食品厌氧菌检测

食品厌氧菌检测发表时间：2019-07-19T17:25:54.417Z 来源：《药物与人》2019年5月作者：苟丽华[导读] 厌氧菌主要就是在无菌环境与条件之下，比有氧环境中生长还要良好的细菌，无法于空气18%氧气环境或者是11%二氧化碳的环境中固体培养基表面生长的细菌。

阆中市疾病预防控制中心苟丽华厌氧菌主要就是在无菌环境与条件之下，比有氧环境中生长还要良好的细菌，无法于空气18%氧气环境或者是11%二氧化碳的环境中固体培养基表面生长的细菌。

此类细菌尚未出现完整性的代谢酶体系，主要是通过无氧发酵的形式实现能量代谢目的。

一般情况下，厌氧菌属于人体正常菌群的主要构成部分，在皮肤组织的深度粘膜表面广泛的存在，如果出现了组织缺血现象或是坏死的现象，将会使得局部区域的氧浓度减少，甚至会出现厌氧菌的感染问题。

如果食品中含括厌氧菌，将会导致进食者的身体健康受到威胁。

那么，如何对食品中的厌氧菌进行检测呢？如何检测才能更好的了解厌氧菌情况呢？1 标本的送检以及处理将标本送往相关的实验室，在半个小时之内完成处理任务，最短时间不可以超过两个小时，以此预防标本中性厌氧菌过量繁殖导致厌氧菌无法正常的生长。

如若无法在规定时间之内进行接种，可以将室内温度控制在合理范围之内，通常情况下，冷藏会导致厌氧菌受到影响，低温还会导致氧的溶解度提升。

所以，在送检的环节中，可以采用以下几种方式：针筒运输送检的方式：使用无菌类型针筒进行标本的抽取，将其中的空气排除，然后将针头插入到无菌橡皮塞之内，以此更好的进行空气隔绝，之后送检。

此类方式的应用，适合进行液体标本的处理，可根据食品的特点与实际状况正确送检。

无菌小瓶类型的处理：此类方式主要使用无菌类型青霉素小瓶，在瓶子之内添加适当的培养基与氧化还原指示剂材料，使用橡皮塞与铝盖对其进行密封，之后取出空气部分，将二氧化碳充实其中，与此同时要对瓶子之内的氧化还原指示剂的情况进行观察，了解颜色情况，以此更好的分析是不是无氧的环境，在合格之后进行标本的注入。

