真菌多糖的加工提取
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真菌多糖的提取工艺目前真菌多糖提取的方法通常采用热水浸提和酶法浸提。
其中热水浸提工艺简单,抽提的主要是胞外多糖,得率较低。
而酶法浸提常采用纤维素酶、果胶酶和蛋白酶以除去胞壁和膜上的果胶、纤维素及蛋白质等成分,有利于胞壁内多糖的溶出,且多糖提出率高。
研究发现各种食用菌多糖的提取过程基本相同:将材料粉碎,热水抽提3次,温度90~100℃不等;离心收集上清液,减压浓缩至适当体积,加3~5倍乙醇, 收集沉淀物,干燥得粗多糖。
下面以几种常见的山东野生食用菌多糖的提取为例作一下详细的介绍。
金顶侧耳多糖的提取:王晓洁等在金顶侧耳多糖体外抗肿瘤作用的研究中用水提法提取多糖:将烘干的菌丝体用植物粉碎机粉碎,过200目筛,按料水比1:20加入蒸馏水。
100℃恒温水浴提取2h,重复3次,过滤、合并提取液,浓缩至原体积的1/4。
全液用组织捣碎机将菌丝体打碎,同上方法提取,最终将提取液浓缩至原体积的1/4。
过滤液提取后也浓缩至原提及的1/4。
然后按乙醇和浓缩液4:1的比例加入乙醇,置于阴凉处沉淀24h。
将下部沉淀离心,用乙醇和丙酮各洗一次,挥干溶剂,冷冻干燥后得多糖固体粉末,全液、过滤液和菌丝体多糖的得率分别为0.16%、0.13%和8.96%。
姬松茸多糖的提取:辛晓林等在姬松茸发酵全液多糖提取及其抗肿瘤活性的研究中用组织捣碎机将发酵全液中的菌丝体破碎, 沸水煮2h 后进行过滤, 滤液加热浓缩至原体积1/4 ,加入4 倍体积乙醇, 醇沉24h,去上清液, 离心(4000r/min)0、5h , 冷冻干燥得姬松茸粗多糖,得率为1.78g/ 100mL。
而在姬松茸菌丝体多糖提取工艺最优化研究[11]中得到的最优化提取工艺为,在菌丝密度为100~250mg/mL(鲜重)的范围内,超声波的破壁时间12min、提取时间为4h、提取温度为70℃,此工艺多糖提取率可达到2.609%(鲜重)。
杏鲍菇多糖的提取:迟桂荣等在杏鲍菇多糖的纯化取杏鲍菇菌丝体烘干至恒重,粉碎机粉碎,氯仿和甲醇(2∶1)提取,95%乙醇沉淀,活性炭脱色,Sevage法[19]脱蛋白,冷冻干燥即为粗多糖A。
灵芝多糖的提取近年来,药理学和免疫学的多方研究表明,灵芝多糖芝扶正固本最有效的成分之一,具有广泛的药理活性,排毒、抗放射,提高肝脏、骨髓合成dna、bna的能力,抗肿瘤增强机体免疫等效果。
因此多糖的提取为广大科研人员药研制者所重视,他们不断研究和探索灵芝多糖提取的方为弄清灵芝多糖的化学成分提供有力的理论依据,同时为许多疾病患者带来福音。
一、灵芝茵丝体多糖的提取(一)材料1.菌种:湖南省食用菌研究所提供的韩国灵芝母种。
2.种子培养基:玉米粉2%大米粉2%蔗糖2%磷酸二氢钾o.1g硫酸镁0.05%ph值自然3.发酵培养基:麦麸浸出液10%葡萄糖2%硫酸铵0.2%磷酸二氢钾0.2%ph值自然(二)方法1.种子培养:2.发酵培养生产菌丝体。
3.测定干、湿菌丝体。
将发酵液进行离心,然后取其沉淀物,加人60%蔗糖,进行高速(3000转/分)密度梯度离心5分钟,取上层菌丝体,洗净蔗糖再压干,即得湿菌体,然后再将湿菌体于高温下烘干即为干菌体。
分别称取其重量。
4.多糖的提取。
