金属转子流量计的应用
金属转子流量计的应用说明如下：
1、新装管道在仪表安装前应将新管道冲洗干净，如果被测介质含有颗粒杂质或气泡，则应在仪表上游安装过滤装置或设置排气口，安装时流体必须从下向上流动，若流体从上向下流动，则仪表不能工作。如被测介质是脉动流，则应在下游设置适当尺寸缓冲装置，如稳压罐等以消除脉动。
2、仪表开箱检查无误后取出填充物，仪表应垂直安装在无震动的管道上；如需水平安装，订货时应另加说明。仪表中心线与铅垂线的夹角不应超过5°。安装时仪表的直管段长度应大于5倍仪表口径，以消除涡流影响。
3、一次仪表按规定安装好后，应先关闭仪表上、下游截止阀；再检查一次仪表同二次仪表接线，无误后，开启二次仪表电源则瞬时流量应显示为零。如要正常使用，则应先开启上游阀呈全开后，用流量计下游调节阀由小到大缓慢调节流量，则瞬时流量应有变化。停止工作时，则应先关闭上游阀门、然后关闭下游调节阀。为了便于检查仪表零点和拆装维修与调试，应在仪表上、下游安装截止阀和旁通阀。
金属管浮子流量计的运用方法
金属管浮子流量计是工业自动化过程控制中常用的一种变面积流量测量仪表。它具有体积小，检测范围大，使用方便等特点。它可用来测量液体、气体以及蒸汽的流量，特别适宜低流速小流量的介质流量测量。
1、用户运用时，若被測流体的密度与水不同时，或被測气体的参数和工作状态与制造厂家规定不同时应对金属管浮子流量计示值读数进行换算；指示器的两盖必须密封，防止灰尘进入，影响正常工作。
2、安装PTFE衬里的仪表时，法兰螺母不要随意不对称拧得过紧，以免引起PTEF衬里变形；
3、带有液晶显示的仪表，要尽量避免阳光直射显示器，以免降低液晶使用寿命；带有锂电池供电的仪表，要尽量避免阳光直射、高温环境（≥65℃）以免降低锂电池的容量和寿命；必须保证仪表的清洁，特别是仪表中孔板、椎管的表面和浮子必须保持清洁，因而仪表使用一段时间后应取下清洗。
4、用于小口径和低流速介质流量测量；工作可靠，维护量小，寿命长；对于直管段要求不高；较宽的流量比10：1；双行大液晶显示，可选现场瞬时/累计流量显示，可带背光单轴灵敏指示；非接触磁耦合传动；若仪表运转不稳，指针跳动的主要原因除流量本身脉冲外，还要考虑介质有两相流的可能性（即液相和气相同时存在），只要采取措施消除两相流的存在，即可保证仪表稳定运转。
转子流量计最容易忽视的问题
流量计是用于测量液体或气体的线性、非线性、质量或体积流量的仪器。良好的流量计选择的基础是对特定应用要求的清晰理解。因此，要花时间全面评估工艺流体及整体安装的性质。选择流量计时，应考虑特定厂区人员的熟悉程度、他们校准和维修的经验、备件的供货能力和平均失效间隔时间等无形因素。因此，应多加注意转子流量计容易出现的问题：
1、气体介质由于受到温度压力影响较大，建议采用温压补偿的方式来获得真实的流量。
2、由于长期使用及管道震动等多因素引起浮子流量计传感磁钢、指针、配重、旋转磁钢等活动部件松动，造成误差较大。解决方法：可先用手推指针的方式来验证。首先将指针按在RP位置，看输出是否为4mA，流量显示是否为0%，再依次按照刻度进行验证。若发
现不符，可对部件进行位置调整。一般要求专业人员调整，否则会造成位置丢失，需返回厂家进行校正。
3、安装不符合要求：对于垂直安装转子流量计要保持垂直，倾角不大于20度;对于水平安装转子流量计要保持水平，倾角不大于20度;转子流量计周围100mm空间不得有铁磁性物体。安装位置要远离阀门变径口、泵出口、工艺管线转弯口等。要保持前5D后250mm 直管段的要求。
4、液体介质的密度变化较大也是引起误差较大的一个原因。由于仪表在标定前，都将介质按用户给出的密度进行换算，换算成标校状态下水的流量进行标定，因此如果介质密度变化较大，会对测量造成很大误差。解决方法可将变化以后的介质密度带入公式，换算成误差修正系数，然后再将流量计测出的流量乘以系数换成真实的流量。
玻璃转子流量计外表面为何会出现模糊？
玻璃材质的仪器它可以具有的一个特点是数据结果清晰可见，也就是说如果我们要使用玻璃转子流量计进行测量的话，我们可以很轻易地就观察到测量结果，而这个对于我们来说还是非常便捷的。
但也正是因为它是玻璃材质的，所以它的外表面也极其的容易受到不同程度的损坏，以至于产生模糊，不便于我们的使用观察，那么面对这样的情况我们应该怎么处理呢?
