多重耐药大肠埃希菌产β-内酰胺酶及耐药表型分析

大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶的检测和耐药分析【关键词】青霉素类超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）是指由质粒介导的能水解所有青霉素类、头孢菌素类和单酰胺类氨曲南的一类酶，它由质粒介导可在菌株间转移和传播，部分产ESBLs菌株不但对β-内酰胺类抗菌药物耐药，而且同时对氨基糖苷类和氟喹诺酮类耐药，因此给临床抗感染治疗带来很大的困难。

大肠埃希菌是引起院内感染的常见病原菌同时又是产ESBLs的代表菌种，为了解其在本院的发生率及耐药情况，作者对分离的393株大肠埃希菌进行产ESBLs的检测，同时做了抗生素的耐药分析，结果报告如下。

1 资料与方法1.1 菌株来源从2005年1月至2006年12月住院患者的痰、尿、分泌物等标本分离的大肠埃希菌393株，其中103株为ATB仪器专家系统确定的ESBLs耐药表型和可疑表型, 从-20℃冰库中取出用40%甘油肉汤保存的菌株复溶。

标准菌株为大肠埃希菌ATCC25922、肺炎克雷伯菌ATCC700603（产ESBLs菌株），均购自卫生部临床检验中心。

1.2 仪器与试剂ATB express 自动细菌鉴定仪和药敏系统、ATB Plus EXPERT、MH药敏培养基均购自法国生物梅里埃公司，ESBLs检测纸片为杭州天和微生物试剂公司产。

1.3 细菌鉴定和药敏试验按照《全国临床检验操作规程》(第二版)分离培养临床标本，使用ATB仪器进行菌种鉴定；药敏试验采用配套的（ATB G-5 2000版）药敏卡。

1.4 产ESBLs的检测仪器法检测和K-B法检测。

产ESBLs确证试验采用NCCLS 推荐的纸片确证法（头孢噻肟，头孢噻肟/克拉维酸；头孢他啶，头孢他啶/克拉维酸）。

2 结果2.1 产ESBLs菌标本来源科室分布见表１。

表１产ESBLs大肠埃希菌的标本来源科室分布(略)2.2 检测产ESBLs菌结果ATB仪器法监测产ESBLs菌，阳性90株；可疑3株，K-B法确证试验结果：单以CTX为底物组检出产ESBLs阳性菌58株，单以CAZ为底物组检出产ESBLs阳性菌5株，两种底物同时检出产ESBLs 阳性菌20株，共83株(ATB法阳性90株中确证80株，可疑13株中确证3株)。

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌临床分布及耐药性分析闫妹姝，陶晓明，华正祥，宗春光摘要 目的：研究承德医学院附属医院大肠埃希菌的临床分布，分析其对常见抗菌药物的耐药性，为正确掌握细菌耐药的发展趋势、临床合理应用抗生素提供理论依据。

方法：收集大肠埃希菌，采用美国临床和实验室标准协会（CLSI ）推荐的表型确证实验，获得产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs ）大肠埃希菌。

所有菌株的鉴定及药敏实验均由仪器VITEK2完成。

结果：674株主要来源于尿标本45%，痰标本29.7%，血液标本14.3%，其他的脓液、胸腹水、分泌物等占11%。

产酶菌株364株与非产酶菌株310株进行比较，对于统计分析的19种抗菌药物除亚胺培南、美罗培南、复方新诺明对比组间差异无统计学意义外，其他抗生素对比组间差异有统计学意义（P <0.01），产酶菌株对于氨苄西林、哌拉西林、氨苄西林/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、头孢唑林、头孢呋辛、头孢克肟、头孢他啶、头孢曲松、头孢噻肟、头孢吡肟、头孢西丁、阿米卡星、庆大霉素、环丙沙星、左氧氟沙星的耐药率明显高于非产酶菌株。

