粪便常规检查直接涂片法作业指导书
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粪便寄生虫体检查操作规程蛔虫、烧虫、绦虫等较大虫体或其片段肉眼即可分辨,钩虫体须将粪便冲洗过筛后方可看到。
1.直接涂片法1.1操作1)以竹签挑取含黏液脓血部分。
若为成形便则自粪便表面、深处及粪端多处取样,混悬于有1滴9g∕L氯化钠溶液的洁净玻片上制成薄片,厚度以能透视纸上字迹为宜。
(2)先用低倍镜观察全片有无虫卵、原虫、包囊、寄生虫及血细胞等。
粪便中常见有蛔虫卵、钩虫卵、鞭虫卵、烧虫卵、华支睾吸虫卵、血吸虫卵、姜片虫卵、绦虫卵等。
在识别虫卵时应注意虫卵大小、色泽、形状、卵壳的厚薄、内部结构等特点,认真观察加以鉴别。
(3)再用高倍镜详细检查病理成分的形态和结构(主要为红细胞、白细胞、巨噬细胞、肠黏膜上皮细胞、肿瘤细胞)及各类结晶。
(4)结果报告:通常要观察10个低倍视野,以低倍视野所见虫卵的最低数和最高数报告。
再观察10个高倍视野,然后描述所见各类细胞和结晶及其数量,具体参照尿沉渣检查报告格式。
1.2.饱和盐水漂浮法:此法适用于检查钩虫卵、蛔虫卵及鞭虫卵。
1.2.1试剂饱和盐水:食盐40Og加水IL煮沸冷却。
1.2.2操作(1)取蚕豆大小粪便置于青霉素药瓶内,加入少量饱和盐水。
(2)将粪便充分混匀,再加入饱和盐水至瓶口。
(3)可用竹签挑去较大粪块,瓶口加载玻片恰好与液面接触。
(4)静置15min,提起玻片迅速反转镜检。
(5)结果以“未找到虫卵”和“找到XX虫卵”报告。
粪便隐血检验标准操作1、试剂:大便隐血(FOB)诊断试剂(胶体金法)2、操作2.1步骤(1)取约0.5ml蒸你(水加入样品杯中,用取样棒挑取粪便标本10~50mg放入样品杯中,与杯内溶液混匀。
(2)将试纸条箭头所指的一端侵入标本溶液中,标本液面不要超过标记线。
(3)等待紫色红线条带出现,测试结果应在5min时读取,IOmin后判断结果无效。
2.2结果判断与分析阳性(+):两条紫红色条带出现。
阳性结果表明:标本中含有人血红蛋白。
阴性(一):仅质控区(C)出现一条紫红色条带。
大便显微镜检查操作规程s o p -CAL-FENGHAI-(2020YEAR-YICAI)_JINGBIAN大便显微镜检查操作规程sop一、项目名称:粪便显微镜检查二、方法:直接涂片、显微镜检查三、试剂:生理盐水、碘液、苏丹Ⅲ染液四、器材:显微镜、玻片五、操作:1、直接涂片法:洁净玻片上滴加生理盐水1-2滴,选粪便不正常部分涂片。
2、虫卵及包囊浓缩检查:1)漂浮法。
2)清水沉淀法。
3、原虫及包囊碘液染色法。
4、血吸虫卵沉淀孵化法。
六、参考值:正常:黄软,成形,无红、白细胞或寄生虫卵等,以低倍镜视野观察等。
七、临床意义:1、球形硬便,便泌时可见。
2、粘液稀便,见于肠壁受刺激或发炎时,如肠炎、痢疾和急性血吸虫病等。
3、粘液性脓性血便,多见于细菌性痢疾。
4、酱色粘液(可带脓)便,多见于阿米巴痢疾。
5、稀汁样便,可见于急性肠胃炎,大量时可见于肠膜性肠炎及隐苞子虫感染。
6、米泔样便等有大量肠粘膜脱落,见于霍乱、副霍乱等。
7、扁平带状便,可能因直肠或肛门狭窄所致。
