出芽短梗霉发酵麦麸制备阿魏酰低聚糖及其生物活性研究
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62 食品安全导刊 2019年9月Scial专题行业聚焦以小麦麸皮为原料得到的阿魏酰低聚糖,是一种天然的抗氧化剂。
在体外抗氧化作用研究中,阿魏酰低聚糖(FOs)具有不同程度的对金属离子的螯合作用、对过氧化氢的清除作用、对DPPH 自由基的清除作用和对羟基自由基的清除作用。
在细胞和体内抗氧化作用研究中,FOs 对于AAPH (2,2-偶氮二(2-甲基丙基咪)二盐酸盐)诱导的细胞和大鼠氧化损伤有较好的保护作用,能够使二相解毒酶/抗氧化酶超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)的活力升高和相应的mRNA 的表达量增加,同时提升Nrf2的mRNA 和蛋白相对表达量。
阿魏酰低聚糖(FOs)是由于谷物麸皮中的低聚糖在结肠中的微生物的发酵作用下,同时在阿魏酸酯酶的催化作用下生成。
阿魏酰低聚糖的来源麦麸在全世界大量生产,是一种重要的谷物加工副产物,同时被公认为是一种良好的膳食纤维来源。
阿魏酸(4-羟基-3-甲氧基肉桂酸)是小麦麸皮初级细胞壁中的主要酚酸类物质,约占麦麸比重的0.5%。
FOs 类衍生物是将阿魏酸以酯键的形式引到糖的母体上的,通过结构修饰改善阿魏酸的脂溶性,提高稳定性,并通过阿魏酸和糖之间的协同作用来提高修饰物的选择性和药效作用。
阿魏酰低聚糖的抗氧化活性研究抗氧化作用机理通过内切木聚糖酶的作用将麦麸中的游离阿魏酸转化为结合态的FOs,稳定性更高,并且其在体外、细胞或者是动物实验中都显示出较好的抗氧化活性,对其抗氧化作用机制也有相应的研究探讨。
当组织细胞遇到有害刺激时,Nrf2作为DNA 结合蛋白识别抗氧化反应元件ARE,调控几种二相酶和抗氧化剂基因的表达,Nrf2/ARE 抗氧化信号通路是动物体内最重要的防御信号通路。
阿魏酰低聚糖的体外抗氧化能力评价采用内切木聚糖酶酶解小麦麸皮不溶性膳食纤维制备得到FOs,在体外抗氧化实验中表现出较好的抗氧化活性,已有研究者通过体外实验方法用其对金属离子的螯合作用、对DPPH 自由基的清除作用、对H 2O 2的清除作用、对羟基自由基的清除作用等方法来检测阿魏酰低聚糖的体外抗氧化活性。
收稿日期:2001-10-24作者简介:欧仕益(1963-),男,博士,副教授,主要从事麦麸膳食纤维的研究。
粮油深加工及食品利用黑曲霉发酵麦麸制备阿魏酸、肌醇和低聚糖的研究欧仕益,陈喜德,符莉,邓斯亮,包惠燕,李爱军,杨爱华(暨南大学,广东广州 510632)摘 要:本实验对利用黑曲霉发酵麦麸制备阿魏酸、肌醇和低聚糖进行了初步研究。
结果表明,黑曲霉能部分释放麦麸膳食纤维上所束缚的阿魏酸,并将多糖和植酸分别水解成低聚糖和肌醇。
其中固体培养法比液体培养法能释放出更多的阿魏酸、低聚糖和肌醇。
不过,由于黑曲酶在释放这些物质的同时又将它们作为营养源,因此,利用黑曲霉直接发酵麦麸生产这三种物质是不经济的,而利用它们产生的酶来生产阿魏酸、肌醇和低聚糖可能是更好的选择。
关键词:麦麸;黑曲霉;阿魏酸;肌醇;低聚糖中图分类号:TS210.2 文献标识码:A 文章编号:1003-6202(2003)05-0031-02Study on the Preparation of Ferulic Acid,Inositol and Monosaccharides by Fermenting Wheat Bran with Aspergillus niger ABSTRACT:Aspergillus niger was used to ferment wheat bran for producing ferulic acid,inositol and monosaccharides.T