大鼠抗心磷脂抗体 IgM ( ACA-IgM )酶联免疫分析试剂盒 使用说明书(2)

IgM（大鼠）ELISA试剂盒实验原理
双抗体夹心ELISA的原理如图所示。

在本试验中，出现了IgM在样品中，抗体与吸附在聚苯乙烯表面的抗IgM抗体发生反应微滴定井。

通过洗涤去除未结合的蛋白质后，抗IgM抗体与添加辣根过氧化物酶（HRP）。

这些酶标记的抗体与抗体形成复合物以前结合的IgM。

在另一个洗涤步骤之后，分析与免疫吸附剂结合的酶通过添加显色底物3,3'，5,5'-四甲基联苯胺（TMB）。

绑定的数量酶直接随被测样品中IgM的浓度而变化；因此，450 nm处的吸光度为测试样本中IgM浓度的量度。

供试品中IgM的数量可以是根据标准曲线进行插值，并根据样品稀释度进行校正。

IgM （大鼠） ELISA试剂盒内包含了IgM （大鼠源） ELISA所需的所有试剂和相关组份。

简单快捷的方案设计和优化的试剂配比，为科研工作者提供较优的IgM （大鼠源） ELISA实验分析方案。

IgM （大鼠） ELISA试剂盒参数：
英文：IgM (Rat) ELISA Kit
保存建议：按操作说明对试剂盒内不同组份进行适当的保存。

IgM （大鼠） ELISA试剂盒特点：
1、试剂盒内含有分析所需的所有必需试剂，操作简单便捷；
2、试剂盒内组分经实验优化，确保更高的检测灵敏度。

小鼠蛋白激酶G（PKG）酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆、组织等样本中蛋白激酶G（PKG）的含量。

实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠蛋白激酶G（PKG）水平。

用纯化的小鼠蛋白激酶G（PKG）捕获抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被的微孔中依次加入小鼠蛋白激酶G（PKG），再与HRP标记的检测抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的小鼠蛋白激酶G（PKG）呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠蛋白激酶G（PKG）含量。

试剂盒组成：样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。

离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清。

检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。

通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。

离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清。

保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

5. 组织标本：切割标本后，称取重量。

加入一定量的PBS，PH7.4。

用液氮迅速冷冻保存备用。

标本融化后仍然保持2-8℃的温度。

抗心磷脂抗体LgG检测试剂盒（酶联免疫吸附法）说明书【产品名称】抗心磷脂抗体LgG检测试剂盒（酶联免疫吸附法）【通用名称】Anti-CardiolipinELISA(lgG)【包装规格】【预期用途】用于体外定量或半定量检测人血清或血浆中抗心磷脂抗体lgG。

适应症：抗磷脂综合症临床意义：与抗心磷脂抗体相关的临床并发症统称为抗心磷脂综合症：静脉和动脉血栓形成、血小板减少症、自发性流产、死胎和早产、中枢神经系统症状（包括头痛到大脑血栓形成等各种症状）、骨坏死的早期体征、肺高压。

抗心磷脂抗体见于50%的系统性红白狼疮患者和约5-40%的其他系统自身免疫异常患者（类风湿性关节炎、硬皮病、干燥综合症、夏普综合症等）。

抗心磷脂抗体阳性的患者有发展为静脉和动脉血栓的危险（高浓度抗心磷脂抗体的患者发病风险约为80%）。

自发性流产、死胎和早期患者经常可检抗心磷脂抗体，与是否存在自身免疫性疾病的征状无关。

但系统性红白狼疮患者更容易出现孕期并发症（达77%），可能的原因包括静脉血栓形成所致子宫内梗死。

心肌或大脑死后检测出高浓度的抗心磷脂抗体预示出现其他血管并发症的危险率增高，也是梗死后病情和预后监测的指标。

抗心磷脂抗体可有lgA、lgG或lgM亚型，诊断价值最高的是高浓度的lgG抗体，但很多患者血清中可检测出lgA和lgM型抗心磷脂抗体。

才外，有证据表明高浓度的抗心磷脂lgG型抗体与血小板减少症高度相关，而高浓度的抗心磷脂lgM型抗体和溶血性贫血高度相关。

【检验原理】试剂盒中每个微孔板条有8个可拆分的包被有心磷脂的微孔。

第一次温育时，稀释后的样本在微孔中反应。

在很多情况下，抗心磷脂抗体识别抗原需要血浆蛋白（β2-糖蛋白1）作为辅助因子，为此，反应体系必含有这一辅助因子，如果样本阳性，特异性lgG（包括lgA和lgM）与抗原相结合，为了检测结合的抗体，可加入发生颜色反应的酶标抗人lgG抗体（酶结合物）进行第二次温育，然后加入酶底物，发生颜色反应。