(1)菌丝体预处理。
取适量的灵芝湿菌体,用乙醇等有机溶剂进行处理,以除去湿菌体中的脂类物质,同时使糖苷酶失去活性,防止多糖的降解。
(2)用热水提取多糖。
取上面经预处理的灵芝湿菌体,放人1:20的热水(95℃)中浸提,一次3小时,连续浸提3次,合并3次的水浸提液减压、浓缩至一定体积,再用3倍体积的95%乙醇混合,静置10-12小时,再离心,最后加入75%的乙醇反复洗涤,以沉淀多糖。
此沉淀物为粗多糖,其中混杂有蛋白质、色素、低聚糖等小分子杂质,一般要经过纯化。
(3)多糖的纯化,去蛋白质和deae纤维素柱层析。
去蛋白质一般采用sevag法:加入0.2倍多糖溶液体积的氯仿和0.04倍体积的正丁醇混合振荡半小时进行分离,直至氯仿与水的界面无沉淀为止,且要重复处理2-3次才能有效除去多糖中的蛋白质。
多糖纯化一般采用硼酸型deae纤维素柱层析法:取脱蛋白后的多糖,分别以0.025mol/l、0.1mol/l的硼砂,0.1mol/l的氢氧化钠溶液进行洗脱,然后用0.2%恿铜硫酸液比色测定吸收度,收集有多糖的洗脱液,再浓缩脱盐即得所需的多糖。
多糖的提取分别方法1.多糖的提取方法生物活性多糖主要有真菌多糖、植物多糖、动物多糖3 大类。
多糖的提取首先要根据多糖的存在形式及提取部位,决定在提取之前是否做预处理。
动物多糖和微生物多糖多有脂质包围,一般需要先加入丙酮、乙醚、乙醇或乙醇乙醚的混合液进行回流脱脂,释放多糖。
植物多糖提取时需注意一些含脂较高的根、茎、叶、花、果及种子类,在提取前,应先用低极性的有机溶剂对原料进行脱脂预处理,目前多糖的提取方法主要有溶剂提取法、生物提取法、强化提取法等。
1.1溶剂法1.1.1水提醇沉法水提醇沉法是提取多糖最常用的一种方法。
多糖是极性大分子化合物,提取时应选择水、醇等极性强的溶剂。
用水作溶剂来提取多糖时,可以用热水浸煮提取,也可以用冷水浸提渗滤,然后将提取液浓缩后,在浓缩液中加乙醇,使其最终体积分数达到70 %左右,利用多糖不溶于乙醇的性质,使多糖从提取液中沉淀出来,室温静置5 h,多糖的质量分数和得率均较高。
影响多糖提取率的因素有:水的用量、提取温度、浸提固液比、提取时间以及提取次数等。
水提醇沉法提取多糖不需特殊设备,生产工艺成本低,安全,适合工业化大生产,是一种可取的提取方法。
但由于水的极性大,容易把蛋白质、苷类等水溶性的成分浸提出来,从而使提取液存放时腐败变质,为后续的分离带来困难,且该法提取比较耗时,提取率也不高。
1.1.2酸提法为了提高多糖的提取率,在水提醇沉法的基础上发展了酸提取法。
如某些含葡萄糖醛酸等酸性基团的多糖在较低pH 值下难以溶解,可用乙酸或盐酸使提取液成酸性,再加乙醇使多糖沉淀析出,也可加入铜盐等生成不溶性络合物或盐类沉淀而析出。
由于H+的存在抑制了酸性杂质的溶出,稀酸提取法提取得到的多糖产品纯度相对较高,但在酸性条件下可能引起多糖中糖苷键的断裂,且酸会对容器造成腐蚀,除弱酸外,一般不宜采用。
因此酸提法也存在一定的不足之处。
1.1.3碱提法多糖在碱性溶液中稳定,碱有利于酸性多糖的浸出,可提高多糖的收率,缩短提取时间,但提取液中含有其它杂质,使粘度过大,过滤困难,且浸提液有较浓的碱味,溶液颜色呈黄色,这样会影响成品的风味和色泽。
