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南方农业学报 Journal of Southern Agriculture 2023，54（11）：3256-3264ISSN 2095-1191； CODEN NNXAABDOI：10.3969/j.issn.2095-1191.2023.11.013瓜实蝇不同发育期及组织实时荧光定量PCR内参基因筛选陈黔1，2，3，杨朗2，王凤英2，黄立飞2，曹雪梅2，张建民3，姜建军1，2*（1广西农业职业技术大学，广西南宁530007；2广西农业科学院植物保护研究所/农业农村部华南果蔬绿色防控重点实验室/广西作物病虫害生物学重点实验室，广西南宁530007；3长江大学农学院，湖北荆州434025）摘要：【目的】筛选出适用于瓜实蝇［Zeugodacus cucurbitae（Coquillett）］抗药性分子机制及生理分子机制研究的内参基因及最优组合数，为瓜实蝇抗药性机理研究打下基础。
【方法】以不同发育期的敏感品系和抗阿维菌素品系瓜实蝇及其不同组织样本为试验材料，将8个候选内参基因通过实时荧光定量PCR进行表达检测，并利用geNorm、NormFinder、Bestkeeper和RefFinder软件对内参基因表达稳定性进行综合评估分析，筛选出最稳定表达的内参基因并明确最优组合数。
【结果】geNorm分析结果显示，不同发育期处理内参基因表达稳定性排序为RPS13=RpL32（0.269）> TUBE（0.623）>TBP（0.702）>β-tubulin（1.069）>G6PDH（1.366）>Actin3（1.596）>Actin2（1.923）；不同组织处理内参基因表达稳定性排序为RpL32=RPS13（0.132）>TBP（0.345）>TUBE（0.442）>β-tubulin（0.552）>G6PDH（0.780）>Actin2（1.101）>Actin3（1.417），最适内参基因个数为2。
瓜实蝇瓜实蝇（学名：Dacus cucurbitae Coquillett），是一种昆虫，属于双翅目、果蝇科。
它主要寄生于瓜果类植物，对瓜果的生长发育和品质产生严重影响。
本文将介绍瓜实蝇的形态特征、生活习性、危害以及防治措施等内容。
形态特征瓜实蝇成虫体长约5mm左右，身体呈灰黄色。
触角有三节，第三节末端呈小刺状，有黑色的感觉毛。
翅膀透明，上有黑色斑纹。
卵呈颗粒状，白色透明，长约0.5mm。
幼虫白色，呈弯曲状，具有触须。
生活习性瓜实蝇主要寄生于瓜果类植物，如西瓜、南瓜、黄瓜等。
它在植物的果实中产卵，一般每个果实只产一颗卵。
卵孵化后，幼虫在果实内进行寄生，以果实为食物进行发育。
随着幼虫的生长，它会在果实外产生一个较大的脱衣蔓，然后在地面附近的土壤中进行蛹化。
成虫从蛹中孵化出来后，再次寄生瓜果，完成繁殖循环。
危害瓜实蝇对瓜果的危害主要表现在以下几个方面：1.寄生对瓜果造成直接损害：瓜实蝇幼虫在瓜果内寄生，以果肉为食，导致果实腐烂、烂熟、变形或腐败。
严重的情况下，整个果实可以被完全破坏。
2.传播病原菌：瓜实蝇在寄生的同时，也很容易传播一些病原菌，如细菌、真菌等。
这些病原菌会加重果实的病害程度，导致瓜果的品质下降。
3.间接损害：瓜实蝇对瓜果造成的损害还包括刺伤、蛀蚀、果皮凹陷等，这些损害不仅影响了果实的外观，还会导致果实易受其他病虫害的侵害。
防治措施针对瓜实蝇的危害，我们可以采取以下防治措施：1.清除寄主植物：及时清除田间和周围的瓜果残渣和野生瓜果，减少瓜实蝇的滋生栖息地。
2.进行灭蝇处理：在瓜果初期果实膨大前使用低毒、环保的昆虫控制剂，对瓜果进行灭蝇处理，清除已有的幼虫和成虫，阻断瓜实蝇的繁殖。
3.使用陷阱：在田间设置黄板或黄板蓄虫器，使用黄色粘板诱捕瓜实蝇，减少虫口密度。
4.引入天敌：可以引入一些天敌如瓜实蝇寄生蜂进行生物防治，有效地控制瓜实蝇的数量。
5.驱除措施：在幼虫孵化前期，可以使用农药进行驱除，及时清除感染果实，以防幼虫寄生。
南瓜实蝇蛹和雌成虫卵巢发育分级张小亚【摘要】在室温饲养条件下,解剖观察了南瓜实蝇不同日龄蛹和雌虫卵巢的形态.结果表明,根据不同日龄南瓜实蝇蛹体形态及附肢分化程度,可将蛹的发育分为5级;根据不同日龄南瓜实蝇雌虫卵巢管及卵细胞发育特点,可将雌虫卵巢发育分为5级.【期刊名称】《浙江农业科学》【年(卷),期】2018(059)012【总页数】4页(P2184-2186,2189)【关键词】南瓜实蝇;蛹;卵巢;发育分级【作者】张小亚【作者单位】宜昌市柑橘科学研究所, 湖北宜昌 443000【正文语种】中文【中图分类】S433南瓜实蝇(Bactrocera tau)，又称南亚果实蝇，是蔬菜和果树上的一种重要检疫性害虫。
