外周血细胞形态学检验及技巧
卫生部北京医院血液科郑天林
卫生部临床检验中心彭明婷谷小林陆红
一．血液学及血细胞形态学临床应用：
●是临床血液病诊断与治疗及临床医学检验学的基础工作。
●血细胞形态学适用于临床血液病诊断快速简捷的要求。
●近年来由于血细胞学及超微结构、免疫学、细胞遗传学、融合基因、造血干细胞及其细胞因子、骨髓造血微环境、基质细胞、树突状细胞、淋巴系细胞发生及其疾病表现，细胞增殖动力学与细胞凋亡以及骨髓组织病理学应用，推动了血液的临床与实验室的新知识迅猛发展。
●当前血液病不能单凭临床与形态学作出诊断，必须以临床和血细胞形态学为基础，将免疫学、细胞遗传学及分子生物学新知识、新技术应用到血液学中，构成现代临床血液学与分子生物学诊断技术，弥补形态学的经验性与主观性带来负面缺陷，才能提高血液病的诊断与治疗水平。
●进入90 年代以来，国内外采用多学科联合技术综合诊断技术与方案：
○FAB-AL （1976 ）、NCL （美国国家癌症研究所）对FAB-AL 分型的补充（1995 ）、AL-MIC 分（类）型，MIC 及MICM 分型（1985-1990 ）；
○FAB-CL 分型（1989 ）、中国CL 分型（1997 ）；
○FAB-MDS 分型（1982 ）、MIC 协作组对FAB-MDS 分型提出补充建议（1987 ）；
○WHO 对造血系统及髓系恶性疾病和淋巴系恶性肿瘤WHO 分类（2000 ）；
●血细胞形态学诊断技术正在进入显微图象软件时期：
○创造出许多多功能软件，如血细胞形态学、细胞化学染色、血液病诊断与鉴别诊断、CL 诊断与治疗及教学系统多媒体软件等。
○将显微镜与微机相连，应用储存、分类、检索软件，编辑、打印诊断报告，并可附多幅细胞图象。
二．血细胞形态学基本概念
血细胞形态学作为临床血液病基础诊断：
●观察血细胞形态和数量及其比例的变化来研究造血器官的结构和功能是血液学的重要组成部分，是诊断造血系统疾病最基本、最简便实用的检查方法，被临床普遍应用。
●正常人的血液及造血器官中，各种血细胞的数量有一定的正常范围，不同血细胞及细胞发育的不同阶段有一定形态结构特点。
●在造血系统疾病中，如果造血功能发生紊乱，就会从血细胞形态学的量变和质变中反映出来。
●血细胞形态学检查应包括外周血和骨髓两部分组成，必须平行进行检查。因为，外周血的血细胞改变往往反映骨髓病变的信息，才有利于诊断。
三．血细胞染色
（一）细胞染色机制：染色是将细胞经染色剂的物理及化学作用，使其清楚显示细胞各个组成部分，有利辨识细胞形态。
染色可分二个步骤：
1 ．染料受相应物质吸附而附着于物质表面；
2 ．固着作用，即染色粒子进入细胞内起化学反应（染料透过细胞膜的学说很多，尚无定论），与相应的物质形成溶解度很低的盐固着于细胞内而显色。染色剂皆有选择作用，其染色不是将细胞全部一齐着色，而只是将其中一部分染色，多余的被冲洗掉。目前多以吸附学说（电力吸附、机械吸附、化学吸附）来解释。
●一般染色方法由两种染色剂（酸性、碱性）组成，通常细胞核及浆碱性粒体为碱性，细胞浆为酸性。酸性染料可和带正电荷的（碱性）物质结合，这种物质称嗜酸性物质，对酸性染料具有亲和力，因此嗜酸性粒细胞之颗粒本身为碱性物质；碱性染料可和带负电荷的（酸性）物质相结合，这种物质称嗜碱性物质，对碱性染色粒具有亲和力，因此嗜碱性粒细胞之颗粒本身为酸性物质。另一种蛋白质在pH6.4 呈等电状态，本身所含的正/ 负电荷相等，因此，既能和酸性染料又能和碱性染料结合，这种物质称中性物质，如中性粒细胞之颗粒。
●一般用pH6.4 PBS 来稀释染液，使每次染色都在同一pH 中进行，让细胞在恒定条件下着色，使染色效果趋于一致。
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染液过碱时，蛋白质带有负电荷，对次甲蓝有色部分的正电荷吸附力强，因此染成的细胞一般着色较蓝，说明pH 不适合。
●染色与固定亦有极大关系，因细胞经固定后，其蛋白质的电力吸附（电附）可能有变化，有些固定液能将细胞某部分的电附加强，使其染色更为容易。因此，这种固定剂不仅有固定作用，也有媒染作用（Mordunt ），染色极为容易。因此，电附是染色过程中最重要的作用。机械吸附在染色过程中也参与作用，如用苏木液和伊红染色，细胞核不是纯蓝色，蓝色中略有红色，胞浆也不能尽为红色，红色中略有蓝色或两者皆带些紫色。这是因为伊红与胞核虽无电附仍有机械吸附，故也能染上少量红色，苏木液与胞浆虽无电附但也有机械吸附，因而胞浆略显蓝色。化学吸附（作用）在染色中应用，最早应用于金属染色剂（氯化金、硝酸银等）的金属与细胞内物质起化学作用，使金属在细胞内变成沉淀物或死亡物，显示细胞结构或物质。近年来此原理用于细胞酶化学染色。
●血细胞的染色多采用瑞氏染色和姬姆萨染色两种，但作者取其两种染色的优点，采用瑞氏和姬姆萨混合染色法，比单用一种染色法更佳。但近年来也出现一些快速和改良染色方法及染色液商品化，对血细胞形态染色不一定适用。
（二）瑞氏（Wright ' s staim ；美蓝－伊红Ｙ）染色：
1 ．瑞氏染料是由碱性染料美蓝（Methvlem blue ）和酸性染料黄色伊红（Eostm Y ）合称伊红美蓝染料即瑞氏（美蓝－伊红Ｙ）染料。
伊红钠盐的有色部分为阴离子，无色部分为阳离子，其有色部分为酸性，故称伊红为酸性染料。美蓝通常为氯盐是碱性的，美蓝的中间产物结晶为三氯化镁复盐，其有色部分为阳离子，无色部分为阴离子，恰与伊红钠盐相反。
2 ．用甲醇作瑞氏染料溶剂，即成瑞氏染液。甲醇是瑞氏染料良好溶剂，有两种作用：
（1 ）甲醇使瑞氏染料中美蓝（M ）与伊红（ E ）在溶液中离解，可使细胞成分选择性吸附其中的有色物质而着色。
甲醇
ME （瑞氏染料）————→M + + E -
在配制的瑞氏染液中美蓝如放置过久即可氧化而含有天青，美蓝天青与伊红化合物能使核染成紫红色，但不能使胞浆染为蓝色，多余美蓝就可以使胞浆染成蓝色，染色主要是化学作用，是离子彼此结合的反应。
（2 ）甲醇具有强大的脱水力，可将细胞固定在一定形态及增加细胞结构的表面积，提高细胞对染料吸收作用，同时由于甲醇吸附染色液中的水，使染色液升温，加速染色反应。
3. 瑞氏染液配制：
(1) 瑞氏染液配制：
瑞氏染料830gm 或1g
甲醇（AR ）500ml 或600ml
先称干燥（事先放入温箱干燥过夜）瑞氏染料放置乳钵内，用乳棒轻轻敲碎染料成粉末，再行研磨至听不到研芝麻声即呈细粉末，加少许甘油或甲醇溶解研磨，使染料在乳缸内显“一面镜”光泽，而无染料粉粒沉着，再加较多量甲醇研磨呈一面镜光亮，静置片刻，将上层液体倒入一清洁储存瓶内（最好用甲醇空瓶），再加甲醇研磨，重复数次，直至乳钵内染料及甲醇用完为止，摇匀，密封瓶口，存室温暗处，储存愈久，则染料溶解、分解就越好，一般储存3 个月以上为佳。
(2) 缓冲液：
1) 缓冲液作用：染色对氢离子浓度是十分敏感的，据观察pH 值的改变，可使蛋白质与染料形成的化合物重新离解。缓冲液须保持一定的pH 使染色稳定，PBS 的pH 一般在6.4~6.8 ，偏碱性染料可与缓冲液中酸基起中和作用，偏酸性染料则与缓冲液中的碱基起中和作用，使pH 恒定。
2) 缓冲液配制（pH6.4~6.8 ，弱酸性）：
配方 1 ：配方2 ：
1% KH 2 PO 4 30ml M/15 KH 2 PO 4 73.5 ml
1% Na 2 HPO 4 20ml M/15 Na 2 HPO 4 26.5ml
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H 2 O( 新鲜) 加至1000ml
置室温黑暗处，瓶口密封，防止霉菌污染，如有污染则应报废。
（四）姬姆萨（Giemsa ' s stain ；天青- 伊红）染色
1．姬姆萨染料是天青（蓝） 2 号伊红AzurII Eqsin) 和天青（蓝）2 号合成的。
2．姬姆萨红染料（Giemsa, 天青- 伊红）染液配制：
姬姆萨红染料（粉末）0.5g 或7.5g
甲醇（AR ）33ml 或500ml
甘油（AR ）33ml 或500ml
先将姬姆萨染料放入乳钵中，逐渐倒甘油研磨溶于甘油中，置于56 ℃水温箱内，90 ～120 分钟，然后加入甲醇，摇匀后放置数天，过滤后或不过滤即可使用。此染液放置室温阴暗处，时间越长越好。
使用染液9 临时配置）：姬姆萨染液1ml ，加DDH 2 O10ml 混匀。即可使用。
3．染色步骤：
（1 ）先用甲醇固定2 ～3 分钟。
（2 ）将血或骨髓涂片放置姬姆萨使用液15 ～30 分钟。
（3 ）涂片用自来水冲洗，在室温中干燥待查。
（五）瑞氏及姬姆萨染色液的鉴定：刚配好或放置一个月以上的染液可进行下列鉴定：
1 ．取1 滴染液于乳白玻板上，自行迅速扩散开，其颜色变紫红色，且有伪足形成。
2 ．取1 滴染液加1 滴缓冲液，染液由深蓝色立即变为紫红色。
3 ．取血片或骨髓片进行试染检查，观察染色后各类细胞的胞核、胞浆及颗粒着色情况，pH 是否合适及染色合适时间。如有上述变化，表明染液合格，可供使用。
（六）瑞氏染色(Wright ' s)- 姬姆萨（Giemsa ' s ）混合染色：