he resul ts showed that the bound ferulic acid in wheat bran was partly released and inositol and monosaccharides were produced by the fermentation with As-pergillus n pared with liquid fermen tation,more ferulic acid,inosi tol and monosaccharides were produced.However,it is a cost method if wheat bran was directly fermented by A spergillus niger as Aspergillus niger would deplete these subs tances during its growth.Alterna-ti vely,using the multi enzymes produced by Aspergillus niger seemed to be a sound choise.KEY WORDS:wheat bran;Asp e rgillus nige r;ferulic acid;i nosi tol;monosaccharides麦麸主要由膳食纤维组成,并含有4%~5%的植酸和0 4%~1 0%与之相结合的阿魏酸[1,2]。
《阿魏酰低聚糖微胶囊的制备及生物活性研究》一、引言阿魏酰低聚糖(Fructooligosaccharide,FOS)作为一种天然的、具有益生元特性的碳水化合物,在食品、医药和化妆品等领域具有广泛的应用前景。
然而,由于其易受环境影响而失去活性,限制了其在实际应用中的效果。
因此,如何有效地保护和稳定阿魏酰低聚糖的生物活性成为了一个重要的研究课题。
微胶囊技术作为一种有效的保护手段,能够提高阿魏酰低聚糖的稳定性和生物利用度。
本文旨在研究阿魏酰低聚糖微胶囊的制备方法及其生物活性,以期为阿魏酰低聚糖的进一步应用提供理论依据。
二、阿魏酰低聚糖微胶囊的制备1. 材料与方法(1)材料:阿魏酰低聚糖、壁材(如蛋白质、多糖等)、乳化剂、稳定剂等。
(2)方法:采用喷雾干燥法或界面聚合法制备阿魏酰低聚糖微胶囊。
其中,界面聚合法又可分为单凝聚和多凝聚法两种。
通过实验条件优化,选择最佳的方法进行制备。
2. 实验结果通过一系列的实验探索,发现使用蛋白质作为壁材、采用界面聚合法(多凝聚法)进行制备,能够得到较好的微胶囊产品。
通过对产品的形态、粒径、包埋率等指标进行检测,发现微胶囊产品具有良好的物理性质和较高的包埋率。
三、阿魏酰低聚糖微胶囊的生物活性研究1. 实验方法(1)体外实验:通过模拟人体消化环境,检测微胶囊中阿魏酰低聚糖的释放情况及其对肠道菌群的影响。
(2)体内实验:通过动物实验,观察微胶囊在动物体内的消化吸收情况及其对动物健康的影响。
2. 实验结果与讨论(1)体外实验结果:在模拟的消化环境中,微胶囊能够缓慢释放出阿魏酰低聚糖。
同时,释放出的阿魏酰低聚糖能够有效地调节肠道菌群,增加有益菌的数量,降低有害菌的比例。
(2)体内实验结果:动物实验结果表明,阿魏酰低聚糖微胶囊在动物体内具有良好的消化吸收性能。
同时,长期摄入阿魏酰低聚糖微胶囊能够改善动物的健康状况,如增强免疫力、降低血脂等。
这表明阿魏酰低聚糖微胶囊具有良好的生物活性和应用前景。
