D-Hanks平衡盐溶液(含酚红)

平衡盐溶液平衡盐溶液（BSS)是从Ringer生理盐水进展起来的，主要由无机盐和葡萄糖组成。

BSS中的无机离子是细胞生命的须要成分，在维持渗透压、缓冲作用和调整溶液pH方面也起着重要作用。

另外，Ca2+、Mg2+能为酶系统的活化提供条件，也是细胞膜的重要组成成分。

等为细胞代谢提供能量。

作为核酸分子的合成也需要S,P等作为基质。

BSS内还含有少量的（酚红），作为pH变幻的指示剂，溶液变酸性时呈黄色，变碱性时呈紫红色，中性时呈桃红色，以此来观看和判定培养液pH的变幻。

在细胞培养中，BSS主要有如下用途：①作为配制培养基的基础溶液：如用Hanks液配制水解乳蛋白培养基等；②配制各种试液：如配“胰酶”消化液；③用于洗涤组织和细胞。

目前最常用的BSS是Hanks液、Earle 液和PBS等。

（一）BSS的配制要求 1．要防止钙的沉淀BSS配制时应将其中的CaCl2单独配制，并将平衡盐溶液配成浓缩液，使其在稀释前不让Ca2+与P042-和C032-接触，以免产生不溶解的CaP04和CaCO3。

避开产生CaC03的办法是将NaHC03单独配制，用法时现加。

2．要有良好的缓冲作用Hanks液和Earle液都需一定量的C02平衡。

因此应将瓶盖（橡皮塞）盖紧，以防瓶中CO2逃逸，致使溶液pH增高。

pH调整液单独灭菌时，亦应将瓶盖塞紧，临时不用的可冻存，否则NaHC03受热分解为NaOH和C02，失去其调整pH之功能。

（二）Hanks平衡盐溶液（Hanks balanced salt solutions, HBSS ) 为了便于保存和削减有关成分的化学反应，此液可配成20倍浓缩液（20×) ,10倍浓缩液（10×)和5倍浓缩液（5×)的储存液（母液）。

现以l0×为例，将其配制办法介绍如下： 1.l0×母液配制法甲液：取450ml三蒸水依次溶解下列试剂 NaCl 80g KCl 4g MgS04·7H20 2g CaCl2 1.4g （含2H20者1.85g) 待彻低溶解后，补足三蒸水至500m1。

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牛血清白蛋白溶液(1% BSA)
简介：
牛血清白蛋白溶液(1% BSA)是用于包被、蛋白添加剂等多种用途的试剂，主要由BSA(组分V)、去离子水组成。

组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、 根据实验具体要求操作。

注意事项：
1、 小心操作，防止细菌污染。

2、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期：12个月有效。

相关：
编号 名称 R00910 Storage 牛血清白蛋白溶液(1% BSA) 100ml 4℃ 使用说明书 1份 编号 名称 CC0005 磷酸缓冲盐溶液(1×PBS,无钙镁) CC0022 D-Hanks 平衡盐溶液(1×,含酚红) CC0128
胰蛋白酶-EDTA 溶液(0.25%:0.02%,含酚红) CS0001
ACK 红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer) DC0032
Masson 三色染色液 OR0011
标准蛋白质溶液(BSA,1mg/ml) PE0018
SDS-PAGE 凝胶配制试剂盒 PT0001
BCA 蛋白定量试剂盒 TC0713 葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD 比色法)。

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乐氏液
简介：
平衡盐溶液(Balanced Salt Solution ，BSS)与细胞生长状态下的pH 值、渗透压等环境状态一致，具有维持渗透压、控制酸碱平衡、供给细胞生存代谢所必需的能量和无机盐成分等作用，可满足体外实验中细胞生存并维持一定代谢的基本需要。

Leagene 乐氏液也属于平衡盐溶液的一种，主要由氯化钠、磷酸盐、氯化钙、葡萄糖等组成，不含HEPES 。

用于哺乳动物离体实验，肌体灌流、清洗组织，并维持离体组织的正常生理功能。

组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、 根据实验具体要求，保存或清洗离体组织。

注意事项：
1、 由于乐氏液含钙离子，容易产生沉淀。

如果产生少许沉淀，可以加热溶解或过滤后使用，产生大量沉淀应弃用。

2、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期： 6个月有效。

相关：
编号 名称 CZ0048 Storage 乐氏液 500ml 4℃ 使用说明书 1份 编号 名称 CC0005 磷酸缓冲盐溶液(1×PBS,无钙镁) CC0022 D-Hanks 平衡盐溶液(1×,含酚红) CC0032
Hanks 平衡盐溶液(1×HBSS,含酚红) CZ0047
任氏液 CZ0063
改良台氏液 DH0006
苏木素伊红(HE)染色液 R00228 Tris-HCl 缓冲液(1mol/L,pH8.0)。