瑞氏染色的染料配方浓度对细胞核着色程度适中, 细胞核结构和色泽清晰艳丽, 对核结构的识别较佳, 但对胞浆着色偏酸, 色泽偏红, 对细胞浆内颗粒特别是嗜天青颗粒及嗜中性颗粒着色较差, 而姬姆萨染色对胞浆着色能较好的显示胞浆的嗜碱性程度, 特别对嗜天青、嗜酸性、嗜碱性颗粒着色较清晰, 色泽纯正, 而对胞核着色偏深, 核结构显示较差, 故采用以瑞氏染液为主姬姆萨染液为辅的混合染色。
染色步骤:
1. 先用瑞氏染液将涂膜面充分覆盖；
2. 稍等片刻再加姬姆萨染液2-3 滴加减( 根据涂片上细胞多少及增升程度酌情而定) ；
3. 稍等1-2 分钟后, 再加磷酸盐缓冲液, 加时应缓慢地一滴一滴加在涂片膜上, 直至膜面上染色液形成表面张力而终止染色液加入；
4. 染色30-40 分钟；
5. 分色：用自来水缓缓冲洗至少 3 分钟以上, 待干，勿用滤纸吸干, 以免滤纸纤维
污染涂片。
四．血液学及血细胞形态学内容及自身特点：
（一）血常规检查（Hb 、RBC 、WBC 、Plt 、血细胞比积、RBC-MCV 、MCH 、MCHC 及血小板容积曲线），用自动化仪器提高工作效率，为使结果准确可靠，必须建立监测方法，搞好质控，此属数值质控。我国已较普遍开展全国、省、市（地区）质控。但普遍存在应付质控质量的问题，并未能切实解决自身质控问题。
（二）白细胞分类：白细胞分类的自动化已普遍应用，只能为患者普查与筛选之用。遇有问题应用显微镜观察，弥补自动化仪器缺陷。一般医院显微镜档次偏低，分辨率低，正确使用和维修欠缺，因而要更好地发挥光镜的观察效应。
（三）骨髓、外周血细胞形态学及分类，是血液病及临床各科患者基本检查及诊断依据。反映继发性疾病的血液学表现，了解机体状况、感染（细菌、病毒、寄生虫等）等改变。
（四）血细胞涂片自身的特点：
1 ．涂片不易均匀：由于血液是混悬液，其中白细胞、有核细胞、RBC 、血小板的形态大小、比重及生物活性和血浆成分等的不同和制片技术差异、质量分布不均匀性差异颇大。
2 ．细胞分布和检查的非随机性：
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(1) 细胞分类标准与观念不一；
(2) 采样和计数100~200 个白细胞的局限性；
(3) 细胞分布的生理变动；
3. 与疾病的相关性；
4. 室内、室间分类不一致性，开展室间质控也是促进形态学提高重要手段。
（五）血细胞形态学（外周血及骨髓）质控：自1983 年以来，澳大利亚皇家病理学质控中心和英国皇家进修学院WHO 质控中心及最近美国洛杉矶质控中心，国内：全国及省地市也普遍开展，由质控标本涂片发展图片指定细胞识别。
五．血细胞形态学采样、制片染色与检查要求：
( 一) 采样、制片及染色，三道工序至关重要，是细胞形态学检查的成败关键。要得到合格的涂片标本，做好上述工序，应注意以下要求：
1. 采样、制片：
(1) 玻片要求：国内1.0mm ×26mm ×76mm ±0.5 ，美国NCCLS 规定 1.0mm ×25mm ×75mm ±0.5 ，要严格清洁，接近中性.
(2) 推片：选择优质推片，推片两端边缘整齐、平滑。也可选用有机玻璃，其大小、厚度与坡片相同，两端之边缘应加工光滑，以利推片用。
(3) 采外周血（样），擦去第一滴血，迅速采血，量适中，如绿豆粒大小，具有一定推片技术，推片倾斜45 °±，推成血膜长度25mm ～35mm ，宽度18 ～20mm ，血膜四周留有空隙区，血膜终尾离玻片终端至少10mm ，血膜均匀，薄如蝉翼，尾端形如弧状，迅速扇（摇）干，血膜具有头、体、尾不同厚薄区域。此外，涂片时，还要考虑患者的血液状态，如贫血程度、血液粘稠度、WBC 或有核细胞多少等因素，调整推片技巧。
(4) 如若采用静脉血推片，用K 3 -EDTA 或肝素抗凝，推制血片应尽早进行（最迟在1 ～2 小时内）。
（二）染色：是识别细胞形态的重要标记工序：
常规瑞氏- 姬姆萨染色要点：
1 ．要得到满意、漂亮的血细胞染色标本，新鲜涂片迅速染色是很重要的。
2 ．染色液配制要合格；
3 ．涂片切勿用甲醛固定，否则不着色；
4 ．染色的好坏与染色液、缓冲液的质量及比例、加液间隔时间、保持玻片染色液面的张力等染色技巧均有重大关系。染液要覆盖涂膜面，再加缓冲液（1:2 ），其量要充足、混均，染色时间要30 分钟以上。
5 ．细胞着色的观察：
(1) 当染液与缓冲液混合后，甲醛吸水液温升高，发生剧烈反应，直至液膜表面的“染色粒”呈均匀分布，随染色时间的推延，“染色粒”由“染色小粒”聚集成“染色大粒”，逐渐由外缘向内缘推进至染色面中心（此过程需要20-30 分钟以上），则表明细胞着色已完成，
(2) 再用自来水缓流冲洗，使染色液沉渣及染色粒浮去，使其充分起分色作用，去除细胞染色中浮色，显示出胞核结构及细胞清晰形态，待干，镜检。
六．外周血细胞形态检查技巧：
外周血中三种血细胞数与形态学表现是：
●反映骨髓造血状态及血液病和其他疾病的厨窗；
●是检查与观察疾病的重要指标；
（一）WBC 形态学诊断技巧：
1 ．WBC 数值准确性估计：
（ 1 ）目前自动化计数仪时有出现结果的偏差，低倍镜观察血涂片可以粗略估计WBC 数值及分布。低倍视野WBC 数：正常约3~5 个，增多 6 个以上，减低3 个以下。
（ 2 ）WBC 如推至片尾，分布不均，估计将有一定难度。较大的细胞如单核、异淋及中性粒细胞及不成熟细胞多在片尾，体部则多为较小的淋巴细胞，使分类造成偏差，所以分类部位在适当调整。
2 ．白细胞计数值限度分级：
（1 ）WBC 正常范围：4.0~10.0 ×10 9 /L;
（2 ）WBC 正常限度以下:
●轻度减少(<4.0 ～3.0 ×10 9 /L),
●中度减少(<3.0 ～2.0 ×10 9 /L),
●极度减少(<2.0 ×10 9 /L);
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（3 ）WBC 正常高限度以上:
●分轻度增多(>10.0 ～20.0 ×10 9 /L),
●中度增多(>20.0 ～40.0 ×10 9 /L),
●明显增多(>40.0 ～80.0 ×10 9 /L)
●极度增多(>80.0 ×10 9 /L) 。
以此与所测知WBC 计数值作粗略对比，推断WBC 计数值的准确性。
（4 ）如在血片分类计数过程中发现较多有核红细胞时，
●计出血片中有核红所占% 率，即以校正原WBC 计数值减去有核红所占比例，求出外周血中WBC 总数值，
●另作WBC 分类计100 个过程中遇到多少有核红细胞，即有核红细胞个/100 个WBC ，
●或作血片有核细胞分类计数（包括有核红细胞），计出有核红细胞所占% 率。
3 ．WBC 分类正常范围及其病理性改变：
（1 ）WBC 分类正常范围：
●新生儿出生后最初24 小时白细胞数高，主要为中性粒细胞, 至第3 ～ 4 周，中性粒细胞与淋巴细胞比例倒转，直至4 岁淋巴细胞比例仍多。表 1
●白细胞分类正常范围由于民族、地区、年龄、性别及其生理性变化的影响，以及检查本身的技术差异，即使一人同次取材不同涂片、一张涂片多次分类计数结果也不可能完全一致，但不可差异太大。
●分类中占大比例的中性粒细胞或淋巴细胞呈正态分布，占小比例的嗜酸/ 嗜碱性粒细胞及单核细胞则为Poisson 分布。
（2 ）病理性形态学改变：
①中性粒细胞：
●中性粒细胞分叶分化程度，被认为从干细胞至粒细胞生成是否正常及与粒细胞年龄相关；如核分叶不良，Pelger-huet 现象；核仅一叶或二叶，其百分率增加时谓之“左移”，反之，多数细胞四叶以上谓之右移，一般认为正常中性粒细胞胞核分叶情况：
4 叶者为1
5 ～25% 3 叶者为40 ～50%
2 叶者为20 ～40% 1 叶者为< 5%
血象中如有多个5 叶以上者提示有巨幼细胞性贫血的可能。
右移现象
—多见于巨幼细胞性贫血、肝脏疾患，并可以5 叶与4 叶所占比例计算，得出简单实
用的分叶指数：
分叶指数=5 叶/4 叶×100% 正常核分叶指数：0 ～17%
—还见于缺铁性贫血、类风湿性关节炎、遗传性高分叶症（显性遗传）及某些败血症（以左移多见）。
左移—见于感染、败血症、出血、小儿慢性中性粒细胞减少症等。
●中性粒细胞毒性颗粒及空泡改变：中性粒细胞由于受到外来刺激（包括感染及应激反应）引起颗粒变性，粗大着色深染及浆内空泡等病理性改变。上述改变及白细胞数增多和出现幼稚及原始细胞则为类白血病反应。
●慢性粒细胞白血病（CML ）的中性成熟粒细胞一般胞浆颗粒较正常稀少，但无空泡及毒性颗粒，而慢性中性粒细胞白血病（CNL ）的中性成熟粒细胞则与类白血病反应形态相似。
●假性嗜酸性颗粒—在某些干细胞疾病如MDS 、粒细胞缺乏症、肾性贫血某些患者中性粒细胞的颗粒增多，形态异常，类似嗜酸性样颗粒的出现。
●遗传性白细胞异常疾病：是先天性白细胞异常疾病，临床上虽罕见，但为了提高辨别的能力，应有所认识。
Pelger-Huer 白细胞异常：属于显性遗传，其白细胞形态特点：核分叶不良，不分叶，核呈花生形、亚铃形等形状，无核丝形成，胞浆正常，此外，还有假性（即继发性）Pelger-huet 白细胞异常应加以鉴别，后者常见于急性肠炎、伤寒、疟疾、流感，无家族史，但在原发病得到治疗后白细胞形态恢复正常。
Alder-Reilly 颗粒异常：常染色体隐性遗传性多糖代谢障碍性疾病，常伴有软骨畸形、肝、脾肿大等，中性、嗜酸性及嗜碱性粒细胞含有多量嗜天青颗粒遮盖整个细胞，单核细胞亦有类似改变。
