Sephadex G-25对乳酸链球菌素溶液脱盐的研究
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有关sephdax的处理问题(一)交联葡聚糖凝胶(sephadex)⑴sephadexg交联葡聚糖的商品名为sephndex,不同规格型号的葡聚糖用英文字母g表示,g后面的阿拉伯数为凝胶得水值的10倍。
例如,g-25为每克凝胶膨胀时吸水2.5克,同样g-200克每克千胶吸水20克。
交联葡聚糖凝胶的种类有g-10,g-15,g-25,g-50,g-75,g-100,g-150,和g-200。
因此,“g”反映,凝胶的交联程度,膨胀程度及分部范围。
⑵sephadexlh-20,是─sephadexg-25的羧丙基衍生物,能溶于水及亲脂溶剂,用于分离不溶于水的物质。
(二)琼脂糖凝胶:商品名很多,常见的有,sepharose(瑞典,pharmacia),bio-gel-a(美国bio-rad)等。
琼脂糖凝胶是依靠糖链之间的次级链如氢键来维持网状结构,网状结构的疏密依靠琼脂糖的浓度。
一般情况下,它的结构是稳定的,可以在许多条件下使用(如水,ph4-9范围内的盐溶液)。
琼脂糖凝胶在40℃以上开始融化,也不能高压消毒,可用化学灭菌活处理。
(三)聚丙烯酰胺凝胶:就是一种人工合成凝胶,就是以丙烯酰胺为单位,由甲叉双丙烯酰胺交联变成的,经潮湿消灭或加工成形做成粒状,掌控交联剂的用量可以做成各种型号的凝胶。
交联剂越多,孔隙越大。
共聚丙烯酰胺凝胶的商品为生物胶-p(bio-gelp),由美国bio-rod厂生产,型号很多,从p-2至p-300共10种,p后面的数字再乘坐1000就相等于该凝胶的排阻限度。
(四)聚苯乙烯凝胶商品为styrogel,具备小网孔结构,可以用作拆分分子量1600至40,000,000的生物大分子,适用于于有机磷酸酯物,分子量测量和脂溶性天然物的分级,凝胶机械强度不好,洗清剂需用甲基亚砜。
三、实验技术(一)层析柱层析柱就是凝胶层析技术中的主体,通常用玻璃管或有机玻璃管。
层析柱的直径大小不影响拆分度,样品用量小,可以加强柱的直径,通常制取用凝胶柱,直径大于2厘米,但在加样时应将样品均匀分布于凝胶柱床面上。
乳酸链球菌素的研究现状乳酸链球菌素的生产及研究现状吴江乳酸链球菌素(Nisin) 是从乳酸链球菌发酵产物中提制的一种多肽抗菌素类物质,是一种世界公认的安全的天然生物性食品防腐剂和抗菌剂。
1944 年Mattick 和Hirsch 发现血清学N 群中的一些乳酸链球菌能产生蛋白类抑菌物质,命名为N-inhibitory Substance 即N 群抑菌物质,简称为Nisin。
1953 年由英国的阿普林和巴雷特公司首次以商品的形式出售了这种新的防腐剂———乳酸链球菌素。
1969 年,FAO/ WHO 食品添加剂联合专家委员会批准Nisin作为一种生物型防腐剂应用于食品工业。
1988 年美国食品和药物管理局(FDA) 也正式批准将Nisin应用于食品中。
我国在GB2760 —86 中批准Nisin可用于罐藏食品、植物蛋白食品、乳制品、肉制品中。
迄今为止,Nisin 已在全世界约60 多个国家和地区被用作防腐剂。
1.乳酸链球菌素的生产1.1 菌种的筛选和改良乳酸链球菌广泛存在于天然牛奶及乳酪和酸奶中, 从牛奶场取生牛奶样品, 加以稀释, 然后在含有检测菌及吐温20 为扩散剂的固体检测培养基表面进行涂布, 在30 ℃培养24h 后, 测量抑菌圈直径, 挑取抑菌圈直径与菌落直径比较大的菌株再进行平板划线分离, 选取单个菌落接至试管斜面保存, 然后, 逐一测定菌株的Nisin 效价。
