青梅精对乳腺癌、肝癌细胞增殖抑制率的研究
- 格式:pdf
- 大小:455.76 KB
- 文档页数:5
杠柳苷元抑制人乳腺癌细胞增殖作用的研究【摘要】目的观察杠柳苷元(periplogenin)对人乳腺癌细胞MCF7的抑制作用并考察其抑制作用的机理。
方法使用四氮唑盐(MTT)法测定杠柳苷元对MCF7细胞的增殖抑制效果,并使用蛋白免疫印迹法测定其中凋亡蛋白的表达。
结果杠柳苷元对MCF7细胞起到了明显的抑制作用,其抑制作用呈剂量依赖性,蛋白免疫印迹法也观察到杠柳苷元促进MCF7细胞内凋亡相关蛋白的表达,其表达呈时间依赖性。
结论杠柳苷元具有显著的体外抑制MCF7细胞增殖的作用,其抑制作用是通过促进MCF7细胞凋亡而发挥的。
【关键词】杠柳苷元;乳腺癌;凋亡近年来,随着中药有效成分研究的进展,对于传统中药香加皮研究发现了多种不同于传统应用的药理学作用,例如抗炎作用[4]、强心作用[5]、抗癌作用[6]等,而其中杠柳苷元是香加皮产生抗炎作用的物质基础[4],并在香加皮抗肿瘤的过程中发挥了重要作用。
为观察杠柳苷元的体外抗乳腺癌细胞的作用,对其机制做较为深入的探讨,特开展本实验,为客观评价和进一步开发研究其临床应用价值提供实验依据。
1 材料与方法1.1 仪器与试剂杠柳苷元由中药香加皮提取纯化而得到,纯度大于98%;MCF7由沈阳药科大学中日医药研究所惠赠;DMEM培养液购自Hyclone公司(UT,USA);胎牛血清购自TBD公司(天津,中国),proCaspase9、Caspase9、Caspase3抗体及辣根过氧化酶标记的二抗购自Santa Cruz公司(CA,USA),MTT 购自Sigma公司(MO,USA)。
其他试剂均为分析纯。
使用的仪器为二氧化碳培养箱(NuAir,USA),DYY III28A型蛋白电泳仪(北京,中国),酶联免疫分析仪(Tecan,Austria)。
1.2 实验方法①MTT法:取处于对数生长期的MCF7细胞,以1×105cell/ml 的密度接种于96孔板中,每孔100 μl,培养18 h后,加入含有杠柳苷元(0160 μm)的培养液,于37℃,5%CO2条件下继续培养18 h,在显微镜下观察细胞形态学的变化后,每孔加入MTT 15 μl(5 g/L),DMSO150 μl溶解后,于酶标仪492 nm 处检测,测定吸光值,并计算抑制率,绘制各点的抑制率反应曲线。
青蒿素对乳腺癌MT40的抑制作用及对CD71表达的影响余和平;崔乐;王必蓉;潘跃进【摘要】目的探讨青蒿素对乳腺癌细胞MT40的抑制作用及对CD71表达的影响.方法采用噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度青蒿素对乳腺癌MT40细胞的增殖抑制作用,流式细胞仪检测其对CD71表达的影响.建立MT40荷瘤小鼠模型,分为阴性对照组、青蒿素实验组、阳性对照组,测量各组肿瘤体积并制作生长曲线,检测各组肿瘤组织的细胞凋亡率及CD71的表达.结果不同浓度的青蒿素作用后,均对MT40细胞增殖产生了抑制作用,50、100、150、200 μmol/L青蒿素实验组细胞增殖抑制率分别为(16.32±0.12)%、(28.13±0.28)%、(44.36±0.23)%、(54.32±0.41)%,呈剂量依赖性;青蒿素作用后MT40细胞CD71表达受到抑制,50、100、150、200 μmol/L青蒿素实验组细胞CD71阳性表达率分别为(54.43±2.15)%、(46.32±2.14)%、(37.22±1.98)%、(30.75±2.87)%,100 μm ol/L及以上浓度青蒿素可以明显抑制细胞CD71的表达(P<0.05).与阴性对照组比较,青蒿素实验组、阳性对照组荷瘤鼠肿瘤生长均受到抑制(均P<0.05);细胞凋亡率,青蒿素实验组为(21.23±4.56)%,阳性对照组为(17.42±1.23)%,阴性对照组为(1.22±0.33)%,青蒿素实验组与阴性对照组相比差异有统计学意义(t=8.193,P<0.05),而与阳性对照组相比差异无统计学意义(t=1.140,P>0.05);CD71表达阳性率,阴性对照组为(77.81±4.33)%,阳性对照组为(70.42±5.23)%,青蒿素实验组为(40.23±4.56)%,青蒿素实验组与阴性对照组相比差异有统计学意义(t=7.371,P<0.05),与阳性对照组相比差异亦有统计学意义(t=5.338,P<0.05).结论青蒿素对乳腺癌细胞MT40具有显著抑制生长、诱导细胞凋亡作用,其机制可能与下调肿瘤组织CD71的表达有关.【期刊名称】《华中科技大学学报(医学版)》【年(卷),期】2016(045)006【总页数】5页(P618-622)【关键词】青蒿素;乳腺癌;CD71;细胞凋亡【作者】余和平;崔乐;王必蓉;潘跃进【作者单位】武汉市普爱医院甲状腺乳腺外科,武汉430033;武汉市普爱医院甲状腺乳腺外科,武汉430033;武汉市普爱医院甲状腺乳腺外科,武汉430033;武汉市普爱医院甲状腺乳腺外科,武汉430033【正文语种】中文【中图分类】R737.9乳腺癌是女性发病率最高的恶性肿瘤,在乳腺癌综合治疗中,药物治疗占重要地位,临床广泛使用的化疗药物易产生显著的毒副作用及耐药性。