May-Hegglin 异常：为常染色体显性遗传疾病，在中性及嗜酸性粒细胞浆内含有Dunle 小体，常伴有巨血小板及血小板减少、紫癜，由于细胞的游走功能差，故病人常出现感染症状。继发性也可见于猩红热、球菌性感染、烧伤早期等某些病例。
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②嗜酸性粒细胞：此种细胞在人体每日规律性变动，晨至午下降，午后始升，午夜至次晨3 时达高峰数值，哮喘患者及夜间工作者其规律与正常相反，晨9 至12 时达高峰。
临床上嗜酸性粒细胞增多见于：
过敏性疾病，如血管神经性水肿、哮喘、食物及药物过敏、血清病、荨麻疹、枯燥热等。
寄生虫病：常见于血丝虫、钩虫、包囊虫、肺吸虫、蛔虫、吕弗氏（Lofllers ）综合征、蛲虫、旋毛虫、疟疾（偶见）及血吸虫等。
皮肤病：如湿疹、剥脱性皮炎、天疱疮、牛皮癣、疟疾、疥、感染、猩红热早期等。
血液病：高嗜酸性粒细胞综合症、CML 、嗜酸性粒细胞白血病、何杰金氏病（占10% 病例）、嗜酸性肉芽肿、家族性嗜酸性细胞增多症、热带嗜酸性细胞增多症、甲状腺癌及播散性结缔组织病。
与化学药物有关：镍（致皮肤炎）、青霉素、PAS 、苯、呋喃妥因、磺胺等。
③嗜碱性粒细胞：在正常人血液中为数甚少，该细胞嗜碱性颗粒含大量组织胺及肝素类物质，临床上主要因骨髓增殖性疾病常伴嗜碱性粒细胞增多如CML 、CML 嗜碱变、嗜碱性粒细胞白血病、M 4EO 、真性红细胞增多症、骨髓纤维化等。此外，还可见于感染恢复期、甲状腺功能低下、何杰金病、溶血性贫血、肝硬化、结核病、流感、肿瘤以及月经初潮等.
④淋巴细胞：淋巴细胞为免疫反应细胞，来源于骨髓淋巴干细胞，经胸腺素作用分化为T 淋巴细胞，参与细胞免疫，另一类经骨髓而成为 B 淋巴细胞，产生免疫球蛋白，可作为体液免疫。
●外周血内淋巴细胞可分为大、中、小淋巴细胞，其形态一般不难辩认，在临床由于各种因素刺激出现异常淋巴细胞，常出现于病毒感染性疾病，如传染性单核细胞增多症、传染性淋巴细胞增多症，传染性肝炎、水痘、风疹、流感、结核病、药物过敏、慢性感染、放射病、应激状态及免疫异常等。其胞体增大，比正常淋巴大一倍以上，核染色质疏松、增多，胞浆丰富或不规则、有很强嗜碱性呈深兰色、不均匀不透明或有泡沫或深兰色、周边着色加深，可见嗜天青红颗粒或空泡。按Doney 氏类型分三型：
Ⅰ型：最多见，胞体增大，核圆、卵圆或肾形，染色质疏松、粗糙，胞浆丰富、深染, 有泡沫或空泡，偶有嗜天青颗粒，核/ 浆约1:1 。
Ⅱ型：胞体较大，主要胞浆明显增多，且不规整（体如单核细胞），染色质较致密，不如Ⅰ型增多聚集，胞浆淡兰染，少数有嗜天青颗粒或少许空泡，核/ 浆为1:2 。
Ⅲ型：少见，大致与Ⅰ型相似。可有核仁。
此外,Tuck 细胞即刺激细胞也是一种异常淋巴细胞, 其意义与上述异常淋巴细胞相同。
●外周血中恶性淋巴细胞见于下列疾病：原幼淋巴细胞—见于ALL 或淋巴瘤。骨髓瘤细胞—多发性骨髓瘤、淋- 浆细胞—华氏巨球蛋白血症、毛细胞—毛细胞白血病。
幼淋细胞（Prolympho Cytic Cell ；PLC ）属于幼淋细胞白血病（Prolymph Cytic Lenkemia ；PLL ）的病理性细胞，介于幼淋与成熟淋巴细胞之间的特殊幼淋细胞，具有成熟的核染色质与核仁并存的发育失衡的异相为最突出的特征。
⑤单核细胞：是血中吞噬性细胞，参与免疫作用，在新生儿出生后一周内，在外周血中单核细胞可高至4.0 ×10 9 /L ，平时由于采血部位及时间不同也有差异。临床上，单核细胞增多见于以下情况：
●常见于细菌感染、结核、细菌性心内膜炎、布氏杆菌病、菌痢或感染性疾病恢复期。
●寄生虫病：疟疾、锥虫病、黑热病、阿米巴肝脓肿等。
●恶性疾病：慢性单核细胞白血病、慢性粒- 单核细胞白血病（CMML ）、MDS 及恶性肿瘤。
（二）红细胞形态学诊断技巧：
1 ．RBC 的Hb 、网织RBC 、MCV 、MCH 、MCHC 及RBC 体积分布宽度（RDW ）是判定贫血类型重要依据：
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(1)Hb/RBC 比值：正常人：Hb/RBC 比值为3gHb/L=100 万RBC/ μL 即3:1 。AA 、溶血性贫血及继发性贫血等属此类。>3:1 者即为大细胞高色素性贫血,<3:1 者为小细胞低色素性贫血.
(2) 网织RBC 是新生的RBC ，可反映造血机能的好坏。正常情况下为0.5~1.0%, 代偿性反应者多>5% 。其网织RBC 内嗜碱性网织增多，代偿性功能减低者，低于正常水平。多见于AA ，但有不典型AA （1/4 ）患者可有网织RBC 增高。网织RBC 计数1000 个RBC 中有多少网织RBC ，以其% 数表示，是一个比值数，不是绝对值。精确应计算绝对值或用流式细胞仪计数更为确切。
(3)MCV 、MCH 、MCHC 反映RBC 病理变化，可将贫血分为大细胞性贫血、正常细胞性贫血、小细胞低色素性贫血及单纯小细胞性贫血（即小细胞性正常色素性贫血），其诊断标准及其病因见表3 ：
2 ．RBC 形态学在检验中易被忽视，观察RBC 形态, 一般以外周血涂片较为可靠。RBC 形态与排列（如重叠、缗钱状）与涂片技术、涂片部位及厚薄有很大关系。这
点在镜检时应予注意。即是合格涂片，RBC 形态依然与涂片部位及厚薄等多种因素有关：
—如取涂片中心区域，RBC 中心淡染，多>1/3 细胞面积大小;
—取自涂片薄处或尾部，RBC 形态误给人以“球形”，失去双凹盘形，中心淡染消失，所谓类球形改变；
—取厚片或制片干燥过慢，RBC 未摊开，收缩变形，甚至出现人工中心染色过淡等；
—取厚片RBC 则重叠堆积，呈假“缗钱状”，不便查清形态；
—玻片不清洁，油脂过多或骨髓脂肪过多，制片干燥不快，RBC 则会形成人工的中心淡染区或空白区。
3 ．RBC 形态及其临床意义：
●正常红细胞为直径7.2~ 7.6mm ，厚度2mm 圆盘状，两面凹陷，中央较薄，着色较浅，在涂片中形态基本一致。
●正常RBC 在体内能经受通过微血管的严重变形而不受损害。在高度粘稠血液中的RBC 变成椭圆形，红细胞膜围绕着所含Hb 旋转，像坦克的踏板（Tread ）。脾脏可筛选缺乏弹性红细胞、红细胞异常变形或丧失弹性红细胞，加强对这些红细胞的清除。
●在贫血或有关疾病时红细胞可出现异常，往往一张较满意的血片，观察红细胞形态，对贫血的性质确定和某些疾病的诊断有一定的帮助。
●贫血在红细胞形态中主要表现个体及群体大小、形状、血红蛋白浓度的差异。
（1 ）大小不等（Anisocytosis ）及形态异常（Poikilocytos|is ），由于骨髓红系代偿性增生旺盛，而产生大小不等的红细胞及形态多样化异常，常见有：
①红细胞显著大小不等及形态异常如梨形、铃形、少数卵圆形，常见于严重性贫血（包括继发性贫血）及溶血性贫血。
②红细胞个体小，大小不等，一般形态异常及中心染色过浅，见于缺铁贫、VitB6 缺乏及慢性失血性贫血等。
③红细胞个体小，大小不等，异形，中心染色过浅，出现靶形及小红细胞，多为地中海贫血及某些Hb 病。
④红细胞个体普遍增大，并呈大小不等，色素浓染，无中心浅染区，多为巨幼细胞性贫血。
（2 ）多嗜性红细胞（或网织红细胞）（Polychro matcphiliomacrocyte ，Reticalocyte ）为胞体较大的成熟红细胞，由于胞浆含有核糖核酸（Cytoplamia-RNA ），淡灰兰色，若经煌焦油兰染色即为网织红细胞。根据细胞嗜酸性物质多少，按Hielmyer 分类法：
0 型：胎幼红细胞浆内嗜碱性网状物质；
Ⅰ型：系卷丝状网状物质；
Ⅱ型：网眼状物质；
Ⅲ型：不完全网眼状物质；
Ⅳ型：整个网丝斑点残体。
（3 ）点彩红细胞（Basophilic Stipplins ）：晚幼红细胞胞浆及成熟红细胞中出现大小不等、分布不均的嗜碱性点彩物质。在溶血性贫血、铅中毒（因铅使核苷酸酶受抑制和嘧啶与核苷酸酶缺乏患者增多）。
作者：198585912005-5-27 19:51 回复此发言
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8 外周血细胞形态学检验及技巧
（ 4 ）豪周氏小体（Howell-Jolly Bodies ）：在晚幼红细胞浆内和成熟红细胞内含单个或多个紫红的包含物为核碎片或染色体残留物。此物具有DNA 物质，是严重溶血、MDS 、脾切除后等出现。
（ 5 ）卡玻氏环（Cabos Ring ）：在红细胞内具有淡紫红色的环形或8 字形环状物. 曾被认为是核的残余和一种豪周氏小体变种。但日前认为是人工造成的，是退变细胞中凝集和变性的蛋白质，也有认为含有组蛋白（Hisfone ）和铁（Feulgen ），相差镜下则看不见. 见于铅中毒、溶贫、白血病、恶性疟疾等。
4 ．特异性红细胞形态改变：
（ 1 ）刺（棘）状细胞或锯形细胞（Aca Ntbocyte ，Burr Cells ）：在血细胞表面呈不规则的、较多的刺状突出，呈锯齿状或刺状。加EDTA-Na 2 更显著。此细胞由膜质改变所致；见于吸收不良反应、肝病、脾切除后、PK 缺乏性贫血、先天性缺乏β- 脂蛋白血症。
（ 2 ）刺毛细胞（Echinocyte ）：整个细胞表面有棘突状突起，从皱绉圆盘形发展或皱缩球形，直至棘突消失，见于尿毒症、PK 缺乏症、输注低钾库血、胃癌、胃溃疡出血等.