结论：大肠埃希菌的耐药性已经很严重，尤其是产酶菌株的耐药率已经很高，应严格加强大肠埃希菌耐药性的监测，防止耐药菌株在院内传播和流行。

关键词：超广谱β-内酰胺酶；大肠埃希菌；耐药性中图分类号：R446.5 文献标识码：A 文章编号：1007-6948(2018)05-0609-04doi ：10.3969/j.issn.1007-6948.2018.05.018Clinical Distribution and Drug Resistance Analysis of Extended Spectrum β-Lactamases Producing Escherichia Coli YAN Mei-shu, TAO Xiao-ming, HUA Zheng-xiang, et al. Affiliated Hospital of ChengdeMedical College, Chengde (067000), ChinaAbstract: Objective To study the clinical distribution of Escherichia coli in the Affiliated Hospital of Chengde Medical College, analyze the drug resistance of common antibiotics, and provide a theoretical basis for the proper development of antibiotic resistance and clinical rational application of antibiotics. Methods Escherichia coli was collected, and the extended spectrum β-lactamase (ESBLs)-producing Escherichia coli was obtained by CLSI-recommended phenotypic confirmation. The identification and drug sensitivity test of all strains were performed by VITEK2. Results Escherichia coli (674 strains) isolated from outpatients and inpatients in our hospital were mainly from urine samples (45%), followed by 29.7% of sputum specimens, 14.3% of blood samples, and some other pus, pleural effusion and secretions accounted for 11%. The 364 strains of enzyme-producing strains were compared with 310 strains of non-enzyme-producing strains. For 19 antimicrobial drugs, there were significant differences in the contrast groups except imipenem, meropenem and cotrimoxazole, the resistance rates of enzyme-producing strains against ampicillin, piperacil, ampicillin/sulbactin, piperacillin/tamazobatam, cefazolin, cefuroxime, ceftazine, ceftriaxone, ceftrixone, cefotaxime, cefpime, cefoxidine, amicacin, cefriamycin, macrocycline, salfloxacin and levofloxacin were higher than those of non-enzyme-producing strains (P <0.01). Conclusion The antibiotic resistance of Escherichia coli in our hospital is very serious, especially the resistance rate of the enzyme-producing strain is very high, and the drug resistance of Escherichia coli should be strictly strengthened to prevent the drug-resistant strains from spreading and popularizing in the hospital.Key words: Extended spectrum β-lactamases; Escherichia coli; drug resistance自从1994年第1例SHV 型超广谱β-内酰胺酶（SHV-extended spectrum β-lactamases ，SHV-ESBLs ）在中国报道以后，其发生率一直上升，如承德医学院附属医院检验科（承德 067000）通信作者：闫妹姝，E-mail ：175021204@何治疗产ESBLs菌已是临床一大难点。

.论著.大肠埃希菌产超广谱内酰胺酶的耐药性分析郭琼杰，杨柳，杨晨，王娜，王珊珊［摘要］目的分析大肠埃希菌(Escherichia coli,E.coli)产超广谱B-内酰胺酶(extended spectrum B-lactamases, ESBLs)的耐药性。

方法选取2017年6月〜2019年6月秦皇岛市第一医院收治的非重复大肠埃希菌感染80例患者作为研究对象，分别对其感染标本中的细菌进行检验、分离培养，运用常规鉴定技术鉴定细菌并进行药敏试验，使用纸片扩散法(K-B paper diffusion method,K-B法)检测E.coli,使用K-B法和国家临床实验室标准委员会(national committee for clinical laboratory standards,NCCLS)建议的双纸片协同试验进行ESBLs检测，统计E.coli ESBLs阳性株数并分析其耐药性。

结果非重复大肠埃希菌感染病例80例患者中E.coli ESBLs阳性株23株，占比28.75%,阴性株57例，占比71.25%。

E.coli ESBLs阳性株主要来源于尿液标本，之后依次为穿刺液、痰液、血液及引流液。

对E.coli ESBLs阳性株进行耐药性分析，结果显示亚胺培南的体外活性最好，耐药率最低为0.00%,其次为阿米卡星4.35%、头孢替坦4.35%、厄他培南4.35%、左氧氟沙星4.35%、头孢他啶4.35%、哌拉西林/他唑巴坦4.35%、妥布霉素4.35%；该试验中细菌对复方新诺明的耐药性最高为95.65%,其次为阿莫西林/克拉维酸91.30%、氨节西林91.30%、氨曲南86.96%、头孢曲松86.96%。

