实验二 凝集、沉淀反应

免疫检验实验凝集沉淀实验一实验名称：免疫凝集类实验实验目的与要求：掌握胶乳凝集试验的原理，熟悉试验方法，了解其应用实验仪器、试剂：RF阳性、阴性对照，胶乳试剂、反应板、血清、生理盐水、吸管、试管、玻片实验原理：凝集反应是完整的细菌、红细胞等颗粒性抗原与相应抗体在一定条件下出现凝集物的现象。

参与反应的抗原称凝集原，抗体称凝集素。

本实验介绍间接凝集反应。

可溶性抗原与抗体结合后不出现凝集。

如把可溶性抗原吸附在载体微球上，成为人工免疫微球，再与抗体结合即出现凝集，此称间接凝集反应。

由于载体微球增大了可溶性抗原的反应面积，微球上少量抗原存在就足以出现肉眼可见的反应。

这种反应的敏感性比沉淀反应高得多。

操作方法：在反应板上依次滴加待检血清，阳性对照、阴性对照各50μl（一滴），然后垂直滴加胶乳试剂1滴，搅匀2～3分钟，肉眼观察结果。

实验现象与数据：出现凝集为阳性，不出现凝集为阴性。

结果分析与结论：实验二实验名称：免疫沉淀类实验实验目的与要求：掌握抗原抗体反应的特异性和沉淀反应的原理；熟悉双向琼脂扩散的操作方法和结果分析。

实验仪器、试剂：待检血清、抗人IgG血清，琼脂、玻片、打孔器、生理盐水实验原理：双向扩散实验是一种定性及半定量试验方法。

先将一定量琼脂倾注于平板上。

凝固后打孔。

加入待测抗原及抗体。

抗原、抗体向孔四周扩散，在比例恰当处形成抗原抗体复合物，呈白色沉淀线，如将抗体作倍比稀释，根据白色沉淀线逐渐消失的情况可测定抗体效价。

操作方法：1、制备琼脂板：将已溶化的盐水琼脂（15g/L）4ml倾注于水平放置的载玻片上，制成约1.5mm厚的琼脂板。

2、打孔：用打孔器打双孔3、加样：在对应孔中加入抗原抗体4、温育：37℃，湿盒中温育24h后观察结果分析与结论：。

对流免疫电泳实验报告【篇一：实验十一免疫电泳】免疫电泳技术抗原与抗体的结合在沉淀反应中，呈一定的分子比例。

不同抗原和抗体之间的分子比例是不同的，但只有在分子比例合适时，才出现可见的沉淀。

所以沉淀能否出现并不完全反映抗原和抗体是否存在和发生结合。

抗原结合多个抗体分子，称抗原为多价；抗体一般只能结合两个抗原分子（igm类抗体分子通常可以结合5个抗原分子）的抗原决定法簇，故为二价。

只有在彼此的结合价饱和时，才出现大量的抗原-抗体复合物沉淀。

当抗原与抗体的比例合适时，即二者结合价彼此饱和，就可形成网状结构的大分子抗原-抗体复合物沉淀，称为等价带。

若比例不合适时，抗体或抗原过量，则虽有抗原、抗体的结合，但不能大量形成网状结构的大分子复合物，沉淀量很少，甚至不出现沉淀。

在抗原、抗体数量关系曲线中，抗体过剩区域称为抗体过剩带，抗原过剩区域称为抗原过剩带。

如图1所示，在等价带的反应液中加入过量的抗原或抗体，沉淀复合物就会有部分溶解，甚至全部溶解的现象。

这是由于新加入的抗原或抗体竞争地结合相应的抗体或抗原，使网状大分子结构破坏，形成小分子复合物，致使沉淀出现溶解，沉淀量减少甚至完全消失。

在沉淀反应中，由于抗原过量而不出现沉淀的现象，称为前带现象。

此时不能误认为无沉淀就是无抗原存在，为了检测就必须稀释抗原。

抗体过量时，称为后带现象，同理需要稀释抗体进行检测。

图1的位置抗原与抗体的结合是依赖于两者分子结构的互补性，故其特异性高。

这种结合也是相当稳定的。

在一定条件下（过酸、过碱或浓盐存在下），二者可以分开，即结合是可逆的。

解离后的抗原、抗体的活性一般保持不变。

双向免疫扩散测定法原理双向扩散法(double diffusion)又称琼脂扩散法，是利用琼脂凝胶为介质的一种沉淀反应。

琼脂或琼脂糖凝胶是多孔的网状结构，大分子物质可以自由通过，这种分子的扩散作用可使分别处于两处的抗原和相应的抗体通过扩散相遇，形成抗原-抗体复合物，比例合适时出现沉淀。