（ 3 ）裂细胞（Schlzocyte ）：为大小不等、形态不规则、呈盔形、带刺、三角碎片. 多由于微血管堵塞、管腔狭小，红细胞可塑性降低，RBC 通过时被挤压或纤维切割所致 . 可见于微血管病性溶血、DIC 、血栓性血小板减少性紫癜、溶血性尿毒性综合症、严重烧伤、心瓣膜溶血、行军性Hb 尿。
（ 4 ）靶形红细胞（Codocyte ）（扁平红细胞—墨西哥帽形细胞）：此细胞比正常红细胞薄，细胞表面积比其容积量相对较大。靶点（Hb 的中心点）和周围Hb 环缺乏连接桥. 这种细胞对渗透脆性试验有较大抵抗性，能耐受比正常红细胞更多的水分渗入，使其成为球形乃至最后溶血之前则容积增大50% ，见于地中海性贫血、Hb-S-C 病、脾切除后及阻塞性肝病。因卵磷脂胆固醇酰基转移酶（LCA T ）减少或缺乏，使血清中胆固醇与卵
磷脂积聚, 影响了细胞膜的改变而致靶形细胞。
（5 ）泪滴红细胞（Pacryocyte ）：此细胞形如泪滴状、网球拍形、长形或豆点状. 见于骨髓纤维化。
（6 ）球形红细胞（Spherocyte ）：此细胞胞体比正常的较小，浓染的圆球形，平均厚度增大（厚径 3.2mm ）, 直径缩小( 6.3mm ) ，MCV 正常，中心淡染区消失，由于变形性差，故易发生溶血，正常人有<5% 的球形细胞。见于遗传性球形红细胞（>20% ）、获得性球形红细胞增多症（如ABO 血型不合引起新生儿溶血性贫血）。
（7 ）椭圆形红细胞（Elliplocyte ）：为卵圆形，如骆驼的红细胞，此为红细胞膜的缺陷。正常人<1.5% ，贫血时可稍多。见于恶性贫血和其他巨幼细胞性贫血、严重缺铁性贫血、地中海性贫血、重症贫血、严重感染、肿瘤、白血病及骨髓纤维化患者。在遗传性椭圆形红细胞增多症可>70% ，此病为显性遗传，男女均可，同等遗传，可能与Rh 因子有关. 未成熟的红细胞仍为圆形，而无此种改变。在出生后第3 个月始出现明显异常。约2% 受孕者有轻度溶血现象，Hb 多为正常（代偿性）或减低（失代偿性）。此种红细胞在37 ℃孵育48 小时可发生自溶，加葡萄糖和ATP 即可纠正。
（8 ）口形红细胞（Stomatocyte ）：此种红细胞中央为中空裂隙，形如口形或椭圆形淡染区，又因该细胞内水分减少，故又称为干细胞（Xerocyte ）。在37 ℃自溶加重，但加葡萄糖症状减轻，细胞内G6PD 和PK 活性升高，但还原型谷胱甘肽浓度很低，过度失K 和Na 时异常增加。小量口形红细胞增多见于：肝硬化、遗传性球形红细胞增多症、轻型地中海贫血、铅中毒、传染性单核细胞增多症、谷胱甘肽过氧化物酶缺乏，恶性肿瘤及酒精中毒等。明显增多见于有溶血性贫血的口形红细胞增多症。
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9 外周血细胞形态学检验及技巧
（9 ）镰形红细胞（Drepanocyte ）：由于Hb-S 的聚合作用，在缺氧情况下方致红细胞变成镰刀状、细长新月形、燕麦形等形状。此种细胞被脾脏阻止破坏产生血管外溶血。多见于黑人Hb-S 病，镰变试验是用还原剂偏重亚硫酸钠（具有夺氧作用）处理后，造成红细胞的镰变更明显。此为诊断Hb-S 方法之一。
（10 ）缗钱状排列：红细胞在有异常高分子蛋白环境中呈缗钱状排列，多见于多发性骨髓瘤、华氏巨球蛋白血症以及免疫球蛋白增多症。
5 ．外周血中出现有核（巨）红（幼粒）细胞意义：外周血中有核（巨）红细胞的出现提示红细胞成熟紊乱，是严重疾病的反应，见于：
（1 ）血片中有幼红、幼粒细胞及点彩红细胞，Howell-Jolly 小体出现，常见于：溶血性贫血、PNH 、自家免疫性贫血、新生儿溶血性贫血（Rh 、ABO 不和等）。婴儿假白血病性贫血、巨幼细胞性贫血、红细胞酶缺乏性贫血（PK 、G6PD ）、Hb 病、不稳定血红蛋白以及极度贫血等。
（2 ）急慢性白血病、红血病及红白血病、MDS 、骨髓纤维化以及其他一些骨髓增殖性疾病和真红、血小板增多症。
（3 ）晚期肿瘤反应及临床危象反应。
以上异常红细胞的临床意义，必须结合临床及其他检查综合分析。这些异常红细胞只能作为阳性发现的一部分或者起向导作用，决不能单凭红细胞异常的出现就武断做诊断，因许多情况如技术原因（即人为的）造成假相是常有的。
（三）外周血血小板及巨核细胞形态学诊断技巧：
1 ．血小板数: 形态及聚集性, 血涂片也是估计Plt 计数主要依据。根据RBC 正常值500 万/ul:Plt 正常值10 ～20 万/ul=RBC:Plt=50:1(2) 个，一个油镜视野RBC 数约RBC200 个：PLT4 ～8 个，计数10 ～20 个油镜视野Plt 数（分别计数正常和巨大异常Plt 数）平均每个油镜视野Plt 数如若4 个相当于10 万/ul ；8 个相当20 万/ul;
2 个相当5 万/ul;1 个相当2.5 万/ ul 。由于巨大和异常的PLT 自动化的仪器不能计数，造成误差。
2 ．血小板增多或减少或出现巨核细胞：见于原发性、特发性血小板增多症、继发性血小板增多症（肿瘤或感染引起如肾衰、肾脓肿、脾切除后、肺癌等）、血小板增多的MDS 、5q —综合症。血小板减少有ITP （原发性）或继发性血小板减少性紫癜及MDS- 血小板减少症及血小板无力症。骨髓增殖性疾病（RBC 增多症、骨髓纤维化、慢粒）。
七．外周血细胞形态学检查步骤及注意事项和检查报告书写内容：
在镜检前先复习患者病历资料及实验室检查结果，临床诊断、送检目的与要求，进行初步分析，考虑须探索问题，在观察形态学过程时要思索这些问题。
( 一) ：外周血涂片检查步骤：
1 ．肉眼观察：涂片面膜大小、厚薄是否适中，染色好坏。
2 ．低倍镜观察全貌：
（1 ）涂片及染色是否合适；
（2 ）了解白细胞数（可大体校对WBC 直接计数是否正确）；
（3 ）了解白细胞大致分布及其各阶段大致比例，特别要注意由于涂片过力，把WBC
及成熟粒细胞大多推于片尾部位，造成分类比值误差。片尾有无异常细胞？
（4 ）选择具有代表性的细胞镜检区域。
3 ．油镜观察：进行WBC 分类计数，观察细胞形态、比例、有无巨大或异常细胞。
（1 ）血涂片对WBC 总数准确性估计：从低倍及油镜中估计WBC 数及其分布。一般区分WBC 数几个等级（油镜视野中WBC 密度、分散无重叠）。参见WBC 形态诊断技巧节段。
（2 ）白细胞分类计数：血中主要两大比例的中性成熟粒细胞与淋巴细胞及其他小比例细胞是否属正常范围及形态有无异常。
（3 ）注意片尾端有无巨大或出现不成熟或异常细胞（如中晚幼粒、中晚幼红细胞、异常淋巴细胞、吞噬细胞、肿瘤细胞等）；
（4 ）红细胞形态（群体、个体）、排列（重叠、缗钱状）；
（5 ）血小板数量、形态及聚集性；
（6 ）异常细胞、寄生虫。
（二）外周血涂片报告内容：
1.WBC 数及主要成分（即分类比例）；
2. 分类细胞比例及形态是否正常；
3. 有无不成熟白细胞、有核红细胞及异常细胞情况；
4. 成熟红细胞形态（包括个体与群体、大小形态、异形）、色素状态（中心淡染、低色素、高色素、多嗜性RBC ）核残余物及排列等情况；
5. 血小板数量、形态、聚集性；
6. 异常细胞、寄生虫。