多糖类药物提取方法及抗病毒活性研究一、多糖类药物提取方法多糖类药物主要来源于天然植物、真菌和微生物等,其提取方法通常包括以下几个方面:1. 搅拌法搅拌法是最常见的提取方法之一。
将植物、真菌或微生物粉碎成细小的颗粒,然后用适当的溶剂浸泡获得药物提取物。
这种方法操作简单、成本低廉,因而在实际生产中应用较为广泛。
2. 超声波法超声波法是利用超声波的机械振动使样品产生强大的超声波辐射,导致产生空化、涡流和高温高压等效应,从而加速溶剂渗透到样品内部,促进多糖的提取。
超声波法具有提取效率高、操作简便、易于控制温度和压力等优点,因而逐渐成为多糖类药物提取的热门技术。
3. 高温高压法高温高压法是通过以高温高压条件下,使溶剂渗透到样品内部,促进多糖的快速提取。
这种方法提取效率高、时间短,但需要特殊的设备和条件,操作相对较为复杂。
4. 超临界流体法超临界流体法是指在超临界状态下使用超临界流体(例如二氧化碳)进行提取。
这种方法提取效率高、不产生有害溶剂残留物,具有较好的环保性,因而备受关注。
二、多糖类药物的抗病毒活性研究多糖类药物在抗病毒领域的应用潜力已经引起了广泛的关注。
多糖类药物对于不同类型的病毒均具有一定的抑制作用,包括流感病毒、乙型肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒(HIV)等。
下面将对多糖类药物的抗病毒活性进行简要的介绍:1. 多糖类药物对流感病毒的抑制作用研究表明,多糖类药物对流感病毒具有一定的抗病毒活性。
来自真菌和植物的多糖类物质对流感病毒的复制和传播起到了抑制作用,有望成为新型流感病毒的治疗药物。
2. 多糖类药物对乙型肝炎病毒的抑制作用多糖类药物也显示出了对乙型肝炎病毒的抑制活性。
多糖类药物可通过干扰病毒入侵、抑制病毒复制等途径发挥其抗病毒作用,为乙型肝炎病毒的治疗提供了新的思路。
3. 多糖类药物对HIV的抑制作用HIV是世界范围内的重大公共卫生问题,而多糖类药物对HIV的抑制作用也备受关注。
有研究显示,来自微生物和植物的多糖类物质对HIV具有一定的抗病毒活性,可以有效抑制HIV的感染和复制。
酶法提取真姬菇多糖的工艺研究
提取真姬菇多糖的工艺可以采用酶法,具体步骤如下:
1.真姬菇研磨。
将真姬菇干燥后研磨成粉末状;
2.制备酶液。
以淀粉酶和葡萄糖酸酶为主要酶种,配制酶液。
酶液浓度可以按照实际情况进行调节,一般为1%~5%;
3.水浸提。
将真姬菇粉末放入水中浸泡,可以在室温下或低温下进行。
浸泡时间一般为2~4小时,可促使多糖从真姬菇中溶解到水中;
4.酶解。
将浸泡好的真姬菇粉末和酶液混合,根据实际情况,酶解温度可以控制在40℃~60℃之间,酶解时间一般为3~6小时。
酶解过程中,可以适当地调节pH值,使酶解条件最优化;
5.过滤。
将酶解后的混合物过滤,去除残余的真姬菇粉末,留下混合物;
6.浓缩。
将过滤后的混合物进行浓缩,可以采用真空浓缩或喷雾干燥等方法;
7.纯化。
对于需要高纯度真姬菇多糖的情况下,可以进行进一步纯化,例如离子交换色谱、凝胶过滤等方法。
最后,将制备好的真姬菇多糖进行干燥即可。
整个提取过程需要注意卫生和安全,以保证多糖的纯度和品质。