《五味子酯甲抑制头颈癌细胞增殖以及诱导凋亡的研究》一、引言头颈癌是一种常见的恶性肿瘤,其发病率在全球范围内呈现逐年上升的趋势。
由于头颈癌的恶性程度高,对患者的生命健康构成了严重威胁。
因此,研究头颈癌的发病机制以及寻找有效的治疗方法成为医学界的重大课题。
近年来,五味子酯甲因其具有显著的抗肿瘤活性,引起了科研人员的广泛关注。
本文旨在研究五味子酯甲对头颈癌细胞增殖的抑制作用以及诱导凋亡的机制,以期为头颈癌的治疗提供新的思路和方法。
二、材料与方法1. 材料本研究所用五味子酯甲为纯度较高的药用级产品,头颈癌细胞系选用常见的癌细胞株。
实验所需试剂及仪器均符合实验要求。
2. 方法(1)细胞培养:采用适宜的培养基对头颈癌细胞进行培养,并观察细胞的生长状态。
(2)药物处理:将五味子酯甲以不同浓度加入培养基中,观察细胞的变化。
(3)细胞增殖检测:采用MTT法检测五味子酯甲对头颈癌细胞增殖的抑制作用。
(4)凋亡检测:通过流式细胞术、Western blot等方法检测五味子酯甲诱导头颈癌细胞凋亡的情况。
(5)数据分析:对实验数据进行统计分析,绘制图表,分析五味子酯甲对头颈癌细胞的抑制及凋亡诱导作用。
三、实验结果1. 五味子酯甲对头颈癌细胞增殖的抑制作用实验结果显示,五味子酯甲在较低浓度下即可显著抑制头颈癌细胞的增殖,且随着浓度的增加,抑制作用逐渐增强。
MTT法检测结果显示,五味子酯甲处理后的头颈癌细胞生长明显减缓。
2. 五味子酯甲诱导头颈癌细胞凋亡的作用流式细胞术检测结果显示,五味子酯甲处理后的头颈癌细胞出现了明显的凋亡现象。
Western blot检测结果显示,五味子酯甲处理后,头颈癌细胞中凋亡相关蛋白的表达发生了明显变化,表明五味子酯甲通过调控凋亡相关蛋白的表达来诱导细胞凋亡。
3. 五味子酯甲的作用机制根据实验结果,我们推测五味子酯甲可能通过抑制头颈癌细胞的增殖相关信号通路,同时激活凋亡相关信号通路,从而达到抑制头颈癌细胞增殖和诱导凋亡的作用。
青蒿素对乳腺癌MT40细胞的生长抑制作用及CD71表达的影响和后遗效应余和平;崔乐;王必蓉;刘键桦;王坤【摘要】Objective To study the cytotoxic effect of Artemisinin in different concentration on breast cancer MT40 cells and expression of CD71 and residual effect in vitro.Methods MT40 cells in logarithmic growth phase were divided into 20 ,40 , 60 and 80 μmol/L concentration Artemisinin groups and negative control group ,positive control group.Flow cytometry(FCM) was used to detect apoptosis and cell cycle change and the expression of CD71 of breast cancer MT40 cells after being treated by Artemisinin.The growth curve was drawn and the doubling time of surviving cells calculate.The experiment was repeated 3 times.Results Apoptosis rate of MT40 cells in 20 ,40 ,60 and 80 μmol/L concentration Artemisinin group s was (6.81 ± 1.28)%,(10.55 ± 3.49)%,(17.12 ± 3.73)% and(19.50 ± 3.70)%,respectively;the apoptosis rate of negative control and positive control was (1.15 ± 0.21)% and(2.45 ±0.53)%,respectively;Artemisinin significantly increased apoptosis rate of MT40 cells(all P<0.05).After MT40 cells were treated by Artemisinin in different concentration ,the cells at G0/G1increased and those at G2/M and S decreased(all P<0.05).The expression of CD71 of MT40 cells was inhibited by Artemisinin in differ-ent concentration ,the expression rate of CD71 was(57.42 ± 3.45)%,(50.38 ± 3.22)%,(47.23 ± 2.35)% and (43.27 ± 2.86)%,respectively