D-Hanks溶液简介：D-hanks液是一种平衡盐溶液，是无钙镁离子的Hanks液。

主要用于洗涤细胞和组织的，也是合成培养基的基础液。

如果含有钙镁离子的话，当用消化液消化细胞时钙镁离子会破坏消化液的活力，影响消化作用.配方：Hank\'s配方:NaCl 8.01;KCl 0.4;CaCl2 0.14; NaHCO3 0.35;KH2PO 4 0.06;Glucose 0.34(g/l); 而D-Hank`s 则不含有Ca2+、Mg2+，D-Hanks液则是无钙镁离子的Hanks液。

BSS与细胞生长状态下的pH值、渗透压及无菌状态一致，且配方简单，是组织培养基本用液，常用于配制培养基及其他用液，或洗细胞等，细胞在BSS中可生存几个小时。

胰蛋白酶(胰酸)溶液是一种常用的细胞消化液，原代培养时用于处理组织块，使细胞分离下来。

传代时用胰蛋白酶使培养细胞离开所贴附的培养瓶表面，并分散成单个细胞。

胰蛋白酶主要采自牛或猪的胰脏，呈白色粉末状，易潮解，应在低温干燥处保存。

胰酶的活力常用一份胰酶解离酪蛋白的份数表示，常用胰酶活力为1：125或1：250。

本实验室一般用1：250(GRC公司生产)。

胰蛋白酶对细胞的分离效果与细胞的类型、特性和瓶壁表面特性有关。

一般来说浓度大、温度高(勿高于37℃)、作用时间长，则对细胞分离能力大。

但超过一定程度会损伤细胞，导致细胞传代后不能贴壁或死亡。

胰酶在pH 8.0、37℃时消化能力最强。

溶液中的Ca2+、Mg2+和血清会降低胰酶活力，所以配制胰酶时须用无Ca2+、Mg2+的D-Hanks液。

当消化结束时，可加入少量血清或含血清的培养基以终止胰酶作用。

细胞传代使用的胰酶浓度是0．25％或0．2％。

用于原代细胞培养消化组织块则为0．1％或0．125％。

运输及保存：常温运输，4℃保存，有效期一年。

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DTT-PBS 溶液(10mmol/L)
简介：
平衡盐溶液(Balanced Salt Solution ，BSS)与细胞生长状态下的pH 值、渗透压等环境状态一致，具有维持渗透压、控制酸碱平衡、供给细胞生存代谢所必需的能量和无机盐成分等作用，可满足体外实验中细胞生存并维持一定的代谢的基本需要。

Leagene DTT-PBS 溶液(10mmol/L)是由PBS 和10mMDTT 组成，其中该PBS 由氯化钠、氯化钾、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾组成，不含Ca 2+、Mg 2+，经过高压灭菌。

该试剂为1×工作液，常用于细胞RNA 原位杂交。

组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、 无需配制，直接使用。

注意事项：
1、 注意避免RNase 污染。

2、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期： 6个月有效。

相关：
编号 名称 NH0024 Storage DTT-PBS 溶液(10mmol/L) 100ml RT 使用说明书 1份
编号 名称 CC0022 D-Hanks 平衡盐溶液(1×,含酚红) CS0001 ACK 红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer) CZ0061
台氏液(Tyrode's solution) DA0057
甲苯胺蓝染色液(1%,硼酸盐法) DH0005
Mayer 苏木素染色液 PS0009
Western 及IP 细胞裂解液 TC1243 甘油三脂(TG)检测试剂盒(GPO-PAP 单试剂比色法)。

人皮肤成纤维细胞库的构建试剂: 胶原酶(Sigma)，优质胎牛血清(Gibco)，胰蛋白酶(Sigma)，中性蛋白酶(Sigma)，DMEM培养基(Sigma)，二甲基亚砜(Merck)。