八、病人准备及标本要求:1.留取新鲜指头大小即可,放入干燥、清洁、无吸水性德有盖容器送检2.检查痢疾阿米巴滋养体,应于排便后立即检查。
冬季需采取保温措施。
3.不应采取尿壶中的粪便标本。
粪便中也不可混入植物、泥土、污水等4.采取标本后,应在一小时内送检。
5.大便隐血试验要求在检验的前三天禁食动物血、肉、肝脏、富含叶绿素的食物、铁剂、中药等,以免假阳性反应。
九、注意事项:操作时应挑取不正常部分。
十、参考文献:全国临床检验操作规程(第3版)十一、编写者:制定日期:修改日期:。
SOP_15-10 粪便培养标准操作程序一、粪便培养标本采集和运送见本手册《病原微生物标本的采集运送和处原则》。
二、标本验收1.申请单验收:要求申请单除患者的基本信息以外还应包括标本收集时间、收集方式、是否已使用抗生素等,验收时应检查申请单是否填写完整。
2.标本验收:(1)检查标本标识是否与申请单相符;(2)检查送检时间是否超过规定的标本保存时间。
3.不合格标本处理:(1)对申请单信息不全者应设法与临床医师取得联系;(2)对标识不符、送检容器不合格,送检时间超过规定时间的标本应注明原因,退回,要求重新留取标本,并做记录。
三、实验室检查1、涂片检查当检查霍乱弧菌以及菌群失调优势菌时需作直接涂片检查。
(1)检查霍乱弧菌落染色检查:取新鲜送检标本涂片,干燥后革兰氏染色,油镜下观察有无革兰阴性呈鱼群排列的弧菌。
悬液检查:取患者粪便,制成悬滴标本,检查细菌的动力,霍乱弧菌呈穿梭状活泼的运动,在悬滴涂下加O1群霍乱弧菌诊断血清后,在显微镜下观察,若原运动的现象停止,为制动试验阳性。
可初步推断为疑似O1群霍乱弧菌。
(2)酵母菌涂片检查:涂片染色在油镜下观察,是否有卵形的芽生孢子及假菌丝,即报告检出酵母样菌。
(3)粪便中优势菌:涂片革兰氏染色油镜下观察:染色性、细菌形态、排列、各自在涂下中所见到的相对比例、推定主要优势菌,并及时报告结果。
2、培养及结果观察(1)沙门-志贺菌:接种SS(或HE)及MAC(或中国兰),35℃、18-24h后检查平板,如未发现沙门菌或志贺菌的可疑菌落,48h重复检查一次。
如未发现可疑菌落,可报告:“未检出沙门/志贺菌”;如有疑似菌落,做推断性生化试验,初步生化反应符合两属生物学定义,并与志贺菌诊断血清中之一发生明显凝集者,可报告“检出**志贺菌”;与沙门菌多价及群因子诊断血清凝集者,只能报告“检出*群沙门菌”。
沙门/志贺菌的选择性增菌培养基,此类培养能抑制革兰阳性菌及暂时性抑制大肠埃希氏菌和变形杆菌生长,并促进沙门/志贺菌的生长。
单位:厦门同安集安门诊部编号:02日期:2015年8月粪便常规检查(直接涂片法)1.实验原理:本实验是利用肉眼观察粪便的颜色和性状,以及利用粪便生理盐水涂片在显微镜下观察涂片中是否有虫卵、幼虫、各种细胞、包囊、结晶等。
2.标本采集标本采集前病人准备:无须特殊准备标本种类:粪便标本要求:标本用取自粪便的不同部位特别是病理性改变比较明显的部位。
、3.标本储存:粪便应取指头大小存放于干燥、清洁、无吸水性的容器内。
粪便的容器必须有盖且有明显的标记。
4.标本运输:室温运输5.标本拒收标准:尿液、植物、泥土、污水等污染标本;干结粪便6.造作步骤肉眼观察粪便的颜色、性状再用竹片搜集少量不同部位的粪便标本,涂抹于滴有一滴生理盐水的洁净玻片上。