in 20 ,40 ,60 and 80 μmol/L Artemisiningroup ,respectively;the expression rate of CD71 in negative con-trolwas(62.90 ± 2.41)%,the expression rate of CD71 of positive controlwas(60.13 ± 2.89)%;Artemisinin inhibited the ex-pression of CD71 of MT40 cells in different concentration(all P<0.05).The peak of the growth curve of surviving cells in each Artemisinin groups moved backwards ,the doubling time of the surviving cells in each groups was 0.59 ,0.59 ,0.61 ,0.65 ,0.71 , 0.78 days respectively in negative control ,positive control and20 ,40 ,60 ,80 μmol/L Artemisinin group ,respectively. Conclusion Artemisinin can induce apoptosis ,block M T40 cells at G0/G1phase and depress the expression of CD71 and extend the doubling time in surviving cells in vitro.%目的探讨不同浓度的青蒿素对乳腺癌M T40细胞的生长抑制作用和CD71表达的影响及后遗效应.方法将处于对数生长期的MT40细胞分为20 、40 、60 、80 μmol/L青蒿素实验组及不加任何药物的阴性对照组、10 μmol/L 丝裂霉素的阳性对照组,采用流式细胞仪检测各组M T40细胞凋亡及细胞周期变化及CD71的表达,绘制各实验组后遗细胞生长曲线,计算细胞倍增时间,实验重复3次.结果 20 、40 、60 、80 μmol/L青蒿素实验组细胞凋亡率分别为(6. 81 ± 1. 28)%、(10.55 ± 3.49)%、(17.12 ± 3.73)%、(19.50 ± 3.70)%,阴性对照组为(1.15 ± 0.21)%,阳性对照组为(2. 45 ± 0.53)%,青蒿素明显提高MT40细胞凋亡率(均 P<0.05).不同浓度青蒿素作用于MT40细胞后,G0/G1期细胞增加,G2/M及S 期细胞减少(均 P< 0.05). 20 、40 、60 、80 μmol/L 青蒿素实验组细胞 CD71表达率分别为(57.42 ± 3. 45)%、(50. 38 ± 3. 22)%、(47. 23 ± 2.35)%、(43. 27 ± 2. 86)%,阴性对照组为(62.90 ± 2. 41)%,阳性对照组为(60. 13 ± 2.89)%,青蒿素抑制了MT40细胞CD71的表达(均 P<0.05). 20 、40 、60 、80 μmol/L青蒿素实验组后遗细胞生长曲线峰值后移(F= 11.86 ,P<0.01).各组后遗细胞倍增时间,阴性对照组和阳性对照组均为0.59 d ,20 、40 、60 、80 μmol/L青蒿素组分别为0.61 、0.65 、0.71 、0.78 d .结论青蒿素对乳腺癌M T40细胞具有诱导细胞凋亡,阻滞细胞于G0/G1期,下调细胞CD71表达的作用,并具有使MT40细胞倍增时间延长的后遗效应.【期刊名称】《华中科技大学学报(医学版)》【年(卷),期】2018(047)003【总页数】5页(P295-299)【关键词】青蒿素;CD71;乳腺癌;细胞凋亡;细胞周期阻滞;后遗效应【作者】余和平;崔乐;王必蓉;刘键桦;王坤【作者单位】武汉市第四医院华中科技大学同济医学院附属普爱医院甲乳外科,武汉 430033;武汉市第四医院华中科技大学同济医学院附属普爱医院甲乳外科,武汉430033;武汉市第四医院华中科技大学同济医学院附属普爱医院甲乳外科,武汉430033;武汉市第四医院华中科技大学同济医学院附属普爱医院甲乳外科,武汉430033;武汉市第四医院华中科技大学同济医学院附属普爱医院甲乳外科,武汉430033【正文语种】中文【中图分类】R737.9乳腺癌是女性发病率最高的恶性肿瘤,每年新发病例超过100万,死亡率为女性恶性肿瘤的第2位[1]。