血液细胞形态学检查标准操作程序 一．目的：指导血液细胞形态学的检查。 二．该SOP变动程序：本操作程序的改变，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报下述人员批准：专业负责人、科主任。 三．具体内容 （一）原理：将血液制成细胞分布均匀的薄膜涂片，用瑞氏—吉姆萨复合染料染色后，在光学显微镜下油镜观察各类细胞的形态特征及数量变化，对血液系统及某些感染疾病有辅助诊断及疗效观察等意义。 （二）标本要求： 1.采血后推制厚薄适宜的血膜片，血膜应呈舌状，头、体、尾清晰可分。 2.推好的血膜应在空气中晃动，以促使其快干，以免细胞变形缩小。 （三）试剂准备：瑞氏—吉姆萨复合染液。 （四）仪器、器材要求：显微镜、洁净载玻片。 （五）操作具体步骤： 1.染色：平置玻片于染色架上，滴加染色液3～5滴，使其迅速盖满血膜约1min后，滴加 缓冲液5～10滴，轻轻摇动玻片或对准血片吹气，与染液充分混合，10～20min后用水冲去染液待干。 2.选择涂片细胞分布厚薄适宜、染色良好的区域在油镜下观察各类细胞的形态及数量变 化。 （六）结果判断 1.红细胞：正常形态呈双凹圆盘状、无核、平均直径7.2μｍ，染粉红色，外周血中无有核红细胞、异常形态红细胞量小于1％。 2.白细胞：正常外周血中白细胞分为中性杆状核粒细胞占1％～5％，中性分叶核粒细胞占50％～70％，嗜酸性粒细胞占0.5％～5％，嗜碱性粒细胞占0～1％，淋巴细胞占20%～40%，单核细胞占3%～8%，无幼稚细胞。 3.血小板：正常形态呈椭圆形及不规则形，无核、胞质中有嗜苯胺蓝颗粒，直径约2～4μｍ，多为2μｍ左右，呈单个或成堆分布。 （七）干扰因素 1.涂片要新鲜，涂片自然晾干后立即进行染色，如特殊情况下，一般不超过一周，否则，细胞蛋白质变性，使染色偏碱。 2.染色时间长短除与气温有关外，也与细胞增生情况、各批染液的性能有关，故要求将染色中的涂片在显微镜下观察，待颗粒清楚、核浆分明，着色满意后才终止染色，冲洗晾干待检。 3.染色过深得涂片可用瑞氏染液滴加于涂片上，马上冲洗；染色过浅可重染，先加缓冲液再加染色液，混合后复染到需要的深度。 （八）临床意义 （一）红细胞分布异常 1.红细胞分布异常：红细胞呈缗钱状分布，见于多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、高纤维蛋白原血症等，红细胞聚集成堆见于冷凝集素血症。 2.红细胞大小及染色异常 a.低色素性小红细胞增多：见于缺铁性贫血、海洋性贫血、骨髓增生异常综合症等。 b.正色素性或高色素性大红细胞增多，见于巨幼细胞性贫血、抗核酸代谢药物等影响。 3.异性红细胞 a.球形红细胞增多：见于遗传性球形红细胞增多症（常大于25%）、自身免疫性溶血性贫血等。
外周血细胞形态学检验及诊断技巧 主讲：卫生部北京医院 郑天林 录制：卫星卫生科技教育网 监制：卫生部科教司 一.概述 （一）血细胞形态学基本概念 （二）血细胞形态学检查方法 （三）血液学及血细胞形态学临床应用 （四）临床/形态学诊断与血液学检验及专业人员素质问题二．血细胞染色法 （一）细胞染色机理 （二）瑞氏染色 （三）姬姆萨染色 （四）瑞氏-姬姆萨染色液鉴定 （五）瑞氏-姬姆萨混合染色 三．形态学与血液检查与自身特性 （一）血常规 （二）白细胞分类 （三）骨髓外周血细胞形态学及分类 （四）血细胞涂片特性 四．血细胞形态学采样、制片与检查程序 （一）采样、制片、染色工序至关重要 （二）染色 五．外周血细胞形态学检验技巧 （一）WBC形态学
（二）红细胞形态学 （三）出现有核（内/巨幼）红/幼粒细胞意义 （四）血小板巨核细胞 六．外周血细胞形态学检查步骤、注意事项及检查报告书写内容 （一）注意事项 （二）外周血涂片检查步骤 （三）外周血涂片报告内容 一、概述 （一）．血细胞形态学基本概念 （二）血细胞形态学检查方法 （三）血液学及血细胞形态学临床应用 （四）临床/形态学诊断与血液学检验及专业人员素质问题 一．概述 血细胞形态学是血液病基础诊断与血液学检验的重要项目 ●正常人的血液及造血器官中，各种血细胞的数量有一定的正常范围，不同血细胞及细胞发育的不同阶段有一定形态结构特点。 ●观察血细胞形态和数量及其比例的变化来研究造血器官的结构和功能是血液学的重要组成部分，是诊断造血系统疾病最基本、被临床普遍应用的最简便实用的检查方法。 ●在造血系统疾病发生造血功能紊乱，引起血细胞形态学的量和质的改变。在临床各科某些原发性疾病患者出现继发性血液学形态学的病理改变，籍以了解患者机体状况如感染（细菌、病毒、寄生虫、药物）等反应。 ●血细胞形态学检查是为临产提供诊断依据，应备有患者的临床表现基础检查初步诊断的病历 摘要，才能进行形态学检查。必要时还要做骨髓活检（切片、活检材料滚片、活检穿刺针残液图片）细胞化学染色,免疫学表型等检查的必备程序。 ●血细胞形态学检查应包括外周血和骨髓两部分组成，必须平行进行检查。外周血细胞改变往 往反映骨髓病变的重要信息，有利于诊断。 ●疑似血液病和血液学检查异常情况不能只依赖使用分析仪做血常规检查而废弃镜下血涂片细
外周血细胞形态检验 1.外周血涂片检查步骤： （1）肉眼观察：涂片面膜大小、厚薄是否适中，染色好坏。（2）低倍镜观察全貌： ①涂片及染色好坏； ②了解白细胞数（可大体校对WBC直接计数是否正确）； ③了解白细胞大致分布及其各阶段大致比例，特别要注意由于涂片过力，把WBC及成熟粒细胞大多推于片尾部位，造成分类比值误差。片尾有无异常细胞。 ④选择具有代表性的细胞镜检区域。 （3）油镜观察：进行WBC分类计数，观察细胞形态、比例、有无巨大或异常细胞。 ①血涂片对WBC总数准确性估计：从低倍及油镜中估计WBC数及其分布。医|学教育网搜集整理一般区分WBC数几个等级（油镜视野中WBC密度、分散无重叠）。参见WBC形态诊断技巧节段。 ②白细胞分类计数：血中主要两大比例的中性成熟粒细胞与淋巴细胞及其他小比例细胞是否属正常范围及形态有 无异常。
③注意片尾端有无巨大或出现不成熟或异常细胞（如中晚幼粒、中晚幼红细胞、异常淋巴细胞、吞噬细胞、肿瘤细胞等）。 ④红细胞形态（群体、个体）、排列（重叠、缗钱状）。 ⑤血小板数量、形态及聚集性。⑥寄生虫。 ●注意事项 1．血膜呈舌状，头、体、尾分明 2.空气中晃动，尽快干燥；37℃恒温箱中促干 3．涂片的厚薄、长度与血滴大小（10~20μl）与血片质量4．1h内染色或在1h内甲醇固定 5.正确清洁玻片 6．抗凝血或毛细血管血涂片；EDTA能阻止PLT聚集 7．抗凝血液4h内涂片，先在低倍镜下浏览全片，了解染色好坏和细胞分布情况，观察有无异常细胞。选择涂片体尾交界处染色良好的区域，在油镜下计数100个白细胞，按其形态特征进行分类计数。求出各类细胞所占百分数。 8.分类时应从血膜体尾交界处边缘向中央依次上下呈城垛 状迂回移动，计数使不能重复和遗漏。
【检验】血细胞形态学检验存在问题与临床实践 2014-10-06 血细胞形态学检查是血常规检验的主要内容，也是医学检验人员必须掌握的基本功。近年来，随着血液分析仪的普及，忽视血常规检验中的形态学观察，以致造成漏检、漏诊及误诊的现象常常发生，已引起临床医生、检验人员及患者家属的高度重视。造成上述现象的原因较多，应积极研究对策，确保血细胞形态学检验质量不断提高。 一、专业知识面窄造成漏检与对策 血细胞形态学检验涉及到红细胞、白细胞、血小板及其它异常细胞形态学的知识和丰富经验。临床工作中常由于形态学知识面窄而造成漏检，甚至引发医疗纠纷。 例1，男、8岁，主因经常鼻衄、皮肤紫癜而求诊，甲院查血常规RBC 3.8×10^12/L，HBG 105g/L，WBC 4×10^9/L，PLT 84×10^9/L，按血细胞减少症治疗不见好转而转乙院。血常规结果与甲院近似，血象中粒细胞胞质中多见Dhle小体，并伴有巨大血小板。其母血象与患者近似。结合临床诊为May-Hegglin畸形。家属认为甲院检验人员工作不认真，要追查其责任，后经耐心解释，家属不再追究。 例2，患者，男，80岁，因发热查血常规，甲院化验报告，RBC 3.5×10^12/L，WBC 20.3×10^9/L，W-SCR 0.26 ,W-LCR 0.74(两分群)，未提示形态学异常，
PLT 160×10^9/L。转乙院W-SCR 0.74 , W-MCR 0.07 ,W-LCR 0.19（三分群）。查血象多为带空泡的绒毛淋巴细胞，骨髓及血涂片证实为伴绒毛淋巴细胞的脾淋巴瘤，家属拟起诉甲院延误诊断，由于本病非常少见，经解释，家属理解。 对策：①普及血细胞形态学知识，不断提高检验人员业务水平。②从事血细胞形态学的检验人员上岗前应接受正规培训。③建立形态学检验人员评价认可制度。 ④加强血细胞形态学室间质评工作，对多次不达标实验室应提出警告。 二、染色技术不正规发生漏诊与对策 有些基层实验室使用快速染色法，这种染色法操作迅速，但不适合鉴别细胞结构。 例3，女，4岁，主因皮肤出现小脓泡、肝、脾肿大而求诊。甲院查血常规RBC 3.1×10^12/L，HBG 93g/L，WBC 3.8×10^9/L，血涂片快速染色后白细胞分类为N 0.63，L 0.36，M 0.01，未报形态学异常。转到乙院后查血象，中性粒细胞胞质中有粗大紫灰色颗粒，淋巴细胞胞质中可见到1~2个粗大紫红色颗粒。结合临床特点诊断为Chediak-Higashi综合征。患者家属对早日确诊非常满意。 对策：①提倡使用国际血液学标准化委员会推荐的Romanowsky染色法，也可使用Wright、Giemsa或Wright-Giemsa混合染色法。②严格按标准化程序进行染色。③采用快速染色法的单位应定期更换分染试剂，以免影响染色质量。 三、仪器法引发的医疗纠纷与对策 随着血液分析仪的普及，忽视血常规检验中的形态学观察，从而造成漏检、漏诊及误诊等现象，以至引发医患之间的矛盾，已引起临床医生、检验人员、患者及其家属的普遍关注。 1、异常结果提示未引起重视 例4，患者，女，40岁，因干咳而住甲院，血常规检查提示WBC 11×10^9/L，三分群血细胞分析仪MCR 0.19，异常提示F2，未查血片。后患者转外院住院，多次查血常规，嗜酸粒细胞高，确诊为支气管哮喘。先后支付医疗费用较多，认为甲院延误了诊断，要求赔偿。 例5，患者，女，38岁，脑外科术前查血常规，血液分析仪RBC 4.25×1012/L，PLT 58×109/L 。异常提示为PLT直方图DW，医生不给做手术，转内科进一步