结论E.coli ESBLs对复方新诺明、阿莫西林/克拉维酸、氨节西林、氨曲南、头孢曲松有着较强的耐药性，对亚胺培南、阿米卡星、头孢替坦、厄他培南、左氧氟沙星、头孢他啶、哌拉西林/他唑巴坦、妥布霉素等药物较为敏感，临床治疗时应严格根据细菌分布特点结合其耐药情况进行合理给药。

大肠埃希菌耐药性分析及超广谱β－内酰胺酶基因检测摘要】目的了解自贡市第一人民医院临床分离的大肠埃希菌的耐药情况及超广谱β－内酰胺酶（ESBLs）基因的存在状况。

方法对2009年8月～2010年8月临床分离的154株大肠埃希菌用表型确证试验检测ESBLs，用Kirby-Bauer琼脂扩散法做药物敏感试验，并采用聚合酶链反应（PCR）检测SHV、CTX-M基因。

结果 154株大肠埃希菌中耐药率最高的是氨苄西林（83.12%），其次是头孢唑林（65.58%），亚胺培南、美罗培南全敏感；ESBLs菌株检出率为51.95％；基因检测结果为SHV 5株 CTX-M 70株，SHV+CTX-M 3株。

结论该院大肠埃希菌株对β－内酰胺药物表现出较高的耐药率，且ESBLs基因检出率也较高，故临床应加强对大肠埃希菌耐药性及耐药基因的监测，严格掌握抗生素的使用指征，防止耐药菌株的传播流行。

【关键词】大肠埃希菌耐药性超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）基因大肠埃希菌是临床分离的革兰阴性杆菌中最常见的菌种，它作为重要的条件致病菌广泛存在于自然界。

尤其是超广谱β－内酰胺酶(extend spectrum beta-lactamases，ESBLs)的出现引起了医院感染的爆发流行。

本研究收集2009年8月～2010年8月本院临床分离的154株大肠埃希菌，通过表型确证试验、药物敏感试验及PCR技术，了解本地区大肠埃希菌的耐药情况及超广谱β－内酰胺酶（ESBLs）基因的存在状况。

1 材料和方法1.1 菌株实验菌株：154株大肠埃希菌临床分离株（不含同一病例相同部位重复分离株）来自自贡市第一人民医院2009年8月-2010年8月期间感染大肠埃希菌的患者。

其中泌尿系统感染84例，呼吸道感染30例，全身感染19例，外科切口感染13例，其他感染8例；全部菌株均重新经VITEK系统（BioMerieux，法国）鉴定确认。

标准菌株：大肠埃希菌ATCC25922 （购自杭州天和微生物试剂有限公司）1.2 试剂抗生素药敏纸片：氨苄西林、头孢唑啉、头孢吡肟、头孢噻肟、头孢他啶、头孢西丁、庆大霉素、阿米卡星、左氧氟沙星、亚胺培南、美罗培南、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、头孢他啶/克拉维酸、头孢噻肟/克拉维酸。

产超广谱β－内酰胺酶大肠埃希菌的耐药性分析目的：研究本院产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的耐药性。

方法：用纸片扩散法检测了370株大肠埃希菌做了ESBLs的检测并分析对抗生素的耐药性。

结果：产ESBLs的阳性率总试验菌株数为370株，170株产ESBLs阳性率为40.48％。

结论：治疗产ESBLs大肠埃希菌引起的感染的首选药物为亚胺培南和头孢哌酮，其次为哌拉西林。

标签：大肠埃希菌；产超广谱β-内酰胺酶；耐药性[文献标识码]A[文章编号]1674-4721(2009)03(b)-034-01现就本院产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的耐药性分析如下：1资料与方法1.1菌株来源2006年6月-2008年6月，收集临床分离产ESBLs大肠埃希菌170株，均分离于医院细菌室，前期经表型确证实验证实为产ESBLs菌株。