当它的外表面模糊情况不是很严重，并且仅仅是因为外表有脏污痕迹所导致的时候，我们就可以通过简单地擦拭来解决问题，不过我们需要注意的一点是应该使用专用的抹布，这样才不会造成二次的损坏。
而如果是模糊比较严重，我们又无法进行擦拭处理的话，那么我们就很有必要考虑去更换仪器了，这个时候选择更换仪器才是解决问题的最好办法，不过我们需要注意的是在下次的使用里应该做好保养工作。
仪器变得模糊自然的是不利于我们的使用的，所以我们就应该通过一定的方法去解决问题，不过最直接的方法是在平时的时候多多注意保护仪器，这样我们自然的也就不需要花费更多的精力去做处理工作了。
金属管浮子流量计在选用前的注意问题
1、耐高温，可达450℃金属转子流量计，金属管浮子流量计，威力巴流量计。耐腐蚀，可以采用衬四氟浮子或者哈氏合金。
2、可以制作适宜小口径低流速气体、液体及蒸汽流量的测量。
3、磁耦合原理无泄漏耐高压，目前出现了第三代金属管浮子流量计，锥管一次成型，品质高外观新颖，压力损失小，测量管无死角，浮子可以转动不易堵塞，不受地磁场干扰等优点。
4、受一定粘度影响，不宜测量高粘度介质。
5、当流量超过100m3/h水流量时，压力损失明显。
6、多用于过程控制用仪表，最高精度1%，一般为1.5%，量程比10:1。
7、本安防爆、隔爆型均有，适合危险工业场合；根据原理，最理想、最适宜的安装方式为下进上出垂直安装。
8、有就地指针型、电池型、二线制型供电型等多种形式可供选择；测量高温低温(-30℃以下)介质时，最好采用夹套型。
9、不适宜测量密度变化大的介质；不适宜测量脉动介质流量(如计量泵出口)。
10、对于气体本表无温压补偿，需另配压力表；对于多台仪表密集安装或碳钢工艺管道经过仪表附近时，要与仪表保持100mm以上的距离，避免磁场干扰；对于含有大量铁磁性颗粒介质流量测量时，要在仪表前加装磁过滤器，并定时进行吹扫。
11、若选用隔爆场合使用仪表，要选用圆壳M4或M8指示器；模块化、智能化、卡件式的流量计还可以根据用户不同配置。
1．何谓医院感染？ 答：医院感染指住院病人在医院内获得的感染，包括在住院期间发生的感染和在医院内获得出院后发生的感染，但不包括入院前已开始或者入院时已处于潜伏期的感染。工作人员在医院内获得的感染也属医院感染。 2.何谓医源性感染？ 答：医源性感染是指在医学服务中，因病原体传播引起的感染。 易引起医源性感染的因素包括：多次进行侵袭性操作；使用消毒或灭菌不合格的医疗器械或设备；医疗环境污染严重，如物体表面、空气、医务人员的手等；输入已被污染的药品、血液或血液制品等；医务人员的职业暴露等等。 3.根据病原体的来源不同，医院感染可分为哪几类？ 答：医院感染可根据病人在医院中获得病原体的来源不同，分为外源性感染和内源性感染。 4.何谓外源性感染？ 答：外源性感染又称交叉感染，其病原体来自病人体外，如来自于其他病人、医务人员、诊疗器械和医院环境等。 5. 何谓内源性感染？ 答: 内源性感染又称自身感染，其病原体来自病人自身（皮肤、口咽、肠道、泌尿生殖道等）的常居菌或暂居菌。当人体免疫功能下降或体内微生态环境失衡时即可发生内源性感染。随着医院感染监控工作的深入，外源性感染已明显减少，内源性感染则在增加，成为医院感染的主要类型。 6.医院感染流行病学有哪些特点？ 答：医院感染流行病学主要特点有：⑴感染链特点：外源性感染的传播过程必须具备三个基本环节，即感染源、传播途径和易感人群，缺一不可。⑵发病形式特点：医院感染多为散发性，有时可出现暴发流行。外源性感染的表现形式可为散发，也可为暴发。而内源性感染则呈散发形式。⑶预防控制特点：大部分外源性感染是可以通过规范医护人员诊疗操作、严格消毒灭菌及隔离等措施得到预防和控制的。 内源性感染的发生基于病人的基础病、诊疗措施等多种因素，较难有效地预防与控制。但可以通过合理使用抗菌药物及免疫抑制类药物、提高机体免疫功能等措施降低感染风险。⑷科室分布特点：医院感染多发生于医院的高危科室，主要有各类重症监护病房、新生儿病房、神经外科、烧伤科、心胸外科、呼吸科、血液科和肾科病房等。⑸感染部位分布特点：鉴于不同国家发生医院感染的危险因素不同，导致医院感染发生的主要部位亦有所不同。在美国，主要感染部位为泌尿道、手术部位、下呼吸道及血流感染。而我国主要感染部位则为呼吸道、消化道、泌尿道及手术部位感染，占整个医院感染的80%以上。 7.医院感染常见感染源有哪些？ 答：医院感染常见感染源主要有病人、带菌者或自身感染、污染的医疗器械、污染的血液或血液制品、环境储源等。
