FolinCiocalteu比色法测定保健品中多酚总量
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第37卷
2009年10月
分析化学(FENXIHUAXUE)
ChineseJournalofAnalyticalChemistry
增刊
F176Folin.Ciocalteu比色法测定保健品中多酚总量
何莎莉+王钫
(浙江省农业科学院质量标准研究所,杭州310021)
目前多酚的测定方法主要有高锰酸钾法、酒石酸亚铁比色法、原子吸收法、紫外分光光度法等。
Folin.Ciocalteu比色法原理是基于Folin.Ciocalte试剂中的钨钼酸可以将多酚化合物定量氧化,自身被还原(、矿变为、Ⅳ5+)生成蓝色的化合物,颜色的深浅跟多酚的含量呈正相关。
目前关于Folin.Ciocalteu比色法的条件研究较少【l,2J,不同文献中比色条件的选择差异很大,本研究主要探讨Folin.Ciocalteu比色法测定保健品时的最佳显色条件,考察了本方法的稳定性、精密度、重现性。
Lambda紫外.可见分光光度计(Pekin.Elmer公司),DC.2006低温恒温槽(宁波市海曙天恒仪器厂),DK.¥22型电热恒温水浴锅(上海精宏实验设备有限公司),BS.224S电子天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司)。
绿原酸购自Sigma公司;Folin.Ciocalteu’S酚试剂购自上海MOL.IMMUNOBIO生物化学实验室;无水碳酸钠为分析纯,购自浙江中星化工试剂有限公司。
根据绿原酸溶液经显色反应后的吸收光谱可知,绿原酸溶液与Foliu.Cioealteu试剂反应显色后在750~800nm范围内有一明显吸收峰,实验选择吸收最强处780nnl作为测定波长。
将各比色试剂混合均匀后,考察显色时间对吸光度值的影响。
结果表明,40min内吸光值增大,显色反应迅速,反应液颜色变蓝且蓝色逐渐加深,40min以后吸光度值趋于稳定,为使反应完全,将反应时间定为60min。
显色反应温度对显色效果也有一定影响,在低温条件下,显色反应缓慢,吸光值较小,随着温度提高,反应速度加快,吸光值也逐渐增大。
而当温度高到一定程度时,吸光度值反而降低,反应颜色相对较浅。
这表明生成的蓝色物质在高温下不稳定,容易分解褪色,所以本实验反应温度设定为250C。
显色剂与酚类化合物反应后必须在碱性条件下才能显色,Folin.Ciocalteu试剂的用量以及它与Na2CO,溶液的比例也会影响体系的比色效果。
实验结果表明,显色剂与饱和Na2CO,溶液的体积比为l:2较合适。
并且当Folin.Ciocalteu试剂添加量大于2.5mL后吸光度达到最大且趋于稳定,所以确定Folin.Ciocalteu比色法显色剂用量为2.5mL,相应的Na2C03溶液用量为5mL。
采用上述的最适合条件绘制标准曲线,分别吸取0.2,0.4,0.6,0.8,1.0,1.2,1.4,1.6,1.8,2.0mL绿原酸标准溶液于25mL容量瓶中,加入2.5mLFolin.Ciocalteu显色剂,摇匀,再加入5mL饱和Na2CO,溶液,加水定容,在25oC下避光放置反应1h,测定其吸光值。
得到标准曲线的回归方程为y=62.606x一0.0097,相关系数帮为0.9986;线性范围是0.8~8mg/L。
绿茶软胶囊、葡萄籽素软胶囊购自杭州海王生物工程有限公司,红葡萄籽提取物胶囊购自广州邦阳生物技术有限公司。
试样制备方法:挤出内容物,混匀,装入洁净容器内,密封。
比较各种提取方法提取效果,采用60oC去离子水的提取效果最佳。
3个样品的测定结果令人满意。
样品放置3h后测定结果基本保持稳定。
References
l曹炜,索素荣.食品与发酵工业,2003,29(12):80~82
2刘丽香,TanguyLaura,梁兴飞,等.茶叶科学,2008,28(2):101-106
’E-mail:sallyhe.a@gIIlail.cⅢ
万方数据
Folin-Ciocalteu比色法测定保健品中多酚总量
作者:何莎莉, 王钫
作者单位:浙江省农业科学院质量标准研究所,杭州,310021
刊名:
分析化学
英文刊名:CHINESE JOURNAL OF ANALYTICAL CHEMISTRY
年,卷(期):2009,37(z1)
被引用次数:0次
1.曹炜.索志荣Folin-Ciocalteu比色法测定蜂蜜中总酚酸的含量[期刊论文]-食品与发酵工业 2003(12)
2.刘丽香.Tanguy Laura.梁兴飞.孙怡.叶红.曾晓雄Folin-Ciocalteu比色法测定苦丁茶中多酚含量[期刊论文]-茶叶科学 2008(2)
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