抗心磷脂抗体IgMELISA试剂盒，说明书大鼠抗心磷脂抗体IgMELISA试剂盒，说明书大鼠牛分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA试剂盒供应商：上海樊克生物有限公司产品规格：96T/48T。

抗心磷脂抗体IgMELISA试剂盒，说明书大鼠操作注意事项：●试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。

稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

●实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

●不用的其它试剂应包装好或盖好。

不同批号的试剂不要混用。

保质前使用。

●使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

●使用干净的塑料容器配置洗涤液。

使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

●底物A应挥发，避免长时间打开盖子。

底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。

避免用手接触，有毒。

实验完成后应立即读取OD值。

●加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

●按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

抗心磷脂抗体IgMELISA试剂盒，说明书大鼠ELISA technology principle:Based on immunological reaction, the specific reaction of antigen and antibody was combined with the high efficiency of enzyme to substrate.1 solid phase of antigen or antibody and enzyme marker of antigen or antibody.2 binding to the antigen or antibody on the surface of the solid supports to maintain its immunological activity.3 the enzyme labeled antigen or antibody not only retains its immunological activity, but also retains the activity of the enzyme.4 the antigen or antibody on the surface of the specimen and the solid carrier. Enzyme labeled antigen or antibody is then added to the solid support.5 at this time, the amount of enzyme in the solid phase and the amount of the substance in the sample were in a certain proportion.6 after adding the substrate of the enzyme reaction, the substrate is catalyzed bythe enzyme to be a colored product, and the amount of the product is directly related to the amount of the substance in the sample, so the qualitative or quantitative analysis can be carried out according to the color of the color. Determination of the method has a high sensitivity (pg-ng/ml level), and good reproducibility.抗心磷脂抗体IgMELISA试剂盒，说明书大鼠试剂盒操作步骤：温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

Mouse IgM ELISA KitCatalog NO.:RK00173version:2.0*使用产品前，请务必阅读产品包装内说明书产品简介本试剂盒产品使用夹心法定量测定小鼠血清、血浆、细胞培养上清或其它生物体液中IgM的含量。

产品检测原理本实验采用双抗夹心ELISA法。

将抗IgM抗体预先包被在酶标板上，向微孔中分别加入标准品和样品，样本中IgM与固相载体上的抗体结合。

孵育后，未结合的样品在洗涤过程中会被洗去，加入酶标抗体，经孵育和洗涤后，加入底物TMB。

样品中IgM的含量与TMB反应的颜色深浅呈正相关，加入酸终止反应并测量吸光值。

根据梯度稀释的IgM标准品的吸光值绘制标准曲线并求出样品的浓度。

试剂盒组分及保存条件未拆封的试剂盒可在2-8°C保存1年，已拆封的产品须在1个月内使用完。

组分规格货号拆封后保存条件抗体预包被酶标板Antibody Coated Plate 8×12RM00720将未使用的板条放回装有干燥剂的铝箔袋中，并重新密封，可在2-8°C存储1个月。

冻干标准品Standard Lyophilized 2支RM00717复溶后不建议再次使用。

浓缩酶标抗体（100×）Concentrated HRP-Conjugate Antibody(100×)1×120ul RM00718可在2-8°C存储1个月。

标准品/样本稀释液（R1）（4x）Standard/Sample Diluent (R1)（4x）1×20mLRM00023可在2-8°C 存储1个月。

酶标抗体稀释液（R2）HRP-Conjugate Antibody Diluent(R2)1×12mLRM00024浓缩洗涤液（20x）Wash Buffer(20x)1×30mLRM00026显色底物TMBSubstrate 1×12mLRM00027终止液Stop Solution 1×6mL RM00028封板膜Plate Sealers4张说明书Specification 1实验所需的材料1.酶标仪，并配置主波长450nm，次波长630nm或570nm。