第一章医院感染管理概论 第一节医院感染的基本概念 1．何谓医院感染？ 答：医院感染指住院病人在医院内获得的，包括在期间发生的感染和在医院内获得出院后发生的感染，但不包括入院前已开始或者入院时已处于潜伏期的感染。工作人员在医院内获得的感染也属医院感染。 2.何谓医源性感染？ 答：医源性感染是指在医学服务中，因病原体传播引起的感染。 易引起医源性感染的因素包括：多次进行侵袭性操作；使用消毒或灭菌不合格的医疗器械或设备；医疗环境污染严重，如物体表面、空气、医务人员的手等；输入已被污染的药品、血液或血液制品等；医务人员的职业暴露等等。 3.根据病原体的来源不同，医院感染可分为哪几类？ 答：医院感染可根据病人在医院中获得病原体的来源不同，分为外源性感染和内源性感染。 4.何谓外源性感染？ 答：外源性感染又称交叉感染，其病原体来自病人体外，如来自于其他病人、医务人员、诊疗器械和医院环境等。 5. 何谓内源性感染？ 答: 内源性感染又称自身感染，其病原体来自病人自身（皮肤、口咽、肠道、泌尿生殖道等）的常居菌或暂居菌。当人体免疫功能下降或体内微生态环境失衡时即可发生内源性感染。随着医院感染监控工作的深入，外源性感染已明显减少，内源性感染则在增加，成为医院感染的主要类型。 6.医院感染流行病学有哪些特点？ 答：医院感染流行病学主要特点有： ⑴感染链特点：外源性感染的传播过程必须具备三个基本环节，即感染源、传播途径和易感人群，缺一不可。 ⑵发病形式特点：医院感染多为散发性，有时可出现暴发流行。外源性感染的表现形式可为散发，也可为暴发。而内源性感染则呈散发形式。 ⑶预防控制特点：大部分外源性感染是可以通过规范医护人员诊疗操作、严格消毒灭菌及隔离等措施得到预防和控制的。 内源性感染的发生基于病人的基础病、诊疗措施等多种因素，较难有效地预防与控制。但可以通过合理使用抗菌药物及免疫抑制类药物、提高机体免疫功能等措施降低感染风险。 ⑷科室分布特点：医院感染多发生于医院的高危科室，主要有各类重症监护病房、新生儿病房、神经外科、烧伤科、心胸外科、呼吸科、血液科和肾科病房等。 ⑸感染部位分布特点：鉴于不同国家发生医院感染的危险因素不同，导致医院感染发生的主要部位亦有所不同。在美国，主要感染部位为泌尿道、手术部位、下呼吸道及血流感染。而我国主要感染部位则为呼吸道、消化道、泌尿道及手术部位感染，占整个医院感染的80%以上。 7.医院感染常见感染源有哪些？ 答：医院感染常见感染源主要有病人、带菌者或自身感染、污染的医疗器械、污染的血液或血液制品、环境储源等。 8. 医院感染的传播途径主要有哪些？ 答：医院感染的传播途径主要有以下几种： ⑴接触传播——是医院感染最常见、也是最重要的传播途径。包括直接接触传播和间接接触传播。由接触传播的疾病常见的有肠道感染、多重耐药菌感染、皮肤感染等。 ⑵飞沫传播——由飞沫传播的疾病常见的有百日咳、白喉、流行性感冒、病毒性腮腺炎等。 ⑶空气传播——由空气传播的疾病常见的有肺结核、麻疹、水痘等。 9.哪些人群为医院感染易感人群？ 答：医院感染易感人群主要有： ⑴有严重基础疾病患者，如糖尿病、恶性肿瘤、慢性肾病等患者。 ⑵老年人及婴幼儿患者。 ⑶接受各种免疫抑制治疗的患者，如抗癌药物、放疗、免疫抑制剂等。 ⑷长期接受抗菌药物治疗，造成体内微生物生态失衡的患者。 ⑸接受各种侵袭性诊疗操作的患者。 第二节医院感染管理的基本概念 1.何谓医院感染管理？ 答：医院感染管理是针对诊疗活动中存在的医源性感染及相关的危险因素运用相关理论与方法，总结医院感染的发生规律，并为降低医院感染而进行的有组织、有计划的预防、诊断和控制活动。 2. 医院感染管理工作的主要内容有哪些？ 答：医院感染管理的主要内容包括： ⑴成立医院感染管理组织，明确职责，并根据国家相关医院感染预防控制法规，结合医院的实际情
培养细胞的完全培养基由基础培养基（如MEM）和添加剂（如血清或无血清培养用的某些确定的激素及生长因子）组成，培养基的配方一直在改进，其中包括抗生素和抗有丝分裂剂等等。 一、基础培养基 绝大多数培养基是建立在平衡盐溶液(BSS)基础上，添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。最广泛应用的培养基是Eearle`s MEM 的混合物，其中含有13种必须氨基酸、8种维生素。而Ham`s F12 也包括非必须氨基酸，维生素的范围亦很广，另外常规含有无机盐和代谢添加剂（例如核苷酸）。MEM/F12 这两种培养基各取 1/2，形成神经生物学最通用的培养基。Dulbecco`s改良培养基——DMEM，现应用于快速生长的细胞，同MEM含有相同的营养成分，但浓度高出2~4倍。选择某种培养基，应仔细了解成分表，应知道大多数情形下培养基都有不足。例如，有些培养基在氨基酸中包括有谷氨酸，而这种培养基虽广泛用于神经生物学领域，但它对某些对谷氨酸敏感的可能有细胞外毒性损伤的神经元而言，则并非最佳选择，特别是如果神经元生长在缺乏胶质的环境中时。F12中含有硫酸亚铁，据报道也有神经毒效应。 在所有这些培养基中，谷氨酸比其他氨基酸有更高的浓度，这是因为它具有不稳定性以及在许多细胞培养中它常用作碳源。对于神经元的培养常常在基础培养基中增加葡萄糖的含量到0.6%或者加入丙酮酸（若培养基中这两种物质缺乏时）。