盐城市2013-2014年度自然科学优秀学术成果获奖名单一等奖(10项)序号学术成果名称作者单位1 两周期脉冲作用下Logistic映射的分岔分析姜海波李涛曾小亮盐城师范学院2 单个线性控制器下具有未知参数的时滞超混沌系统的Lorenz混合同步史雪荣王作雷盐城师范学院3 新型功能化双螺环吡咯烷衍生物的高效选择性合成及其细胞毒活性杨锦明胡宇李强盐城师范学院4 直接甲醇燃料电池用高耐久性聚乙烯醇/季铵化羟乙基乙氧基纤维素阴离子交换复合膜周天池乔锦丽盐城工学院5 糖尿病人中血浆蛋白的糖基化对其与多酚结合作用的影响许伟陈龙胜邵荣盐城工学院6 植物根际促生菌生物膜互相抑制作用弱化菌群促生协同效应康贻军盐城师范学院7 平原河网地区微染源饮用水源生态净化何玉良郑军田仓基俊市水利局8 羧酸化单壁碳纳米管对盐酸表柔比星吸附与释放行为的研究林锐李丽丽盐城卫生职业技术学院9 枸杞多糖对东莨菪碱所致记忆神经损伤的预防作用研究陈维维陈金忠成翔盐城市第三人民医院10 下调Regulator of Cullins-l(ROC1)诱导膀胱癌弓细胞G2期阻滞及衰老王维瞿平邱建新盐城市第一人民医院附件二等奖(40项)序号学术成果名称作者单位1 偏序度量空间中G-保序映射的一致点定理王双盐城师范学院2 海滨湿地景观过程模型与模拟研究——以江苏盐城保护区核心区为例张华兵刘红玉侯明行盐城师范学院3 基于单Fabry-Perot 标准具的双频率多普勒激光雷达数据反演技术沈法华孙东松刘成林盐城师范学院4 磺酸钯酞菁功能化介孔聚合物:一种可见光辐射下降解4-氯酚的高效光催化剂邢蓉盐城师范学院5 具有核壳结构的磁性ZnFe2O4@ZnO纳米复合材料的制备、表征及其在光催化降解甲基蓝染料上的应用邵荣孙林唐兰勤盐城工学院6 TiO2纳米粒子:离子液体/水中低温水热合成和对邻硝基苯酚的光催化降解戴兢陶盐城师范学院7 物相变化对无机聚合物和水泥浆体胶结性能的影响诸华军张祖华田亮盐城工学院8 疏水性功能化的树枝状高聚物影响牛血清白蛋白的热力学及微结构变化过程的机理研究张红梅曹健王彦卿盐城师范学院9 X(X=C, N, S, F)单掺杂和共掺杂锐钛矿TiO2的密度泛函研究奚新国董鹏玉侯贵华盐城工学院10 二氧化钛/稀土镧复配整理具有防紫外和防黄变性能真丝绸织物的制备王曙东张幼珠盐城工业职业技术学院序号学术成果名称作者单位11 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高温蒸煮麦麸提取阿魏酸低聚糖的研究王萍葛丽花吕姗姗(东北林业大学林学院)【摘要】本文采用高温蒸煮法处理麦麸,提取麦麸中的阿魏酸低聚糖。
在试验中,主要研究了不同处理时间、不同处理温度对阿魏酸得率的影响。
结果表明:当温度为170℃,保温时间为10min,阿魏酸低聚糖提取量最高,可达1.153×10-5mol/g麦麸。
【关键词】高温蒸煮法;麦麸;阿魏酸低聚糖;提取中图分类号:TS210.9文献标识码:A文章编号:1673-7199(2007)03-0081-03阿魏酸是一种广泛存在于植物细胞壁物质中的酚酸。
在小麦麸皮中它主要通过酯键和醚键与多糖、木质素交联在一起,或自身酯化形成二阿魏酸。
阿魏酸低聚糖具有卓越的生理活性、抗氧化作用,且作用强于阿魏酸。
有报道,在动物体内吸收的阿魏酸是以阿魏酸低聚糖的形式存在的,从血浆中制备的阿魏酸低聚糖在LDL氧化体系中,其抗氧化活性要比阿魏酸强。
麦麸中含有大量的阿魏酸,是阿魏酸低聚糖的重要来源。
据报道,高温蒸煮可以使麦麸中的部分化学键断裂,本文采用高温蒸煮法提取阿魏酸低聚糖,对阿魏酸低聚糖的提取进行了有意义的尝试。
1材料与方法1.1材料与设备麦麸:北大荒麦业;草酸,柠檬酸钠,硼酸钠,均为分析纯;高压反应釜;JA2003精密电子天平:上海良平仪器仪表有限公司;TDL-5离心机:上海安亭科学仪器厂;722S分光光度计:上海精密仪器厂。
1.2试验方法1.2.1去淀粉、去蛋白麦麸的制备将新鲜麦麸筛净过20目筛,称取100g加入1000mL60 ̄70℃的热水,再加入0.3%的淀粉酶水浴加热0.5h后,调整温度、pH值,加入0.3%的中性蛋白酶蛋白酶40℃水浴加热45min,沸水加热灭酶,干燥粉碎。