1．概述厌氧菌广泛存在于外界环境和人体的口腔、肠道和女性生殖道等部位，常引起内源性感染。

据文献报道，约60％的临床感染有厌氧菌参与，且大多数是与需氧菌混合感染，故开展厌氧菌的检验对感染的诊断、治疗都有重要意义。

2．标本类型脓胸及未破溃的脓肿、肺分泌物、血液标本、窦道、深部脓肿等的标本。

3．检验流程3.1 形态与染色标本涂片、革兰染色、镜检，观察细菌的形态和染色性，并估计标本中大致的含菌量，可用“少量”“十”“++”“+++”“++++”表示。

镜检不仅能反映各种厌氧菌特殊形态，同时也能为鉴定厌氧菌提供参考和依据。

如脆弱拟杆菌菌体细长，两端尖；韦荣球菌是极小的革兰阴性球菌。

同时厌氧菌芽胞的位置、形态、大小对鉴定很有意义，必要时作芽胞形成试验。

例如，芽胞在菌体极端且大于菌体呈鼓槌状，是破伤风梭菌的特征。

根据厌氧菌的特殊形态，可初步确定有无厌氧菌感染，及时向临床医师发出一级报告，建议采用哪类药物。

3.2 培养特性一般标本接种3个血琼脂平板，分别放置于有氧、无氧和含5％～10％C0环境中培养。

如果只要求检出厌氧菌，只需接种1个厌氧血琼脂平板，也可增2加1个相应的选择厌氧血琼脂平板。

为便于在混合培养中及早发现厌氧菌，一般将标本分3段划线接种，在第1和第2段交界处贴1张甲硝唑(5 mg/片)纸片，若出现隐约抑菌圈，则提示有厌氧菌生长。

不同厌氧菌的生长速度和菌落形态各异，色素也有不同，荧光产生与否也有助于鉴定，根据上述特征，可初步推测厌氧菌的种类。

3.2.1 革兰阴性杆菌在BBE琼脂平板上有灰黑色、直径>1 mm的菌落，菌落周围有黑色的晕，可初步鉴定为脆弱拟杆菌。

在卡那万古溶血琼脂平板上，有棕色或黑色菌落，或用伍德灯照射有砖红色荧光者，为产黑素普雷沃菌。

菌落沉人琼脂内，使培养基表面留有小坑者，可能是解脲拟杆菌和纤细拟杆菌。

菌落表面有小斑点，或如面包屑，结合涂片所见，可初步鉴定为具核梭杆菌。

3.2.2 革兰阴性球菌菌体很小，排列成双、短链或小堆，菌落小，不透明，可能是小韦荣球菌。

厌氧菌检验的基本流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。

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厌氧菌测试方法
厌氧菌是一类在无氧条件下比在有氧环境中生长好的细菌。

那怎么测试它们呢？
有一种方法是培养法哦。

我们得先准备好专门适合厌氧菌生长的培养基，这就像是给厌氧菌盖的小房子，要特别定制呢。

把可能含有厌氧菌的样本放到这个培养基里，然后把它放在无氧的环境下。

可以用专门的厌氧培养箱，这个箱子就像是厌氧菌的小天地，里面没有氧气来打扰它们。

过一段时间后，看看培养基里有没有细菌生长，如果有，那就有可能是厌氧菌啦。

不过这个过程得很小心，就像照顾小婴儿一样，温度、湿度啥的都得控制好。

还有个方法是通过检测厌氧菌产生的一些特殊代谢产物来判断。

厌氧菌在生长过程中会制造出一些独特的东西，就像它们的小标记。

比如说，有的厌氧菌会产生一些特殊的气体，像硫化氢之类的。

我们可以用一些化学试剂来检测这些气体的存在。

如果检测到了，那就说明有厌氧菌在偷偷活动哦。

这就像是通过脚印来判断是不是有小动物来过一样有趣呢。

另外呢，现在还有一些高科技的方法，像基因检测技术。

这个就很厉害啦，就像是给细菌做个基因身份证。

通过检测样本里细菌的基因序列，然后和已知的厌氧菌基因序列对比，如果匹配上了，那就肯定是厌氧菌没跑啦。

不过这种方法可能需要比较专业的设备和技术人员，就像需要超级英雄来操作一样，一般人还搞不定呢。

厌氧菌的测试方法各有各的妙处，不管是传统的培养法，还是高大上的基因检测法，都是为了能把厌氧菌这个神秘的小生物给找出来。

不过这些测试大多都需要在实验室里由专业人员来做，咱们可不能自己在家乱捣鼓哦，毕竟细菌的世界还是很复杂的呢。

1菌落总数菌落总数是指示性微生物指标，并非致病菌指标。

主要用来评价食品清洁度，反映食品在被加工过程中被污染的程度及卫生质量的重要指标。

菌落总数超标可能是企业所使用的原辅料初始菌数较高，或未按要求严格控制生产加工过程的卫生条件，或包装容器清洗消毒不到位，还有可能是产品包装密封不严，储运条件控制不当等导致。

