分子肿瘤概论上传

分为 钙黏蛋白(E-cad, 上皮 钙黏蛋白 上皮-钙黏蛋白 钙黏蛋白) E-钙黏蛋白 ---关系最密切 关系最密切 ---主要分布于各种上皮细胞 主要分布于各种上皮细胞 ---促进同质黏附力 促进同质黏附力 P-钙黏蛋白 钙黏蛋白(P-cad, 胎盘 钙黏蛋白 胎盘-钙黏蛋白 钙黏蛋白) 钙黏蛋白 N-钙黏蛋白 (N-cad , 神经钙黏蛋白 神经钙黏蛋白) 钙黏蛋白 最近又发现了一些新的类型， 最近又发现了一些新的类型，如 H-cad。 。
（一）肿瘤细胞增殖和扩展 浸润转移的前提和基础 （二）肿瘤血管生成(tumor angiogenesis) 肿瘤浸润转移的必要条件
肿瘤细胞分离脱落， （ 三 ） 肿瘤细胞分离脱落 ， 与细胞外基 质黏附 1.瘤细胞表面负电荷增加 2．瘤细胞黏附力的改变 1）瘤细胞自身结构异常 瘤细胞自身结构异常 2）瘤细胞同质黏附力下降 瘤细胞同质黏附力下降
2.PCR-限制性片段长度多态性 限制性片段长度多态性（restrection 限制性片段长度多态性 fragment length polymorphisms , RFLP） 分析技术
3.变性梯度凝胶电泳法（denaturing gradient gel 变性梯度凝胶电泳法
electrophoresis, DGGE)
②整合素(integrin) ---细胞表面糖蛋白 ，约有20 多个亚型 约有20 细胞表面糖蛋白 ---各种肿瘤细胞表面整合素种类不同 ---各种肿瘤细胞表面整合素种类不同 ---肿瘤生长各个阶段表达水平也不同 ---肿瘤生长各个阶段表达水平也不同
作用 a.介导细胞与细胞外基质的黏附 a.介导细胞与细胞外基质的黏附 b.参与不同细胞之间的黏附连接 b.参与不同细胞之间的黏附连接 C.扮演细胞信号传递的角色 C.扮演细胞信号传递的角色
4. DNA 序列分析（DNA sequencing ） 序列分析（ 5. 荧光原位杂交 ( FISH) 6． DNA 芯片技术（DNA chip ） 芯片技术（ ．
（三）肿瘤的微卫星不稳定性分析 微卫星不稳定性（microsatellite instability , MI）, 是 ） 指简单重复序列的增加或丢失 检测方法 PCR + DNA 序列凝胶电泳
2.基因拷贝数的增加、转录产物mRNA的增加 ---基因拷贝数的增加、转录产物 基因拷贝数的增)核酸分子杂交（nucleic acid molecular 核酸分子杂交（ 核酸分子杂交 hybridisation）技术 ） 最常用的基本技术 1.原位杂交 （ISH） ISH） 原位杂交 2.荧光原位杂交 FISH）， 2.荧光原位杂交 （FISH）， 3.双色 多色）银染原位杂交（DSISH） 双色（ 3.双色（多色）银染原位杂交（DSISH） 杂交) 3.Southern blot (DNA 杂交) 杂交) 4.Northern blot (RNA 杂交)
2)功能特点
可分别降解ECM中各种不同成分 中各种不同成分 可分别降解 3)活性调节 3)活性调节 基因转录水平 其它蛋白水解作用而激活 特异性抑制因子TIMP TIMP的拮抗作用 特异性抑制因子TIMP的拮抗作用
4)金属蛋白酶抑制物 4)金属蛋白酶抑制物 TIMPTIMPTIMP-1 ，TIMP-2 （3）胱氨酸蛋白酶类 ） Cathepsin B 与肿瘤浸润转移关系密切 作用 降解ECM中各种胶原、LM、 FN、粘蛋白 中各种胶原、 、 降解 中各种胶原 、 激活间质胶原酶和IV型胶原酶 激活间质胶原酶和 型胶原酶
④选择素(selectin) 内源性植物凝血素（凝集素） 内源性植物凝血素（凝集素） 介导内皮细胞、 作用 介导内皮细胞、血小板与瘤细胞黏附 选择素家族包括： 选择素家族包括： P-selectin E-selectin L-selectin
CD44 ⑤ CD44 及其它 44(透明质酸受体) CD 44(透明质酸受体) 路易斯寡糖（SLEX，,s-LewisX ） 路易斯寡糖 血管内皮细胞 E-选择素的配体 跨膜超级家族基因蛋白（TM4ST） 跨膜超级家族基因蛋白（TM4ST） 六 种 成 分 ： CD9 、 CD37 、 CD53 、 CD63 、 CD9 CD37 CD53 CD63 CD81 CD82 81、 CD81、CD82 调节整合素的黏附功能
（五）细胞外基质的降解 1．肿瘤细胞产生的蛋白水解酶 ． （1）丝氨酸蛋白酶类及其抑制因子 ） 纤维蛋白溶解酶) ①纤溶酶 (纤维蛋白溶解酶 纤维蛋白溶解酶 纤溶酶原
② 尿激酶型纤溶酶原激活剂(urokinase-type plasminogen activator , u-PA）系统 A．u-PA： ． ：
③ 免 疫 球 蛋 白 超 基 因 家 族 (immunoglobulin
superfamily)
主要参与细胞与细胞间的连接 ICAM细胞间黏附分子ICAM-1 （细胞间黏附分子-1） VCAM血管黏附因子） VCAM-1 （血管黏附因子） 神经细胞黏附因子） NCAM （神经细胞黏附因子） 包括CEA 其它 包括CEA 、DCC
