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【医学PPT课件大全】 体液蛋白质检验

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《体液蛋白质检验》PPT课件

《体液蛋白质检验》PPT课件

• 营养监测:
前白蛋白、白蛋白、视黄醇结合蛋白、转铁蛋白、铁蛋白
• 出 / 凝血疾病:
纤维蛋白原、AT3、纤溶酶原
• 贫血:
触珠蛋白、转铁蛋白、铁蛋白、可溶精性选P转PT铁蛋白受体
3
检验学部属于蛋白质的实验项目
生化室：总蛋白，白蛋白，球蛋白，载脂蛋白A1，载脂蛋
白B，前白蛋白，脂蛋白（a），高密度脂蛋白，低密度脂蛋 白，极低密度脂蛋白，血清蛋白电泳（白蛋白，α1、α2 、 β 、γ球蛋白），血尿β2微球蛋白，糖化血红蛋白，肌钙 蛋白-T，24小时尿蛋白定量，尿微量白蛋白，酶类。
蛋白质的分离
透析、沉淀、盐析、电泳、层析、超速离心
血浆蛋白质的分类
精选PPT
8
3、血浆蛋白质的分类
• 根据分离方法： ①盐析法：白蛋白和球蛋白两大类（各种蛋白
质的亲水性和所带的电荷均有差别。） ②电泳法（醋酸纤维素薄膜）：白蛋白、α1－
球蛋白 、 α2 － 球蛋白、 β －球蛋白、纤维 蛋白原、γ－球蛋白。
精选PPT
10
根据生理功能分类：
精选PPT
11
二、一些临床常检测血浆蛋白质
1、白蛋白（albumin , Alb)
肝实质细胞合成，分子量66 458，
半衰期15～19天，是血浆中含量最多的蛋白质，占40～60％。 在肝细胞中没有贮存。
•
分子结构1975年阐明，含585个氨基酸残基的单链多肽，
分子量66458，含17个二硫键（—S—S—），不含糖的组分。
精选PPT
28
7、 1抗胰蛋白酶（1-AT）
• 是具有蛋白酶抑制作用的一种急性时相反应蛋白，分子量 为5.5万，P1值4.8，含有10%-12%糖。在醋酸纤维薄膜 或琼脂糖电泳中泳动于α1区带，是这一区带的主要组分。 区带中的另2个主要组分；α1-酸性糖蛋白含糖量特别高， α1-脂蛋白含脂类特别高，因此蛋白质的染色都很浅。

第三章-体液蛋白质的检测PPT课件

第三章-体液蛋白质的检测PPT课件

抑免制疫剂应答
修胎饰儿凝剂期血蛋因白子
补体成分
胆固醇
免疫球蛋白
逆结转合运血
免疫球蛋白
红蛋蛋白免白酶疫抑球制蛋剂白
铁氧炎化症酶介质
6 运铁到
细运胞胆内固醇
7
到补组体织成分 20
血浆蛋白质的功能分类
分类 载体蛋白 免疫防御系统蛋白
血浆蛋白质 前白蛋白、白蛋白、脂蛋白、铜蓝蛋白、运铁蛋 白、结合球蛋白、 血红素结合蛋白、甲状腺素结 合球蛋白等
.
28
3.临床意义
②作为肝功能不全的指标。 ③负性急性时相反应蛋白（APP）。 急性炎症、恶性肿瘤、创伤等任何急需 合成蛋白质的情况下，血清PA均迅速下 降
.
29
急性时相反应
急性时相反应（APR）：
对炎症和组织损伤的非特异性反应，血浆蛋白质 如α1-抗胰蛋白酶、α1-酸性糖蛋白、结合珠蛋白、铜 蓝蛋白、C4、C3、纤维蛋白原和C-反应蛋白等浓度显著 升高或升高，而血浆前清蛋白、清蛋白、转铁蛋白浓度
.
9
N
红细胞 L
血细胞
白细胞
E B
全血
血 （40~50%） 血小板 M
液
血浆
水（91~92%）
（50~60%） 低分子物质
血清 血浆
蛋白质
清蛋白 球蛋白
纤维蛋白原
.
10
第八章 蛋白质测定
第一节 血浆蛋白质 (Plasma protein)
一﹑血浆蛋白质的组成、功能及分类
（一）血浆蛋白质的来源
二、个别血浆蛋白质
12 8
6
7
功能
营养.运载 营养.运载. 维蛋持白胶酶压等 抑免制疫剂应答 修胎饰儿剂期蛋白 胆固醇 逆结转合运血 红蛋蛋白白酶抑制剂 铁氧化酶 运铁到 细运胞胆内固醇 到补组体织成分19