MEM与F12均要用5%的CO2来平衡，DMEM 含更高浓度的NaCO3，要用10%的CO2来平衡，当然也可以在较低CO2浓度下使用。这些基础培养基的组成成分是建立在对不同细胞系生长的研究之上的，但通常在原代培养中使用也能有比较令人满意的结果。 原则上，HEPES作为缓冲剂可用来代替碳酸氢盐，以解除需要高浓度CO2培养环境的限制。实际操作中并非如此简单。显然，溶解的CO2与碳酸氢盐对良好的细胞生长是重要的。Leiboviz`s L15培养基可用来在大气环境中令神经细胞生长，该培养基采用了与众不同的BSS作基础，它含有高浓度的氨基酸来提高缓冲能力，培养基中使用半乳糖作碳源，以阻止培养基中乳酸形成，少量溶解的CO2由丙酮酸代谢产生。这一培养基的优点是明显的，特别是在保持较高CO2有困难时，例如在长时间的显微操作及生理学研究中。L15培养基已用来成功的培养了外周神经元，但尚未在CNS神经元的发育研究中全面检测过。
目录 引言 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .1手册目的 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .1细胞培养简介 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .2什么是细胞培养？ . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .2有限细胞系与连续细胞系 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .2培养条件 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2冻存 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .2培养细胞的形态 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .3细胞培养的应用 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .3细胞培养实验室 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .4安全 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .4生物安全性等级 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .4安全数据表 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .5安全设备 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5个人防护设备 (PPE) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .5实验室安全规范 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .5细胞培养设备 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .6基本设备 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 6扩增设备 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 6其他用品 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 6细胞培养实验室 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .7无菌工作区域 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .7细胞培养通风橱 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .7细胞培养通风橱布局 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .8培养箱 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .9储存 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .9低温储存 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .10细胞计数器 