沉淀反应实验报告沉淀反应实验报告引言：沉淀反应是化学实验中常见的一种反应类型，通过溶液中的离子相互作用形成固态沉淀物。

本次实验旨在通过观察和分析沉淀反应的过程和结果，探究反应条件对沉淀形成的影响。

实验目的：1. 理解沉淀反应的基本原理和过程；2. 掌握沉淀反应的实验操作技巧；3. 研究不同条件下沉淀反应的变化规律。

实验材料和仪器：1. 实验材料：氯化银(AgCl)、氯化钡(BaCl2)、硝酸银(AgNO3)、硫酸钡(BaSO4)、盐酸(HCl)、硝酸(HNO3)、蒸馏水；2. 实验仪器：试管、滴管、玻璃棒、烧杯、热水浴。

实验步骤：1. 实验前准备：清洗实验仪器，准备所需试剂；2. 实验一：向两个试管中分别加入等量的氯化银溶液和硝酸银溶液，观察并记录反应结果；3. 实验二：向两个试管中分别加入等量的氯化钡溶液和硫酸钡溶液，观察并记录反应结果；4. 实验三：在一试管中加入氯化银溶液，滴加盐酸，观察并记录反应结果；5. 实验四：在一试管中加入氯化银溶液，滴加硝酸，观察并记录反应结果；6. 实验五：在一试管中加入氯化银溶液，加热至沸腾，观察并记录反应结果。