《体液蛋白质检验》课件

《体液蛋白质检验》课件
维持代谢平衡。
调节生理功能
调节蛋白可以调节机体的生理 功能，如激素、生长因子等， 影响生长发育和新陈代谢。
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
免疫作用
免疫蛋白能够抵御外来病原微 生物的侵害，维持机体免疫平
衡。
蛋白质的结构和性质
氨基酸组成
蛋白质由20种不同的氨基酸组 成，通过肽键连接形成多肽链
。
二级结构
多肽链通过特定的折叠方式形 成二级结构，如α-螺旋、β-折 叠等。
蛋白质相互作用分析
通过分析蛋白质之间的相互作用，揭 示蛋白质在细胞内的功能和调控机制 。
蛋白质序列分析和结构预测
蛋白质一级结构分析
对蛋白质的氨基酸序列进行分析，了解蛋白质的基本组成和特性 。
蛋白质二级结构预测
利用算法和统计模型预测蛋白质的二级结构，有助于理解蛋白质的 功能和稳定性。
蛋白质三级结构预测
蛋白质提取过程中需要注意避 免蛋白质的降解和交叉污染， 以保证蛋白质的完整性。
蛋白质的分离
蛋白质分离是利用不同蛋白质在物理、化学性质上的差异，将混合蛋白质分离开的 过程。
常用的蛋白质分离方法包括：凝胶电泳、色谱技术等。
蛋白质分离过程中需要选择合适的分离介质和条件，以保证蛋白质的纯度和回收率 。
蛋白质的纯化
监测病情
蛋白质检验可以监测病情的发展和治疗效果。例如，慢性 肝炎患者可以通过蛋白质检验了解肝脏功能状况，评估治 疗效果。
指导治疗
蛋白质检验的结果可以帮助医生制定和调整治疗方案。例 如，对于肾病患者，蛋白质检验的结果可以帮助医生判断 是否需要调整饮食或药物治疗方案。
蛋白质检验的基本概念和原理
基本概念
紫外吸收法
利用蛋白质在紫外光下的吸收特 性进行定量，准确度高，但受干 扰因素较多。

体液蛋白质检验(生物化学检验课件)

体液蛋白质检验(生物化学检验课件)
种类：1000种 500种 200种 含量： 60-80g/L 来源：肝脏是蛋白质主要的加工厂
（一）血浆蛋白质的分类 1. 根据分离方法分类
盐析法：（pH7.0半饱和的硫酸铵溶液） 分为清蛋白和球蛋白(最简单)
醋酸纤维素薄膜电泳：6种
分
电泳法 (实用)
琼脂糖凝胶电泳：13种 聚丙烯酰胺凝胶电泳：30种
第七章
体液蛋白质检验
教学目标 OBJECTIVES
知识目标
✓ 简述血浆蛋白质的组成、功能及分类。 ✓ 认识血清总蛋白和、白蛋白、纤维蛋白原的测定方法和原理。 ✓ 归纳急性时相反应蛋白的概念、种类和临床意义。
能力目标
✓ 描述血浆中主要蛋白质的来源、功能和临床意义。 ✓ 描述常见相关疾病蛋白质水平的典型变化特征。
(六) α2-巨球蛋白(α2-MG，AMG)
合成部位：肝细胞和单核吞噬细胞系统合成 理化性质：分子量最大的蛋白质，625-800KD 生理功能：是血浆中主要的蛋白酶抑制剂，能与蛋白水解酶 （如纤维蛋白溶酶、胃蛋白酶、糜蛋白酶、胰蛋白酶及组织蛋 白酶）结合而抑制这些酶的活性
临床意义 ①低蛋白血症（如肾病综合症）时升高，可能是一种代偿机制以 保持血浆胶体渗透压 ②妊娠及口服避孕药时升高 ③新生儿及儿童比成人高2-3倍，是保护作用，抗衡较高浓度的 蛋白酶
生理功能 ①急性时相反应主要蛋白：急性炎症时升高，与免疫防御功能 有关 ②可结合利多卡因和普萘洛尔（心得安），急性心肌梗死时 AAG作为急性时相反应升高，可干扰药物剂量的有效浓度
临床意义 ①作为急性时相反应指标：风湿病，恶性肿瘤，心肌梗死和组 织坏死时增高；一般增加3-4倍 ②随糖皮质激素而增加，包括内源性的Cushing综合征和外源 性强的松、地塞米松等药物治疗时；雌激素使其降低。 ③营养不良，肝严重损伤、肾病综合征、胃肠道疾病致蛋白严 重丢失等情况下AAG降低 ④AAG升高是活动性溃疡性结肠炎最可靠的诊断指标之一 参考范围：0.25-2.0g/L