配液 :成纤维细胞培养基配制:DMEM10g，NaHCO3 3．7g，HEPES 2．4g，优质胎牛血清100ml，青霉素100 000U，链霉素100 000U，超纯水加至1 000ml，用1N NaOH 调pH值至7-2～7．4，0．22pan孑L滤膜过滤除菌，9Om】／瓶分装，一2O℃贮存备用。

D—Hanks 平衡盐液：NaC1 8．0g，KC1 0．4g，Na2HPO4·12H：0 134．4mg，KH~PO4 0．06g，NaHCO3 0．35g，酚红O．O2g，青霉素100000U，链霉素100000U，超纯水加至1 o0Ornl，用1N NaOH调pH值至7．2-7A，0．22tun孔滤膜过滤除菌，90ml／瓶分装，一2O℃贮存备用。

方法:乙醇棉球将标本用力擦拭3遍；标本移至培养皿中，用D—Hanks平衡盐液反复用力彻底冲洗标本5遍，直至标本发白，轻度发胀；在培养皿中修剪皮下筋膜组织及多余的皮下脂肪，将标本剪成0．3cmx2．0em大小的皮条，置于培养皿中，加0．25％胰蛋白酶浸没组织，4℃冰箱中消化14~16h，以用眼科镊能轻轻揭下表皮为度；消化后的标本置于超净工作台上。

吸出胰蛋白酶，用DMEM漂洗2遍，中止胰蛋白酶消化作用；用眼科镊轻轻揭下表皮，置于另一培养皿中(用于培养角质形成细胞)，真皮置于培养皿中，用眼科剪将真皮成分剪成糊状(组织大小约为0．1cmx0．1cmx0．1cm)，加入0．2％胶原酶浸没组织，37℃孵箱中消化1~4h，以将组织基本上消化散开，看不到组织块为度；加D-Hanks平衡盐液1 500#min离心5min，5遍，以洗去胶原酶，沉淀即为成纤维细胞，弃上清，加DMEM制成细胞混悬液，接种至50ml培养瓶中，置37℃、5％CO：、湿度95％的CO 孵箱中培养131。

Hanks平衡盐溶液(1×HBSS,无酚红)产品简介：平衡盐溶液(Balanced Salt Solution，BSS)与细胞生长状态下的pH值、渗透压等环境状态一致，具有维持渗透压、控制酸碱平衡、供给细胞生存代谢所必需的能量和无机盐成分等作用，可满足体外实验中，细胞生存并维持一定的代谢的基本需要。

平衡盐溶液(BSS)主要由无机离子组成，有时含有碳酸氢钠、葡萄糖、酚红等，如果有必要还可以加入HEPES，加入少量的HEPES后，可以减少氯化钠的加入量，以维持渗透压的平衡。

平衡盐溶液可以作为完全培养基的基液，亦可以用于稀释浓缩的氨基酸、维生素溶液以配制完全培养基。

BBS配方常有改动，如Hank’s BBS由不含钙镁或酚红的，也有含钙镁含酚红的等等, Dulbecco’s PBS由不含钙镁或含钙镁的等。

HBSS、EBSS、PBS等都是与较弱的磷酸盐缓冲液相关的盐溶液。

常见的平衡盐溶液有Eargle液，Hanks’液、低钙镁和无钙、镁平衡盐溶液及磷酸盐缓冲液(PBS)等。

Hanks平衡盐溶液是最常用的磷酸盐缓冲溶液之一，又称Hanks' Balanced Salt Solution、Hanks’BSS, 或HBSS, 主要由氯化钠、氯化钾、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、碳酸氢钠、葡萄糖等组成，含钙离子和镁离子，pH值一般为7.2～7.4。

Leagene Hanks平衡盐溶液(1×,无酚红)，含钙离子和镁离子，无酚红，用重蒸超纯水配制，pH值7.4，经严格过滤除菌处理，内毒素含量低，可用于胰蛋白酶和EDTA细胞消化液等各种无或低钙镁细胞培养用液的配制，组织和细胞的漂洗等，直接使用。

主要成分：主要由KCl、KH2PO4、NaCl、NaHCO3、Na2HPO4、葡萄糖、Mg2+、Ca2+等组成，不含酚红。

操作步骤（仅供参考）：1、无需配制，直接使用。

注意事项：1、在进行细胞培养过程中细胞的洗涤时，应注意无菌操作，避免被微生物污染。