这样便筛选出产Nisin 的乳酸链球菌菌株。
若想获取高产菌株, 可对原始菌株再进行诱变处理。
1.2 培养基和培养条件不同的乳酸链球菌株,其Nisin 的效价也有显著的变化,所适应的发酵条件也各有所不同,国内外这方面的研究较多,综合来看,在C 源上,最适合的主要为蔗糖和可溶性淀粉,其添加量随菌株的不同也各有所不同。
最适N 源,主要为酵母膏,添加量1 %左右,另外酵母膏及吐温80对细胞的生长及Nisin 的产生均有利。
最适P 源普遍认为KH2PO4最合适,添加量一般≤5 % ,使用KH2PO4主要有两方面优点:即可创造良好的pH环境;可提高Nisin 的产生。
乳酸链球菌素的研究进展摘要:本文介绍了乳酸链球菌素(Nisin)的分子结构、性质、抗菌机理和生产的研究进展;综述了乳酸链球菌素在食品工业中的应用现状,并对其应用前景进行展望,以期为乳酸链球菌素的进一步研究提供参考.关键词:乳酸链球菌素,抗菌机理,食品工业,应用Abstract:Nisin is an antibacterial multipeptide produced by certain strain of Lactococcus lactis.It is a high efficiency and nopoisonous effect natural biopreservative.This paper comprehensive described research exploitation and progress about produce and applies of nisin.Key words:nisin;preservative;research and progress乳酸链球菌素(Nisin)是世界上公认安全的防腐剂,是一种由微生物代谢所产生的具有很强杀菌作用的天然代谢产物。
乳酸链球菌素本身具有许多优良性质:首先,容易被人体消化道中的一些蛋白酶和胰蛋白酶所降解,不会在体内蓄积而引起不良反应,并且对食品的色、香、味等无不良影响。
使用它还可以降低杀菌温度,减少热处理时间,因此能改进食品的营养价值、风味、结构、颜色等性状,同时还可节省能耗。
Nisin本身具有热稳定性,并耐酸、耐低温贮藏,Nisin 作为一种理想的天然防腐剂获得越来越广泛的应用1、乳酸链球菌素的研究现状1.1乳酸链球菌素的分子结构Nisin)亦称乳酸链球菌肽或音译为尼辛,是目前最常用的生物防腐剂,它是乳酸链球菌产生的一种多肽物质,由34个氨基酸残基组成。
分子式为C143H228N42037S7,分子量为3510。
高效液相色谱仪法检测乳酸链球菌素含量的研究胡小立;王淑霞;郭向阳;卢珊珊;霍巍【摘要】乳酸链球菌素效价检测法有琼脂扩散法、显色法和酶联免疫吸附法等,前两种方法检测周期长,操作过程复杂,结果误差大;酶联免疫吸附法灵敏度高,检测准确快速,但前期需制备免疫原、多克隆抗体,周期长,成本高.为提高检测效率,节约成本,本实验建立了高效液相色谱仪法快速检测乳酸链球菌素含量(效价)的方法.本法在乳酸链球菌素质量浓度1~20mg/mL范围内线性关系良好,其回归方程为Y=340.118973x +35.202113,相关系数为r2 =0.99973,检出限为0.5mg/mL,样品回收率达90%以上.本实验建立的分析方法简便快捷、具有较好的灵敏度和可靠性,可用于乳酸链球菌素的定量分析.