《体液蛋白质检验》课件

《体液蛋白质检验》课件
体液蛋白质检验
汇报人：
目录
添加目录标题
01
体液蛋白质检验概述
02
体液蛋白质的分类和 特点
03
体液蛋白质的检测指 标和临床意义
04
体液蛋白质检测的方 法和技术
05
体液蛋白质检验的质 量控制和标准化
06
添加章节标题
体液蛋白质检验 概述
定义和意义
体液蛋白质检验：通过检测体液中的蛋白质含量和种类，了解人体健康状况和疾病诊断的一种方 法。
检验方法
生化检验：通过 酶联免疫吸附试 验（ELISA）、 免疫荧光法等方 法检测蛋白质含 量
免疫学检验：通 过免疫电泳、免 疫印迹法等方法 检测蛋白质种类 和含量
质谱分析：通过 质谱分析法检测 蛋白质的种类和 含量
基因测序：通过 基因测序法检测 蛋白质的基因序 列和表达水平
体液蛋白质的分 类和特点
白蛋白：反映肝脏合成功能，降低可能 与肝病、营养不良有关
球蛋白：反映机体免疫功能，升高可能 与感染、炎症有关
尿蛋白：反映肾脏功能，升高可能与肾 病有关
血清蛋白电泳：检测血清中各种蛋白质 的含量和比例，有助于诊断某些疾病
血清蛋白免疫固定电ห้องสมุดไป่ตู้：检测血清中各种蛋 白质的含量和比例，有助于诊断某些疾病
临床意义
自动化检测流 程：样本采集、 样本处理、检 测分析、结果
报告等
自动化检测优 势：提高检测 效率、减少人 为误差、降低
检测成本等
体液蛋白质检验 的质量控制和标 准化
质量控制
样本采集：确保样本的完整性和准确性 检测方法：选择合适的检测方法和设备 检测环境：确保检测环境的清洁和稳定
检测人员：培训和考核检测人员的专业 技能和操作规范

体液蛋白质检验(共25张PPT)

体液蛋白质检验(共25张PPT)
应用：标准蛋白的标定及 校正其它常规方法〔参考 方法〕
C端
双缩脲法
N端
原理：
蛋白质中的肽键〔-CONH-〕在碱性溶液中能与Cu2+作用而产生紫红色络合物，
其颜色的深浅与蛋白质的浓度成正比，而与蛋白质的分子量及氨基酸成分无关。
双缩脲生成
22 2
2 2
1800 加热
H－
＋NH3
2 2
条件：至少含两个肽键〔-CONH-〕基团才能和Cu2+形成络合物,氨基酸及二肽无反 应,三肽以上才能反响。
依据来源、别离方法和生理功能
540nm ↑
这种紫红色络合物在540nm处的吸光度 值与蛋白质的含量在10~120g/L范围内呈正 比关系，与经过同样处理的蛋白质标准液比 较，即可求出蛋白含量。 条件：至少含两个肽键〔-CONH-〕基团才能和Cu2+形成络合物,氨基酸及二肽无反
应,三肽以上才能反响。
〔2〕Warburg-Christian 公式 蛋白质浓度〔mg/ml〕=1.55 A 280 - 0.76 A 260
评价及应用：
➢优点：敏感而简便，可保存蛋白生物活性，常用与较纯的酶和 免疫球蛋白。需紫外分光光度计及石英比色皿。
➢缺点：各种蛋白质中芳香族氨基酸含量和比例不同；在280nm测定易受 尿酸和胆红素的干扰；导致准确性和特异性受影响。
分类： 依据来源、别离方法和生理功能
➢来源
肝生成：绝大多数血浆蛋白质 其他组织细胞生成：免疫球蛋白和蛋白类激素
盐析法：白蛋白/球蛋白〔pH7.0半饱和的硫酸铵溶液〕
➢别离方法
醋酸纤维素薄膜电泳：6种
分
琼脂糖凝胶电泳：13种
电泳法：
辨 率
聚丙烯酰胺凝胶电泳：30种