实验结果和分析：1. 实验一中，氯化银溶液与硝酸银溶液反应后生成白色沉淀，即氯化银(AgCl)。

这是因为氯化银溶液中的氯离子与硝酸银溶液中的银离子发生反应，生成不溶于水的氯化银沉淀。

2. 实验二中，氯化钡溶液与硫酸钡溶液反应后生成白色沉淀，即硫酸钡(BaSO4)。

这是因为氯化钡溶液中的钡离子与硫酸钡溶液中的硫酸根离子发生反应，生成不溶于水的硫酸钡沉淀。

3. 实验三中，氯化银溶液与盐酸反应后生成白色沉淀，即氯化银(AgCl)。

这是因为盐酸中的氯离子与氯化银溶液中的银离子发生反应，生成不溶于水的氯化银沉淀。

此外，盐酸的加入使反应溶液的酸碱度增加，促进了沉淀反应的进行。

4. 实验四中，氯化银溶液与硝酸反应后生成白色沉淀，即氯化银(AgCl)。

这是因为硝酸中的硝酸根离子与氯化银溶液中的银离子发生反应，生成不溶于水的氯化银沉淀。

免疫凝聚反应和免疫沉淀反应的异同免疫凝聚反应和免疫沉淀反应是两种常用的免疫学实验方法，它们在疾病诊断、病原体检测、药物筛选等方面有着广泛的应用。

虽然这两种实验方法都涉及到抗原和抗体的相互作用，但它们的实验原理、操作步骤和结果判定方法有所不同。

一、免疫凝聚反应免疫凝聚反应是一种基于抗原-抗体相互作用的免疫学技术，其原理是在溶液中添加抗原和抗体，当它们结合时会形成可见的凝集物。

根据凝集物的形态，免疫凝聚反应可分为单价凝集和多价凝集两种。

单价凝集是指抗原和抗体在溶液中仅结合一次，形成的凝集物比较小、均匀，如Ouchterlony双扩散法。

多价凝集是指抗原和抗体在溶液中结合多次，形成的凝集物比较大、不规则，如免疫扩散法和免疫电泳法。

在免疫凝聚反应中，抗原和抗体的浓度、PH值、离子强度等条件都会影响凝集的形成和稳定性。

因此，对于不同的实验目的和样品类型，需要选择不同的实验条件和检测方法。

二、免疫沉淀反应免疫沉淀反应是一种通过抗原-抗体相互作用来沉淀抗原的免疫学技术。

其原理是将样品中的抗原和抗体在一定条件下结合，然后加入沉淀剂使其形成沉淀，最后离心分离沉淀物。

与免疫凝聚反应不同，免疫沉淀反应的结果是形成可见的沉淀物，而不是凝集物。

免疫沉淀反应常用于检测血清中的免疫复合物、病原体抗原、药物-蛋白质相互作用等。

在免疫沉淀反应中，抗原和抗体的浓度、PH值、离子强度等条件也会影响沉淀的形成和稳定性。

此外，还需要注意的是选择合适的沉淀剂、离心条件和分离方法，以获得高质量的沉淀物。

三、免疫凝聚反应和免疫沉淀反应的比较虽然免疫凝聚反应和免疫沉淀反应都是基于抗原-抗体相互作用的免疫学实验方法，但它们的实验原理、操作步骤和结果判定方法有所不同。

免疫凝聚反应和免疫沉淀反应的结果形态不同。

前者是凝集物，后者是沉淀物。

其次，两种实验方法选择的条件和操作步骤也不同，如反应体系、反应时间、检测方法等。

最后，两种方法在实验结果的判定上也有所区别，如凝聚环的大小和数量、沉淀物的形态和质量等。

实验二细胞凝集反应生命科学学院生科四班张行润200900140177摘要细胞膜是双层脂嵌蛋白质结构，脂和蛋白质以能与糖分子结合为细胞表面的分支状糖外被。

目前认为：细胞间的联系，细胞的生长各肿瘤发生都和细胞表面的分枝状糖分子有关。

凝集素可以通过使它与细胞表面的糖分子连接，在细胞间形成“桥”的结果，加入能与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。

凝集素是一类含糖、并能与糖专一结合的蛋白质，被认为与糖的运输、储存物质的积累、细胞间的互作以及细胞分裂的调控有关。

凝集素使细胞凝集是因为它与细胞表面的糖分子连接，在细胞间形成“桥”的结果，加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞发生凝集。

大多数凝集素存在于储藏器官中，作为一种氮源；对某些植物而言，受到危害时，凝集素作为一种防御蛋白发挥作用。

凝集素与糖结合的活性及专一性决定其功能。

关键词红细胞凝集；土豆凝集素；PBS前言红细胞凝集反应是指红细胞凝集的现象。

有由病毒、细胞凝集素和抗体而引起的红细胞凝集。

（1）由病毒而引起的凝集：G．H．Hirst（1941）发现流感病毒能使鸡的红细胞发生凝集，其后又发现其它各种病毒也能引起同样的红细胞凝集反应。

即红细胞表面存在着对各种病毒的受体，病毒与受体结合，以红细胞为桥梁的结果而引起凝集。

利用此反应可以进行病毒的定性和定量。

另外，如果存在抗病毒的抗体时，则由病毒引起的凝集作用将被抑制，所以可用于抗病毒抗体的检出。

（2）由抗体引起的凝集：（a）如果存在对红细胞表面决定基的抗体，则红细胞亦将凝集。

可用于测定对抗红细胞的抗体的效价或鉴定人的血型。

（b）在红细胞表面，如果人为地使之吸附或结合特定的抗原物质，则与该抗原相对应的抗体将引起红细胞凝集一、实验目的掌握红细胞凝集的原理与方法二、实验原理细胞膜是双层脂镶嵌蛋白质结构，脂和蛋白质又能与糖分子结合为细胞表面的分枝状糖外被。

目前认为：细胞间的联系，细胞的生长和分化，免疫反应和肿瘤发生都和细胞表面的分枝状糖分子有关。

动物免疫学实验指导实验一凝集试验颗粒性抗原(细菌、螺旋体、红细胞等)与相应抗体结合后，在有适量电解质存在下，抗原颗粒可相互凝集成肉眼可见的凝集块，称为凝集反应(Agglutination reaction)或凝集试验。

参与凝集反应的抗原称为凝集原（Agglutinogen），抗体称为凝集素（Agglutinin）。

细菌或其它凝集原都带有相同的负电荷，在悬液中相互排斥而呈现均匀的分散状态。

抗原与相应抗体相遇后可以发生特异性结合，形成抗原抗体复合物，降低了抗原分子间的静电排斥力，此时已有凝集的趋向，在电解质（如生理盐水）参与下，由于离子的作用，中和了抗原抗体复合物外面的大部分电荷，使之失去了彼此间的静电排斥力，分子间相互吸引，凝集成大的絮片或颗粒，出现了肉眼可见的凝集反应。