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .10无菌技术 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .11简介 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .11无菌工作区域 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .11良好的个人卫生 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .11无菌试剂和培养基 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .12无菌操作 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 12无菌技术核对表 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .13
DMEM、RIPA1640、F12、L15等细胞培养基的基本知识 培养细胞的完全培养基由基础培养基（如MEM）和添加剂（如血清或无血清培养用的某些确定的激素及生长因子）组成，培养基的配方一直在改进，其中包括抗生素和抗有丝分裂剂等等。 一、基础培养基 绝大多数培养基是建立在平衡盐溶液(BSS)基础上，添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。最广泛应用的培养基是Eearle`s MEM 的混合物，其中含有13种必须氨基酸、8种维生素。而Ham`s F12 也包括非必须氨基酸，维生素的范围亦很广，另外常规含有无机盐和代谢添加剂（例如核苷酸）。MEM/F12 这两种培养基各取1/2，形成神经生物学最通用的培养基。Dulbecco`s改良培养基——DMEM，现应用于快速生长的细胞，同MEM 含有相同的营养成分，但浓度高出2~4倍。选择某种培养基，应仔细了解成分表，应知道大多数情形下培养基都有不足。例如，有些培养基在氨基酸中包括有谷氨酸，而这种培养基虽广泛用于神经生物学领域，但它对某些对谷氨酸敏感的可能有细胞外毒性损伤的神经元而言，则并非最佳选择，特别是如果神经元生长在缺乏胶质的环境中时。F12中含有硫酸亚铁，据报道也有神经毒效应。 在所有这些培养基中，谷氨酸比其他氨基酸有更高的浓度，这是因为它具有不稳定性以及在许多细胞培养中它常用作碳源。对于神经元的培养常常在基础培养基中增加葡萄糖的含量到0.6%或者加入丙酮酸（若培养基中这两种物质缺乏时）。MEM与F12均要用5%的CO2来平衡，DMEM含更高浓度的NaCO3，要用10%的CO2来平衡，当然也可以在较低CO2浓度下使用。这些基础培养基的组成成分是建立在对不同细胞系生长的研究之上的，但通常在原代培养中使用也能有比较令人满意的结果。 原则上，HEPES作为缓冲剂可用来代替碳酸氢盐，以解除需要高浓度CO2培养环境的限制。实际操作中并非如此简单。显然，溶解的CO2与碳酸氢盐对良好的细胞生长是重要的。Leiboviz`s L15培养基可用来在大气环境中令神经细胞生长，该培养基采用了与众不同的BSS作基础，它含有高浓度的氨基酸来提高缓冲能力，培养基中使用半乳糖作碳源，以阻止培养基中乳酸形成，少量溶解的CO2由丙酮酸代谢产生。这一培养基的优点是明显的，特别是在保持较高CO2有困难时，例如在长时间的显微操作及生理学研究中。L15培养基已用来成功的培养了外周神经元，但尚未在CNS神经元的发育研究中全面检测过。 二、血清 细胞在单纯的基础培养基中不能存活，在特殊类型的细胞培养中必须提供某些 痕量营养物质及生长因子才能使细胞得以生长并维持生长状态。基础培养基常常要添加血清，血清终浓度多为5~20%。特殊用途的血清来源须用经验确定，广泛应用的血清种类有马血清与胎牛血清。胎牛血清中富含有丝分裂因子，常选其作增殖细胞用的血清，也用于细胞系和原代培养。而马血清常常用来作有丝分裂后的神经元培养。然而，很多人也将胎牛血清
院感知识培训计划 医院是一个为人们服务于健康的地方，在医院里有一科目叫院感科，其全称应该是“控制院内感染科”，下面为你了院感知识培训计划，希望能帮到你！ 为加强医院感染管理，有效预防和控制医院感染，提高医疗质量，确保医疗安全和医务人员的职业健康，充分发挥广大医务人员在预防和控制医院感染工作中的作用，按照国家《传染病防治法》、《医院感染管理办法》、《消毒管理办法》、《医疗机构医疗废物管理办法》等法律法规和行业标准的要求，制定我院的医院感染管理知识培训计划： 1、全院各级各类医务人员、工作人员 2、新进人员 3、实习人员 根据培训对象选择下列相关内容进行培训。 1、多重泛耐药菌感染病人预防与控制措施（医院感染管理科）
