脐带间充质干细胞综述(转)

人脐血间充质干细胞治疗肝纤维化的研究进展【中图分类号】r329 【文献标识码】a 【文章编号】1004-7484（2012）13-0068-02研究发现，具多向分化潜能的间充质干细胞（mesenchymal stem cells，mscs），脐带间充质干细胞具有无限增殖和多项分化潜能，可以向肝细胞分化，能在体外自我增殖，并可以定向分化为内、中、外3 个胚层来源的多种细胞，如骨、软骨、脂肪、神经及类肝细胞等，有望用于肝脏疾病的治疗。

脐带来源广泛，无伦理道德方面的争议。

如果能够利用易于获得的mscs在体内外定向分化为肝前体细胞，则可做为肝细胞移植的一个主要来源。

不过脐血中的间充质干细胞含量很少，如何分离纯化？如何使其较长时间保持干细胞特性？如何诱导其向肝细胞分化？据研究表明，人脐血间充质干细胞能够贴壁生长，而体外培养的贴壁细胞是一个异质细胞群，可能含有多种细胞成分。

一般呈现类纤维细胞形态，并可分裂增生，且同时具有间皮细胞标志的贴壁细胞，如cd44+ 细胞，可以初步判断为是mscs。

之前，报道hucmscs可采用密度梯度离心法结合直接贴壁法分离获得，并可冷冻保存；复苏后在肝细胞生长因子和成纤维细胞生长因子4 的联合诱导下，能定向分化为表达ck8&18，并合成白蛋白和糖原的类肝细胞，类肝细胞可能具有诱导人脐血间充质干细胞向肝系细胞定向分化的作用。

脐血中存在mscs， ucbmsc 形态与mscs相似，倍增时间为48 h ，传代后形态基本无变化； ucbms c 不表达cd34及cd45，强表达cd44及cd166 ，与mscs的表面抗原特性一致，是脐血中区别于造血干细胞的一群处于未分化状态的非定向干祖细胞。

本研究先通过对hucmscs 的体外培养，对hucmscs进行纯化、扩增和鉴定；初步掌握hucmscs分离、培养及冻存的技术和方法，探索有效诱导hucmscs 分化为肝前体细胞的途径；然后，将诱导和未诱导的hucmscs在体外与人肝星状细胞（hsc）共培养，为下一步研究其在体内通过不同途径移植到肝纤维化鼠体内，以观察其对肝功能的修复情况及对肝纤维化进程的影响奠定基础。

脐带间充质干细胞脐带间充质干细胞（Mesnchymal Stem Cells，MSCs）是指存在于新生儿脐带组织中的一种多功能干细胞，它能分化成许多种组织细胞，具有广阔的临床应用前景。

目录1概念2优势3分离培养4用途5干细胞研究▪期刊简介▪研究对象▪研究内容1概念脐带间充质干细胞是以人脐带血血清为主体的培养体系的脐带间充质干细胞培养扩增的方法：流式细胞仪检测结果显示，贴壁细胞均表达CD44、CD29，低表达CD106，不表达造血细胞表型CD14、CD34、CD45和内皮细胞表型CD31，也不表达HLA-DR：细胞倍增时间为30h，细胞周期分析表明，G0～G1期和+G2+M期所占比例分别为78.84%和11.16%。

结论：应用灭活脐带血清培养体系可成功扩增人脐带间充质干细胞，培养的细胞具有间充质干细胞的基本特性，为建立间充质干细胞库和临床应用提供了理论依据。

2优势脐带间充质干细胞（MSCs）具有较高的分化潜能，可向多个方向进行分化。

它在骨、软骨、肌肉、肌腱、韧带、神经、肝、内皮和心肌等组织工程方面具有广阔的临床应用前景。

有报道从人脐带中分离出MSCs，且细胞含量、增殖能力优于骨髓MSCs，免疫原性比骨髓MSCs低[1]，并且具有取材方便，无伦理学争议等优点，因此越来越受到研究工作者们的关注。

干细胞的培养体系主要应用含动物血清（如胎牛血清）的培养基，在此种环境下生长的干细胞，其内部结构会发生何种变化尚未可知，为避免含动物血清培养中病毒等病原体污染和异种血清所致的过敏反应，课题组进行了以人脐带血血清为主体的培养体系体外培养扩增脐带间充质干细胞的实验研究。