B．u-PA 受体（u-PAR）及纤溶酶原受体 ． 受体（ ） C．PAI （PA 抑制剂） 抑制剂） ． PAI1 是u-PA 的主要抑制剂 PAI2 不同肿瘤表达意义不一 PAI3 功能不清
（2）基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases, MMP） ） ） 1) MMP 分类 胶原酶： 胶原酶：如间质胶原酶 （Collagenase） ） 明胶酶：如明胶酶A 明胶酶：如明胶酶 (gelatinase A) 间质溶素：如间质溶素1 间质溶素：如间质溶素 、2 膜型基质金属蛋白酶： 膜型基质金属蛋白酶：Ⅰ、Ⅱ型
（四）肿瘤易感性检测
遗传癌症综合征与易感性 癌症综合征 易感基因 Rb1 视网膜母细胞瘤 Wilms 瘤 WT1 Li-Fraumeni 综合征 p53 家族性腺瘤性息肉（ APC 家族性腺瘤性息肉（FAP） ） 遗传性非息肉性结肠癌（ 遗传性非息肉性结肠癌（HNPCC） hMSH2, hMSH1 ） BRCA1 乳腺癌 BRCA1 卵巢癌
MSF（迁移刺激因子 迁移刺激因子） （2） MSF 迁移刺激因子 （3） HGF/SF 肝细胞生长因子/分散因子) HGF/SF（肝细胞生长因子 分散因子) 肝细胞生长因子/ AMF是近期发现的最强大的动力因子 HGF 和AMF是近期发现的最强大的动力因子
3．瘤细胞的化学趋向性 ． 21KD 的蛋白质 骨吸收因子
（五）肿瘤相关病毒 核酸杂交技术与PCR技术 核酸杂交技术与 技术 (六) 基因重组技术 六 主要目的是获得某一基因或DNA片段的大 主要目的是获得某一基因或 片段的大 量拷贝 (七) 基因转染（gene transfection）技术 RNA干涉 （八）RNA干涉(RNA interference）和微小RNA（micro ）和微小RNA
（四）瘤细胞的迁移(migration)及化学趋向性 1．瘤细胞的运动 黏附；肌动蛋白、微管、 黏附；肌动蛋白、微管、中间丝 2．瘤细胞运动的调节
据其作用，大致可分为两大类： 据其作用，大致可分为两大类： 既影响运动又影响生长的因子： 既影响运动又影响生长的因子： 自分泌运动因子) （1） AMF (自分泌运动因子) 自分泌运动因子
器异性机制 1. 黏附分子的作用 2. 化学趋化因子（归巢现象 化学趋化因子（归巢现象) 3. 微环境不适合 4. 与免疫状态有关
（八）肿瘤浸润转移相关基因 转移相关基因 指基因的表达和改变能够促进或导致肿瘤发生 转移的基因
（九）机体免疫状态与肿瘤浸润转移 参与控制转移的免疫细胞主要有 NK 细胞 巨噬细胞 T 淋巴细胞
RNA, miRNA） ）
（九） 激光捕获显微切割技术(Laser capture
microdissection，LCM) ，
（十）共聚焦激光扫描显微镜技术(Confocal 共聚焦激光扫描显微镜技术 Laser Scanning Microscope，CLSM) ，
分子肿瘤概论
一、肿瘤浸润、转移的分子机制 肿瘤浸润、 肿瘤浸润、 肿瘤浸润、转移的步骤 1.肿瘤细胞增殖 肿瘤细胞增殖 2.肿瘤血管生成 肿瘤血管生成(tumor angiogenesis) 肿瘤血管生成 3.肿瘤细胞分离脱落 肿瘤细胞分离脱落 4.肿瘤细胞迁移 肿瘤细胞迁移(migration) 5.与细胞外基质黏附,降解细胞外基质 与细胞外基质黏附, 与细胞外基质黏附 6.瘤细胞以主动方式入循环管道并形成栓子 瘤细胞以主动方式入循环管道并形成栓子 7.在特定器官的毛细血管滞留并黏着，再次穿过血 在特定器官的毛细血管滞留并黏着， 在特定器官的毛细血管滞留并黏着 管壁并定居、 管壁并定居、增殖
（2）聚合酶链反应（polymerase chain ）聚合酶链反应（ reaction , PCR）技术 ） 又称体外基因扩增
扩增产物的检测 凝胶电泳分析 最常用) 琼脂糖凝胶电泳 (最常用 最常用 聚丙烯酰胺凝胶电泳
定量PCR 定量PCR RealReal-time PCR 原位PCR 原位PCR RTRT-PCR 3.基因芯片技术 3.基因芯片技术
具有高度转移潜能的肿瘤细胞才能逃脱各种损 伤因素存活 瘤细胞存在形式 单个 成团 同类癌栓 异类癌栓 黏附分子对其发挥调节作用
在特定器官的毛细血管滞留并黏着， （七）在特定器官的毛细血管滞留并黏着，再次穿 过血管壁并定居、 过血管壁并定居、增殖 种子与土壤学说 机械和解剖学说 肿瘤细胞表型差异性
3）瘤细胞异质黏附力增加 ） 指肿瘤细胞与其它不同细胞及间质的黏 附力 黏附因子介导 通过配通过配-受体之间的识别和结合实现
3．肿瘤黏附因子(adhesion molecules) 肿瘤黏附因子 ① 钙黏蛋白(cadherin) 又称为钙连接素，钙黏素。 又称为钙连接素，钙黏素。 依赖细胞外钙 介导钙离子依赖性细胞与细胞（同源细胞） 介导钙离子依赖性细胞与细胞（同源细胞） 的黏附