碱性蛋白酶

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碱性蛋白酶检测
碱性蛋白酶（Alkaline protease）是属于内肽酶中的一种丝氨酸蛋白酶类，在碱性环境下作用于肽键，可将蛋白质水解为氨基酸、多肽以及游离氨基酸，还能够水解酯键、酰胺键，具有转酯及转肽的功能，广泛应用于酶洗涤剂工业、食品加工、酿造、医药和皮革加工等领域。

迪信泰检测平台采用生化法，结合相应的酶类的试剂盒可以高效、精准的检测碱性蛋白酶的活性变化。

此外，我们还提供其他酯酶类的检测服务，以满足您的不同需求。

生化法测定碱性蛋白酶样本要求：
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。

周期：2~3周。

项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告，报告包括：
1. 实验步骤（中英文）。

2. 相关参数（中英文）。

3. 图片。

4. 原始数据。

5. 碱性蛋白酶活性信息。

迪信泰检测平台可根据需求定制其他物质测定方案，具体可免费咨询技术支持。

洗涤用酶制剂的种类和作用
目前常用的酶制剂有四类:蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶。

一、碱性蛋白酶能使蛋白质水解成可溶于水的小分子物质。

衣物上附着的血渍、奶渍、酱油渍等污物，都会在碱性蛋白酶的作用下酶解，结构松弛、膨胀解体，稍加搓洗，最终污迹会从衣物上脱落,碱性蛋白酶主要针对的是蛋白质污垢。

二、碱性淀粉酶能使淀粉迅速分解为麦芽糖、葡萄糖等可溶性成分，因此淀粉酶用于洗涤配方中用以除去含淀粉的污垢,如来自面条、巧克力等的污垢。

三、碱性纤维素酶本身不能去除衣物上的污垢，它的作用是使纤维的结构变得蓬松，从而使渗，入到纤维深处的尘土和污垢能够与洗衣粉充分接触，从而达到更好的去污效果。

碱性纤维素酶可以去除在洗涤和穿着时由于磨损在棉纤维上所产生的微纤维,从而使棉纤维恢复原有的光滑状态。

需要注意的是，如果过量使用，也能损伤棉、麻等天然纤维织物，因此，要做好添加量的测试。

四、碱性脂肪酶可以将脂肪水解为甘油和游离的脂肪酸等，这些都比原来的脂肪易溶解，食品中的油渍、人体皮脂等，通过在洗涤剂中加入去除含脂肪的碱性脂肪酶，可快速达到去除脂肪污垢。

碱性蛋白酶使用方法
碱性蛋白酶是一种常用的酶类试剂，广泛应用于生物学、生物化学和分子生物学等领域。

它能够在碱性条件下高效催化蛋白质水解反应，常用于蛋白质纯化、酶切、免疫学实验等。

本文将介绍碱性蛋白酶的使用方法，希望能够对使用者有所帮助。

1. 确定使用条件。

在使用碱性蛋白酶前，首先需要确定实验所需的碱性条件。

一般来说，碱性蛋白酶的最适作用pH为8.0-9.5，因此在实验中需要选择适合的缓冲液来维持碱性条件。

2. 酶解反应条件。

将待酶解的蛋白样品与适量的碱性蛋白酶按照比例混合，通常在室温下进行反应。

酶解的时间可以根据需要进行调整，一般情况下15-60分钟即可完成反应。

3. 反应终止。

在酶解反应结束后，需要及时终止反应以防止酶的过度作用。

一般常用的方法是加入蛋白质酶抑制剂或直接加热至95℃以上，使
酶失活。

4. 样品处理。

酶解后的样品可以根据实验需要进行进一步处理，如进行电泳
分析、质谱分析、免疫印迹等。

5. 储存条件。

碱性蛋白酶通常以粉末形式供应，应密封保存于-20℃以下，避
免受潮和高温。

在使用过程中，应尽量避免长时间暴露于室温下。

6. 安全注意事项。

在使用碱性蛋白酶时，应注意避免吸入粉尘或接触皮肤和眼睛，避免误食。

使用过程中应佩戴口罩、手套和护目镜，避免产生粉尘。

总之，碱性蛋白酶是一种非常重要的酶类试剂，正确的使用方
法能够有效提高实验效率，获得准确的实验结果。

希望本文介绍的
使用方法能够对使用者有所帮助，祝实验顺利！。

碱性蛋白酶产品概述奥迪尔碱性蛋白酶是经原生质体诱变方法选育的枯草杆菌通过深层发酵、提取及精制而成的一种蛋白水解酶。

广泛应用于制革、丝绸、食品、医疗、酿造等行业。

产品原理碱性蛋白酶活性成分属于一种丝氨酸内切碱性蛋白酶，它能水解蛋白质分子肽链生成多肽或氨基酸，在有机溶剂中它还可催化多肽的合成。

产品特性1.温度范围：有效温度范围20-60℃，最适温度范围在35-45℃。

2.PH值范围：有效pH范围6-11，最适pH值范围9.5-10.5产品性状1.产品规格：固体100000u/g，200000u/g粉末（颗粒状）；液体100000u/ml液体酶pH（25℃）：7.0-9.0，容重：≤1.25g/ml；固体酶细度（0.4mm标准筛通过率）：≥80%。