2、手卫生制度（医院感染管理科） 3、手术部位感染预防与控制措施（医院感染管理科） 4、医疗废物管理规范（医院感染管理科） 5、职业暴露与防护知识（医院感染管理科） 6、医院感染防控基础知识（医院感染管理科） 7、根据国家有关部门颁布的各项政策和传染病疫情，随时进行专项培训（相关科室） 8、医院感染管理专职人员、和重点科室人员参加省市医院感染管理专业委员会和相关专业委员会组织的相关培训。 采用大课集中培训和小范围专项培训相结合的方法。以多媒体课件授课为主。 集中培训时间重点安排在4月、7月、8月、9月，专项培训随时进行安排。
医院感染管理科，医务科，护理部。 每一专题培训结束后，根据情况，对不同人员进行答卷考试或操作考试。新进人员考试合格后，方可上岗，考试成绩记入个人考绩档案。 为进一步贯彻执行卫生部医院感染管理的相关法律法规，加强我中心及卫生站的院感管理工作，使临床医务人员能够全面掌握院感管理知识并主动参与院感管理工作，避免院内感染的发生，保证医疗质量，特制订xx年院感管理培训计划，培训内容如下： 一、卫生部及卫生局相关法律法规的解读，我中心相关院感管理制度及工作流程。 二、消毒与灭菌技术（基础知识）。 三、医务人员手卫生规范。 四、医务人员职业防护。 五、导管相关血流感染预防与控制技术指南。
细胞培养基础知识 细胞培养基本条件 1、合适的细胞培养基 合适的细胞培养基是体外细胞生长增殖的最重要的条件之一，培养基不仅提供细胞营养和促使细胞生长增殖的基础物质，而且还提供培养细胞生长和繁殖的生存环境。 2、优质血清 目前，大多数合成培养基都需要添加血清。血清是细胞培养液中最重要的成分之一，含有细胞生长所需的多种生长因子及其它营养成分。 3、无菌无毒细胞培养环境 无菌无毒的操作环境和培养环境是保证细胞在体外培养成功的首要条件。在体外培养的细胞由于缺乏对微生物和有毒物的防御能力，一旦被微生物或有毒物质污染，或者自身代谢物质积累，可导致细胞中毒死亡。因此，在体外培养细胞时，必须保持细胞生存环境无菌无毒，及时清除细胞代谢产物。 4、恒定的细胞生长温度 维持培养细胞旺盛生长，必须有恒定适宜的温度。 5、合适的气体环境 气体是哺乳动物细胞培养生存必需条件之一，所需气体主要有氧气和二氧化碳。 细胞培养基种类与基本成分
细胞培养基的种类很多，按其来源分为合成培养基和天然培养基（目前使用的培养基绝大部分是合成培养基），按其物质状态分为干粉培养基和液体培养基两类。干粉培养基需由实验者自己配制并灭菌，液体培养基由专业商家提供，用户可直接使用，非常方便。 1、合成培养基的主要成分有：氨基酸、碳水化合物、无机盐、维生素及其它辅助物质： 氨基酸 氨基酸是组成蛋白质的基本单位。不同种类的细胞对氨基酸的要求各异，但有几种氨基酸细胞自身不能合成，必须依靠培养液提供，这几种氨基酸称为必需氨基酸。其中谷氨酰胺是细胞合成核酸和蛋白质必需的氨基酸，在缺少谷氨酰胺时，细胞生长不良而死亡。因此，各种培养液中都有较大量的谷氨酰胺。但是，由于谷氨酰胺在溶液中很不稳定，应臵于-20℃冰箱中保存，在使用前加入培养液内。已含谷氨酰胺的培养液在4℃冰箱中储存2 周以上时，还应重新加入原来量的谷氨酰胺。 碳水化合物 碳水化合物是细胞生长主要能量来源，其中有的是合成蛋白质和核酸的成分。主要有葡萄糖、核糖、脱氧核糖、丙酮酸钠和醋酸等。 无机盐 培养液中无机盐的主要功能是帮助细胞维持渗透压平衡。此外，通过提供钠，钾和钙离子，帮助细胞调节细胞膜功能。培养液的渗透压是一个非常重要的因素, 细胞通常可耐受260mOsm/kg ～320
阜阳市第二人民医院院感基础知识题库 1.病区医院感染管理第一责任人为那位？ 答案：病区负责人为本病区医院感染管理第一责任人。 2.手卫生是那些手卫生行为总称？ 答案：医务人员洗手、卫生手消毒和外科手消毒的总称。 3.飞沫传播是一种近距离传播,近距离是指多少距离 答案：1米以内 4.病房多人房间的床间距应大？m 答案：大于0.8 m 5.根据疾病传播途径的不同，有那三种隔离措施隔离措施？ 答案：应根据疾病传播途径的不同，采取接触隔离、飞沫隔离或空气隔离措施 7.特殊感染是指哪些感染？ 答案：阮病毒、气性坏疽、突发不明原因传染病的病原体。 8.重复使用的诊疗器械、器具和物品，使用后应先消毒、再清洁，再消毒或灭菌是否正确？ 答案：错误 9.空气传播是指带有病原微生物的微粒子通过空气流动导致的疾病传播,微粒子直径为多少？ 答案：直径≤5μm 10.发生乙肝病毒职业暴露，HBsAb达到多少时，不需要特殊处理 答案：≥10 IU/mL 11.医院发现哪些情况应于12小时内向所在地县级卫生行政部门以及疾病预防控制机构报告? 答案： 5例以上疑似医院感染暴发；3例以上医院感染暴发。 12.艾滋病预防性用药应在艾滋病职业暴露后尽早开始，最好在4小时内实施，最迟不得超过多少小时。