Hans Journal of Food and Nutrition Science 食品与营养科学, 2019, 8(1), 75-79Published Online February 2019 in Hans. /journal/hjfnshttps:///10.12677/hjfns.2019.81010Research on Inhibition Rate of Plum Essence to the Proliferation of Breast Cancer CellsMCF-7 and Liver Cancer Cells HepG2Duo Liang, Zhijun LiuGuangdong Vocation College of Science and Trade, Guangzhou GuangdongReceived: Jan. 26th, 2019; accepted: Feb. 8th, 2019; published: Feb. 15th, 2019AbstractPlum is an important characteristic fruit in mountainous area. Plum essence is a traditionalprocessed food. It has been reported that it can kill bacteria and inhibit tumors. In this paper, the inhibitory effect of plum essence on breast cancer cell MCF-7 and hepatoma cell HepG2 was stu-died. The results showed that plum essence can inhibit the growth of breast cancer cell line MCF-7and HepG2. The proliferation of breast cancer cells MCF-7 and HepG2 cells was inhibited to vary-ing degrees in all dosage groups, and the dose-effect relationship was obvious. The inhibitory rates of 5 mg∙mL−1to breast cancer MCF-7 cells and hepatoma HepG2 cells were 82.18% and81.22%, respectively.KeywordsPlum Essence, Breast Cancer Cells, Liver Cancer Cells青梅精对乳腺癌、肝癌细胞增殖抑制率的研究梁多,刘智均广东科贸职业学院,广东广州收稿日期:2019年1月26日;录用日期:2019年2月8日;发布日期:2019年2月15日摘要青梅是重要的山区特色水果,青梅精是一种传统的加工食品,据报道有杀菌、抑制肿瘤等作用。
预知子、白花蛇舌草抑制肝癌细胞恶性增殖的研究任红艳,方肇勤,梁超(上海中医药大学,上海201203)摘要:目的:在中医药常用治法方药中筛选最具抑制肝癌细胞恶性增殖的药物。
方法:采用MTT 法和细胞形态学检查,观察中药行气活血方、清热解毒方及其各组成药物乙醇提取物及联合细胞毒抗生素G418对肝癌细胞恶性增殖的抑制作用。
结果:清热解毒方及各单味药物对肝癌细胞恶性增殖均具有不同程度的抑制作用,存在量效关系;其中5mg /ml 白花蛇舌草对肝癌细胞的增殖抑制作用最强(P <0.05)。
行气活血方及各单味药物对肝癌细胞恶性增殖也多具不同程度的抑制作用,存在量效关系;其中5mg /mL 预知子的作用尤为突出,强于阳性对照G4180.6mg /mL (P <0.01)。
2.5mg /mL 预知子联合0.3mg /mL G418用药,其对肝癌细胞恶性增殖的抑制作用接近0.6mg /mL G418,提示有减量增效作用。
无论是单独用药还是联合G418,预知子对肝癌细胞恶性增殖的抑制作用均显著于白花蛇舌草(P <0.01)。
结论:预知子、白花蛇舌草是抑癌扶正行气活血方中抑制肝癌细胞恶性增殖的主要药物,其中预知子的作用最显著。
预知子联合细胞毒抗生素,具有减少细胞毒抗生素用量且增效的作用。
关键词:肝癌;SMMC7721细胞;预知子;白花蛇舌草;减量增效中图分类号:R965文献标志码:B 文章编号:1000-1719(2013)12-2553-03Research of Akebia Fruit and Oldenlandia Diffusa InhibitingLiver Cancer Cells Malignant ProliferationREN Hongyan ,FANG Zhaoqin ,LIANG Chao(Shanghai University of Chinese Medicine ,Shanghai 201203,China )Abstract :Objective :To select Chinese herbs which can inhibit the hepatoma carcinoma cells malignant proliferation effective-ly ,from prescriptions of the Chinese medicinal common therapies.Methods :To observe the inhibiting effect for hepatoma carcino-ma cells malignant proliferation ,this was generated by ethanol