盖上盖玻片,涂片的厚度以能透过印刷物字迹为准。
先在低倍物镜下观察有无包囊、虫卵、幼虫等,再在高倍镜下观察有无红细胞、白细胞、各种结晶,并观察粪便中的菌群分布。
7.结果判断与分析粪便颜色根据观察所见报告,如黄色、褐色、土灰色、绿色、红色、柏油样等。
正常粪便因粪胆素而呈棕黄色,但可因饮食、药物或病理原因影响而改变粪便颜色;灰白色见于钡餐后、服硅酸铝、阻塞性黄疸、胆汁减少或缺乏;绿色见于食用含叶绿素的蔬菜后及含胆绿素时;红色见于下消化道出血、食用西红柿、西瓜等;柏油样便见于上消化道出血等。
酱色常见于阿米巴痢疾、食用大量咖啡、巧克力等;米泔水样见于霍乱。
性状可以报告为软、硬、糊状、泡沫状、稀汁样、血水样、血样、粘液血样、粘液脓样、有不消化食物等。
正常时为有形软便。
7.2.1球形硬便:便秘时可见7.2.2粘液稀便:见于肠壁受刺激或发炎时,如肠炎、痢疾和急性血吸虫病等。
7.2.3粘液脓性血便:多见于细菌性痢疾7.2.4酱色粘液(可带脓)便:多见于阿米巴痢疾7.2.5稀汁样便:可见于急性肠胃炎,大量时见于伪膜性肠炎及了隐孢子虫感染。
7.2.6米泔样便并有大量肠粘膜脱落见于霍乱7.2.7扁平带状便:可能因直肠或肛门狭窄所致。
粪便常规检验标准操作一.目的:规范粪常规检验标准操作二.适用范围:适用于粪常规检验三.支持性文件:全国临床检验操作规程第三版四.原理:直接涂片镜检法。
五.仪器:光学显微镜。
六.试剂:生理盐水七.样本要求:一般检验留取新鲜指头大小(约5g)即可,放入干燥、清洁、无吸水性的有盖容器内送检,标本容器最好用内层涂腊的硬纸盒,便于检查后焚毁。
血吸虫毛蚴孵化则留全量新鲜便(不少于30g)。
细菌检查的粪便标本应收集于灭菌封口的容器内,勿混入消毒剂及其它化学药品。
检查蛲虫卵需要用软玻璃纸拭子,在清晨排便前由肛门四周拭取标本,也可用棉拭子拭取,但均须立即镜检。
检查阿米巴滋养体,应于排便后立即检查。
冬季需采取保温措施,迅速送检。
八.操作步骤:1.一般性状检查(1)颜色:根据观察所见报告:黄色,褐色,灰白色,绿色,红色,柏油样等。
(2)性状:可报告为软,硬,糊状,液状等。
(3)寄生虫虫体:蛔虫,蛲虫,绦虫节片等较大虫体,肉眼即可分辨,钩虫虫需将粪便冲洗过筛后方可看到,服用驱虫剂后排便时应立即检查有无虫体,驱绦虫后应立即细寻找有无虫头。
2.直接涂片镜检(1)洁净玻片上加生理盐水1-2滴,选择粪便的异常部分,或挑取粪便的不同部位制成涂片,涂片的厚度以能透过印刷物字迹为准。
(2)先用低倍镜观察全片,再转用高倍镜鉴别。
(3)如发现可疑包囊,则在该涂片上加一滴碘液,在高倍镜下仔细辨认。
(4)虫卵的报告方式:未找到者注明“未检出虫卵”,找到则用每低倍视野计数其量。
(5)应注意粪便中有无红细胞,白细胞,嗜酸性粒细胞(涂片干后瑞氏染色)上皮细胞,巨噬细胞等。
(6)应注意夏科-雷登结晶,常见于肠道溃疡,尤以阿米巴感染粪便中最易检出,过敏性腹泻及钧虫患者粪便中亦可见到。
(7)注意检查霉菌。
(8)注意肌纤维,结缔组织,弹力纤维,淀粉颗粒,脂肪球的大量出现。
3.结果输入上海新和中文操作系统打印报告。
九.参考范围:成人:黄褐色婴儿:金黄色均为柱状软便;有少量粘液但肉眼不可见;无红细胞;可有少量结晶;白细胞偶见;细菌正常菌群;上皮细胞偶见;霉菌少量;无致病性虫卵;少量食物残渣。