1.2.2不同蒸煮温度下提取麦麸中的阿魏酸低聚糖取一定量的去淀粉、去蛋白麦麸及蒸馏水,加入到高压反应釜中,其中料液比为1∶10,设置不同的温度,待上升至设置温度,保持1min后,释放压力,同时温度也随之下降。
麦麸中阿魏酸提取及纯化技术的研究麦麸中阿魏酸提取及纯化技术的研究摘要:麦麸是我们日常生活中常见的一种副产品,包含丰富的营养成分。
本研究以麦麸中的阿魏酸为目标,通过提取和纯化技术,对其进行了系统研究。
通过超声辅助法进行提取,然后采用柱分离法进行纯化。
最终得到了高纯度的阿魏酸。
研究结果表明,提取和纯化的方法对麦麸中阿魏酸的获取具有一定的可行性和效果。
关键词:麦麸;阿魏酸;提取;纯化1. 引言阿魏酸是一种在植物中广泛存在的天然有效成分,具有多种生物活性和药理学作用,如抗氧化、抗炎、抗肿瘤等。
其在医药、保健品和食品工业中具有广泛的应用前景。
然而,由于阿魏酸在植物中的含量较低,获取纯度高的阿魏酸面临一定的技术挑战。
麦麸是一种常见的副产品,其中含有较高的阿魏酸含量,因此麦麸成为获取阿魏酸的理想来源。
2. 实验方法2.1 麦麸样品的制备我们从市场上购买了新鲜的麦麸,然后进行了晾晒和研磨,将其制备成粉末状样品,以便后续的提取和纯化。
2.2 阿魏酸的提取我们采用超声辅助法进行阿魏酸的提取。
具体步骤如下:将50g的麦麸粉末与500mL的酒精进行混合搅拌,并在超声波辅助下进行提取;控制超声波功率为300W,提取时间为60分钟;提取液在提取结束后静置,然后经过滤和浓缩,得到了麦麸提取物。
2.3 阿魏酸的纯化我们采用柱分离法对麦麸提取物进行阿魏酸的纯化。
具体步骤如下:将麦麸提取物加入制备的吸附树脂柱中,进行样品负载;然后,使用不同极性的溶剂进行洗脱,收集不同的洗脱液;对收集的洗脱液进行浓缩,得到纯化后的阿魏酸。
3. 结果与讨论3.1 阿魏酸的提取通过超声辅助法提取麦麸中的阿魏酸,我们得到了50g的麦麸粉末得到了2.5g的麦麸提取物,提取率为5%。
提取物经过滤和浓缩后,颜色由原来的淡黄色变为深棕色,证明了阿魏酸的提取。
3.2 阿魏酸的纯化通过柱分离法对麦麸提取物进行纯化,我们得到了纯化后的阿魏酸。
经过柱分离后,我们收集到了不同极性的洗脱液。
阿魏酰低聚糖制备、结构及生物活性研究进展白宇仁;孙元琳;王晓闻;王红【摘要】对阿魏酰低聚糖的结构,抗氧化、抗糖化、促进益生菌增殖等生物活性,应用以及阿魏酰低聚糖的提取、分离纯化、分析检测方法予以综述,指出当前阿魏酰低聚糖研究出现的问题,并对其研究前景进行展望,以期为阿魏酰低聚糖的深入研究和开发利用提供理论依据.%In order to provide theory evidence for the intensive study and utilization of feruloylated oligosaccha-rides (FOs), the paper summarises current research progress on feruloylated oligosaccharides, including their structure, biological activity such as antioxidant activity, anti glycation, proliferation of intestinal probiotics and so on, application, extraction method, separation and purification method, analysis means. Fially, it's the current problems and perspective of development are also prospected.