南瓜实蝇的取食范围很广，寄主作物达80多种。
除危害甜瓜属、南瓜属、丝瓜属、冬瓜属和苦瓜属外，还为害葫芦属、番木瓜属、西番莲属、茄属、番茄属、西瓜属等，在缺少寄主植物条件下亦可为害柑橘[1-4]。
掌握实蝇蛹的发育进度，明确实蝇雌虫卵巢的发育特性，是了解其发育生物学的基础，同时也是开展预测预报并提供针对性防治措施的前提[5]。
目前针对橘小实蝇、橘大实蝇、瓜实蝇的卵巢发育分级已有相关报道[6-8]，但南瓜实蝇蛹和卵巢发育分级报道较少。
为了解南瓜实蝇蛹和雌虫卵巢发育特性，本研究拟在室内饲养温度条件下通过解剖南瓜实蝇蛹和卵巢，观察并记录其发育形态，确定南瓜实蝇蛹和卵巢发育的分级标准，为丰富南瓜实蝇发育生物学提供参考，并为该虫的预测预报提供依据。
1 材料与方法1.1 供试材料虫源为连续继代饲养2年以上的实验种群。
在(28±1)℃条件下，幼虫用南瓜饲养，成虫用自制凝胶饲料饲养。
1.2 南瓜实蝇蛹的发育分级观察在室内饲养温度下，挑选体长一致的老熟待化蛹幼虫100头，放入湿润的蛭石中待其入土化蛹，24 h后观察其化蛹情况，并随机挑选50粒蛹。
在化蛹后第1、2、4、6、8天，随机挑选并小心用镊子剥掉蛹壳，观察并记录其发育形态。
果蝇发育中的各个阶段写一篇观察小论文800字
由卵发育为成虫果蝇大体经过四个阶段：卵、幼虫、蛹和成虫。
果蝇繁殖得很快，经历卵、幼虫和蛹等阶段发育为成虫，大约只需要10天，时间依温度高低有所不同。
果蝇的 1 个完整的生活周期分为 4 个明显的时期，即卵→幼虫→蛹→成虫。
卵长约 0. 5 mm、白色，前端背面伸出一触丝，能附着在食物或瓶壁上，不致深陷于食物中。
卵经 22 - 24 h 孵化为幼虫，幼虫经两次蜕皮为三龄幼虫，约 4 - 5 mm ；肉眼可见其一端稍尖为头部，上有一黑色钩状口器。
幼虫生活约 4 d 左右化蛹，起初颜色淡黄、柔软，以后逐渐硬化变成深褐色，此时即将羽化；成虫果蝇自羽化后 8 h 可交配，2 d 后即可产卵，成虫果蝇在25℃下一般存活 37 d。
成虫常见于腐败植物及果子的周围，产卵于其中。
幼虫孳生于腐败水果或其他腐败植物中。
果蝇常常在腐烂的水果中生长和繁殖，所以在人群居住的地区，若能稍加注意就可能见到，如腐烂的水果及蔬菜上，垃圾堆里，酿造厂的车间以及某些厨房、火车、轮船甚至飞机上都可能见到它们的踪迹。
在自然界里，如花丛中、腐草下、果园里、菜地间、林荫树上流出的汁液、森林中的腐烂树皮、朽株、落叶以及肉质的真菌上（如木耳、蘑菇
等），都可能见到果蝇的出没。
果蝇卵巢细胞分裂动态研究果蝇是模式生物学中重要的一种研究对象。
作为一种常见的实验生物，在生物领域的广泛应用中，对果蝇卵巢细胞分裂动态的研究成果也不少。
果蝇卵巢细胞分裂动态的研究，对于深入理解卵细胞形成、发育和调控等方面具有重要的意义。
果蝇卵巢中卵细胞的形成过程需要经过一系列的细胞分裂途径。
在哺乳动物中，卵母细胞经过一系列的分裂和减数分裂形成卵子。
而在果蝇中，卵巢发育早期时，一些称为始基细胞的细胞通过有丝分裂形成一些称为卵母细胞的细胞。
在成熟卵巢中，已经形成了一个完整的卵母细胞囊，每个囊中都含有8个成熟的卵细胞。
果蝇卵巢细胞的分裂动态，主要经过三个阶段：有丝分裂前期、有丝分裂中期和有丝分裂后期。
在有丝分裂前期，核膜破裂并开始准备分裂。
在有丝分裂中期，染色质成为密集的结构并开始移向中心区域。
随后，细胞的中心区域形成称为纺锤体的结构，在这个过程中，染色体会结合纤维束的纤维以形成纺锤体。
在有丝分裂后期，细胞分离成两个细胞，并开始重组细胞的核。
果蝇卵巢细胞分裂的动态过程需要借助于一些特定的实验研究方法。
在果蝇卵巢细胞的分裂动态研究中，实验方法主要包括细胞生物学方法、遗传学方法和遗传敲入敲出方法等。
通过这些实验方法，科学家们能够深入地研究果蝇卵巢细胞分裂的相关问题。
在最新的研究中，科学家们在果蝇卵巢细胞分裂的过程中发现，染色体分离的过程需要依靠筛分合成截短系统。
筛分合成截短系统作为一种新型的细胞器，为近年来生物领域中的重要研究方向之一。
这项研究的发现为深入了解生物学中的重大问题和详细了解细胞生物学中的分子机制提供了新视野。
总之，果蝇卵巢细胞分裂动态的研究，尤其是对果蝇卵巢细胞分裂动态的深入了解，对于提高果蝇作为实验生物的应用价值，具有非常重要的意义。
对于未来加强关于果蝇细胞分裂动态的研究，将对生命科学研究的推进和发展带来巨大的突破。