抗心磷脂抗体(ACA) IgG ELISA磷酯有着广泛的生理意义。

循环抗磷脂抗体的存在可引起种种疾病，这些抗磷脂抗体的作用途径至今不清楚。

可能通过与内皮细胞膜上磷脂的交叉反应防止花生四烯酸释放，致使前列环素合成减少，从而促进血小板凝聚；另一种机理是防止血纤维蛋白溶解酶原激活剂的释放，降低血纤维蛋白溶酶原转变成血纤维蛋白溶酶，致使血纤维蛋白裂解减低。

ACA的存在常易发生静脉及动脉血栓形成。

ACA对血小板膜上的磷脂具有交叉反应，导致网状内皮系统摄血小板作用加强。

ACA阳性见于急性缺血性脑病，缺血性视神经病、脑血栓形成、偏头痛样头痛、肺源性高血压和习惯性流产。

抗磷脂抗体综合症的实验室诊断主要是抗磷脂抗体测定。

本试剂盒用于定性检测人血清中的抗心磷脂抗体ACA IgG浓度。

酶标板96wells 浓缩洗涤液(20X) 25ml吸收液12ml 酶联物12ml底物A 6ml 阴性对照 1 vial底物B 6ml 终止液6ml1.避免溶血、高血脂标本。

2.标本中若有悬浮物，应离心去除。

3.标本若不及时检测，请冻存于-20°C。

1.取出所需板条，其余立即密封放回2-8°C。

取出的板条应放入自封袋内（密封）平衡至室温再试验，以防水滴凝聚在冷板条上。

2.浓缩洗涤液(20X)用双蒸水稀释成1X(至500ml)。

未用完的放回2-8°C。

3.试剂盒应平衡至室温再试验。

1.样品孔内先加入100ul吸收液，再加入10ul血清标本。

2.加入100ul阴性对照至相应孔内。

(必要时加入100ul阳性血清至适当孔内)3.空白孔内加入100ul吸收液。

4.轻轻混匀30秒钟，封住板孔，37°C 45分钟。

5.洗板：甩尽孔内液体，每孔加入洗涤液350ul,静止30秒后甩尽液体，在厚叠吸水纸上拍干，洗5次。

6.每孔加入100ul 酶联物, 轻轻混匀30秒钟，封住板孔，37°C 30分钟。

7.洗板：甩尽孔内液体，每孔加入洗涤液350ul,静止30秒后甩尽液体，在厚叠吸水纸上拍干，洗5次。

大鼠IgM酶（IgM）ELISA试剂盒使用说明书产品编号：E0543r各试剂在使用前平衡至室温。

1.加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。

除空白孔外，余孔分别加标准溶液或待测样品100ul，轻轻混匀，37℃，120分钟。

2.弃去液体，甩干，不用洗涤。

3.每孔加检测溶液A工作液100ul，37℃,60分钟。

洗板3次，350ul/每孔，甩干。

4.每孔加检测溶液B工作液100ul，37℃，60分钟，洗板5次，甩干。

5.依序每孔加底物溶液90ul，37℃避光显色30分钟。

6.依序每孔加终止溶液50ul，终止反应。

用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。

注：1．每次实验留一孔作为空白调零孔，该孔不加任何试剂，只是最后加底物溶液及2NH2SO4。

测量时先用此孔调OD值至零。

2．为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内。

洗板方法手工洗板方法：吸去（不可触及板壁）或甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将推荐的洗涤缓冲液至少0.4ml注入孔内，浸泡1-2分钟，根据需要，重复此过程数次。

自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。

特异性本试剂盒可同时检测重组或天然的大鼠IgM，且与其它相关蛋白无交叉反应。

计算以标准物的浓度为横坐标（对数坐标），OD值为纵坐标（普通坐标），在半对数坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

注意事项1．洗涤过程非常重要，不充分的洗涤易造成假阳性。

2．一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

3．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。

4．如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请最后乘以稀释倍数。

5．在配制标准品、检测溶液工作液时，请以相应的稀释液配制，不能混淆。

大鼠脂联素（ADP)酶联免疫分析试剂盒使用说明书厦门慧嘉生物科技有限公司本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清，血浆及相关液体样本中脂联素（ADP)的含量。

实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠脂联素（ADP)水平。

用纯化的大鼠脂联素（ADP)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入脂联素（ADP)，再与HRP标记的脂联素（ADP)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的脂联素（ADP)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠脂联素（ADP)浓度。

样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。

离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清。

检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。

通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。

离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清。

保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

5. 组织标本：切割标本后，称取重量。

加入一定量的PBS，PH7.4。

用液氮迅速冷冻保存备用。

标本融化后仍然保持2-8℃的温度。

加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。