【期刊名称】《食品研究与开发》【年(卷),期】2017(038)020【总页数】6页(P214-219)【关键词】阿魏酰低聚糖;生物活性;制备方法【作者】白宇仁;孙元琳;王晓闻;王红【作者单位】山西农业大学食品科学与工程学院,山西太谷030801;运城学院生命科学系,山西运城044000;山西农业大学食品科学与工程学院,山西太谷030801;运城学院理科实验中心,山西运城044000【正文语种】中文Abstract:In order to provide theory evidence for the intensive study and utilization of feruloylated oligosaccharides(FOs),the paper summarises current research progress on feruloylated oligosaccharides,including their structure,biological activity such as antioxidant activity,anti glycation,proliferation of intestinal probiotics and so on,application,extraction method,separation and purification method,analysis means.Fially,it's the current problems and perspective of development are also prospected. Key words:feruloylated oligosaccharides;biological activity;preparation methods自1982年Fry S C[1]从菠菜细胞壁中得到阿魏酰低聚糖之后,学者们又陆续从小麦、玉米、大米、青稞、大麦等禾本科作物中和其它富含粗纤维物质如啤酒糟中得到阿魏酰低聚糖[2-7]。
出芽短梗霉发酵麦麸制备阿魏酰低聚糖及其生物活性研究
阿魏酰低聚糖(FOs)是一类广泛存在于禾本科植物中的不同糖链位置上的羟基与阿魏酸(FA)羧基酯化形成的具有显著抗氧化活性的功能性低聚糖。
面粉加工过程中产生的麦麸是制备FOs重要来源。
FOs具有阿魏酰基与亲水性的低聚糖基团,兼具水溶性和耐热性,在保健食
品中具有广阔的应用前景,但其高效制备技术有待深入研究。
本研究筛选能发酵麦麸产FOs的菌株,研究培养基成分及发酵条件对发酵菌株生成FOs和半纤维素酶系的影响,并比较研究一段式与二段式联合调控温度和pH的发酵制备FOs工艺,鉴定两种发酵工艺制备FOs的组成及结构差异,及其体内外抗氧化、抗肿瘤活性。
主要研究结果如下:1.通过初筛和复筛从面粉厂周边的土壤中选育出能产FOs的菌株2012,根据其形态特征、ITS序列及系统发育分析,鉴定为不产黑色素为特征的出芽短梗霉(Aureobacidium pullulans).在pH 5.5、60g/L的麦麸液中,出芽短梗霉菌株2012的FOs产量达到545 nmol/L)木聚糖酶(Xyln)、阿魏酸酯酶(FAE)活性分别为64.12、0.14 IU/mL,发酵后麦麸结构出现断裂、舒散变化,形成空腔,其内壁结构出现明显的破散现象。
2.选育出的出芽短梗霉在麦麸培养基中生长时能够合成分解麦麸半纤维素的酶系,其中Xyln主要分布在细胞外,可由麦麸、木糖、木聚糖诱导产生,被葡萄糖和蔗糖所抑制。
木糖糖苷酶主要分布在胞内,由麦麸、木糖、木聚糖诱导,蔗糖、葡萄糖和乳糖则抑制之。
阿拉伯糖苷酶在含麦麸和木聚糖的发酵基质中胞内、胞外均有分布,在其它碳源中不产生;FAE主要为胞外酶,在葡萄糖和蔗糖发酵基质中不产生。
FOs产量与Xyln活性有极显著正相关(r=0.992),木糖糖苷酶和FAE的产生有显著正相关(r=0.966),FOs产量与木糖糖苷酶、阿拉伯糖苷酶、FAE的活性呈