2.酶活力定义：1g固体酶粉（或1ml液体酶），在40℃±0.2℃、pH10.5条件下，1min水解酪蛋白产生1μg酪氨酸，为1个酶活力单位，以u/g（u/ml）表示。

3.产品标准：执行中华人民共和国国家标准GB/T23527-2009应用方法1.碱性蛋白酶用于皮革加工具有简化工序、缩短周期、提高成品质量、增加的率、降低生产成本等优点。

用于浸水工序的加酶量为0.02-0.1%（按原料质量计，酶活力以10万u/ml计，下同），20-25℃作用12-20小时；用于皮革软化的加酶量为0.05-0.2%,35-38℃作用3-6小时；用于脱毛的加酶量为0.1-0.3%，20-35℃作用12-20小时。

以上使用pH均为9-11.2.碱性蛋白酶用于丝绸脱胶有丝素不受损伤、不起毛丝和蓬松的效果。

原料经过前处理，按0.8-2.4%加酶，pH9-11,40-50℃的条件下作用30-60min。

3.碱性蛋白酶用于软骨素生产，可有效提高收率和纯度。

原料在碱提取后，按照0.2-0.6%的添加量，pH8-10，温度40-50℃的酶解条件作用4-8小时。

4.碱性蛋白酶用于肝素钠的生产，可提高分子均一性和产品纯度。

2024年碱性蛋白酶市场发展现状简介碱性蛋白酶是一种特殊的酶类，其在碱性条件下具有较高的活性。

它具有广泛的应用领域，包括食品加工、洗涤剂生产、皮革加工等。

本文将重点关注碱性蛋白酶在市场中的发展现状，并分析其未来发展趋势。

市场规模碱性蛋白酶市场在过去几年呈现稳步增长的态势。

据市场研究报告显示，碱性蛋白酶市场规模在2019年达到了XX亿美元，并预计到2025年将达到XX亿美元。

这一增长主要受到食品和洗涤剂行业的推动。

市场驱动因素1. 食品加工业的增长随着全球人口的增加和经济的发展，食品加工业成为碱性蛋白酶市场的重要驱动因素。

碱性蛋白酶可以帮助食品加工企业提高生产效率、改善产品质量，并降低成本。

因此，在食品加工中广泛使用碱性蛋白酶已成为一种趋势。

2. 洗涤剂需求的增长洗涤剂是另一个主要的碱性蛋白酶市场驱动因素。

随着全球家庭用品消费水平的提高，洗涤剂的需求也相应增加。

碱性蛋白酶在洗涤剂中的应用可以提高清洁效果，改善衣物质地，因此备受消费者的喜爱。

3. 环保意识的增强在当前环境保护意识增强的背景下，碱性蛋白酶逐渐替代传统的化学清洁剂成为一种绿色清洁技术。

由于碱性蛋白酶是一种天然产物，具有较高的生物可降解性和低对环境的污染性，受到了环保主义者和政府的青睐。

市场障碍尽管碱性蛋白酶市场发展势头良好，但仍面临一些挑战。

1. 技术瓶颈尽管现有的碱性蛋白酶技术已经相对成熟，但仍然存在一些技术瓶颈。

例如，酶的稳定性和活性在不同的碱性条件下可能会受到影响，限制了其在某些应用领域的进一步推广。

2. 法规限制不同国家和地区对于碱性蛋白酶的使用存在不同的法规要求。

一些国家对酶类产品的安全性和影响进行了严格的评估和监管，这对业内企业提出了更高的要求和限制。

市场趋势1. 技术创新随着生物技术的不断进步，碱性蛋白酶的技术也在不断创新。

研究人员致力于开发更稳定、活性更高的碱性蛋白酶，以满足不同应用领域的需求。

未来，随着技术的进一步突破，碱性蛋白酶市场有望迎来更多发展机遇。

实验三. 碱性蛋白酶活力测定【实验目的】1. 掌握测定碱性蛋白酶活力的原理和酶活力的计算方法。

2. 学习测定酶促反应速度的方法和基本操作。

【实验原理】酶活力是指酶催化某些化学反应的能力。

酶活力的大小可以用在一定条件下它所催化的某一化学反应的速度来表示。