ISO15189-2012质量管理体系文件(作业指导书)临检室作业指导书文件编号:TJDX-3-LJ-01~50第C版编制:审核:批准:生效日期:2018年01月01日TJDX附属协和医院检验科目录修订页血红蛋白电泳检查(电泳法)1. 原理血红蛋白是由两对多肽链组成的复杂分子。
每一条链含有血红素和络合铁原子的卜啉。
所有血红蛋白的血红素部分都是相同的。
所测定的血红蛋白的蛋白部分称之为珠蛋白。
正常人血红蛋白多肽链包括α、β、δ和γ。
血红蛋白的结构、分子特性取决于形成其肽链的氨基酸顺序和性状。
氨基酸不同可形成不同的血红蛋白,其表面电荷不同,在电场中的泳动率不同。
本实验在碱性(PH=8.60)条件下,以琼脂糖凝胶电泳的方法进行,对红细胞洗涤后造成溶血,电泳分离血红蛋白后以氨基黑染色。
多余的染色液用酸性液体洗去。
待琼脂糖凝胶板干燥后,肉眼可直接判别有无电泳条带异常。
运用光密度扫描仪检测准确定量分析电泳条带异常情况。
血红蛋白异常有二种类型:血红蛋白性质或结构的异常称之为血红蛋白病。
血红蛋白中的一条链合成减少引起血红蛋白性质异常,称之为地中海贫血。
2. 标本采集2.1 标本采集前病人准备:受检者应空腹。
2.2 标本种类:抗凝血2.3 标本要求:抗凝剂选用EDTA,柠檬酸或肝素均可,避免碘乙酸。
常规静脉采血1.8ml,加入含有109mmol/L枸橼酸钠溶液0.2ml的干燥。
清洁试管中,充分混匀。
4. 标本储存:储存于2-8℃冰箱中,5天。
5. 标本运输:储存于2-8℃状态下的冰壶或泡沫箱密封运输。
6. 标本拒收标准:细菌污染、溶血或脂血标本不能作测定。
7. 试剂7.1 试剂名称:血红蛋白电泳检查试剂7.2 试剂生产厂家:法国Sebia公司7.3 包装规格:150tests7.4 试剂盒组成琼脂糖凝胶10块溶血素1瓶缓冲液条带10包×2条薄滤纸1×10张氨基黑(浓缩液)1瓶×100ml 点样模具滤纸10条×1盒7.5 试剂储存条件及有效期:贮存于室温(15~30℃)或冰箱(2~8℃),不能冷冻。
粪便常规检验一、检验目的:检验粪便颜色性状及细胞成分和食物残渣等,辅助诊断消化道疾病,判断消化系统器官功能状况。
二、原理:通过肉眼观察颜色性状;显微镜检查细胞、食物残渣和结晶等成分。
三、标本的采集:1、收集粪便的容器:使用清洁、干燥、无吸水性一次性有盖塑料杯。
2、样本的采集:采集新鲜粪便;采取标本时应注意选择带脓血及粘液的部分;无明显异常标本应多点取样;检查蛲虫卵需要用软黏秀明纸拭子,在清晨排便前由肛门四周拭取标本,也可用棉拭子拭取,但需立即镜检。
四、试剂:生理盐水。
五、仪器设备:1.光学显微镜。
2.竹签。
3.玻片。
六、操作步骤(一)肉眼检查:描述颜色与性状(二)显微镜检查:1.制备涂片:取洁净载玻片1张,加生理盐水1—2滴,用竹签挑取外观异常的粪便(无明显异常标本应多点取样),与生理盐水混合制成涂片,涂片面积应占玻片2/3,厚度以能透视纸上字迹为佳。
2.观察先用低倍镜观察有无寄生虫虫卵、原虫和食物残渣等,再换高倍镜观察血细胞、吞噬细胞、上皮细胞等,并对其数量进行估计。
