共聚焦显微镜使用规章(暂行)

蔡司共聚焦显微镜安全操作及保养规程前言蔡司共聚焦显微镜是一种高分辨率成像设备，广泛应用于生命科学、物质科学等领域。

为保障设备安全、延长设备使用寿命，特制定本文档，介绍该设备的安全操作及保养规程。

安全操作规程1.在操作前，应查询设备的使用说明书，并全面了解设备的性能及操作方法。

2.在使用前，应先检查设备是否正常，确保仪器各部件安装牢固、电线不松动，各部件动作正常。

3.严禁将化学试剂或其他腐蚀性物质放入显微镜中，以免损坏设备。

4.操作中应遵循“先关灯后关机，先开机后开灯”的原则，确保设备正常开启或关闭。

5.切勿使用过大或过小的力量操作显微镜，以免影响设备寿命。

6.当设备因异常情况需要紧急停机时，应使用急停开关，切勿使用电源开关，避免损坏设备。

7.在设备开启状态下，切勿随意更换设备配件或涉及设备内部维修，如有异常情况应立即向厂商或专业技术人员求助。

保养规程1.在设备正常使用期间，应加强对设备的保养和维护，保持设备的清洁和干燥。

2.设备需要接通电源时，在保证电压稳定的情况下，应使用稳定的电源并加装过电压保护装置，避免对设备产生损害。

3.在操作前，应对设备进行彻底清洁，清洁过程中不得直接将水或清洁剂倒在设备上或对设备产生损害的部位。

4.在清洗设备时，应用干燥软布或软毛刷进行擦拭，切勿使用含有酸碱成分的清洁剂或物品，以免对设备产生腐蚀或损害设备表面。

5.在清洗设备表面时，不得将清洁剂或水进入仪器内部，以免对设备产生损害。

6.镜头是设备中最为重要的部分，应特别注意保养，如镜头脱落、变形、磨损或压伤等情况，应及时向专业技术人员进行维修和更换。

7.设备长时间不用时，应及时切断电源并将设备置于安全干燥的地方，保护好设备的各部件，避免设备长时间不用而导致的性能损害。

结语蔡司共聚焦显微镜是一种高精度设备，安装、操作及保养过程中需要严格遵守规程，避免对设备产生不必要的损害。

在设备的日常使用和保养过程中，我们应该掌握正确的操作和保养方法，保证设备在长期使用中保持良好的性能状态。

激光共聚焦显微镜操作规程一、准备工作a)打开计算机。

依次打开激光器电源、钥匙开关。

多线氩离子(458 nm, 488 nm, 514 nm) ON、氦氖绿(543 nm) ON、氦氖红(633 nm) ON。

打开汞灯电源开关。

b)登陆Windows XP系统。

双击快捷方式：FV10-ASW 1.1。

User ID: Administrator ; Passeword: Administrator。

注意区分大小写。

二、显微镜镜下观察１.微分干涉差观察a)使用手控面板选择物镜。

插入起偏镜。

插入微分干涉滑块。

b)点击FV10-ASW软件中的图标。

标本聚焦.２.荧光观察：c)使用手控面板选择物镜。

d)打开汞灯的机械快门，拉出DIC滑块，点击FV10-ASW软件中的图标e)使用手控面板选择荧光滤色片。

标本聚焦。

３.获取单张荧光图像a)点击FV10-ASW软件中的按钮。

b)关闭汞灯快门，点击按钮，关闭卤素灯快门。

c)点击染料选择按钮，在染料列表中，双击用于观察的荧光染料。

点击Apply按钮。

d)点击XY Repeat按钮开始扫描。

调节图像。

点击Stop按钮停止扫描。

e)选择AutoHV,，并选择扫描速度。

f)点击XY按钮取得一幅图像。

g)点击SeriesDone按钮，“2D View-LiveImage(x)”2D界面就出现。

h)保存该幅图像:右图像管理器中显示的图像图标，选择另存为保存该幅图像。

(保存为“xml”类型是击FV10-ASW软件专用的图像格式。

)４.获得单张（荧光+微分干涉）图像a)点击FV10-ASW软件中的按钮，关闭汞灯快门。

点击按钮，关闭卤素灯快门。

b)点击染料选择按钮，在染料列表中，双击用于观察的荧光染料。

点击Apply按钮。

c)选择TD1。

d)点击XY Repeat按钮开始扫描。

调节绿色(FITC)图像和微分干涉差的图像。

点击Stop按钮停止扫描。

e)选择AutoHV, 并选择扫描速度。

Nikon 共聚焦显微镜安全操作规程一、操作步骤1、开机：大体按照：电脑→激光台（打开要用的激光按钮）→卤素灯→载物台→显微镜→控制器→软件，荧光灯需要就打开，不需要不用打开2、拍摄流程：打开软件Nikon confocal，ok进入软件操作界面，点eye port，看目镜聚焦，然后点eye port及Interlock解锁切换到激光光路L100，根据自己实验来设置参数和探测方法（DU4），然后点scan，重调Z轴找焦面，对通道进行HV和功率优化，停止scan，点击capture，完成一次拍摄。