测定酶活力实际就是测定被酶所催化的化学反应的速度。

酶促反应的速度可以用单位时间内反应底物的减少量或产物的增加量来表示，为了灵敏起见，通常是测定单位时间内产物的生成量。

由于酶促反应速度可随时间的推移而逐渐降低其增加值，所以，为了正确测得酶活力，就必须测定酶促反应的初速度。

碱性蛋白酶在碱性条件下，可以催化酪蛋白水解生成酪氨酸。

酪氨酸为含有酚羟基的氨基酸，可与福林试剂（磷钨酸与磷钼酸的混合物）发生福林酚反应。

（福林酚反应：福林试剂在碱性条件下极其不稳定，容易定量地被酚类化合物还原，生成钨蓝和钼蓝的混合物，而呈现出不同深浅的蓝色。

）利用比色法即可测定酪氨酸的生成量，用碱性蛋白酶在单位时间内水解酪蛋白产生的酪氨酸的量来表示酶活力。

【实验材料】1.实验器材电热恒温水浴槽；分析天平；容量瓶；移液管；721分光光度计2.实验试剂(1)福林试剂：在1L容积的磨口回流瓶中加入50g钨酸钠(Na2WO4·2H2O)、125g钼酸钠(Na2MoO4·2H2O)、350ml蒸馏水、25ml 85％磷酸及50ml浓盐酸，充分混匀后回流10h。

回流完毕，再加25g硫酸锂、25ml蒸馏水及数滴液体溴，开口继续沸腾15分钟，以便驱除过量的溴，冷却后定容到500ml。

过滤，置于棕色瓶中暗处保存。

使用前加4倍蒸馏水稀释。

(2)1%酪蛋白溶液：称取酪蛋白1克于研钵中，先用少量蒸馏水湿润后，慢慢加入0.2mol/L NaOH 4ml，充分研磨，用蒸馏水洗入100ml容量瓶中，放入水浴中煮沸15分钟，溶解后冷却，定容至100ml，保存于冰箱内。

(3)pH10缓冲溶液：甲液（0.05mol/L硼砂溶液）：取硼砂(Na2B4O7·10H2O) 19克，用蒸馏水溶解并定容至1000ml。

碱性蛋白酶概述碱性蛋白酶是经细菌原生质体诱变方法造育的2709枯草杆微生物通过深层发酵、提取及精制而成的一种蛋白水解酶，属于一种丝氨酸脆外高碱性蛋白酶，它能水解蛋白质分子肽链生成多肽或氨基酸，具有较强的分解蛋白质的能力。

生产工艺是采用微滤超滤膜分离、喷雾干燥或真空冷冻干燥等先进技术，广泛应用于食品、医疗、酿造、丝绸、制革等行业。

碱性蛋白酶是目前市场上流行的洗涤添加剂，能大幅度提高洗涤去污能力，特别对血渍、汗渍、奶渍、油渍等蛋白类污垢,具有独特的洗涤效果。

碱性蛋白酶在技术上采用细菌原生质体诱变处理方法,从国内碱性蛋白菌生产菌2709枯草杆菌中研究选育出若干稳定高性能菌株,在后处理上,采用去渣盐析沉淀法,减少了蛋白酶的杂质含量和产品特有的气味，提高了溶解速度,与洗涤剂有更好的配伍性,延长了保质期。

碱性蛋白酶由上~海斯~诺~美~生物~医学~技术~服务中心~Z提供。

碱性蛋白酶性状碱性蛋白酶是由造育的地衣芽孢杆菌发酵而得，主要成分为枯草杆菌蛋白酶，是一种内切酶，催化部位为丝氨酸，分子量约为27300。

碱性蛋白酶外观为褐色粉末，有酵曲的特殊臭味，碱性蛋白酶使用条件适宜于在40-55℃、PH9-11的碱性条件下使用，超出以上范围酶的活力下降。

重金属离子和阳离子表面活性剂对其活力有抑制作用，应用中应避免。

碱性蛋白酶在蚕丝脱胶中的应用举例：设备：精练桶碱性蛋白酶1克/升，纯碱0.3克/升，温度45℃，60-90分钟编辑本段碱性蛋白酶保存及CAS 编号保存：5℃保藏，保质期一年；25℃储存，酶活保存期至少3个月以上CAS 编号：9014-01-1中性蛋白酶是由枯草芽孢杆菌经发酵提取而得的，属于一种内切酶，可用于各种蛋白质水解处理。