一、正常粒细胞系统形态？ 1、原始粒细胞：胞体直径10~18μm，圆形或类椭圆形。胞核较大，约占细胞的2/3以上，圆或类椭圆形，居中或略偏位，核染色质呈细砂粒状，均匀、平坦如一层薄砂，无浓集。核膜薄较模糊，染成淡红色。核仁2~5个，较小，清楚。胞质量少，染成淡蓝或深蓝似天蓝色，透明绕于核周，无颗粒。过氧化物酶染色阴性，但后期有时也可呈阳性反应。 2、早幼粒细胞：胞体直径12~20μm，较原粒细胞大，圆或椭圆形。胞核大，圆或类椭圆形，位于中央或偏位。核染色质呈粗粒状，较原粒粗，开始聚集。核仁可见或消失。胞质量较多，呈淡蓝、蓝或深蓝色，浆内含大小、形态和多少不一的紫红色非特异的天青胺蓝颗粒，分布不均。过氧化物酶染色阳性。 3、中幼粒细胞： （1、）中性中幼粒细胞：胞体直径10~18μm，圆形。胞核椭圆形或一侧开始扁平，，染色质聚集呈索块状，核仁消失。胞质量多，淡红色，内含中等量、大小较一致的特异的中性颗粒，常伴有少数非特异性颗粒。 （2）嗜酸性中幼粒细胞：胞体直径15~20μm，胞核与中性中幼粒细胞相似。胞质内充满粗大、均匀、排列紧密、橘红色的特异性的嗜酸性颗粒。 （3）嗜碱性中幼粒细胞：胞体直径10~15μm，胞核椭圆形，轮廓不清楚，核染色质较模糊。胞质内及核上含有数量不多、排列零乱、大小不等的紫黑色特异的嗜碱性颗粒。 4、晚幼粒细胞 （1、）中性晚幼粒细胞：胞体直径10~16μm，呈圆形。胞核明显凹陷呈肾形、马蹄形、半月形，但其核凹陷程度一般不超过核假设直径的一半。核染色质粗糙，排列更紧密，核仁消失。胞浆量多，染浅红色，充满中性颗粒。 （2、）嗜酸性晚幼粒细胞：胞体直径10~16μm，胞核在中央或偏一侧，呈肾形或椭圆形。核质充满着嗜酸性颗粒，其颗粒粗大呈橘红色，大小一致，但有时见到深褐色或紫棕色颗粒。 （3、）嗜碱性晚幼粒细胞：胞体直径10~14μm。胞核固缩呈肾形，轮廓模糊。胞质内及核上含有少量、分布不匀的嗜碱性颗粒。 5、杆状核粒细胞： （1、）中性杆状核粒细胞：胞体直径10~15μm，圆形。胞核凹陷程度超过核假设直径的一半，核径最窄处大于最宽处1/3以上，形态弯曲成带状，粗细均匀，核染色质粗糙呈块状，也可见核呈“S”形、“U”形或“E”形，核两端钝圆染深紫红色。胞质充满中性颗粒。 （2、）嗜酸性杆状核粒细胞：胞体直径11~16μm，圆形。胞核与中性杆状粒细胞相似。胞质充满着粗大的橘红色嗜酸性颗粒。 （3、）嗜碱性杆状核粒细胞：胞体直径10~12μm。胞核呈模糊杆状。胞质内及胞核上含有紫黑色、大小不匀、数量较少的嗜碱性颗粒。 6、分叶核粒细胞： （1、）中性分叶核粒细胞：胞体直径10~14μm，圆形。胞核分叶状，叶与叶之间有细丝相连或完全断开，或者虽未断开，但有粗而明显的切痕。核常分2~5叶，核染色质浓集或呈较多小块，染深紫红色。胞质丰富，染淡红色，浆内分布着细小紫红色中性颗粒。 （2、）嗜酸性分叶核粒细胞：胞体直径11~16μm。胞核多分为两叶。胞质充满着粗大呈橘红色嗜酸性颗粒。 （3、）嗜碱性分叶核粒细胞：胞体直径10~12μm。胞核可分3~4叶或分叶不明显，常融合呈堆集状。胞质嗜碱性颗粒呈紫黑色，大小不一，分布不均，常掩盖在核上，以致核的形态看不清，有时很难确定为哪一个阶段细胞。
外周血细胞形态学检验及技巧 卫生部医院血液科天林 卫生部临床检验中心明婷谷小林陆红 一．血液学及血细胞形态学临床应用： ●是临床血液病诊断与治疗及临床医学检验学的基础工作。 ●血细胞形态学适用于临床血液病诊断快速简捷的要求。 ●近年来由于血细胞学及超微结构、免疫学、细胞遗传学、融合基因、造血干细胞及其细胞因子、骨髓造血微环境、基质细胞、树突状细胞、淋巴系细胞发生及其疾病表现，细胞增殖动力学与细胞凋亡以及骨髓组织病理学应用，推动了血液的临床与实验室的新知识迅猛发展。 ●当前血液病不能单凭临床与形态学作出诊断，必须以临床和血细胞形态学为基础，将免疫学、细胞遗传学及分子生物学新知识、新技术应用到血液学中，构成现代临床血液学与分子生物学诊断技术，弥补形态学的经验性与主观性带来负面缺陷，才能提高血液病的诊断与治疗水平。 ●进入90 年代以来，国外采用多学科联合技术综合诊断技术与方案： ○FAB-AL （1976 ）、NCL （美国国家癌症研究所）对FAB-AL 分型的补充（1995 ）、AL-MIC 分（类）型，MIC 及MICM 分型（1985-1990 ）； ○FAB-CL 分型（1989 ）、中国CL 分型（1997 ）； ○FAB-MDS 分型（1982 ）、MIC 协作组对FAB-MDS 分型提出补充建议（1987 ）； ○WHO 对造血系统及髓系恶性疾病和淋巴系恶性肿瘤WHO 分类（2000 ）； ●血细胞形态学诊断技术正在进入显微图象软件时期： ○创造出许多多功能软件，如血细胞形态学、细胞化学染色、血液病诊断与鉴别诊断、CL 诊断与治疗及教学系统多媒体软件等。 ○将显微镜与微机相连，应用储存、分类、检索软件，编辑、打印诊断报告，并可附多幅细胞图象。 二．血细胞形态学基本概念 血细胞形态学作为临床血液病基础诊断：
血细胞形态学检验存在问题与临床实践 血细胞形态学检查是血常规检验的主要内容，也是医学检验人员必须掌握的基本功。近年来，随着血液分析仪的普及，忽视血常规检验中的形态学观察，以致造成漏检、漏诊及误诊的现象常常发生，已引起临床医生、检验人员及患者家属的高度重视。造成上述现象的原因 血细胞形态学检查是血常规检验的主要内容，也是医学检验人员必须掌握的基本功。近年来，随着血液分析仪的普及，忽视血常规检验中的形态学观察，以致造成漏检、漏诊及误诊的现象常常发生，已引起临床医生、检验人员及患者家属的高度重视。造成上述现象的原因较多，应积极研究对策，确保血细胞形态学检验质量不断提高。一、专业知识面窄造成漏检与对策血细胞形态学检验涉及到红细胞、白细胞、血小板及其它异常细胞形态学的知识和丰富经验。临床工作中常由于形态学知识面窄而造成漏检，甚至引发医疗纠纷。例1，男、8岁，主因经常鼻衄、皮肤紫癜而求诊，甲院查血常规RBC 3.8×1012/L，HBG 105g/L，WBC 4×109/L，PLT 84×109/L，按血细胞减少症治疗不见好转而转乙院。血常规结果与甲院近似，血象中粒细胞胞质中多见Dhle小体，并伴有巨大血小板。其母血象与患者近似。结合临床诊为May-Hegglin畸形。家属认为甲院检验人员工作不认真，要追查其责任，后经耐心解释，家属不再追究。例2，患者，男，80岁，因发热查血常规，甲院化验报告，RBC 3.5×1012/L，WBC 20.3×109/L，W-SCR 0.26 ,W-LCR 0.74(两分群)，未提示形态学异常，PLT 160×109/L。转乙院W-SCR 0.74 , W-MCR 0.07 ,W-LCR 0.19（三分群）。查血象多为带空泡的绒毛淋巴细胞，骨髓及血涂片证实为伴绒毛淋巴细胞的脾淋巴瘤，家属拟起诉甲院延误诊断，由于本病非常少见，经解释，家属理解。对策：①普及血细胞形态学知识，不断提高检验人员业务水平。②从事血细胞形态学的检验人员上岗前应接受正规培训。③建立形态学检验人员评价认可制度。④加强血细胞形态学室间质评工作，对多次不达标实验室应提出警告。二、染色技术不正规发生漏诊与对策有些基层实验室使用快速染色法，这种染色法操作迅速，但不适合鉴别细胞结构。例3，女，4岁，主因皮肤出现小脓泡、肝、脾肿大而求诊。甲院查血常规RBC 3.1×1012/L，HBG 93g/L，WBC 3.8×109/L，血涂片快速染色后白细胞分类为N 0.63，L 0.36，M 0.01，未报形态学异常。转到乙院后查血象，中性粒细胞胞质中有粗大紫灰色颗粒，淋巴细胞胞质中可见到1~2个粗大紫红色颗粒。结合临床特点诊断为Chediak-Higashi综合征。患者家属对早日确诊非常满意。对策：①提倡使用国际血液学标准化委员会推荐的Romanowsky染色法，也可使用Wright、Giemsa或Wright-Giemsa混合染色法。②严格按标准化程序进行染色。③采用快速染色法的单位应定期更换分染试剂，以免影响染色质量。三、仪器法引发的医疗纠纷与对策随着血液分析仪的普及，忽视血常规检验中的形态学观察，从而造成漏检、漏诊及误诊等现象，以至引发医患之间的矛盾，已引起临床医生、检验人员、患者及其家属的普遍关注。 1、异常结果提示未引起重视例4，患者，女，40岁，因干咳而住甲院，血常规检查提示WBC 11×109/L，三分群血细胞分析仪MCR 0.19，异常提示F2，未查血片。后患者转外院住院，多次查血常规，嗜酸粒细胞高，确诊为支气管哮喘。先后支付医疗费用较多，认为甲院延误了诊断，要求赔偿。例5，患者，女，38