如果食品的菌落总数严重超标，将会破坏食品的营养成分，加速食品的腐败变质，使食品失去食用价值。

2大肠菌群大肠菌群是国内外通用的食品污染常用指示菌之一。

食品中检出大肠菌群，提示被致病菌（如大肠埃希氏菌、柠檬酸杆菌、产气克雷伯氏菌和阴沟肠杆菌等）污染的可能性较大。

大肠菌群超标可能由于产品的加工原料、包装材料受污染，或在生产过程中产品受人员、工具器具等生产设备、环境的污染而导致。

大肠菌群，它不代表某一个或某一属细菌，而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌。

大肠菌群都是直接或间接地来自人和温血动物的粪便。

一般食品中大肠菌群超标，表示食品受动温血动物的粪便污染，其中典型大肠杆菌为粪便近期污染，其他菌属则可能为粪便的陈旧污染。

人吃了大肠菌群超标的食物可能会导致：肠道传染病、食物中毒等。

3霉菌霉菌，是丝状真菌的俗称，意即"发霉的真菌"，它们往往能形成分枝繁茂的菌丝体，但又不像蘑菇那样产生大型的子实体。

在潮湿温暖的地方，很多物品上长出一些肉眼可见的绒毛状、絮状或蛛网状的菌落，那就是霉菌。

霉菌在我们的生活中无处不在，它比较青睐于温暖潮湿的环境，一有合适的环境就会大量的繁殖，必须采取措施来阻止霉菌的繁殖或切断其传播途径，就可以摆脱霉菌的污染。

霉菌毒素对人主要毒性表现在神经和内分泌紊乱、免疫抑制、致癌致畸、肝肾损伤、繁殖障碍等。

4酵母酵母是一些单细胞真菌，并非系统演化分类的单元。

是子囊菌、担子菌等几科单细胞真菌的通称，一般泛指能发酵糖类的各种单细胞真菌，有的为致病菌。

空气中、人体中都存在一定数量的酵母菌，只要在合适的环境就会快速繁殖;吃了酵母菌污染的食品易造成食物中毒，有些免疫力低的人群亦可能发生酵母菌感染。

厌氧菌在有氧的情况下不能生长。

要培养厌氧菌，必须创造一个环境中的游离氧，以降低氧化还原电势。

如疱肉培养基、硫基乙酸钠培养基，牛心脑浸液培养基等。

常用的厌氧培养方法有许多，可根据实际情况选用。

1.厌氧缸法：接种好标本的平板或液体培养基试管，可放入厌氧缸内培养，厌氧缸是普通的干燥缸，用物理化学的方法使缸内造成厌氧环境，从而将厌氧菌培养出来。

2.厌氧袋：即在塑料袋内造成厌氧环境来培养厌氧菌。

塑料袋透明而不透气，内装气体发生管、美兰指示剂管、钯催化剂管、干燥剂。

放入已接种好的平板后，尽量挤出袋内空气，然后密封袋口。

先折断气体发生管，后折断美兰指示剂管，命名袋内在半小时内造成无气环境。

如不突变表示袋内已达厌氧状态，可以孵育（较为推荐）。

3.厌氧手套箱：是迄今为止国际上公认的培养厌氧菌最佳仪器之一。

它是一个密闭的大型金属箱，箱的前面有一个有机玻璃做的透明面板，板上装有两个手套，可通过手套在箱内进行操作，故名。

箱侧有一交换室，具有内外二门，内门通箱内先关着。

欲放物入箱，先打开外门，放入交换室，关上外门进行抽气和换气达到厌氧状态，然后手伸入手套把交换室内门打开，将物品移入箱内，关上内门。

箱内保持厌氧状态，也是利用充气中的氢在钯的催化下和箱中钱残余氧化合成水的原理。

该箱可调节温度，本身是孵箱或孵箱即附在其内，还可放入解剖显微镜便于观察厌氧菌菌落，这种厌氧箱适于作厌氧细菌的大量培养研究，大量培养基可放入作预还原和厌氧性无菌试验。

金属硬壁型厌氧箱的抽气、充气、厌氧环境和温度等均系自动调节。

4.厌氧盒：原理同厌氧袋，有成品销售。

5.生物耗氧法：在一密闭的容器内放以生物，消耗氧气，同时产生二氧化碳，供细菌生长用。

我没见过。

6.焦性末食子酸法：在一洁净的玻片上铺上纱布或滤纸，均匀撒上焦性末食子酸，然后再混入NaHCO3粉末或NaOH溶液，迅速将已接种细菌的平板倒扣在上面，用融化的白蜡封边，造成一个封闭空间。