【期刊名称】《肉类工业》【年(卷),期】2019(000)004【总页数】6页(P43-48)【关键词】乳酸链球菌素;高效液相色谱仪法;含量;效价;色谱柱【作者】胡小立;王淑霞;郭向阳;卢珊珊;霍巍【作者单位】双汇集团技术中心河南漯河462003;双汇集团技术中心河南漯河462003;双汇集团技术中心河南漯河462003;双汇集团技术中心河南漯河462003;双汇集团技术中心河南漯河462003【正文语种】中文天然保鲜剂具有无毒、安全、价格合理、环保、抗菌性强等特点,天然保鲜剂的开发研究深受科学家的重视。
乳酸链球菌素是由乳酸链球菌产生的一种天然食品防腐剂,乳酸链球菌素(Nisin)是由三十多个氨基酸残基组成的多肽,可抑制肉毒梭菌、单增李斯特菌属和大多数革兰氏阳性细菌,并对芽孢杆菌的孢子有强烈的抑制作用[1~6],乳酸链球菌素通过降低腐败菌细胞膜磷脂数量,抑制细胞膜孔道的形成,阻碍膜内外的信息与能量传递,破坏细胞膜结构,进而抑制腐败菌生长[7]。
乳酸链球菌素食用后,在人体生理pH条件和α-胰凝乳蛋白酶作用下很快水解成氨基酸,不会改变人体肠道内正常菌群,也不会产生如其它抗菌素所出现的抗性问题,更不会与其它抗菌素出现交叉抗性,因此对人体安全无毒副作用,是一种安全、绿色、环保的防腐剂[8~11]。
广谱乳酸菌素的研究牟光庆;李霞;李慧;霍贵成【期刊名称】《食品科学》【年(卷),期】2008(029)011【摘要】研究的主要目的是筛选产广谱乳酸菌素的乳酸菌菌株,并将其产生的乳酸菌素进行提取和纯化研究.实验从多种材料中筛选出22株乳酸菌,采用牛津杯法选出抑菌活性最高的乳酸菌B9,该菌株经菌种鉴定为植物乳杆菌.乳酸菌B9发酵液的抑菌圈直径为22.19mm,经硫酸铵盐析、透析脱盐、DEAE-52离子柱层析和Sephadex G-25凝胶柱层析后的抑菌圈直径分别为19.54、23.46、25.32、25.76mm.采用高效液相色谱进行纯度检测,得到一个峰,说明该菌株发酵所产细菌素经一系列提取纯化操作后,纯度得到很大提高.此菌株产生的乳酸菌素不仅对革兰氏阴性菌如大肠杆菌有较强抑制作用,而且对革兰氏阳性菌如金黄色葡萄球菌也有较强的抑制作用,是一种广谱乳酸菌素.【总页数】4页(P469-472)【作者】牟光庆;李霞;李慧;霍贵成【作者单位】东北农业大学乳品科学教育部重点实验室,黑龙江哈尔滨,150030;大连工业大学生物与食品工程学院,辽宁大连,116034;大连工业大学生物与食品工程学院,辽宁大连,116034;大连工业大学生物与食品工程学院,辽宁大连,116034;东北农业大学乳品科学教育部重点实验室,黑龙江哈尔滨,150030【正文语种】中文【中图分类】TS201.3【相关文献】1.广谱哲学的奠基之作——《广谱哲学探索》研究札记 [J], 崔浩;2.辩证唯物论与广谱哲学关于数理哲学的比较研究——从数理哲学角度解读《广谱哲学浅说》 [J], 左卫兵;3.产广谱乳酸菌素乳酸菌的选育 [J], 赵耀;李玲;刘飞扬;罗思芹;曹珂珂4.广谱哲学的奠基之作——《广谱哲学探索》研究札记 [J], 崔浩5.产广谱乳酸菌素菌株的选育、鉴定及其发酵特性研究 [J], 赵鑫锐;张书祥因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
乳酸链球菌素抑菌效果的研究
侯革非;何仁
【期刊名称】《广西工学院学报》
【年(卷),期】2001(012)004
【摘要】本文探索了不同pH值、不同菌株、菌量等参数对乳酸链球菌素(即Nisin)抑菌效果的影响,从而为工业应用提供了理论依据.