外周血细胞形态学检验及技巧 卫生部北京医院血液科郑天林 卫生部临床检验中心彭明婷谷小林陆红 一．血液学及血细胞形态学临床应用： ●是临床血液病诊断与治疗及临床医学检验学的基础工作。 ●血细胞形态学适用于临床血液病诊断快速简捷的要求。 ●近年来由于血细胞学及超微结构、免疫学、细胞遗传学、融合基因、造血干细胞及其细胞因子、骨髓造血微环境、基质细胞、树突状细胞、淋巴系细胞发生及其疾病表现，细胞增殖动力学与细胞凋亡以及骨髓组织病理学应用，推动了血液的临床与实验室的新知识迅猛发展。 ●当前血液病不能单凭临床与形态学作出诊断，必须以临床和血细胞形态学为基础，将免疫学、细胞遗传学及分子生物学新知识、新技术应用到血液学中，构成现代临床血液学与分子生物学诊断技术，弥补形态学的经验性与主观性带来负面缺陷，才能提高血液病的诊断与治疗水平。 ●进入90 年代以来，国内外采用多学科联合技术综合诊断技术与方案： ○FAB-AL （1976 ）、NCL （美国国家癌症研究所）对FAB-AL 分型的补充（1995 ）、AL-MIC 分（类）型，MIC 及MICM 分型（1985-1990 ）； ○FAB-CL 分型（1989 ）、中国CL 分型（1997 ）； ○FAB-MDS 分型（1982 ）、MIC 协作组对FAB-MDS 分型提出补充建议（1987 ）； ○WHO 对造血系统及髓系恶性疾病和淋巴系恶性肿瘤WHO 分类（2000 ）； ●血细胞形态学诊断技术正在进入显微图象软件时期： ○创造出许多多功能软件，如血细胞形态学、细胞化学染色、血液病诊断与鉴别诊断、CL 诊断与治疗及教学系统多媒体软件等。 ○将显微镜与微机相连，应用储存、分类、检索软件，编辑、打印诊断报告，并可附多幅细胞图象。 二．血细胞形态学基本概念 血细胞形态学作为临床血液病基础诊断：
外周血细胞形态学检 验及技巧
外周血细胞形态学检验及技巧 卫生部北京医院血液科郑天林 卫生部临床检验中心彭明婷谷小林陆红 五．血细胞形态学采样、制片染色与检查要求： ( 一 ) 采样、制片及染色，三道工序至关重要，是细胞形态学检查的成败关键。要得到合格的涂片标本，做好上述工序，应注意以下要求： 1. 采样、制片： (1) 玻片要求：国内 1.0mm × 26mm × 76mm ± 0.5 ，美国 NCCLS 规定 1.0mm × 25mm × 75mm ±0.5 ，要严格清洁，接近中性 . (2) 推片：选择优质推片，推片两端边缘整齐、平滑。也可选用有机玻璃，其大小、厚度与坡片相同，两端之边缘应加工光滑，以利推片用。 (3) 采外周血（样），擦去第一滴血，迅速采血，量适中，如绿豆粒大小，具有一定推片技术，推片倾斜 45 °±，推成血膜长度 25mm ～ 35mm ，宽度 18 ～ 20mm ，血膜四周留有空隙区，血膜终尾离玻片终端至少 10mm ，血膜均匀，薄如蝉翼，尾端形如弧状，迅速扇（摇）干，血膜具有头、体、尾不同厚薄区域。此外，涂片时，还要考虑患者的血液状态，如贫血程度、血液粘稠度、 WBC 或有核细胞多少等因素，调整推片技巧。 (4) 如若采用静脉血推片，用 K 3 -EDTA 或肝素抗凝，推制血片应尽早进行（最迟在 1 ～ 2 小时内）。 （二）染色：是识别细胞形态的重要标记工序： 常规瑞氏 - 姬姆萨染色要点： 1 ．要得到满意、漂亮的血细胞染色标本，新鲜涂片迅速染色是很重要的。 2 ．染色液配制要合格； 3 ．涂片切勿用甲醛固定，否则不着色；
外周血细胞形态学检验及诊断技巧主讲：卫生部北京医院 郑天林录制：卫星卫生科技教育网监制：卫生部科教司 一.概述 （一）血细胞形态学基本概念 （二）血细胞形态学检查方法 （三）血液学及血细胞形态学临床应用 （四）临床 /形态学诊断与血液学检验及专业人员素质问题二．形态学及血液检查与自身特性 （一）血常规检查 （二）白细胞分类 （三）骨髓外周血细胞形态学及分类 （四）血细胞涂片特性三．血细胞染色法 （一）细胞染色机理 （二）瑞氏染色 （三）姬姆萨染色 （四）瑞氏 - 姬姆萨染色液鉴定 （五）瑞氏 - 姬姆萨混合染色四．血细胞形态学采样、制片与检查程序 （一）采样、制片、染色工序至关重要 （二）涂片染色五．外周血细胞形态学检验技巧 （一）WBC 形态学 （二）红细胞形态学 （三）出现有核（内 /巨幼）红 / 幼粒细胞意义 （四）血小板巨核细胞六．外周血细胞形态学检查步骤、注意事项及检查报告书写内容 （一）注意事项 （二）外周血涂片检查步骤 （三）外周血涂片报告内容一、概述 （一）血细胞形学基本概念 血细胞形态学是血液病基础诊断与血液学检验的重要项目 ?正常人的血液及造血器官中，各种血细胞的数量有一定的正常范围，不同血细胞及细胞发育的不同阶段有一定形态结构特点。 ?观察血细胞形态和数量及其比例的变化来研究造血器官的结构和功能是血液学的重要组成部分，是诊断造血系统疾病最基本、被临床普遍应用的最简便实用的检查方法。 ?在造血系统疾病发生造血功能紊乱，引起血细胞形态学的量和质的改变。在临床各科某些原发性疾病患者出现继发性血液学形态学的病理改变，籍以了解患者机体状况如感染（细菌、病毒、寄生虫、药物）等反应。 ?血细胞形态学检查是为临床提供诊断依据，应备有患者的临床表现基础检查初步诊断的病历摘要，才能进行形态学检查。必要时还要做骨髓活检（切片、活检材料滚片、活检穿刺针残液图片）细胞化学染色 , 免疫学表型等检查的必备程序。 ?血细胞形态学检查应包括外周血和骨髓两部分组成，必须平行进行检查。外周血细胞改变往往反映骨髓病变的重要信息，有利于诊断。 ?疑似血液病和血液学检查异常情况不能只依赖使用分析仪做血常规检查而废弃镜下血涂片细胞形态学检查的错误倾向。 （二）细胞形态学检查方法 1．光镜细胞形态学；细胞形态学的基本内容和常用的检查方法，广泛用于临床方法。
2020年外周血细胞形态学检验及诊断技巧 精品版
外周血细胞形态学检验及诊断技巧 主讲：卫生部北京医院 郑天林 录制：卫星卫生科技教育网 监制：卫生部科教司 一.概述 （一）血细胞形态学基本概念 （二）血细胞形态学检查方法 （三）血液学及血细胞形态学临床应用 （四）临床/形态学诊断与血液学检验及专业人员素质问题二．血细胞染色法 （一）细胞染色机理 （二）瑞氏染色 （三）姬姆萨染色 （四）瑞氏-姬姆萨染色液鉴定 （五）瑞氏-姬姆萨混合染色 三．形态学与血液检查与自身特性 （一）血常规 （二）白细胞分类 （三）骨髓外周血细胞形态学及分类 （四）血细胞涂片特性 四．血细胞形态学采样、制片与检查程序 （一）采样、制片、染色工序至关重要 （二）染色 五．外周血细胞形态学检验技巧 （一）WBC形态学 （二）红细胞形态学