3、图像保存：⑴数据保存：File，save as，保存原始数据文件格式.ND2；⑵图片保存：File，Inport/Export，Export ND document，在Export ND document 窗口中Channels，TIF compatibility Options（选择第二个或第三个），保存叠加图像时，在Export ND document 窗口中Channels勾选Insert Overlaps，再点击export4、关机：Z轴降到500以下，物镜转到空挡，最后与开机完全相反顺序进行关机。

二、注意事项：1、放置样品时，确保样品的中心区域在物镜的正上方，且尽量要物镜在两个夹片中心区域，以免转换物镜时，撞坏物镜；2、原则上所有的光源都非常忌讳频繁开关，会大大缩短其使用寿命。

荧光灯、卤素灯：开机后不管是否使用，都最好半小时后再关闭；关机后至少等十五分钟再开机。

激光：开机后不管是否使用，都最好一小时后后关闭；关机后至少等一小时再开机。

3、明场卤素灯的功率值不能超过4，否则会导致温度过高烧坏光纤，影响明场成像；4、60倍和100倍物镜是油镜，滴油时注意只需沾一下，切勿多，滴了油，如果要转物镜，必须先将当前滴了油的物镜用石油醚清洗擦干净才能转换；5、实验结束或者换样品转换镜头时必须按照以下程序进行操作：首先，取下样品，将物镜Z轴值降到500以下，然后，将载物台的载玻片拨至两端，最后再进行物镜的转换。

共聚焦显微镜（Nikon, C2-plus）操作规程
1.先开总电源。

2.使用钥匙打开仪器，从左往右开机。

3.打开电脑，进入主界面。

4.点开桌面上的软件，上面为荧光照相，下面为明场照相。

5.根据实验需求选择荧光照相或明场照相。

6.关机顺序从右向左。

7.关闭电源。

8.罩好仪器罩子。

注意事项：
1. 激光器一旦打开，需半小时后才可关闭。

2. 食用油镜后，实验结束后，要蘸取酒精，使用专用擦镜纸向一个方向擦干净。

3．数据拷贝禁止使用u盘，拷贝数据请根据数据量，携带光盘刻录。

4. 共聚焦属于精密仪器，请大家注意保护。

易损物品及配件见下表。

5. 凡使用共聚焦显微镜人员须知：共同承担后期机器的维修费，激光光源损耗等一切费用。

共聚焦显微镜易损耗物品及配件。

潍坊医学院医学研究实验中心仪器简明操作规程汇编
激光共聚焦显微镜简明操作规程
1. 启动
开启UPS电源，依次开启右侧手柄上的三个开关，从左至右顺序开启，最后开启激光钥匙。

2. 开启软件
电脑进入操作系统界面后，双击电脑桌面启动共聚焦操作软件。

3. 自检
点击对话框的“OK”键进行自检，结束后进入软件界面
4. 开启激光管
点击屏幕上方的“configuration”按钮进入配置界面→点击左边
按钮→打开所需激光（OFF →ON ），Argon激光还需拖动右方滑块以调节输出功率
5. 设置参数
6. 放置样品进行观察。

7. 观察结束保持数据。

8.关机，做好记录。

激光共聚焦扫描显微镜操作规程一．开机程序1．开启总电源，确认所有仪器电源状态正常工作2．开启电脑，双击桌面上的LSM510图标，开启显微镜。

3．在初始平面上点击Start Expert Mode 键开启专家拍摄模式。

4．在主菜单中点击File New键，建立新的数据库。

二．软件拍摄1．在主菜单上点击Acquire Laser键，开启需要使用的激光2．在主菜单上点击VIS键，开启显微镜观察模式3．把需要观察的玻片放到载物台上选择需要观察的平面4．在主菜单上点击LSM键，开启进入显微镜激光扫描模式5．在主菜单上点击Config键，选择所需要扫描的模式及参数6．在主菜单上点击Scan Find键，进行图像参数自动校正7．在Scan子菜单下点击Fast X键，进行层面选择8．在连续扫描中调节放大器增益、补偿；激光强度等图像参数来优化图像9．点击图像子菜单上的Save键存储优化好的图像三．关机程序1．完成所有操作后，关掉激光开关，冷却5分钟后，点击主菜单上Exit键，退出所有程序2．关闭电脑3．关闭电源ZEISS 510 MET A二维扫描程序1.在Acquire → config →确定扫描所需的波长，（如果已作过相同方法的扫描，可直接调出一张相同条件的图像，用图像窗中的Reuse确定有关的扫描条件）2.在Acquire → micro →在低倍镜(透射光或荧光)下找到要观察的图像3.在Scan control → mode → find →在显示器上找到图像，选定扫描需用的分辨率4.调节物镜到适当的放大倍数5.Scan control → mode →New，打开一新图像窗6.在Scan control → mode → cont →用zoom将图像大小调至最佳，用Pinhole（一般选1）、Detector Gain（650左右，不宜时间超过800，也不宜低于500）、Amplifier offset（不宜过低），以及选择作算术平均值次数、调节激光强度（488nm不超过25%）等调节图像质量至最佳。