3.报告结果(1)以低倍镜报告寄生虫虫卵、原虫和食物残渣等,如“见到某种虫卵”,(2)以每高倍镜视野所见最低值和最高值细胞报告。
七、质量控制1、加强人员的责任心,工作认真仔细。
2、加强人员培训,严格按照操作规程操作。
八、计算方法:九、生物参考区间:(1)颜色正常成人呈黄褐色,食用大量蔬菜后可呈绿色;婴儿为黄色或金黄色。
(2)性状正常呈成形软便。
(3)显微镜镜检红细胞:0/HP。
白细胞:偶见/HP。
无寄生虫卵。
可见少量食物残渣。
十、操作性能:十一、超出可报告范围的处理:十二、危急值:十三、干扰因素:观察由上到下,左到右,避免重复。
十四、人员培训:1、掌握粪便检查显微镜下有形成分的形态特征。
2、掌握收集标本的要求和保存条件。
十四、临床意义:1、粪便颜色:柏油色,见于上消化道出血等。
酱红色,见于痢疾。
结肠癌、直肠或肛门出血时呈红色血便。
1.目的规范粪便标本细菌学检验标准操作规程,确保检验结果准确可靠。
2.适用范围粪便培养。
3.标本3.1 标本类型粪便、直肠拭子。
3.2 标本采集3.2.1 自然排便采集自然排便后,挑取其脓血、黏液部分2~3 g,液体粪便取絮状物2~3ml,盛于灭菌容器内,或置于保存液(运送培养基)、增菌培养基中送检。
3.2.2 直肠拭子如不易获得粪便时,或排便困难病人及婴儿,可用直肠拭子采取,即以无菌棉拭用保存液或生理盐水湿润后,插入肛门内4~5cm(幼儿2~3cm)轻轻转动取出,插入卡-布(Cary- Blair)运送培养基内或无菌容器内送检。
3.2.3 粪便标本应立即送检,室温保存不能超过2小时,如不能及时送检可以放人磷酸盐甘油(PH7.0)或转运培养基,但不能超过24小时。
培养艰难梭菌的标本保存于-20℃以下。
培养沙门菌和志贺菌的标本应放置磷酸盐甘油溶液中保(100mg/L)试剂。
存。
保存弯曲杆菌和弧菌的标本,需加CaCl23.3 标本拒收标准3.3.1 粪便标本放置时间超过2小时。
3.3.2 送检的粪便标本混有尿液。
3.3.3 直肠拭子未置于运送培养基中。
4. 试剂、仪器4.1 革兰染液、氧化酶试剂、麦康凯平板。
SS平板、TCBS平板及相关生化试剂等。
4.2 VITEK 鉴定系统;革兰阴性菌鉴定卡(GNI+)、革兰阴性细菌药敏卡(GNS)、革兰阳性细菌鉴定卡(GPI)、革兰阳性细菌药敏卡(GPS)。
真菌鉴定卡(YBC)药敏纸片、ATB板条等,有效期及储存条件参见试剂说明书。
培养箱。
4.3 接种针、接种坏、电热灼烧器、显微镜、孵育箱、CO24.4 诊断血清。
5. 细菌鉴定和药敏质控参见《质量管理程序》。
6.检验步骤接收标本后,立即对标本进行编号、登记。
6.1 涂片检查粪便标本因各种正常菌群含量甚多,仅以染色性和形态无法辨别是否为病原菌。
因此,粪便标本一般不作涂片检查。
只有怀疑霍乱弧菌及菌群失调所致腹泻时,才作直接涂片检查(观察动力和菌群比例)。
粪便常规检查(直接涂片法)作业指导书
1. 实验原理:本实验是利用肉眼观察粪便的颜色和性状,以及利用粪便生理盐水涂片在显微镜下观察涂片中是否有虫卵、幼虫、各种细胞、包囊、结晶等。
2. 标本采集
2.1 标本采集前病人准备:无须特殊准备。
2.2 标本种类:粪便。
2.3 标本要求:标本应取自粪便的不同部位特别是病理性改变比较明显的部位。
