柱有其他组份被洗脱出 - 冲洗, 直至基线稳定
色谱柱保护
色谱柱的再生
进行色谱柱再生时，应使用一个廉价的泵，我们建议最好不使用您的高效液相色 谱仪上的泵。
色谱柱尺寸 柱体积 所用溶剂的体积 125-4 1.6ml 30ml 250-4 3.2ml 60ml 250-10 -20ml 400ml 请根据下表选择您的再生方法： 极性固定相（如Si，NH2*，DIOL基色谱填料）的再生： 正庚烷→氯仿→乙酸乙酯→丙酮→乙醇→水** 非极性固定相（如反相色谱填料RP－18，RP－8，CN等）的再生： 水→乙腈→氯仿（或异丙醇）→乙腈→水 0.05M稀硫酸可以用来清洗已污染的色谱柱 注意： 在对NH2改性的色谱柱进行再生时，由于NH2可能成铵根离子的形式存在，因此
流动相内含有空气 - 脱气处理 检测池内有气泡 - 冲洗检测池或在检测池出口接一段内径0.009“的
管子(此法只适用于耐压检测器 !!!) 色谱柱内有未洗脱尽的组份 - 洗脱色谱柱. 系统有漏液之处 - 检漏并处理 电噪声 - 去除噪声源, 信号线屏蔽, 检查系统接地状况 检测器光源灯能量低 - 更换光源灯 检测池污染 - 冲洗检测池
逻辑判断及处理
化学品
*色谱柱/保护柱 *溶液 *样品
问题
环境
*电源 *地线 *温度 *湿度
*清洁程度
机器
*泵 *进样器 *检测器 *数据处理单元
液相色谱仪器出现故障可以从多方面入手
1.从部件的运转情况推测，如压力、流速的变化 2.从色谱图的异常情况推测，如出峰时间、峰形 3.从数据结果中分析
典型故障分析及实例基线噪声
Sample Loop (Fixed Volume)
Inject
To Waste
To Column
From Pump
手动进样器
样品要干净、经过过滤。 合适的进样体积，比如定量环
为20ul，进样体积应为0—10ul， 或者20ul，进样20ul时注射样 品量应至少60ul以上。 定期清洗进样阀，清洗过程如 下： 1，将进样阀旋至Inject位置； 2，用带有专用头的注射器用 纯水约20—30ml冲洗进样阀； 3，将进样阀旋至Load位置。 参考左图。
应该在水洗后用0.1M的氨水冲洗，然后再用水冲洗至碱溶液完全流出。 **如果简单的有机溶剂/水的处理不能够完全洗去硅胶表面吸附的杂质，用0.05M
稀硫酸冲洗非常有效。
6 检测器
VWD的光源—氘灯有一定的半衰期， 一般为1000小时左右，所以在没有样 品分析任务时要关闭氘灯，以延长氘 灯的使用寿命。
一、液相色谱仪日常维护及注意事项
1 流动相 2 脱气机（在线） 3 泵（单元、二元、四元） 4 进样器（手动、自动） 5色谱柱 6 检测器(VWD/DAD/FLD/RID…)ຫໍສະໝຸດ 1 流动相溶剂 乙睛
水 环己烷 己烷 甲醇 乙醇 乙醚 二氯甲烷 氯仿 四氯化碳 四氢呋喃 甲苯
UV截止波长（nm） 190 190 195 200 210 210 220 220 240 265
基线周期性噪声
绝大多数情况下是来源于泵的问题 泵头内有气泡 - 流动相脱气 ,泵头排气(注意正确的排气方法) 泵进出口阀有问题 - 更换阀组件 柱塞杆有问题 - 更换柱塞杆及其密封圈 溶剂混合不良 - 加装混合器 电噪声 - 去除噪声源
非周期性噪声 气泡 - 流动相脱气 检测池内有气泡 - 流动相脱气, 检测池后加适当反压 系统有漏液之处 - 检漏并处理 溶剂混合不良 - 加装混合器 电噪声 - 去除噪声源
自动进样器
Metering device
Sampling unit
6-port valve To waste
From pump To column
准备位置
调用样品瓶 吸样品
进样和运行位置
标准进样过程 ...
自动进样器
• 样品要干净、经过过滤。 洗针：把样品残留降低到 最小限度，可降低进样的 记忆效应，洗针瓶最好不 要加瓶垫。 多次吸液 用于进样量大于100ul
在线真空脱气机
12 ml Solenoid valve
3泵
出口球阀BOV 阻尼器/压力传感器
主动输入阀AV 梯度比例阀
溶剂瓶
清洗阀Purge Valve
泵驱动
柱塞杆Piston
二元泵工作原理
Purge valve
Mixer
Damper
Waste
Inlet valve
Outlet valve
Inlet valve
流动池污染后，会造成灵敏度下降、 噪声加大，应避免脏的样品进入流动 池。定期使用异丙醇冲洗系统对保持 流动池性能有一定好处。
更换氘灯。
二、液相色谱仪故障分析
能引起HPLC发生问题的潜在因素:
工作环境 流动相 进样器 在线过滤器 色谱柱 数据处理装置
电源及地线 泵 保护柱 连接管路 检测器 操作