extract of the promoting qi to activate blood prescription and clear-ing away heat and toxic materials prescriptions ,and the single Chinese herbs which composed the prescriptions ,as well as unitedwith cytotoxicity antibiotic G418,via MTT and cell morphology examining.Results :Clearing away heat and toxic materials prescrip-tion and the single Chinese herbs which composed prescription all could inhibit hepatoma carcinoma cells malignant proliferation and dose -effect relationship existed.In the which ,the inhibiting effect of Oldenlandia diffusa ethanol extract (5mg /mL )was the best (P <0.05).Promoting qi to activate blood prescription and the single Chinese herbs which composed prescription also could inhibit hepatoma carcinoma cells malignant proliferation and dose -effect relationship existed too.In the which ,the inhibiting effect of Akebia fruit ethanol extract (5mg /mL )was the best (P <0.01),and also better than G418(0.6mg /mL ).Akebia fruitethanol extract (2.5mg /mL )united with G418(0.3mg /mL )could inhibit hepatoma carcinoma cells proliferation well ,and the inhibiting effect was close to the G418's (0.6mg /mL ).This indicated that the united therapy could result in reducing dose andenhancing effect at same time.The inhibiting effect of Akebia fruit ethanol extract is always better than Oldenlandia diffusa ,wheth-er single use or united G418use.Conclusion :Akebia fruit and Oldenlandia diffusa are main Chinese herbs to inhibit hepatoma carcinoma cells maliganant proliferation.In the which ,Akebia fruit's inhibiting effect is remarkable.And Akebia fruit united with G418could produce reducing dose and enhancing effect at same time.Key words :hepatoma carcinoma ;SMMC7721cell ;Akebia fruit ;Oldenlandia diffusa ;reducing dose and enhancing effect 收稿日期:2013-06-12基金项目:国家自然科学基金资助项目(30973703;81273641);上海市教委项目(2010JW05)作者简介:任红艳(1981-),女,甘肃临洮人,博士研究生,研究方向:中医药防治肿瘤的基础研究。
不同三叶青提取物体外抗肿瘤细胞作用研究邱模昌;徐子金;杨章坚【摘要】目的明确三叶青水、乙醇、乙酸乙酯三种提取物体外对乳腺癌细胞(MCF-7)的抑制作用,分析不同提取方式对肿瘤细胞抑制强弱差异.方法 MTT法检测三叶青三种提取物含药血清分别在2、10、50、100、200μg·mL-1时对MCF-7细胞存活率的影响;采用流式细胞仪检测三种提取物含药血清在200μg·mL-1浓度时对MCF-7细胞凋亡的影响.结果三种提取物均具有与浓度相关的MCF-7细胞体外抑制作用(P<0.05),作用强弱依次是乙酸乙酯提取物>乙醇提取物>水提取物;三种提取物均能促进MCF-7细胞凋亡(水、乙醇组P<0.05,乙酸乙酯组P<0.01);乙酸乙酯提取物比水提物组、乙醇组具有更强的凋亡促进作用(P<0.05).结论三种提取物均具有体外抗乳腺癌MCF-7细胞作用,其中乙酸乙酯提取物作用最强.【期刊名称】《中国中医药现代远程教育》【年(卷),期】2018(016)017【总页数】3页(P93-95)【关键词】三叶青;乳腺癌细胞;提取物;细胞存活率【作者】邱模昌;徐子金;杨章坚【作者单位】江西医学高等专科学校药学系,江西上饶334000;江西医学高等专科学校药学系,江西上饶334000;江西医学高等专科学校药学系,江西上饶334000【正文语种】中文三叶青 (Tetrastigmatis hemsleyani)为葡萄科植物三叶崖爬藤的块根或全草,别名为金线吊葫芦、丝线吊金钟、三叶扁藤等[1],为江西省道地药材。