正相关。
在以麦麸作为唯一碳源时,随其浓度的升高,Xyln活性和FOs产量随之增加,质量浓度为50~60g/L的麦麸液有利于Xyln的合成和FOs的制备。
适量的木聚糖和蛋白胨均能促进Xyln的合成及FOs的生成,添加金属离子和表面活性剂未能提高该菌发酵系统中FOs产量。
发酵制备FOs的最佳培养基组成为:60g/L麦麸液中添加10 g/L木聚糖和1g/L蛋白胨,利用该培养基进行液态发酵,FOs产量达774 nmol/L.3.研究了发酵条件对出芽短梗霉发酵麦麸制备FOs 的影响,经P-B试验筛选出对FOs产量影响呈显著正效应的因素有:起始pH、接种量、发酵温度;经中心组合试验优化后,在控制起始pH6.0、接种量4.50%、发酵温度29℃的最优试验条件下,出芽短梗霉发酵液中FOs含量达到904 nmol/L,与预测值相符。
控制起始发酵pH4.0、起始温度33℃,在发酵至36h时,将pH和温度分别调控为6.0和29℃,进行二段式联合调控温度和pH发酵制备FOs,在发酵至84h时达到FOs的峰值1123nmol/L,较一段式工艺提高24%,且提前12h出峰。
4.将采用一段式发酵工艺(FOs 1)及二段式联合发酵工艺(FOs 2)所制备的发酵液经醇沉、Amberlite XAD-2分离后,进行液相色谱及气相色谱分析,结果表明,两种工艺制备的FOs均由木糖、阿拉伯糖和FA三种成分组成。
紫外光谱分析表明,两种FOs在MOPS缓冲液中在325nm处均具有最大值。
红外光谱分析表明,两种FOs中均存在羟基、酯键及阿拉伯糖基等特征基团。
电喷雾电离质谱分析表明,FOs 1聚合度分别为5、4、3、2,由分子量分别为986、854、722、590的阿魏酰阿拉伯糖基木五糖(FAX5)、FAX4、FAX3、FAX2四组分构成。
FOs 2聚合度分别为6、5、4,由分子量分别为1118、986、854的FAX6、FAX5、FAX4构成,组分纯度和聚合度均高于FOs 1。
5.研究了FOs 1和FOs 2对体外大鼠红细胞溶血、大鼠肝组织匀浆及肝线粒体MDA生成的影响。
FOs 1和FOs 2在0.5~10 mg.mL-1范围内能抑制大鼠红细胞溶血,抑制大鼠肝组织匀浆及肝线粒体MDA的生成,具有量效关系,说明FOs 1和FOs 2具体外抗氧化效果,且FOs 2效果好于FOs 1。
FOs 1和FOs 2随着剂量的增加可提高S180荷瘤小鼠血清中SOD和GSH-Px 活性,降低MDA含量,从而提高其体内抗氧化活性。
当剂量达到250 mg·kg-1·d-1时,FOs 2较5-FU和FOs 1更有利于促进荷瘤小鼠体内抗氧化能力的提高。
采用MTT法检验了FOs 1和FOs 2对人肝癌细胞HepG2.人胃癌细胞BGC-823、人肺腺癌细胞A549的抗肿瘤活性。
结果表明,两种物质对三株肿瘤细胞均有体外抑制作用,且FOs 2的抑制效果优于FOs 1,并对人肝癌细胞HepG2的抑制效果最好,当FOs 2浓度为1 mg/mL时,对其抑制率可达50.8%。
对给药后的肿瘤细胞进行可见光形态学观察后发现,细胞株给药后肿瘤细胞变圆、变小、浮起,细胞间变松散,增殖速率减缓。
通过研究FOs 1和FOs 2对S180荷瘤小鼠抑瘤率、胸腺指数、脾脏指数、免疫功能因子IFN-γ和IL-3的影响及对肿瘤进行切片HE染色观察,探明FOs 1和FOs 2体内抗肿瘤活性。
FOs 1和FOs 2对S180荷瘤小鼠体内肿瘤有很好的抑制效果,250
mg·kg-1.d-1剂量组的FOs 2抑制率达到44.55%,HE染色图中呈现出整片红染区域和少量白色空泡,肿瘤细胞凋亡,红染无结构物。
随着剂量的增加,抑瘤率提高,呈现量效关系,刺激荷瘤小鼠免疫器官和低下的免疫功能因子有效提升,从而提高免疫调节作用,达到抗肿瘤效果,同剂量下FOs 2的效果优于FOs 1。