蛋白检验PPT课件

转录因子----某些基因表达变化
21
22
（二）肝脏疾病： 肝脏合成大多血浆蛋白； 肝巨噬细胞（枯否细胞（Kupffer Cell)）参与免疫调节 急性肝炎时，可出现非典型的急性时相反应。
23
（三）肾脏疾病 蛋白尿：血浆蛋白丢失 小分子量蛋白丢失：下降 大分子量蛋白因代偿性合成增加：可增 加
24
结合细菌、真菌及原虫体内的多糖； 结合卵磷脂、核酸 激活补体，引发调理作用，增强细胞吞 噬功能，抑制血小板凝集和血块收缩
急性时相蛋白。心肌梗死、创伤、感染、手术、肿瘤浸润
20
二、疾病时的血浆蛋白质
（一）炎症、创伤：
前白蛋白、白蛋白、转铁蛋白：下降
其它：
升
高
机理：炎症损伤----某些细胞因子----信号转导系统----
3
分类：
1. 盐析：白蛋白、球蛋白 2. 醋酸纤维薄膜：白蛋白、a1-球蛋白、
a2-球蛋白、b-球蛋白、g-球蛋白和纤维 蛋白原
4
5
SDS-PAGE电泳
6
二维电泳
7
功能分类：
1. 载体蛋白： 前白蛋白，白蛋白，载脂蛋白，铜蓝蛋白，运铁蛋白，给合球蛋白， 血红素结合蛋白，甲状腺素结合蛋白
2. 免疫防御系统蛋白： IgG,IgM,IgD,IgE,IgA,补体系统
28
一、血清总蛋白测定 两个假设： 1. 都是单纯蛋白； 2. 所有蛋白与化学试剂发生相同反应。
29
1.凯氏定氮法 蛋白+强酸消化---铵盐+碱---氨----酸 滴定，测定总氮量---×6.25
30
2. 双缩脲法
31
O
NH2-CH-C +
H OH
甘氨酸
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90%左右，主要是对抗由多形核白细胞吞噬作用时释 放的溶酶体蛋白水解酶，其作用具明显pH依赖性，中 性/弱碱性环境中活力大，pH4.5时活性基本丧失，属 APR。
2020/10/15
遗传分型： 分离鉴定33种等位基因，最多见PiMM型，另有PiZZ、 PiSS、PiSZ、PiMZ、PiMS等。
临床意义： 低血浆AAT见于胎儿呼吸窘迫综合征； M型AAT缺陷时，蛋白水解酶的过度作用损伤组织 弹性纤维，可导致肺气肿，肝硬化等。
2020/10/15
(六) 结合珠蛋白 （haptoglotin Hp） 理化性质：电泳中属α2区带球蛋白，分子为α2β2 两对肽链四聚体。 遗传分型：α链有α1和α2两型，α1又有α1F和α1S 两种遗传分型，由α1F、α1S、α2三种等位基因编码 形成αβ聚合体使个体存在多种遗传表现型，又决 定了不同遗传表现型个体血浆中Hp性质上差异。
2020/10/15
(四)α1-酸性糖蛋白 (α1-acid glycoprtein AAG) 理化性质：MW近4万，含糖45% ，PI 2.7~3.5。 来源：肝及某些肿瘤组织；脓毒症时粒/单核细胞。 功能：APR，急性炎症时显著升高，与免疫防御有关。 临床意义：作为急性时相反应指标，炎症、风湿病、 恶性肿瘤心肌梗死等上升；营养不良，严重肝损害等 下降。
2020/10/15
(五) 甲胎蛋白(α1-fetoprotein AFP) 来源：胎儿肝 理化性质：MW6.9万，胎儿期占血浆蛋白总量1/3，出生时为
<5mg/L，周岁接近成人水平(低于10μg/L)。 临床意义： 1. 产妇羊水或母体血浆AFP用于胎儿产前监测：高于正常提
示可能有开放性神经管缺陷、无脑儿、脐膨出、先天性 食管闭锁等。 2. 成人AFP用于肝癌，生殖细胞癌等监测(返祖现象)， 是原发性肝癌最灵敏特异的肿瘤标志物。
由4个亚基单位组成。 功能：可与多种分子与离子结合，与许多蛋白水解酶结合而
影响酶活性，是血浆中主要的蛋白酶抑制剂。 临床意义：在低白蛋白血症、
妊娠期及口服避孕药 等情况下可见升高。
2020/10/15