根据是否出现凝集反应及其程度，对待测抗原或待测抗体进行定性、定量测定。

凝集反应包括直接凝集反应和间接凝集反应两大类，本实验主要介绍直接凝集反应。

[目的要求]1. 掌握平板凝集试验和试管凝集试验的操作方法。

2. 掌握凝集试验的结果判定及判定标准。

3. 熟悉平板凝集试验和试管凝集试验所需材料和试剂。

[材料与试剂]1. 玻板，载玻片，试管（1cm x 8cm），试管架，刻度吸管，滴管，微量可调加样器，滴头（tip头），牙签或火柴棒，记号笔。

2. 灭菌的生理盐水，灭菌的0.5%石炭酸生理盐水。

3. 布氏杆菌病试管凝集抗原，布氏杆菌病平板凝集抗原，布氏杆菌病虎红平板凝集抗原，布氏杆菌病阳性血清，布氏杆菌病阴性血清，被检血清（牛、羊或猪）。

4. 鸡白痢平板凝集抗原，鸡白痢阳性血清，鸡白痢阴性血清，被检鸡血清。

[实验内容及操作方法]（一）试管凝集试验以牛布氏杆菌病试管凝集试验为例。

1. 试管准备：每份血清用试管4支，另取3支试管作为对照，作好标记，置试管架上。

如被检血清有多份，对照只需做1份。

2. 被检血清稀释：第1管加入2.3 ml 0.5% 石炭酸生理盐水，第2、3、4管加入0.5 ml 0.5% 石炭酸生理盐水；然后用加样器或刻度吸管吸取被检血清0.2 ml ，加入第1管中，反复吹吸5次混匀，吸取1.5 ml 弃之，再吸取0.5 ml 加入第2管中，混匀后吸取0.5 ml 加入第3管，依此类推至第4管，混匀后吸弃0.5 ml （见表1-1）。

实验二细胞凝集反应和细胞膜通透性的观察报告（1）实验二细胞凝集反应和细胞膜通透性的观察一、实验目的1、了解细胞糖被的特点和功能，了解植物凝集素的作用2、了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度二、实验原理1、细胞膜表面的有分支状糖外被，细胞间的联系、细胞的生长和分化、免疫反应、肿瘤的发生等都和细胞表面的分支状糖分子有关。

凝集素（lectin）是一类含糖并能与糖分子专一结合的蛋白质，它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。

凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接，在细胞表面间形成“桥”的结果，加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。

2、细胞膜是细胞与外界环境进行物质交换的结构。

可选择性地让某些物质进出细胞，各种物质出入细胞的方式是不同的，水是生物界最普遍的溶剂，水分子可以按照物质浓度梯度从渗透压低的一侧通过细胞膜向渗透压高的一侧扩散，以至于在高渗环境中，动物细胞会失水而收缩；在低渗环境中，动物细胞会吸水膨胀直至破裂。

本实验将红细胞分别放于各种等渗溶液中，由于红细胞膜对不同溶质的通透性不同，使得不同溶质透入细胞的速度相差很大，有些溶质甚至不能透入细胞。

当溶质分子进入细胞后可引起渗透压升高，水分子随即进入细胞，使细胞膨胀，当膨胀到一定程度时，红细胞膜会发生破裂，血红素溢出，此时，原来不透明的红细胞悬液突然变成红色透明的血红蛋白溶液，这种现象称为红细胞溶血。

由于各种溶质进入细胞的速度不同，所以不同的溶质诱导红细胞溶血的时间不同，相反可通过测量溶血时间来估计细胞膜对各种物质通透性的大小。

三、实验材料、器具和试剂1、器材与仪器：显微镜、载玻片、盖玻片、直管、5ml量筒、滴管、天平、离心管2、材料与试剂：土豆块茎，鸡（采血）、5mmol/LNaCl、65 mmol/LNaCl、0.15 mol/LNaCl、0.8 mol/L甲醇、0.8 mol/L丙三醇、2% Triton X-100、氯仿、PBS缓冲液、生理盐水四、实验步骤（一）细胞凝集反应1、2%鸡血红细胞悬液制备：以无菌方法抽取鸡静脉血液（加抗凝剂），用生理盐水洗5次，每次2000rpm离心5 min，最后按沉淀压积的红细胞体积，用生理盐水配成2％红细胞悬液待用。