答案： 24小时 13.什么是医院感染暴发？ 答案：医院感染暴发是指在医疗机构或其科室的患者中，短时间内发生3例以上同种同源感染病例的现象。 14.发生梅毒职业暴露，推荐使用苄星青霉素单次肌注，用量为 答案： 240万U 15接触隔离、飞沫隔离或空气隔离标识分别是什么颜色？ 答案：接触隔离（蓝色）、飞沫隔离（粉色）、空气隔离（黄色） 16.卫生手消毒监测的细菌数应达到的要求： 答案：≤10cfu/cm2 17.医疗机构出现疑似医院感染暴发后，应遵循的基本原则？ 答案：医疗机构发生疑似医院感染暴发时，应遵循“边救治、边调查、边控制、妥善处置”的基本原则 18.请说出经空气传播疾病的定义 答案：由悬浮于空气中、能在空气中远距离传播(＞1m)，并长时间保持感染性的飞沫核传播的一类疾病。包括了专性经空气传播疾病（如：开放性肺结核）和优先经空气传播疾病（如：麻疹和水痘）。 19.手卫生五个时刻指的是哪些？ 答案：接触患者前、清洁/无菌操作前、体液暴露风险后、接触患者后、接触患者周围环境后 20.什么是疑似医院感染暴发和假暴发？ 答案： 疑似医院感染暴发：在医疗机构或其科室的患者中，短时间内出现3例以上临床症候群相似，怀疑有共同感染源的感染病例；或者3例以上怀疑有共同感染源或感染途径感染病例的现象。 医院感染假暴发：疑似医院感染暴发通过调查排除暴发，而是由于标本污染、实验室错误、监测方法改变等因素导致的同类感染或非感染病例短时间内增多的现象。 21.手消毒剂开瓶后有效期多长时间？ 答案：GB 27950－2011《手消毒剂卫生要求》中要求，易挥发的醇类产品开瓶后的使用期不超过30天，不易挥发的产品开瓶后的使用期不超60天。
第一章：细胞组织培养的三种类型？ 原代外植块培养：是从人或动物体内取出一小块组织，模拟体内生理环境，在保证无菌、适宜温度和营养条件下，使之生存和生长并保持其结构和功能的方法。 器官培养：指的是应用和组织培养相似的条件，培养的是器官的原基或器官的一部分或整个器官，使之在体外生存、生长和保持一定功能的方法。 细胞培养：是以相似的培养方法体外培养单个细胞或单一细胞群，使其在适宜条件下生长并保持细胞特性。 第二章 1.体内体外的环境不一样，细胞之间的粘附是通过什么实现的？ 细胞的黏附是通过特异的细胞表面受体与细胞外基质分子结合实现的。 在细胞铺展之前，细胞已分泌了细胞外基质蛋白和蛋白聚糖。细胞外基质先黏着到带电底面上，然后再通过特异的受体附着到基质上。 因此，细胞曾经生长过的玻璃或塑料表面更适合细胞附着，用基质成分，如纤连蛋白、胶原或其衍生物（如明胶）预处理培养器皿，有利于要求复杂培养条件的细胞附着和增殖。 主要有四类跨膜蛋白参与了细胞与细胞、细胞与底物的黏附。 不依赖Ca2+的细胞间黏附分子介导同种或异种细胞与细胞粘附 依赖Ca2+的钙黏着蛋白参与同源细胞间的相互作用 整合蛋白，介导细胞与基质之间的相互作用，是基质分子 跨膜的蛋白聚糖，能和基质成分如其他蛋白聚糖或胶原相互作用，具有稳定、活化和把生长因子转运到高亲和性受体上的作用。2.细胞外基质成分及作用？ 细胞外基质（ECM）由胶原、层粘连蛋白、纤粘连蛋白、透明质酸酶、蛋白多糖及膜结合生长因子（或细胞因子）等各种成分组成。ECM能提高细胞的生存、增殖和分化能力3.概念，接触抑制：细胞在生长过程中达到相互接触时运动停止，同时细胞质膜褶皱减少，最终细胞分裂停止。 4.诱导细胞分化的条件？ 有助于诱导细胞分化的条件： 细胞密度高 细胞与细胞、细胞与基质之间作用强 培养基中存在各种分化因子 5.细胞信号传递的类型？ 体内细胞的增殖、迁移、分化、凋亡均受细胞间、细胞与基质间相互作用及营养条件和激素等信号分子的调控。 体内细胞信号传递的类型有： 自分泌：由细胞自身合成并通过与自身受体结合作用于细胞自身。 内分泌：信号分子通过体内脉管系统从一种细胞转移到另一种组织细胞中发挥作用的过程 同型（旁）分泌：某些细胞分泌的可溶性信号物质作用于同类型细胞。 异型旁分泌：同一细胞类型分泌的信号物质作用于不同的反应蛋白 旁分泌：不通过血液而直接作用于邻近细胞的方式 体内都存在这些类型的细胞信号传递方式，而在体外，在具有基本培养基的常规条件下，只有自分泌和同型分泌两种方式。 6.细胞传代分为哪三个阶段？ 原代培养期：从体内取出组织，接种培养到第一次传代阶段（初代培养） 1-4周、细胞呈活跃的移动、可见细胞分裂、形态结构和功能活动上与体内原组织相似性大、多呈二倍体核型 细胞群是异质的，细胞克隆形成率很低，即细胞独立生存性差。 传代期：初代培养细胞一经传代后便改称做细胞系。在全生命期中此期的持续时间最长。在培养条件较好情况下，细胞增殖旺盛，并能维持二倍体核型，呈二倍体核型的细胞称二倍体细胞系。为保持二倍体细胞性质，细胞应在初代培养期或传代后早期冻存（10代内）。一般情况下当传代10～50次左右，细胞增殖逐渐缓慢，以至完全停止，细胞进入第三期，即有限细胞系。 衰退期：此期细胞仍然生存，但增殖很慢或不增殖，细胞很难长满培养空间；