(八) 铜蓝蛋白(ceruloplasmin CER) 理化性质：主要由肝细胞合成，分子量12-16万，含铜而呈 蓝色，属α2球蛋白。 功能： 1 具氧化酶活性，催化多酸及多胺类底物氧化。 2 铜代谢库，血液中CER可视为铜的无毒代谢库。 3 抗氧化剂作用，减少组织中脂质过氧化物及自由基的生成。 4 APR。 临床意义： 在感染、创伤、肿瘤时升高； Wilson病（肝豆状核变性，主要因体内铜代谢障碍所致）时 血浆CER明显下降；严重肝、肾疾病及妊娠期时下降。
α2球蛋白： α2ＭＧ Ｈp ＣＥＲ
γ球蛋白： Ig(IgM,IgA,IgG) CRP
2020/10/15
➢功能分类:
2020/10/15
二、个别血浆蛋白质的理化性质、功能与临床意义 (一)前白蛋白(prealbumin PA) 来源：肝细胞合成。 理化性质：MW5.4万，因pH 8.6时电 Nhomakorabea位于白蛋白之
2020/10/15
临床意义： 1. 个体营养指标。
>35g/L为正常；<34g/L为缺乏； <21g/L为严重缺乏。 2. 影响许多配体血循环存在形式。 3. 监测脱水的一项指标。 4. 低白蛋白血症为临床常见。 5. 白蛋白遗传性变异。
2020/10/15
(三)α1--抗胰蛋白酶(α1-antitrypsin α1AT) 理化性质：MW5.5万，是α1区带中主要成分，含糖10-12%。 功能：具有蛋白酶抑制作用，占血清中抑制蛋白酶活力的
2020/10/15
(九) 转铁蛋白(transferrin TRF) 来源：肝细胞及MPS合成。 理化性质：Mw7.7万，单链糖蛋白，半寿期7天。 功能：血浆中主要含铁蛋白，负责以TRF-Fe３＋形式运载消化 道吸收及红细胞降解的铁至骨髓再利用合成血红蛋白。 临床意义： 1. 用于贫血诊断和对治疗的监测。 IDA时TRF升高，但铁饱和度下降； 铁利用障碍性贫血时，TRF正常下降，但铁饱和度升高。 2. 急性时相反应时下降。 3. 妊娠或服用雌激素时升高。
白可以在恶性肿瘤病人重新出现。 6. 血浆蛋白质在实际工作中广泛用于组织与细胞培养。 7. 在动脉粥样硬化及肿瘤等发病学研究中对血浆蛋白质有广
泛涉及。
2020/10/15
2020/10/15
β球蛋白：
ＴＲＦ
ＬＤＬ＆ＶＬＤＬ
Ｃ3，Ｃ４ β2 -m Fg
α1球蛋白： ＡＡＴ ＡＡＧ ＡＦＰ ＨＤＬ
2020/10/15
功能： 1.与红细胞中释出的自由形式存在的血红蛋白不可
逆结合，Hp-Hb转运至肝降解，重新利用氨基酸 和铁，可防止Hb从肾丢失，为机体有效保留铁。 2. 属APR。 临床意义： 监测急性时相反应和溶血是否处于进行状态，溶血 时因血红蛋白大量释出，Hp下降。
2020/10/15
(七) α2--巨球蛋白 (α2-macroglobin α2MG) 来源：肝细胞和单核吞噬细胞系统合成。 理化性质：MW62.5-80万,含糖8%，血浆蛋白中分子量最大,
体液蛋白质检验
医学检验系 临床生物化学检验教研室
2020/10/15
本章内容概要：
第一节 概述 第二节 体液蛋白质测定
2020/10/15
第一节 概述
血浆蛋白质的研究在以下几个领域进展迅速： 1. 各种血浆蛋白质的合成、降解、转换更新和代谢调节 2. 各种血浆蛋白质生理功能的进一步研究。 3. 血浆蛋白质的遗传变异，通过它了解人群与家族遗传特征。 4. 以新技术对血浆蛋白质进行微量和特异检测分析。 5. 在进化与个体发育的生化研究中，发现不少正常胎儿期蛋
前而得名，半寿期12h。 临床意义：了解蛋白质营养不良和肝功不全的指标。 营养不良：200-400mg/L为正常；<150mg/L为缺乏；
<50mg/L为严重缺乏。 肝功不全：其浓度降低早于其他血清蛋白质
2020/10/15
(二)白蛋白(albumin Alb) 来源：肝实质细胞。 理化性质：血浆含量最多的蛋白，占血浆总蛋白的57－68％， 半寿期15-19d，pH7.4环境中带负电荷。 功能： 1.血浆中许多激素和药物的主要载体。 2.维持血浆胶体渗透压。 3.具有相当的缓冲酸碱的功能。 4.属于APR－。 5.运输作用，可与某些金属离子和化合物结合，如Cu2+、 Ca2+、BIL，将其运输到各自的靶细胞。