近年来,对于三叶青抗肿瘤活性研究较多,三叶青黄酮能显著地抑制肺癌A549细胞、SGC-7901胃癌细胞、及SMMC-7721肝癌细胞的生长,并且具有浓度依赖性[2-4]。
三叶青乙酸乙酯提取物能有效抑制结肠癌HT-29细胞、白血病HL60细胞、颈癌Hela细胞[5-7]的增殖。
三叶青乙醇提取物在一定浓度范围内能抑制恶性黑色素瘤A375细胞的增殖,且呈剂量依赖关系[8]。
生精汤对乳腺癌MCF—7细胞增殖影响的实验研究目的观察生精汤对雌激素依赖性乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响,揭示生精汤的雌激素活性。
方法选用乳腺癌MCF-7细胞株,应用细胞增殖实验(E-SCREEN法)来检测生精汤的雌激素作用。
实验可分为空白对照组与雌激素对照组(己烯雌酚,30 μg/mL)和生精汤低、中、高剂量组(分别为500、800、1000 μg/mL),观察给药前后的细胞形态学变化,并运用四唑盐比色法(MTT法)测定乳腺癌MCF-7细胞的增殖率。
结果生精汤高、中、低剂量组均可明显提高乳腺癌MCF-7细胞的增殖率,并呈现一定的量效关系。
结论生精汤能显著提高乳腺癌MCF-7细胞的增殖率,即具有明显的雌激素样作用。
标签:乳腺癌MCF-7细胞;生精汤;细胞增殖多囊卵巢综合征(PCOS)是妇科临床常见的内分泌失调性疾病,近年来发病率呈上升趋势[1]。
中医中药从整体观念出发,治疗本病有独特优势。
生精汤即为经过多年临床证明能有效治疗多囊卵巢综合征的中药复方[2,3],由菟丝子、淫羊藿、女贞子、补骨脂等药配伍而成。
据文献报道,生精汤中的组成中药如菟丝子[4]、淫羊藿[5]、女贞子[6]等提取物均具有雌激素样作用,提示本方可能是通过雌激素样作用来对抗多囊卵巢综合征中的雄激素过多,调节下丘脑-垂体-卵巢轴的内分泌系统紊乱,从而起到治疗作用。
MCF-7细胞增殖实验即E-SCREEN 法作为评价药物雌激素活性的一种经典方法,灵敏度高,方便快捷,其原理是根据雌激素受体(ER)阳性的MCF-7乳腺癌细胞株,可在雌激素或雌激素样物质的刺激下发生增殖[7]。
因此,本实验利用ER阳性乳腺癌MCF-7细胞增殖实验,观察生精汤对乳腺癌MCF-7细胞增殖的作用,评价其植物雌激素活性,揭示其对多囊卵巢综合征的作用机制,为指导临床妇科疾病用药提供参考。
1 材料与方法1.1材料1.1.1 实验材料生精汤由以下各味中药组成:菟丝子、淫羊藿、女贞子、补骨脂、熟地、山药、鸡血藤、刘寄奴、王不留行、制香附、生麦芽,均购置于浙江中医药大学中药饮片厂。
青梅果药理学作用研究进展作者:赵维薇申元英来源:《安徽农业科学》2017年第04期摘要对青梅果的抗菌作用、抗病毒作用、抗肿瘤作用、代谢调节作用及其他药理学作用近年来的研究成果进行综述,以期为青梅的深入研究和开发利用提供参考。
关键词青梅;药理学作用;抗菌;抗病毒;抗肿瘤;代谢调节中图分类号 S662.4 文献标识码 A 文章编号 0517-6611(2017)04-0128-04Research Progress on Pharmacological Effects of Prunus mume FruitZHAO Wei-wei,SHEN Yuan-ying (College of Public Health,Dali University,Dali,Yunnan 671000)Abstract This paper summarized the research progress on the antibacterial,antiviral,antitumor effect and metabolic regulation effect of Prunus mume,which could provide references for its further research and development.Key words Prunus mume;Pharmacological effects;Antibacterial;Antiviral;Antitumor;Metabolic regulation青梅(Prunus mume Sieb.et Zucc.),又称果梅、酸梅等,蔷薇科植物,原产我国,目前主要分布在我国的广东、浙江、江苏、广西、云南、福建、湖南、台湾等地,在日本、韩国、朝鲜也有大量的栽培,在日本常称为“Ume”或“Japanese apricot”,韩国称为“Maesil” [1-2]。