3. 标本储存:粪便应取指头大小存放于干燥、清洁、无吸水性的容器内。
粪便的容器必须有盖且有明显的标记。
4. 标本运输:室温运输。
5. 标本拒收标准:尿液、植物、泥土、污水等污染标本;干结粪便。
6. 操作步骤:
6.1 肉眼观察粪的颜色、性状。
6.2 再用竹片搜集少量不同部位的粪便标本,涂抹于滴有一滴生理盐水的洁净玻片上。
6.3 盖上盖玻片,涂片的厚度以能透过印刷物字迹为准。
6.4 先在低倍镜下观察有无包囊、虫卵、幼虫等,再
在高倍镜下观察有无红细胞、白细胞、各种结晶,并观察粪便中的菌群分布。
7. 结果判断与分析:
7.1 粪便颜色根据观察所见报告,如黄色、褐色、土灰色、绿色、红色、柏油样等。
正常粪便因粪胆素而呈棕黄色,但可因饮食、药物或病理原因影响而改变粪便颜色:灰白色见于钡餐后、服硅酸铝、阻塞性黄疸、胆汁减少或缺乏;绿色见于食用含叶绿素的蔬菜后及含胆绿素时;红色见于下消化道出血、食用西红柿、西瓜等;柏油样便见于上消化道出血等。
酱色常见于阿米巴痢疾、食用大量咖啡、巧克力等;米泔水样见于霍乱。
7.2 性状可报告为软、硬、糊状、泡沫状、稀汁样、血水样、血样、粘液血样、粘液脓样、有不消化食物等。
正常时为有形软便。
7.2.1 球形硬便:便秘时可见。
7.2.2 粘液稀便:见于肠壁受刺激或发炎时,如肠炎、痢疾和急性血吸虫病等。
7.2.3 粘液脓性血便:多见于细菌性痢疾。
7.2.4 酱色粘液(可带脓)便:多见于阿米巴痢疾。
7.2.5 稀汁样便:可见于急性肠胃炎,大量时见于伪膜性肠炎及了隐孢子虫感染。
7.2.6 米泔样便并有大量肠粘膜脱落,见于霍乱等。
7.2.7 扁平带状便:可能因直肠或肛门狭窄所致。
7.3 蛔虫、蛲虫、绦虫节片等较大虫体,肉眼即可分辩。
钩虫虫体常需将粪便冲洗过筛后方可看到。
服驱虫剂后排便时应检查有无虫体。
驱绦虫后应仔细寻找有无虫头。
8. 临床意义:为各类消化道疾病提供协助性诊断;查找并鉴别寄生虫。
9. 操作性能:快速简便
10. 方法局限性:有时会受主观因素的影响
11. 参考文献:
12. 注意事项:
12.1 虫卵的报告方式:未找到者注明“未找到虫卵”,找到一种报告一种,找到几种报告几种,并在该虫卵后面注明数量若干,以低倍视野计算。
12.2 应注意将植物纤维及其细胞与寄生虫、人体细胞相鉴别,并注意有无肌纤维、结缔组织、弹力纤维、淀粉颗粒、脂肪小滴球等。
若大量出现,则提示消化不良或胰腺外分泌功能不全。
12.2 细胞中应该注意红细胞、白细胞、嗜酸性粒细胞(直接涂片干后用瑞氏染色)、上皮细胞、巨噬细胞等。
12.3 夏科-雷登结晶:为无色或浅黄色两端尖而透明
具有折光性的菱形结晶,大小不一。
常见于肠道溃疡,尤以阿米巴感染粪便中最易检出。
过敏性腹泻及钩虫病患者粪便亦常可见到。
12.4 细菌:占粪便净重的1/3(4000亿/g干粪),正常菌群主要是大肠杆菌和肠球菌,占80%;而过路菌(产气杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌等)不超过10%;芽孢菌(如梭状菌)和酵母菌为常住菌,但总量不超过10%。
正常菌群消失或比例失调可因大量应用抗生素所致,除涂片染色找细菌外,应采用不同培养基培养鉴定。