在一定温度、PH值下，本品能将大分子蛋白质水解为氨基酸等产物。

可广泛应用于动植物蛋白的水解，制取生产高级调味品和食品营养强化剂的HAP和HVP，此外还可用于皮革脱毛、软化、羊毛丝绸脱胶等加工。

实验四碱性蛋白酶活力的测定一、实验原理以酪蛋白为底物测定碱性蛋白酶的活力。

酪蛋白经蛋白酶作用后，会降解成相对分子质量较小的肽和氨基酸，在反应混合物中加入三氯醋酸溶液，相对分子质量较大的蛋白质和肽就沉淀下来，相对分子质量较小的肽和氨基酸仍留在溶液中。

溶解于三氯醋酸溶液中的肽的数量正比于酶的数量和反应时间。

因而采用Folin法测定上清液中肽的含量就可以计算酶的活力。

二、试剂和仪器试剂：0.1mol/L碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液（pH10）、5%三氯醋酸、1%酪蛋白溶液（称取5g酪蛋白置于500mL 0.1mol/L碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液（pH10）中，加热使其溶解）、0.4mol/L碳酸钠溶液、100μg/mL酪氨酸溶液、Folin试剂，稀释3倍使用仪器：水浴锅、721分光光度计（含比色皿）、秒表、常规玻璃仪器三、实验步骤1、酶液的萃取称取1g粗酶制剂置于研钵中，加少量缓冲液一起研磨，然后定容至100mL，从容量瓶中取出5mL酶液（视酶活而定）再定容至100mL，稀释后的酶液经滤纸过滤后得到澄清的酶液。

2、酶活力的测定样品管：取不同量的酶液（0.1~1.0mL：0.2mL、0.4mL、0.6mL），用0.1mol/L 碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液（pH10）（对应为0.8mL、0.6mL、0.4mL）补足体积到1.0mL，然后在每个样品管中再加入1mL预先在40℃保温的1%酪蛋白溶液，混匀，在40℃准确保温10min，加入2mL 5%三氯醋酸溶液，迅速摇匀，于室温静置半小时。

空白管：先在每支试管中各加入1.0mL 1%酪蛋白溶液和2.0mL 5%三氯醋酸溶液，摇匀后，再加入1.0mL的酶液，酶液浓度分别与对应的样品管相同，在40℃下准确保温10min，以下操作同样品管。

将酶反应混合物过滤后收集滤液，在1mL滤液中加5mL 0.4mol/L碳酸钠溶液和1mL Folin试剂，摇匀后在40℃恒温水浴中显色20 min，以相应的空白管中的反应液为对照，在680nm下测定样品管中反应液的吸光度。

碱性蛋白酶活力的测定1、实验原理蛋白酶在一定的温度与pH值条件下，水解酪素底物，产生含有酚基的氨基酸（如酪氨酸、色氨酸等），在碱性条件下，将福林试剂（Folin）还原，生成钼蓝与钨蓝，用分光光度法测定，计算其酶活力。

2、实验试剂2.1 福林试剂的制备于2000mL磨口回流装置中加入钨酸钠（Na2WO4·2H2O）100g、钼酸钠（Na2MoO4·2H2O）25g、水700mL、85%磷酸50mL、浓盐酸100mL，小火沸腾回流10h，取下回流冷却器，在通风橱中加入硫酸锂（Li2SO4）50g、水50mL和数滴浓溴水（99%），再微沸15min，以除去多余的溴（冷后仍有绿色需再加溴水，再煮沸除去过量的溴），冷却，加水定容至1 000mL。

混匀，过滤。

制得的试剂应呈金黄色，贮存于棕色瓶内。

使用溶液：1份福林试剂与2份水混合，摇匀。

2.2. 碳酸钠溶液（Na 2CO3）=0.4mol／l 称取无水碳酸钠42.4g，用水溶解并定容至1 000mL。

2.3. 三氯乙酸c（CCl 3·COOH）＝0.4mol／l 称取三氯乙酸65.4g，用水溶解并定容至1 000mL。

2.4. 氢氧化钠溶液（NaOH）＝0.5mol／l2.5. 盐酸溶液（HCl）＝lmol／l及0.lmol／l2.6. 硼酸缓冲溶液（pH10.5）甲液称取硼酸钠（硼砂）19.08g，加水溶解并定容至1 000mL。

乙液称取氢氧化钠4.0g，加水溶解并定容至1 000mL。

使用溶液：取甲液500mL、乙液400mL混匀，用水稀释至1 000mL。

上述各种缓冲溶液，均需用pH计校正。

2.7. 10g／L酪素溶液称取酪素1.000g，精确至0.001g，用少量0.5mol／L氢氧化钠溶液湿润后，加入适量的各种适宜pH值的缓冲溶液约80mL，在沸水浴中边加热边搅拌，直至完全溶解，冷却后，转入100mL容量瓶中，用适宜的pH值缓冲溶液稀释至刻度。