Hans Journal of Food and Nutrition Science 食品与营养科学, 2019, 8(1), 75-79Published Online February 2019 in Hans. /journal/hjfnshttps:///10.12677/hjfns.2019.81010Research on Inhibition Rate of Plum Essence to the Proliferation of Breast Cancer CellsMCF-7 and Liver Cancer Cells HepG2Duo Liang, Zhijun LiuGuangdong Vocation College of Science and Trade, Guangzhou GuangdongReceived: Jan. 26th, 2019; accepted: Feb. 8th, 2019; published: Feb. 15th, 2019AbstractPlum is an important characteristic fruit in mountainous area. Plum essence is a traditionalprocessed food. It has been reported that it can kill bacteria and inhibit tumors. In this paper, the inhibitory effect of plum essence on breast cancer cell MCF-7 and hepatoma cell HepG2 was stu-died. The results showed that plum essence can inhibit the growth of breast cancer cell line MCF-7and HepG2. The proliferation of breast cancer cells MCF-7 and HepG2 cells was inhibited to vary-ing degrees in all dosage groups, and the dose-effect relationship was obvious. The inhibitory rates of 5 mg∙mL−1to breast cancer MCF-7 cells and hepatoma HepG2 cells were 82.18% and81.22%, respectively.KeywordsPlum Essence, Breast Cancer Cells, Liver Cancer Cells青梅精对乳腺癌、肝癌细胞增殖抑制率的研究梁多,刘智均广东科贸职业学院,广东广州收稿日期:2019年1月26日;录用日期:2019年2月8日;发布日期:2019年2月15日摘要青梅是重要的山区特色水果,青梅精是一种传统的加工食品,据报道有杀菌、抑制肿瘤等作用。
本文研梁多,刘智均究了青梅精对乳腺癌细胞MCF-7和肝癌细胞HepG2的抑制作用,结果显示:青梅精各剂量组都能不同程度的抑制乳腺癌细胞MCF-7和肝癌HepG2细胞的增殖,且呈现明显剂量–效应关系。
青梅精浓度5 mg∙mL−1对乳腺癌MCF-7细胞和肝癌HepG2细胞抑制率分别达82.18%和81.22%。
关键词青梅精,乳腺癌细胞,肝癌细胞Copyright © 2019 by author(s) and Hans Publishers Inc.This work is licensed under the Creative Commons Attribution International License (CC BY)./licenses/by/4.0/1. 引言青梅又称酸梅、果梅,为蔷薇科杏属乔木果实,原产于我国,栽培历史在3000年以上[1],主要分布于长江流域及华南、西南地区一带,以广东、广西、云南、福建、浙江、江苏等省的产量较多。
青梅适合种植在丘陵地带和山区,青梅产品加工是山区人民脱贫致富的途径之一。
青梅是我国传统的药食兼用果品,因其酸涩味强而鲜食量少,多用于加工[2]。
青梅据报道有抗肿瘤[3][4]、保护肝脏[5]、抑菌[6]、抗氧化[7]等作用。
本草纲目记载青梅加工产品乌梅归肝、脾、肺、大肠经,具有敛肺、涩肠、治久咳、疟痢、反胃、噎隔、蛔厥、吐利、消肿、涌痰、杀虫、解毒等功效[8]。
青梅主要用于加工果脯、蜜饯、青梅饮料、青梅酒、青梅果酱、青梅醋、青梅精[9][10][11][12]等产品。
其中青梅精是日本一种传统的青梅加工产品,是将青梅打浆榨汁后连续熬煮48 h,浓缩到73~78 Brix,颜色变成黑色,即得青梅精。
青梅精中梅素(Mumefrual),又称为梅华,是青梅精中主要功能成分之一,具有抑制流感病毒的作用[13]。
乳腺癌是严重威胁女性健康与生命的恶性肿瘤之一,其死亡率为欠发达国家地区女性恶性肿瘤致死的首位[14],每年有160多万人被诊断为乳腺癌,而死于乳腺癌的患者超过120万人[15]。