沉淀反应和凝集反应的异同点一、引言沉淀反应和凝集反应是化学中常见的反应类型，它们在实验室和工业生产中都有广泛应用。

这两种反应都是由于物质之间的相互作用而发生的，但是它们在本质上有很大的区别。

本文将从不同角度比较沉淀反应和凝集反应的异同点。

二、定义沉淀反应是指在两种溶液中加入适量反应物后，产生难溶性固体沉淀的化学反应。

凝集反应则是指在介质中存在着一定浓度的胶体颗粒，在加入适量凝集剂后，颗粒聚集形成较大的团块或者沉淀。

三、化学基础1. 反应类型沉淀反应属于双离子交换反应，即两种带电离子交换配位基团而形成新物质。

凝集反应则属于胶体物理学范畴。

2. 反应机制沉淀反应通常是由于配位基团之间形成了较弱的键而发生的。

而凝集剂通常会与胶体颗粒表面上带电离子相互作用，使得颗粒聚集形成较大的团块或者沉淀。

四、实验操作1. 反应条件沉淀反应通常需要控制反应物浓度、温度和pH等因素。

而凝集反应则需要控制凝集剂浓度、介质pH和温度等因素。

2. 实验方法沉淀反应通常采用滴定法或者比色法进行分析，如Mohr滴定法、Fajans滴定法和Gravimetric分析法等。

凝集反应则通常采用光散射或者电泳等技术进行分析。

五、应用领域1. 工业生产沉淀反应常用于废水处理、金属提取和药物合成等工业生产中。

而凝集反应则广泛应用于纸浆造纸、矿物选矿和废水处理等领域。

2. 生命科学在生命科学领域，沉淀反应被广泛用于蛋白质纯化和酶活性检测等方面。

而凝集反应则被广泛用于细胞分离和药物输送系统的设计等方面。

六、总结通过以上比较可以看出，沉淀反应和凝集反应在反应类型、反应机制、实验操作和应用领域等方面都有很大的不同。

虽然它们都是由于物质之间的相互作用而发生的，但是它们所涉及的化学基础和实验方法都有很大的差别。

因此，在实际应用中需要根据需求选择合适的反应类型和方法。

常见抗原抗体反应种类引言：抗原抗体反应是生物学研究中的重要领域，它涉及到免疫系统的功能与调节机制。

在这篇文章中，我们将介绍一些常见的抗原抗体反应种类，包括沉淀反应、凝集反应、中和反应、荧光反应和免疫组化。

一、沉淀反应沉淀反应是指当抗原与抗体结合后，形成可见的沉淀物。

这种反应通常发生在溶液中，例如在免疫沉淀试验中。

通过加入沉淀剂，如聚乙二醇，可以促使抗原和抗体结合形成沉淀物。

沉淀反应的结果可以通过肉眼观察或显微镜观察来确定。

二、凝集反应凝集反应是指抗原与抗体结合后，形成可见的凝集物。

这种反应通常发生在液体中，如血清凝集试验中。

当抗原与抗体结合后，它们会形成凝集物，这些凝集物可以通过肉眼观察或显微镜观察来确定。

凝集反应在临床诊断中具有重要的应用价值，可以用于检测特定疾病的诊断和监测。

三、中和反应中和反应是指抗体与抗原结合后，阻止抗原的活性或入侵机体。

这种反应通常发生在体内，例如针对病毒或细菌的中和抗体。

当中和抗体与病原体结合后，它们可以阻止病原体进入或感染宿主细胞。

中和反应是免疫系统中重要的防御机制，对于预防病毒感染和细菌感染具有重要意义。

四、荧光反应荧光反应是指通过使用荧光标记的抗体来检测特定抗原。

在荧光免疫分析中，荧光染料被标记在抗体上，当这些荧光标记的抗体与目标抗原结合时，可以通过荧光显微镜观察到荧光信号。

荧光反应在生物医学研究中具有广泛的应用，可以用于检测抗原的存在和定位。

五、免疫组化免疫组化是指通过使用特异性抗体来检测组织中的特定分子。

在免疫组化实验中，组织样本被固定和切片，然后与特异性抗体结合。

通过使用染色剂或荧光标记的二抗来检测抗原-抗体结合，可以观察到抗原在组织中的位置和表达水平。

免疫组化广泛应用于疾病诊断和医学研究领域。

结论：抗原抗体反应是免疫系统中重要的功能机制，涉及到多种反应类型。

沉淀反应、凝集反应、中和反应、荧光反应和免疫组化是常见的抗原抗体反应种类。

这些反应不仅在基础科学研究中有重要应用，也在临床诊断和医学研究中具有广泛的应用前景。