（三）出现有核（内/巨幼）红/幼粒细胞意义 （四）血小板巨核细胞 六．外周血细胞形态学检查步骤、注意事项及检查报告书写内容 （一）注意事项 （二）外周血涂片检查步骤 （三）外周血涂片报告内容 一、概述 （一）．血细胞形态学基本概念 （二）血细胞形态学检查方法 （三）血液学及血细胞形态学临床应用 （四）临床/形态学诊断与血液学检验及专业人员素质问题 一．概述 血细胞形态学是血液病基础诊断与血液学检验的重要项目 ●正常人的血液及造血器官中，各种血细胞的数量有一定的正常范围，不同血细胞及细胞发育的不同阶段有一定形态结构特点。 ●观察血细胞形态和数量及其比例的变化来研究造血器官的结构和功能是血液学的重要组成部分，是诊断造血系统疾病最基本、被临床普遍应用的最简便实用的检查方法。 ●在造血系统疾病发生造血功能紊乱，引起血细胞形态学的量和质的改变。在临床各科某些原发性疾病患者出现继发性血液学形态学的病理改变，籍以了解患者机体状况如感染（细菌、病毒、寄生虫、药物）等反应。 ●血细胞形态学检查是为临产提供诊断依据，应备有患者的临床表现基础检查初步诊断的病历 摘要，才能进行形态学检查。必要时还要做骨髓活检（切片、活检材料滚片、活检穿刺针残液图片）细胞化学染色,免疫学表型等检查的必备程序。 ●血细胞形态学检查应包括外周血和骨髓两部分组成，必须平行进行检查。外周血细胞改变往 往反映骨髓病变的重要信息，有利于诊断。 ●疑似血液病和血液学检查异常情况不能只依赖使用分析仪做血常规检查而废弃镜下血涂片细 胞形态学检查的错误倾向。
【关键字】检验 【检验】血细胞形态学检验存在问题与临床实践 2014-10-06 济南百博生物技术股份有限公司 血细胞形态学检查是血常规检验的主要内容，也是医学检验人员必须掌握的基本功。近年来，随着血液分析仪的普及，忽视血常规检验中的形态学观察，以致造成漏检、漏诊及误诊的现象常常发生，已引起临床医生、检验人员及患者家属的高度重视。造成上述现象的原因较多，应积极研究对策，确保血细胞形态学检验质量不断提高。 一、专业知识面窄造成漏检与对策 血细胞形态学检验涉及到红细胞、白细胞、血小板及其它异常细胞形态学的知识和丰富经验。临床工作中常由于形态学知识面窄而造成漏检，甚至引发医疗纠纷。 例1，男、8岁，主因经常鼻衄、皮肤紫癜而求诊，甲院查血常规RBC 3.8×10^12/L，HBG 105g/L，WBC 4×10^9/L，PLT 84×10^9/L，按血细胞减少症治疗不见好转而转乙院。血常规结果与甲院近似，血象中粒细胞胞质中多见Dhle小体，并伴有巨大血小板。其母血象与患者近似。结合临床诊为May-Hegglin畸形。家属认为甲院检验人员工作不认真，要追查其责任，后经耐心解释，家属不再追究。 例2，患者，男，80岁，因发热查血常规，甲院化验报告，RBC 3.5×10^12/L，WBC 20.3×10^9/L，W-SCR 0.26 ,W-LCR 0.74(两分群)，未提示形态学异常，PLT 160×10^9/L。转乙院W-SCR 0.74 , W-MCR 0.07 ,W-LCR 0.19（三分群）。查血象多为带空泡的绒毛淋巴细胞，骨髓及血涂片证实为伴绒毛淋巴细胞的脾淋巴瘤，家属拟起诉甲院延误诊断，由于本病非常少见，经解释，家属理解。 对策：①普及血细胞形态学知识，不断提高检验人员业务水平。②从事血细胞形态学的检验人员上岗前应接受正规培训。③建立形态学检验人员评价认可制度。④加强血细胞形态学室间质评工作，对多次不达标实验室应提出警告。 二、染色技术不正规发生漏诊与对策 有些基层实验室使用快速染色法，这种染色法操作迅速，但不适合鉴别细胞结构。 例3，女，4岁，主因皮肤出现小脓泡、肝、脾肿大而求诊。甲院查血常规RBC 3.1×10^12/L，HBG 93g/L，WBC 3.8×10^9/L，血涂片快速染色后白细胞分类为N 0.63，L 0.36，M 0.01，未报形态学异常。转到乙院后查血象，中性粒细胞胞质中有粗大紫灰色颗粒，淋巴细胞胞质中看来到1~2个粗大紫红色颗粒。结合临床特点诊断为Chediak-Higashi综合征。患者家属对早日确诊非常满意。 对策：①提倡使用国际血液学标准化委员会推荐的Romanowsky染色法，也可使用Wright、Giemsa或Wright-Giemsa混合染色法。②严格按标准化程序进行染色。③采用快速染色法的单位应定期更换分染试剂，以免影响染色质量。 三、仪器法引发的医疗纠纷与对策
血细胞形态学检验 血细胞形态学检验 （一）异常红细胞 1.红细胞大小异常 小红细胞 临床意义: 增多：血红蛋白合成障碍如缺铁性贫血、海洋性贫血。 大红细胞 临床意义: 增多：溶血性贫血、巨幼红细胞性贫血。 巨大红细胞 临床意义: 叶酸或维生素B12缺乏性巨大幼稚红细胞性贫血。 红细胞大小不等 临床意义: 严重增生性贫血，以巨幼红细胞性贫血最明显。 2.红细胞形态异常 球形红细胞 临床意义: 常见于遗传性球形细胞增多症；自身免疫性溶血性贫血；异常血红蛋白病。 椭圆形红细胞 临床意义: 正常人不超过15%；增多：高于25-50%对遗传性椭圆细胞增多症有诊断价值；大细胞性贫血可达25%，其它贫血也有不同程度增多。 靶形红细胞 临床意义: 主要见于地中海性贫血、严重的缺铁性贫血、血红蛋白病、肝病、脾切除后及阻塞性黄疸。镰形红细胞 临床意义: 主要见于遗传性镰形红细胞增多症。 口形红细胞 临床意义: 正常<4%，增多见于口形细胞增多症、急性乙醇中毒。 棘形红细胞 临床意义: 主要见于棘形细胞增多症（可高达70-80%），严重肝病或制片不当。 皱缩红细胞 临床意义: 可见于急性铅中毒、尿毒症等，也可见于血片干燥太慢。 锯齿红细胞 临床意义: 主要见于尿毒症、微血管病性溶血性贫血、丙酮酸激酶缺乏症、阵发性睡眠性血红蛋白尿症。
裂片细胞 临床意义: 指红细胞碎片，主要见于DIC、微血管病性溶血性贫血、心源性溶血性贫血、化学中毒、肾功能不全、血栓性血小板减少性紫癜等。 3.染色异常 着色过浅 临床意义: 红细胞中心淡染区扩大，多见于缺铁性贫血、地中海贫血及血红蛋白病。 着色过深 临床意义: 中心淡染区不见，多见于先天性溶血性能贫血及大细胞性贫血。 嗜多色性红细胞 临床意义: 为一种未成熟的红细胞，主要见于增生性贫血。 4.红细胞结构异常 嗜碱点彩红细胞 临床意义: 铅、铋、汞中毒。 卡波环 临床意义: 见于恶性贫血、溶血性贫血、铅中毒等。 豪周氏小体 临床意义: 见于增生性贫血、脾切除后、巨幼细胞性贫血、恶性贫血等。 有核红细胞 临床意义: 正常外周血片中不见，可见于溶血性贫血、急慢性白血病、红白血病、髓外造血及严重缺氧等。 缗钱状红细胞 临床意义:见于多发性骨髓瘤。 （二）异常白细胞 1.中性粒细胞核象变化 核左移 临床意义: 外周血中中性杆状核细胞增多>7%，常见于感染。如晚幼粒、中幼粒等细胞增多见于类白血病、白血病。伴白细胞总数增高常见于急性化脓性感染；白细胞总数不增高或减低常见于严重感染、机体抵抗力低下时，如伤寒、伴感染中毒性休克的败血症等。 核右移 临床意义: 指外周血中不仅中性分叶核细胞增多，且分叶过多，常见4-5叶（正常3叶）。为造血功能衰退或造血物质缺乏的表现。常见于营养性巨幼细胞性贫血和使用代谢药物后。 2.中性粒细胞毒性变化 细胞大小不均 临床意义:
血液形态学进修报告标准化管理处编码[BBX968T-XBB8968-NNJ668-MM9N]
进修报告 尊敬的各位院领导，各位同事，大家下午好！ 今天下午就我在甘肃省人民医院临检中心进修半年的学习情况汇报如下，首先非常感谢院领导能给我这次外出学习的机会，接触新的知识，提升自身的技能,这次我主要学习的是血液细胞形态学检验，由于临床检验工作中大量自动化设备的应用，提高了工作效率，还大大改善了检测结果的精密度和准确度。但是也出现了对细胞形态识别重视程度不够，当存在异常的细胞群时,仪器可出现不分类或分类不准确，这时会出现异常标识。由于自动化仪器不能计数和分类异常的细胞群或者识别一些显着形态异常的细胞，需要我们推片染色进行人工分类。如白血病早期异常细胞数量少，血液分析仪难以鉴别幼稚细胞，不做镜检往往会造成漏诊。 这次主要分三部分内容进行学习： 一、基础知识的巩固：包括外周血的白细胞分类、红细胞形态及熟悉其临床意义；骨髓细胞各阶段形态学 特点；细胞化学染色的方法及其意义 二、理论结合实践，熟悉各系统常见疾病的诊断：红细胞系统：各种常见的贫血（包括缺铁性贫血、巨幼 细胞性贫血、再生障碍性贫血等）；白细胞系统：白细胞减少和增多的疾病（能够区分急性髓系白血病和急性淋巴细胞白血病、慢性粒细胞白血病、白细胞减少症）；巨核细胞系统:特发性血小板减少性紫癜（ITP）的诊断。 三、疑难和少见疾病的认识和掌握：包括骨髓增生异常综合症（MDS）、多发性骨髓瘤、浆细胞白血病、嗜 酸粒细胞白血病等。 通过这次对血液细胞形态学的深入学习，在以后的工作中我科会全力协助临床，为临床疾病的诊断提供有力的证据和线索。杨琳