食用菌多糖提取技术简介食用菌多糖提取技术简介[ 修改时间:2011-8-20 下午 09:17:51 浏览次数:552]食用菌多糖提取技术简介2010年4月20日来源:中国食用菌商务网【按】食用菌多糖的生物活性、食药用价值及无毒副作用的特性已被认可,其研制成的药品及保健品已成为当前突破食用菌精深加工瓶颈的重大措施。
也是转变食用菌经济发展方式的重要门路,我县是中国食用菌之都。
品种多、产量高,采取提取食用菌多糖,再加工成终端产品有巨大的发展空间,今收集了六种提取多糖办法。
供大家参考:1、水提醇沉法提取食用菌多糖多糖溶于水而不溶于醇、醚、丙酮等有机溶剂。
用热水进行提取。
主要是借助于热力作用使食用菌细胞发生质壁分离,水作为溶剂渗人细胞壁和细胞质中。
溶解液泡中的物质。
使其穿过细胞壁,扩散到外部溶剂中。
刘祖同、罗信昌归纳了食用菌子实体多糖的提取工艺步骤:即食用菌子实体粉碎一脱脂肪一多糖的浸提一过滤(离心分离)一合并滤液一多糖沉淀一去蛋白质、脱色一多糖组分的分离纯化一多糖组成和结构的分析,其中,热水浸提的温度一般为90℃~100~C。
浸提时间为lh~3h,浸提次数为2次~3次。
说明此方法有较好的准确度。
水提醇沉法的优点为试验设备简单。
操作容易。
准确度高,成本低廉。
一次性投入较小。
适用于大规模的工业生产。
但提取效率低且费时,劳动强度大。
产品纯化困难且括性损失较大,随着工业技术的发展。
一些现代高新技术被应用于食用菌多糖的提取。
2,酸碱浸提法提取食用菌多糖原理是通过酸碱液的充分作用。
使食用菌细胞、细胞壁充分吸水胀膨而破裂,从而使食用菌多糖充分游离出来,提高得率。
田光辉等以灵芝为材料考察了酸碱盐介,酸碱介质能够明显提高多糖的提取率。
但以酸作为介质时对糖苷键具有一定的破坏作用,降低多糖的得率。
还会对容器造成腐蚀,除弱酸外一般不宜采用。
采用稀碱液浸提后既能节省时间,又能减少原材料及试剂的消耗。
且提取的多糖含量高。
但碱提后的溶液浓度增大。
云芝多糖提取方法云芝(Hericium erinaceus)是一种有着丰富药用价值的真菌,其主要有效成分为多糖,具有抗氧化、免疫调节、抗肿瘤等多种生物活性。
因此,提取云芝多糖成为研究云芝药用价值的重要环节。
目前,有多种方法可以提取云芝多糖,包括水提法、酶解法、超声波法、蒸发浓缩法、冷冻干燥法等。
下面将分别介绍几种常用的提取方法。
1.水提法水提法是最常用的云芝多糖提取方法之一、其基本操作步骤为:将云芝菌体研磨成粉末,加入适量的水,进行浸泡提取,然后进行过滤、浓缩、沉淀、冷冻干燥等步骤,得到多糖提取物。
2.酶解法酶解法是利用酶对云芝菌体进行酶解,使多糖从细胞内部释放出来。
常用的酶有纤维素酶、蛋白酶等。
具体操作步骤为:将云芝菌体研磨成粉末,加入适量的酶液,进行酶解反应,然后进行过滤、浓缩、沉淀、冷冻干燥等步骤,得到多糖提取物。
3.超声波法超声波法是利用超声波的机械振动作用,破坏云芝细胞壁,加快多糖的释放和提取。
具体操作步骤为:将云芝菌体研磨成粉末,加入适量的溶剂,使用超声波提取装置进行超声波处理,然后进行过滤、浓缩、沉淀、冷冻干燥等步骤,得到多糖提取物。
4.蒸发浓缩法蒸发浓缩法是利用蒸发器将溶液中的水分蒸发掉,从而得到浓缩的多糖提取物。
具体操作步骤为:将云芝菌体研磨成粉末,加入适量的溶剂,进行浸泡提取,然后使用蒸发器将溶液中的水分蒸发掉,得到浓缩的多糖提取物。
5.冷冻干燥法冷冻干燥法是利用低温和真空条件下,将溶液中的水分冻结成固态,然后通过升华的方式脱除水分,从而得到干燥的多糖提取物。