院感的基本知识 1、医院感染、医源性感染、医疗保健相关感染有何不同？ 医院感染：指住院病人在医院内获得的感染；包括在住院期间发生的感染和在医院内获得出院后发生的感染；不包括入院前已开始或入院时已处于潜伏期的感染；医院工作人员在医院内获得的感染也属医院感染。 医源性感染指在医学服务中，因病原体传播引起的感染。 在早期，医院获得性感染和医院感染这两个术语一直被使用，由于医疗保健和医疗保健流行病学的服务和范围正在不断扩大，因此医院感染定义也在扩大。美国CDC将“患者因其他状况在接受治疗过程中获得的感染，或医务人员在医疗环境中履行职责时获得的感染”定义为医疗保健相关感染（HAI）。 答：Vol.02 医院感染暴发：指在医疗机构或其科室的患者中，短时间内发生3例以上同种同源感染病例的现象。 疑似医院感染暴发：指在医疗机构或其科室的患者中，短时间内出现3例以上临床症候群相似、怀疑有共同感染源的感染病例；或者3例以上怀疑有共同感染源或感染途径的感染病例现象。 指发生甲类传染病感染或依照甲类传染病管理的乙类传染病的医院感染。 4、医院感染根据病原体来源是怎么分类的？ 分两类，即内源性感染和外源性感染。
内源性感染又称自身感染，感染的病原体来自病人自身体内和体表，多数为在人体定植、寄生 的正常菌群，正常情况下对人体无感染力，当它们与人体之间的平衡被打破就成为条件致病菌，造成各种内源性感染。如细菌的移位、宿主的局部或全身免疫功能下降、菌群失调、二重感染等。 外源性感染又称交叉感染，是指病原体来自病人以外的环境和人员，如由其他病人、工作人员、物品以及医院环境引起的直接或间接感染。 医院感染是由病原微生物经过一定的传播途经，进入易感宿主体内引起的，医院感染发生必须 具备三个环节，即感染源、传播途径、易感宿主，又称感染链，只有当三个环节都存在时，才 能构成医院感染 8、医院感染的易感人群有哪些？ （1）患严重影响或损伤机体免疫机能疾病的病人，如各种造血系统疾病、淋巴组织及网状内 皮系统疾病、各种肿瘤、糖尿病、肝硬化等。 （2）老年有婴幼儿：因老年人的生理防御功能减退，婴幼儿的免疫功能尚未成熟。 （3）营养不良者；营养不良对皮肤粘膜的防御功能、抗体生成功能以及粒细胞吞噬功能均有 影响。 （4）接受各种免疫抑制剂治疗者，如抗癌、放疗、激素治疗等。 （5）长期使用抗菌治疗者。 （6）接受各种介入和损伤操作者。 （7）住院时间长者，医院是病原微生物的集聚场所，住院时间长可增加感染机会。 9、你知道哪些是医院感染的危险因素吗？ （1）宿主方面的危险因素：如年龄因素（老年和婴幼儿）、基础疾病（各种肿瘤、血液病、 糖尿病、肝硬化等）、意识状态（如昏迷等）。 （2）侵入性诊疗操作方面因素：如器官移植、血液净化、动静脉插管、留置尿管等。 （3）直接损害免疫系统因素：如放疗、化疗、肾上腺皮质激素的应用等。
医院感染基本知识 一、医院感染基本概念 1.医院感染：是指住院病人在医院获得的感染，包括住院期间发生的感染和在医院获得出院后发病的感染。但不包括入院前已开始或入院时已存在的感染。医院工作人员在医院获得的感染也属医院感染。 2.医院感染暴发：是指在医疗机构或其科室的患者中，短时间发生3例以上同种同源感染病例的现象。 3. 疑似医院感染暴发：是指在医疗机构或其科室的患者中，短时间出现3例以上临床症候群相似，怀疑有共同感染源的感染病例；或者3例以上怀疑有共同感染源或感染途径的感染病例现象。 4. 医院感染暴发事件报告程序及责任人，处置流程 （一）科主任为本科室医院感染暴发报告的第一责任人。 （二）发生3例以上医院感染暴发或3例以上疑似医院感染暴发病例的所在临床科室，应由本科室的质控医生立即报告医院感染管理科，如遇公休日或其它特殊原因者，应立即报告院总值班，由总值班负责与医院感染管理科联系。 5、标准预防：针对医院所有患者和医务人员采取的一组预防感染措施。包括手卫生，根据预期可能的暴露选用手套、隔离衣、口罩、护目镜或防护面屏，以及安全注射。也包括穿戴合适的防护用品处理患者环境中污染的物品与医疗器械。标准预防基于患者的血液、体液、分泌物，非完整皮肤和粘膜均可能含有感染性因子的原则。 6、终末消毒：传染源离开疫源地后，对疫源地进行的一次彻底的消毒. 如传染病患者出院、转院或死亡后，对病室进行的最后一次消毒。 7、床单位消毒：对患者住院期间、出院、转院、死亡后所用的床及床周围物体表面进行的清洁与消毒。 8、感染性疾病传播的环节：感染源，传播途径，易感人群。 9、隔离：采用各种方法、技术，防止病原体从患者及携带者传播给他人的措施。 10、空气传播：带有病原微生物的微粒子(≤5 μm) 通过空气流动导致的疾病传播。 11、飞沫传播：带有病原微生物的飞沫核( > 5μm) ，在空气中短距离(l m )移动到易感人群的口、鼻黏膜或眼结膜等导致的传播。 12、接触传播：病原体通过手、媒介物直接或间接接触导致的传播。