实验室细胞培养基本知识ppt课件
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细胞培养基础知识细胞培养基本条件1、合适的细胞培养基合适的细胞培养基是体外细胞生长增殖的最重要的条件之一,培养基不仅提供细胞营养和促使细胞生长增殖的基础物质,而且还提供培养细胞生长和繁殖的生存环境。
2、优质血清目前,大多数合成培养基都需要添加血清。
血清是细胞培养液中最重要的成分之一,含有细胞生长所需的多种生长因子及其它营养成分。
3、无菌无毒细胞培养环境无菌无毒的操作环境和培养环境是保证细胞在体外培养成功的首要条件。
在体外培养的细胞由于缺乏对微生物和有毒物的防御能力,一旦被微生物或有毒物质污染,或者自身代谢物质积累,可导致细胞中毒死亡。
因此,在体外培养细胞时,必须保持细胞生存环境无菌无毒,及时清除细胞代谢产物。
4、恒定的细胞生长温度维持培养细胞旺盛生长,必须有恒定适宜的温度。
5、合适的气体环境气体是哺乳动物细胞培养生存必需条件之一,所需气体主要有氧气和二氧化碳。
细胞培养基种类与基本成分细胞培养基的种类很多,按其来源分为合成培养基和天然培养基(目前使用的培养基绝大部分是合成培养基),按其物质状态分为干粉培养基和液体培养基两类。
干粉培养基需由实验者自己配制并灭菌,液体培养基由专业商家提供,用户可直接使用,非常方便。
1、合成培养基的主要成分有:氨基酸、碳水化合物、无机盐、维生素及其它辅助物质:氨基酸氨基酸是组成蛋白质的基本单位。
不同种类的细胞对氨基酸的要求各异,但有几种氨基酸细胞自身不能合成,必须依靠培养液提供,这几种氨基酸称为必需氨基酸。
其中谷氨酰胺是细胞合成核酸和蛋白质必需的氨基酸,在缺少谷氨酰胺时,细胞生长不良而死亡。
因此,各种培养液中都有较大量的谷氨酰胺。
但是,由于谷氨酰胺在溶液中很不稳定,应置于-20℃冰箱中保存,在使用前加入培养液内。
已含谷氨酰胺的培养液在4℃冰箱中储存2 周以上时,还应重新加入原来量的谷氨酰胺。
碳水化合物碳水化合物是细胞生长主要能量来源,其中有的是合成蛋白质和核酸的成分。
主要有葡萄糖、核糖、脱氧核糖、丙酮酸钠和醋酸等。
第一章细胞培养的基本原理与技术现代生物技术一般认为包括基因工程技术、细胞工程技术、酶工程技术和发酵工程技术,而这些技术的发展几乎都与细胞培养有密切关系,特别是在医药领域的发展,细胞培养更具有特殊的作用和价值。
比如基因工程药物或疫苗在研究生产过程中很多是通过细胞培养来实现的。
基因工程乙肝疫苗很多是以CHO 细胞作为载体;细胞工程中更是离不细胞培养,杂交瘤单克隆抗体,完全是通过细胞培养来实现的,既使是现在飞速发展的基因工程抗体也离不开细胞培养。
正在倍受重视的基因治疗、体细胞治疗也要经过细胞培养过程才能实现,发酵工程和酶工程有的也与细胞培养密切相关。
总之,细胞培养在整个生物技术产业的发展中起到了很关键的核心作用。
第一节体外培养的概念一、基本概念体外培养(in vitro culture),就是将活体结构成分或活的个体从体内或其寄生体内取出,放在类似于体内生存环境的体外环境中,让其生长和发育的方法。
●组织培养:是指从生物体内取出活的组织(多指组织块)在体外进行培养的方法。
●细胞培养:是指将活细胞(尤其是分散的细胞)在体外进行培养的方法。
●器官培养:是指从生物体内取出的器官(一般是胚胎器官)、器官的一部分或器官原基在体外进行培养的方法。
二、体内、外细胞的差异和分化1、差异:细胞离体后,失去了神经体液的调节和细胞间的相互影响,生活在缺乏动态平衡的相对稳定环境中,日久天长,易发生如下变化:分化现象减弱;形态功能趋于单一化或生存一定时间后衰退死亡;或发生转化获得不死性,变成可无限生长的连续细胞系或恶性细胞系。
因此,培养中的细胞可视为一种在特定的条件下的细胞群体,它们既保持着与体内细胞相同的基本结构和功能,也有一些不同于体内细胞的性状。
实际上从细胞一旦被置于体外培养后,这种差异就开始发生了。
2、分化:体外培养的细胞分化能力并未完全丧失,只是环境的改变,细胞分化的表现和在体内不同。
细胞是否表现分化,关键在于是否存在使细胞分化的条件,如Friend 细胞(小鼠红白血病细胞)在一定的因素作用下可以合成血红蛋白,血管内皮细胞在类似基膜物质底物上培养时能长成血管状结构,杂交瘤细胞能产生特异的单克隆抗体,这些均属于细胞分化行为。
细胞培养基础知识细胞培养呀,就像是在一个小小的世界里创造生命的奇迹!咱就说,细胞可是生命的基本单位呢,培养它们就像是在照顾一群娇贵的小宝贝。
想象一下,你要有一个超级干净的“家”给它们住,这个“家”就是培养皿啦。
培养皿得干净得像刚洗过的脸一样,不能有一点儿脏东西,不然细胞宝宝们可不高兴啦。
然后呢,你得给它们准备好吃的,这就是培养液啦。
培养液就像是细胞的大餐,里面有它们需要的各种营养成分。
就好比咱人得吃米饭、蔬菜、肉一样,细胞也需要它们特定的营养来茁壮成长呀。
温度也很重要哦!不能太冷也不能太热,得刚刚好,就像咱们睡觉要盖合适的被子一样。
要是温度不合适,细胞可就不开心啦,可能就长不好咯。
还有哦,你得时刻关注它们的成长情况。
这就像家长关注孩子的成长一样,看看它们有没有长大呀,有没有生病呀。
要是发现有不对劲的地方,就得赶紧想办法解决。
培养细胞也得有耐心呀!不能着急,得慢慢等它们长大。
有时候可能等了好几天也看不到明显的变化,但别灰心,说不定它们正在偷偷努力呢。
而且呀,培养细胞可不能粗心大意。
就像你照顾小婴儿,一点小疏忽都可能带来大问题。
比如说不小心污染了培养皿,那可就糟糕啦,细胞可能就全军覆没了。
你说这细胞培养神奇不神奇?通过我们的努力,能让这些小小的细胞在我们的眼皮子底下成长、分裂,就好像看着一个小生命在慢慢绽放。
这感觉,真的很奇妙呀!培养细胞的过程中也会遇到各种挑战呢。
有时候细胞就是不长,你就得绞尽脑汁想办法,是培养液有问题?还是温度不合适?或者是其他什么原因。
这就像是解一道难题,得不断尝试、探索,直到找到答案。
细胞培养可不只是在实验室里玩玩哦,它对医学、生物学等好多领域都有着非常重要的意义呢。
通过培养细胞,我们可以研究疾病的发生机制,可以测试药物的效果,还可以为再生医学提供帮助呢。
总之呢,细胞培养是一件既有趣又有意义的事情。
虽然有时候会遇到困难,但只要我们有耐心、细心,就一定能让这些小细胞在我们的手中绽放出绚丽的光彩!难道不是吗?原创不易,请尊重原创,谢谢!。