焦性末食子酸与碱反应后耗氧。

大肠杆菌检验方法
大肠杆菌(Escherichia coli)是一种革兰氏阴性的厌氧菌，常常被用作指示性微生物来评估食品和水源的卫生质量。

以下是常见的大肠杆菌检验方法：
1. 培养基方法：将样品接种在包含大肠杆菌生长所需营养物质的培养基上，如大肠杆菌选择性琼脂培养基(MacConkey琼脂培养基)和EC培养基等。

大肠杆菌能够利用琼脂中的乳糖发酵产生酸，导致培养基呈现红色或粉红色。

此外，EC 培养基还包含了可以检测大肠杆菌β-葡萄糖苷酶的亚甲基红试剂，如果大肠杆菌存在，则培养基呈现金属光泽。

2. 确认方法：对落有培养基上的鲜艳深色菌落进行进一步确认。

典型的确认方法包括革兰染色、目测观察形态特征、氧化发酵试验和测试产气杆菌酶试验。

3. PCR检测方法：利用聚合酶链反应(PCR)技术，从样品中扩增大肠杆菌特异性基因片段（如16S rRNA基因），然后通过凝胶电泳检测扩增产物。

4. 快速方法：如免疫层析试纸法和光学组织测定法。

免疫层析试纸法利用抗大肠杆菌抗体与大肠杆菌特异性抗原结合生成可视化结果。

光学组织测定法利用大肠杆菌的β-葡萄糖苷酶水解比色底物产生颜色变化。

这些方法都可用于检测大肠杆菌在食品和水源中的存在及其数量。

在进行检验时，应严格遵守相关的操作规程和实验室操作规范，以确保结果的准确性和可靠性。

蜡样芽孢杆菌检测标准蜡样芽孢杆菌（Bacillus cereus）是一种常见的细菌，广泛存在于土壤、水、空气和食品中。

它是一种厌氧菌，在适宜的条件下能够迅速生长繁殖，因此对其检测标准十分重要。

蜡样芽孢杆菌的存在会对食品安全造成威胁，因为它可以产生多种毒素，其中包括引起食物中毒的致病毒素。

因此，对食品中蜡样芽孢杆菌的检测标准必须严格执行，以保障食品安全。

首先，蜡样芽孢杆菌的检测应该基于科学的方法和标准。

目前，国际上对蜡样芽孢杆菌的检测标准主要包括ISO标准和FDA标准。

ISO标准主要适用于食品和饮用水等领域，而FDA标准则更多地用于医药和化妆品等领域。

在执行检测时，应当严格按照相关标准进行操作，以确保检测结果的准确性和可靠性。

其次，蜡样芽孢杆菌的检测应该注重样品的采集和保存。

在采集样品时，应当避免外界污染，并选择适当的容器进行保存，以防止细菌的生长和繁殖。

同时，在运输和保存过程中，应当注意避免温度和湿度的变化，以确保样品的完整性和稳定性。

另外，蜡样芽孢杆菌的检测还应该关注检测方法的选择和操作流程。

目前常用的检测方法包括培养法、PCR法和免疫学方法等。

在选择检测方法时，应当根据具体的检测对象和要求进行合理的选择，并严格按照操作流程进行操作，以确保检测结果的准确性和可靠性。

除此之外，蜡样芽孢杆菌的检测还应该关注检测结果的解读和评估。

在获得检测结果后，应当根据相关标准和法规进行结果的解读和评估，以确定是否符合安全标准。

同时，还应当对检测过程中出现的异常情况进行分析和处理，以确保检测结果的真实性和可靠性。

总的来说，蜡样芽孢杆菌的检测标准对于保障食品安全至关重要。

在执行检测时，应当严格按照科学的方法和标准进行操作，注重样品的采集和保存，选择合适的检测方法并严格执行操作流程，最终对检测结果进行准确的解读和评估。

只有这样，才能有效地预防和控制蜡样芽孢杆菌对食品安全造成的威胁。