具体操作步骤为:将云芝菌体研磨成粉末,加入适量的溶剂,进行浸泡提取,然后进行冷冻干燥处理,得到干燥的多糖提取物。
总的来说,提取云芝多糖的方法繁多,科学家们可以根据实际需要选择合适的方法。
这些方法各有优缺点,可以互相补充,提高多糖的提取效率。
值得注意的是,提取过程中要注意实验条件的控制,确保多糖的活性和稳定性。
此外,提取云芝多糖的方法还可以结合分离纯化和结构表征等技术手段,进一步深入研究云芝多糖的分子结构和生物活性。
香菇多糖的提取香菇多糖是从香菇中提取的一种重要活性成分,具有多种保健功效和药用价值。
香菇,又称冬菇、草菇,是一种常见的食用菌类食材,被广泛用于烹饪和药用。
香菇多糖是香菇中的一种多糖类物质,具有多种生物活性,包括抗氧化、抗肿瘤、免疫调节等作用。
香菇多糖的提取过程通常包括以下几个步骤:首先是将香菇进行清洗和切碎,然后用适当的溶剂(如水、乙醇等)浸泡,使多糖从香菇中溶解出来。
接着通过过滤、浓缩、沉淀等工艺步骤,将多糖提取出来并进行纯化。
最终得到的香菇多糖产品可以用于制备保健品、药品或化妆品等产品。
香菇多糖具有多种保健功效。
首先,香菇多糖具有显著的抗氧化作用,可以清除体内的自由基,延缓衰老,预防疾病。
其次,香菇多糖还具有抗肿瘤作用,可以抑制肿瘤细胞的生长和扩散,对预防和辅助治疗肿瘤具有重要作用。
此外,香菇多糖还可以调节免疫系统,增强机体免疫功能,提高抵抗力,预防感染和疾病。
除了以上几种主要功效外,香菇多糖还具有降血糖、降血脂、抗炎、抗菌等多种生物活性。
因此,香菇多糖被广泛应用于保健品、药品、化妆品等领域。
在现代社会,人们对健康和美容的需求越来越高,香菇多糖作为一种天然的功能性成分,受到了越来越多消费者的青睐。
需要注意的是,香菇多糖作为一种天然产物,虽然具有多种保健功效,但并非万能药物。
在使用香菇多糖时,应根据个人体质和健康状况适量使用,避免过量或长期大量食用,以免引起不良反应。
此外,购买香菇多糖产品时应选择正规渠道,避免购买劣质或掺假产品,以保障健康。
香菇多糖是一种具有多种保健功效和药用价值的活性成分,其提取和应用具有重要意义。
随着人们对健康的重视和需求的增加,香菇多糖作为一种天然的功能性成分,将在保健品、药品、化妆品等领域发挥越来越重要的作用。
我们期待未来在科研和生产上能够进一步挖掘香菇多糖的潜力,为人类健康和美容提供更多选择和帮助。
多糖的提取、分离纯化真菌多糖是从真菌细胞壁和组织体的菌丝之中分离出的由十个以上的单糖以糖苷键连接而成的高分子多聚物。
真菌多糖能通过对淋巴细胞、巨噬细胞、网状内皮系统而调节机体的免疫功能,在治疗肿瘤、心血管、肝炎、糖尿病,甚至爱滋病等方面显示出特殊的效果,有些已在临床上广泛应用[1]。
真菌多糖作为药物毒性极小,其在治疗代谢紊乱、感染及癌症等疾病方面的应用正不断增加,它在医疗上是一种很好的佐料。
真菌多糖其研究日益受到人们重视。
1 真菌多糖的提取、分离纯化与纯度检测1.1 真菌多糖的提取和分离提取真菌多糖的原料,应先用丙酮、乙醚或乙醇进行预处理,以除去原料中的脂类物质,然后用热水、稀酸或稀碱反复提取,提取液中和至中性后,用甲醇或乙醇沉淀,沉淀物经离心、干燥后,制得粗多糖。