质控菌株大肠埃希菌ATCC25922由本省细菌耐药监控中心提供。

方法参照NCCLS2004年推荐标准，采用琼脂平皿对倍稀释法进行MIC测定。

1.2试剂与仪器Mueller2Hint 0n(M214)培养基购自英国0xiod公司。

电热恒温培养箱为上海精宏实验设备有限公司产品，气浴恒温振荡培养箱为江苏省金坛教学仪器厂产品，多点接种仪为英国AQSManufacturing公司产品，细菌浊度仪为Oxiod公司产品。

1.3抗生素用于MIC测定的抗生素如下：哌拉西林(Pip，华北制药)，哌拉西林—他唑巴坦(PTZ，Wyeth2 Ayerst公司，USAl，头孢他啶(CAZ，葛兰素史克苏州制药公司)，头孢曲松钠(CRO，上海罗氏制药公司)，头孢噻肟钠(CTX，湘北威尔曼制药公司)，头孢吡肟(FEP，中美上海施贵宝公司)，头孢哌酮钠一舒巴坦钠fSCF，辉瑞制药有限公司)，阿米卡星(AMK，上海旭东海普药业有限公司)，左氧氟沙星(LVFX，浙江医药股份公司)，亚胺培南一西司他丁钠aMP，杭州默沙东制药有限公司)，亚胺培南(MER，住友制药株式会社)，头孢西丁(FOX，海口市制药厂有限公司)。

大肠埃希菌药敏结果和产超广谱β-内酰胺酶菌株的耐药基因分析摘要】目的对我院2011年上半年分离出的147株大肠埃希氏菌药敏及耐药基因型进行分析，为临床合理应用抗生素，减少耐药菌株的出现提供参考依据。

【方法】采用梅里埃公司的VITEK2全自动微生物分析仪，对标本进行细菌鉴定和药敏分析。

对产生超广谱β—内酰胺酶（Extended-spectrum β-lactamase ，ESBLs）的大肠埃希菌确证实验，采用美国临床检验室标准化委员会（ Clinical and Laboratory Standards Institude,CLSI）推荐的纸片扩散法，进行确证实验。

耐药基因采用多重PCR检测鉴定。

【结果】147株大肠埃希氏菌，ESBLs菌株有71株，百分比为48.1%。

对71株ESBLs大肠埃希氏菌的质粒进行PCR扩增，显示29株CTX-M基因阳性，检出率为40.8%；TEM 基因型菌株25株，所占百分比35.2%；SHV基因型菌株17株，所占百分比23.9%型；OXA基因型菌株11株，所占百分比15.4%。