【总页数】3页(P63-65)
【作者】侯革非;何仁
【作者单位】广西工学院轻化系,;广西工学院轻化系,
【正文语种】中文
【中图分类】TS261.13
【相关文献】
1.乳酸链球菌素(Nisin)抑菌作用及其抑菌机理的研究 [J], 吕淑霞;白泽朴;代义;冯江波;黄益
2.内酯型槐糖脂与乳酸链球菌素对金黄色葡萄球菌的抑菌活性比较及联合抑菌效果研究 [J], 吕志飞;连战;王如娜;冯昱宁;陈静;刘新利
3.乳酸链球菌素复配后抑菌效果研究 [J], 金明晓;王陆玲;宋阳成;陈雨亭
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5.乳酸链球菌素抑菌机理及在食品保鲜中的研究进展 [J], 王佳宇;胡文忠;管玉格;于皎雪;赵曼如
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乳酸链球菌素的研究和应用
李科德;韩木兰;柏建玲
【期刊名称】《微生物学通报》
【年(卷),期】2002(029)004
【摘要】综述了一种新型天然食品防腐、保鲜剂-乳酸链球菌素的研究开发进展,主要从乳酸链球菌素的性质、作用机理、使用的安全性、活力单位的测定、作为食品添加剂的优缺点、在食品方面的用途及工业化生产现状等方面进行了探讨,以便我国更好地研究开发和利用这一生物工程产品造福食品加工业.
【总页数】3页(P102-104)
【作者】李科德;韩木兰;柏建玲
【作者单位】广东省微生物研究所,广州,510070;广东省微生物研究所,广
州,510070;广东省微生物研究所,广州,510070
【正文语种】中文
【中图分类】Q93
【相关文献】
1.乳酸链球菌素及其在食品中的应用研究进展 [J], 高蕾蕾;李迎秋
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5.乳酸链球菌素及其在食品中的应用研究进展 [J], 罗林根; 朱明扬; 黄谦; 刘剑波
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Sephadex G-25对乳酸链球菌素溶液脱盐的研究陈娟;郑玉果;赵波;许炜;赵文杰;朱宝泉【摘要】Objective To study the process of gel filter desalination of nisin. Methods The sample load, sample volume, flowing rate and the ratio of height to diameter of Sephadex G-25 bed on the effect of desalination were compared. Results The optimum conditions for desalination of nisin: sample load 7*104 IU per milliliter gel, ' the sample volume O.lmL/mL gel, the ratio of height to diameter of bed 15:1, with flow tote of pH3.45 acetic acid buffer solution 0.6mL/min. On this condition, the desalination yield and recovery of nisin were both above 90%. Conclusion Sephadex G-25 can separate nisin and salt effectively.%目的研究乳酸链球菌素的凝胶过滤脱盐法.方法比较在Sephadex G-25柱上加样量、加样体积、洗脱流速和高径比对脱盐效果的影响.结果确定了乳酸链球菌素的最佳脱盐工艺为:色谱柱高径比15∶1,加样体积为每毫升凝胶0.1mL料液、加样量为每毫升凝胶7×104IU、用pH3.45的醋酸缓冲溶液在0.6mL/min流速下洗脱.在此条件下,乳酸链球菌素的脱盐收率和回收率都在90%以上.结论 Sephadex G-25能有效的将乳酸链球菌素和盐分离.【期刊名称】《中国抗生素杂志》【年(卷),期】2012(037)003【总页数】4页(P212-215)【关键词】乳酸链球菌素;Sephadex G-25;脱盐【作者】陈娟;郑玉果;赵波;许炜;赵文杰;朱宝泉【作者单位】中国医药工业研究总院上海医药工业研究院,创新药物与制药工艺国家重点实验室,上海,200040;中国医药工业研究总院上海医药工业研究院,创新药物与制药工艺国家重点实验室,上海,200040;中国医药工业研究总院上海医药工业研究院,创新药物与制药工艺国家重点实验室,上海,200040;中国医药工业研究总院上海医药工业研究院,创新药物与制药工艺国家重点实验室,上海,200040;中国医药工业研究总院上海医药工业研究院,创新药物与制药工艺国家重点实验室,上海,200040;中国医药工业研究总院上海医药工业研究院,创新药物与制药工艺国家重点实验室,上海,200040【正文语种】中文【中图分类】R978脱盐是样品精制过程中常用的一种方法,很多实验如萃取、盐析、疏水层析和树脂分离等可能残留有盐类,这将影响以后的纯化,降低产品的重量纯度。