1.1.1 粗多糖中蛋白的去除常用的脱蛋白的方法主要有3种:Sevag法是用氯仿、正丁醇或正戊醇按5:1混合后,加到样品水溶液中振摇,离心除去凝胶状蛋白质,反复多次直至蛋白质除尽为止。
三氟三氯乙烷法[2]是多糖溶液和三氟三氯乙烷1:1混合,在低温下搅拌10min左右,离心得上层溶液, 上层溶液继续用上述方法处理几次,即得无蛋白的多糖溶液。
三氯乙酸法是在多糖水溶液中滴加3%的三氯乙酸,直至溶液不再浑浊为止,于5~10℃放置过夜,离心除去沉淀即得无蛋白的的多糖溶液,但是此法会引起多糖的降解,不宜采用。
另外还有硫酸铵法和蛋白酶法。
1.1.2脱色多糖中所含的色素一般有两种,即游离色素和结合色素。
游离色素大多呈阴离子状态,可以通过离子交换法除去,常用DEAE纤维素或DEAE-Sepharose TM Fast Flow来吸附色素。
若多糖与色素结合,则色素易被离子交换柱吸附,不易被水洗脱,这类色素可采用氧化脱色:以浓氨水(或NaOH溶液)调至ph8.0左右,于50℃以下滴加H2O2至浅黄色,保温2h;根据真菌多糖与色素的结合情况选择合适的脱色方法[3]。
食用菌多糖的提取工艺研究以平菇子实体为对象,探讨了食用菌子实体多糖的提取工艺,考察了料水比、浸提时间、浸提温度、醇析浓度等因素对提取结果的影响。
实验结果表明,水法提取的最佳工艺条件为:1:40料水比,100℃,提取3.0h,80%乙醇醇析;碱法提取的最佳工艺为:0.7mol/L氢氧化钠,1:60料液比,100℃,提取5h,80%乙醇醇析。
标签:食用菌多糖;提取工艺;平菇0 前言食用菌多糖被称为“生物应答效应物”(Biological Response Modifier,简称BRM)。
是一种能够增强人体免疫功能的生物活性物质,对于遗传性的疾病具有一定的治疗效果。
本文以平菇子实体为研究对象,以水和碱为提取介质,探讨了多糖的提取工艺,考察了主要影响因素对提取结果的影响,在单因子实验的基础上进行了正交试验,确定了最佳的提取工艺,以期能给食用菌子实体多糖的提取研究提供一些基础性的参考。
1 材料和方法1.1 材料2.1.1 原料鲜灰平菇(唐平1号)子实体,从当地菇农处选购。
2.2.2 仪器及设备2XZ-0.5真空泵、HH.S21-4数显水浴锅、101-0BS干燥箱、752型分光光度计、托盘扭力天平、美的多功能食物搅拌器、FC104电子天平、海尔冰柜等。
1.2 方法2.2.1 实验方案本实验采用溶剂浸提法,首先干燥平菇子实体,粉碎过筛,选择合适的提取溶剂,考察提取时间、提取温度、料液比、溶剂浓度、乙醇加量等因素对提取结果的影响,在单因子实验的基础上进行正交实验,并确定最佳提取工艺。
2.2.2 实验流程(1)热水浸提法:原料→烘干(80℃,干燥4h以上)→粉碎→过筛(80目)→水浴浸提→真空抽滤→浓缩→除蛋白→醇沉多糖→脱色→干燥→称重测含量(2)氢氧化钠提取法:原料→烘干(80℃,干燥4h以上)→粉碎→过筛(80目)→浸提(NaOH溶液,96℃水浴种浸提2h)→真空抽滤→浓缩→除蛋白→醇沉多糖→脱色→干燥→称重测含量2.2.3 多糖的测定:粗多糖:采用称重法,取洁净平皿干燥至恒重,其重量记为M1,将粗多糖置于平皿中干燥至恒重,重量为M2,原料重为M ,则:粗多糖含量(%)=[(M2-M1)/M]╳100%多糖:采用苯酚-硫酸法,以葡萄糖为标准物质,绘制标准曲线。