【结论】本地临床分离大肠埃希菌对抗生素敏感性，存在有一定的地域差别，这可能跟不同地区用药习惯用药历史有关。

本地区ESBLs大肠埃希菌具有较高的CTX-M型ESBLs检出率。

是本地区产ESBLs大肠埃希菌流行的的主要耐药基因型。

【关键词】大肠埃希菌超广谱b-内酰胺酶基因型 CTX-M 细菌耐药性大肠埃希菌是院内感染监测的主要病原菌。

由于抗生素在各地区各个方面的广泛应用，导致大肠埃希氏菌对多种抗生素产生耐药。

在这些耐药的大肠埃希氏菌中，产生超广谱的β—内酰胺酶类的菌株呈递年增长。

而超广谱β-内酰胺酶是导致肠杆菌科细菌对第三代头孢菌素耐药的最常见机制，由于其耐药基因的多样性和传导性，使得医院感染的细菌的耐药性越来越复杂，越来越严重。

而且，耐药基因也在各地区存在差异。

现对本院2011年上半年临床分离的大肠埃希菌，耐药性和ESBLs耐药基因型进行检测和分析，了解大肠埃希氏菌的耐药性和本地区ESBLs耐药基因的分型。

大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶基因型与耐药相关性分析王慧玲;庚俐莉;杜雅洁【期刊名称】《大连医科大学学报》【年(卷),期】2007(29)6【摘要】[目的]对临床分离的大肠埃希菌产超广谱β内酰胺酶(extended-spectrum β-lactamases,ESBLs)株的发生率、基因类型及其对抗菌药物的耐药相关性进行分析,为临床治疗产ESBLs大肠埃希菌感染提出建议.[方法]常规分离临床标本,经API系统鉴定.按照NCCLs推荐的纸片扩散法表型确证实验进行ESBLs检测.采用PCR方法对细菌进行耐药基因扩增.采用二倍琼脂稀释法测定抗菌药物对所有菌株的最低抑菌浓度(MIC).[结果]84株大肠埃希菌中产ESBLs30株,占35.71%.30株表型确证实验ESBLs阳性菌中,23株菌有至少一组引物扩增呈阳性.基因型构成以CTX-M型为主.最低抑菌浓度结果,产ESBLs大肠埃希菌对亚胺培南敏感率为100%;对含酶抑制剂的复合β-内酰胺类抗菌药物哌拉西林/他唑巴坦敏感率为76.67%;对头孢噻肟的耐药率为83.33%,对头孢他啶耐药率为46.67%.[结论]本实验ESBLs产生株基因型以CTX-M型为主,其对含酶抑制剂的复合β-内酰胺类抗菌药物哌拉西林/他唑巴坦相对敏感,对头孢他啶耐药率比头孢噻肟相对低,亚胺培南是最敏感的抗菌药物.【总页数】4页(P580-583)【作者】王慧玲;庚俐莉;杜雅洁【作者单位】大连医科大学,第二临床学院,呼吸科,辽宁,大连,116027;大连市中心医院,呼吸科,辽宁,大连,116033;贵州铝厂职工医院,内科,贵州,贵阳,550038【正文语种】中文【中图分类】R446【相关文献】1.产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌耐药性及基因型分析 [J], 李云慧;翟如波;张昊;吴秋梅;邱广斌2.儿科产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌耐药基因型研究 [J], 曲莉;李明成;白雪松3.不同民族新生儿产超广谱13内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性及基因型分布研究 [J], 张坚;张文利4.产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的基因型分型及耐药研究分析 [J], 向祖祥5.产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌耐药性及基因型分析 [J], 周杰;徐康立;张鲍虎;张莉;杨书才;张扬因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶的检测及耐药性分析摘要】目的：检测肺炎克雷伯菌以及大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶及其耐药性。

方法：在我院门诊以及住院患者胸腔积液、胆汁、脓液、分泌物、中段尿以及胆汁、痰、血液等标本中分离出的肺炎克雷伯菌244株和大肠埃希菌311株，全部菌株均为非重复菌株。

依照《全国临床检验操作规程》鉴定细菌及药敏试验，所用质控菌株为肺炎克雷伯菌以及大肠埃希菌。

结果：肺炎克雷伯菌共计分离出244株，检出155株肺炎克雷伯菌ESBLs阳性菌，检出率为63.52%，大肠埃希菌共计分离出311株，检出162株大肠埃希菌ESBLs阳性菌，检出率为52.09%。

结论：肺炎克雷伯菌以及大肠埃希菌产ESBLs具有较高发生率，且对多种抗生素存在多重耐药以及交叉耐药性，对产ESBLs菌株及时进行报告并确保临床用药的合理性能够使细菌耐药性产生得到延缓，可使耐药菌株播散得到有效控制。

【关键词】大肠埃希菌；肺炎克雷伯菌；超广谱β-内酰胺酶；耐药性【中图分类号】R446.5 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2018）26-0076-02超广谱β-内酰胺酶主要通过质粒介导，可使青霉素类以及单环β-内酰胺类以及头孢菌素类抗菌药物产生耐药性，能够在菌株间传播以及转移，部分超广谱β-内酰胺酶既能够对β-内酰胺类药物产生耐药性同时也会对喹诺酮类药物以及氨基糖苷类药物产生耐药性，会导致治疗难度加大[1]。

此次研究旨在分析2016年9月至2018年3月我院自临床标本中分离出的肺炎克雷伯菌以及大肠埃希菌耐药性，报道如下。

1.资料与方法1.1 基线资料在我院门诊以及住院患者胸腔积液、胆汁、脓液、分泌物、中段尿以及胆汁、痰、血液等标本中分离出的肺炎克雷伯菌244株和大肠埃希菌311株，全部菌株均为非重复菌株。

1.2 方法依照《全国临床检验操作规程》鉴定细菌及药敏试验，所用质控菌株为肺炎克雷伯菌以及大肠埃希菌。