激光扫描共聚焦显微镜室管理规定1.进入激光扫描共聚焦显微镜操作室的人员必须阅读并严格遵守以下管理规定方可进入。

2.实验操作时间以仪器管理人员安排的时间为准。

不能如期进行实验的，必须提前半天告知仪器管理人员，未作说明，超过30分钟未上机者，按违约处理，取消当次实验；不超过30分钟者，实际使用的开机时间一律按使用安排表上的时间填写。

3.所有实验人员必须换鞋后方可进入实验室，并随手关门，需换或加衣服必须在实验室缓冲区内完成，禁止在实验室内更换，严禁在实验室内饮食。

无关人员不得随意进入实验室。

4.进入实验室首先查看空调温度和抽湿机的湿度（仪器的光学系统非常精密，易受温度和湿度的变化影响，进一步可严重影响仪器性能和软件对硬件的识别）。

空调温度＞23o C，湿度显示＞70%均不可开机，打开或调节空调温度，倒掉除湿机的水，等待温度湿度降到合适的度数再开机（本实验室根据设备技术要求严格控制温度在20-23 o C，湿度在40%-60%之间）。

5.查看不间断电源（UPS）是否正常工作。

非正常工作下不可开机，并立刻报告仪器管理人员；若实验过程中发生停电事故，须尽快保存数据并正常关机（UPS 供电不长）。

6.激光扫描共聚焦显微镜价格昂贵，操作复杂，原则上只有仪器管理人员和经过特殊培训取得上机操作资格的的课题组负责人方可操作。

任何人不得随意改动仪器设置。

7.实验过程中密切注意空调温度、如遇空调故障（室内温度高于250C）必须关机并报告仪器管理人员，潮湿季节需定时检查抽湿机是否水满并及时倒水。

实验过程中发现仪器任何异常情况请立即联系仪器管理人员。

8.物镜的调节要非常小心，不能与载玻片发生碰撞。

发生物镜损坏等情况，实际操作者及所在课题组将承担物镜更换费用，并视具体情况按照实验室相关规定进行处理。

若使用了水/油镜，用完后要及时用擦镜纸将水/油擦尽，再用无水乙醇清洗镜头。

9.实验完毕后一定要倒掉抽湿机的水（注意：不可关闭空调），等待仪器冷却10分钟再用防尘罩遮盖好仪器，并诚实做好仪器的使用登记。

共聚焦荧光显微镜使用流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。

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Leica共聚焦显微镜使用说明Step 1: 打开PC电源——“1”Step 2: 打开汞灯控制开关——“2”Step 3: 打开中控盒——“3”Step 4: 打开计算机主机——“4”，启动计算机。

注：计算机操作系统启动后方可继续开机！！Step 5: 顺序打开激光器电源Scanner—“5”，激光冷却系统LASER Ar/ArKr—“6”★注：须确认冷风开启后方可打开激光电源！！！！！Step 6: 将上图虚线框中激光功率控制旋钮——“6.5”顺时针旋转60°左右。

Step 7: 将上图所示488 nm激光管开关——“7”钥匙沿顺时针旋转约120°至显示灯亮，再将钥匙旋回竖直位置Step 8: 依次将上图所示543/594 nm激光管开关——“8”和633 nm 激光管开关——“9”钥匙沿顺时针旋转约90°至显示灯亮。

Step 9:依次打开半导体激光器电源——“10”和405 nm激光管开关——“11”，（“11”的开启方式同“8”、“9”。

）Leica共聚焦显微镜关机顺序及注意事项Step 1: 关闭软件→拷贝Data→关闭计算机Step 2: 依照开机顺序倒序关闭各个开关，由”11”→”7”, ”5”→”1”。

★注：（1）冷风——”6”不能立即关闭！！须在关闭所有硬件设备30min 后方可关闭，以使激光管完全冷却，延长使用寿命。

（2）PC电源——“1”须在电脑确定关闭后方可关闭！！数据采集Step 1: 实验前扫描样本片观察激光通路是否正常工作。

Step 2: 上样，须轻起轻落科勒照明系统，选择合适倍数物镜，通过FLUO键选择相应荧光通道，调节载物台和焦距，找到合适视野。

Step 3: 点击由Visual→Scan，点击选择扫描模式，如xy, xyz, xyt, xyzt, xyλ etc..点击选择扫描格式（一般为默认值512*512）。

Step 4: 点击打开Beam path setting窗口，对光路和检测器进行设置。