近50年的临床实践显示。
据报道中药辅助治疗乳腺癌可延长乳腺癌中晚期患者生命,并改善其生活质量,据统计可以治疗乳腺癌的中药材共有85种[16]。
原发性肝癌在中国的死亡率达17.37%,位居我国癌症发病率第2位,仅次于肺癌[17]。
研究表明,很多中药的水提液在抑制肝癌细胞增殖、促进凋亡、逆转耐药性、抑制癌细胞侵袭转移、提高机体免疫力等方面具有较好的活性[18][19]。
Nakagawa [20]等人研究了一种日本市售的青梅果浓缩汁对2种乳腺癌细胞有抑制作用。
因此本文研究青梅浓缩加工产品青梅精对乳腺癌细胞和肝癌细胞的抑制作用,为进一步抗肿瘤产品的开发提供依据。
2. 材料与方法2.1. 实验材料青梅:白粉梅,产自广东陆河。
人乳腺癌细胞(MCF-7)、人肝癌细胞(HepG2)购自美国American Type Culture Collection公司,人正常肝细胞(LO2)购自中山大学医学院。
试剂:高糖DMEM培养基,胎牛血清(FBS),胰蛋白酶,PBS磷酸缓冲液购于美国Gibco公司,四氮唑蓝(MTT),二甲基亚砜(DMSO)购自美国Sigma公司。
其他试剂均为分析纯,购于国药集团化学试剂有限公司。
梁多,刘智均2.2. 主要实验仪器和设备CO2细胞培养箱,美国Thermo公司;生物安全柜(新加坡Esco公司);Varioskan Flash酶标仪,美国Thermo公司。
2.3. 实验方法2.3.1. 青梅精加工方法青梅精的加工包括以下步骤:1) 将青梅清洗干净、预煮、去核、榨汁,得到青梅果浆;2) 对青梅果浆进行灭菌处理,装灌密封,常温储存1~2年;3) 青梅果浆倒入保温夹层锅内,加热至沸腾,沸腾回流8~10 h,停止加热,保温8~10 h;4) 再次将青梅果浆加热至沸腾,常压浓缩,过滤除去青梅果浆中的果肉纤维,滤液置于保温材料中保温8~10 h;5) 将步骤4)中的滤液加热至沸腾,常压浓缩,得到青梅精[21]。
2.3.2. 细胞实验方法1) 细胞系及传代培养所有细胞均培养于含10%胎牛血清(FBS)和100 U/mL青霉素和100 U/mL链霉素的高糖型DMEM正常培养基中,并置于37℃、5% CO2的细胞培养箱中培养,隔天换一次培养基。
待细胞密度长至约瓶壁80%,用0.25%胰蛋白酶消化,按照1:3比例传代。
2) 青梅精对细胞存活率的影响实验青梅精对细胞存活率的影响采用MTT法测定,将细胞配成浓度为5 × 104个/mL的细胞悬液,反复吹打均匀后接种于96孔细胞培养板上,每孔100 μL。
置于37℃、5% CO2培养箱中培养使细胞重新贴壁。
24 h后,弃去培养基,实验组加入不同浓度(5.00 mg/mL,2.50 mg/mL,1.25 mg/mL,0.625 mg/mL DMEM 正常培养基配制)的青梅精溶液100 μL,对照组分别加入100 μL DMEM正常培养基,每组设3个平行孔。
在CO2培养箱中继续培养。
48 h后,向每个细胞培养孔加入20 μL MTT溶液(5 mg/mL,PBS配制),轻轻混匀后置于37℃、5% CO2培养箱中继续培养4 h。
弃去每个孔中的MTT培养液,加入100 μL DMSO,37℃震荡10 min后,将生成的甲臜溶液置于酶标仪中在570 nm处测定其OD值。
另设空白调零组,调零孔不接种细胞,其余操作同空白对照组。
设实验组的OD值为A,对照组OD值为B,调零组OD值为C。
细胞存活率的计算公式如下:()()()=−−×细胞存活率%A C B C100%2.4. 统计分析所有实验重复3次以上,实验结果用平均值± 标准差(mean ± SD)表示。
采用美国IBM公司开发的SPSS19.0软件进行单因素方差分析(one-way ANOVA)。
显著性水平P < 0.05为差异显著,P < 0.01为差异极显著。
3. 结果与分析3.1. 青梅精对乳腺癌MCF-7细胞增殖的抑制作用实验结果如表1显示,0.625~5.00 mg∙mL−1青梅精处理48 hr对乳腺癌MCF-7细胞有明显的抑制作用,随着药物浓度的增加,抑制作用逐渐增强,显示出一定的量效关系。
其中青梅精浓度5.00 mg∙mL−1对乳腺癌细胞抑制率达(82.18 ± 4.9)%,差异具有统计学意义(P < 0.05)。
梁多,刘智均Table 1. Inhibition of growth of MCF-7 cells by plum essence (X s±, n = 3)表1. 青梅精对乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响(X s±, n = 3)组别抑制率/%空白对照0 ± 0.100.625 mg∙mL−120.20 ± 0.28**1.25 mg∙mL−136.15 ± 0.90**2.50 mg∙mL−165.67 ± 2.1**5.00 mg∙mL−182.18 ± 4.9**注:与空白对照组比较,**P < 0.01。
3.2. 青梅精对肝癌HepG2细胞增殖的抑制作用实验结果如表2所示,0.625~5.00 mg∙mL−1青梅精处理48 hr对肝癌HepG2细胞有明显的抑制作用,随着药物浓度的增加,抑制作用逐渐增强,显示出一定的量效关系。