以探讨人脐带血血清替代动物血清用于培养临床组织工程用干细胞的可行性。

同时研究脐带间充质干细胞形态学、生长特性、细胞周期、免疫表型等特性，旨在建立脐带间充质干细胞的富集方法，为建立脐带间充质干细胞库和临床应用提供有力的理论依据。

[2]3分离培养脐带间充质干细胞的获取主要有组织块贴壁法与酶消化法，由于酶对细胞的损伤较大，且细胞得率较低，费用昂贵，因此大多数实验室采取了组织块贴壁法进行培养。

233CARCINO GENESIS ，TERATO GENESIS &MUTA GENESIS脐带来源的华通氏胶间充质干细胞的分离、特性及应用前景丁赛，张红霞，朱海英*(海军军医大学基础医学院细胞生物学教研室，上海200433)收稿日期：2021-11-21；修订日期：2022-05-13基金项目：国家自然科学基金(32171387)作者信息：丁赛，E-mail ：。

*通信作者，朱海英，E-mail ：【摘要】间充质干细胞(MSCs)的来源非常广泛。

虽然各种组织来源的MSCs 生物学特性不尽相同，但在标准培养条件下该类细胞均可以贴壁生长；细胞群体中有95%以上的细胞表达典型的间充质标记分子，如CD73、CD90和CD105，但缺乏造血标记分子CD14、CD19、CD34、CD45和CD79a 的表达；特别是均具有分化为成脂细胞、成骨细胞和成软骨细胞的能力。

这些性质是国际细胞治疗协会给出的定义该类细胞的最低标准。

脐带间充质干细胞是指来源于新生儿脐带组织中的多能干细胞。

目前来看，从脐带不同解剖学部位(区室)获得的MSCs 的生物学性质也存在差异，其中从脐带华通氏胶中分离获得的华通氏胶间充质干细胞，在增殖能力、分化潜能、免疫调节能力等方面均明显优于其他区室来源的间充质干细胞，是用于组织器官损伤修复及免疫调节的一种理想的“种子”细胞，被认为具有更好的临床应用前景。

本文围绕近年来华通氏胶间充质干细胞的分离建系、增殖特性、分化潜能以及临床应用方面的研究进展进行了综述，其中重点介绍了化学诱导分化方案的建立和优化，认为与通过遗传改变诱导重编程方法相比，化学诱导分化方法具有更好的临床应用潜力。

【关键词】脐带；华通氏胶；间充质干细胞；分化潜能；分离；增殖特性中图分类号：R329.2+8文献标志码：A文章编号：1004-616X(2022)03-0233-04doi ：10.3969/j.issn.1004-616x.2022.03.011间充质干细胞最早在骨髓中被发现和鉴定，随后在人体胚胎及成体的多种组织中被陆续鉴定出来，这些组织主要包括成体骨髓、脂肪、滑膜、骨骼、肌肉、肺、肝、胰腺等组织以及羊水、脐带和脐带血等。

脐带间充质干细胞制备原理一、概述脐带间充质干细胞（Wharton's jelly mesenchymal stem cells，WJ-MSCs）是一种来源于新生儿脐带的干细胞。

与其他来源的干细胞相比，WJ-MSCs具有易于获取、无伦理争议、低免疫原性和多向分化潜能等优点，因此在临床应用中具有广泛的前景。

本文将就WJ-MSCs制备原理进行详细介绍。

二、脐带间充质干细胞的来源脐带是连接胎盘和新生儿的管道，其中包含了丰富的干细胞资源。

在脐带中，除了血液造血干细胞外，还存在着一种特殊类型的干细胞——脐带间充质干细胞。

这种干细胞主要存在于脐带Wharton's jelly （WJ）中，与周围组织隔离。

三、WJ-MSCs制备方法1. 脐带获取制备WJ-MSCs首先需要获取新生儿脐带组织。

通常情况下，在新生儿出生后不久即可进行采集。

采集过程中需要注意消毒和无菌操作。

2. 分离WJ组织将采集到的脐带组织进行分离，去除血管和外层膜等部分，得到WJ组织。

WJ组织是一种透明的胶状物质，通常呈现出白色或浅黄色。

3. 制备单细胞悬液将WJ组织切成小块，并加入胶原酶等消化酶进行消化。

消化后，用PBS等缓冲液洗涤多次，最后制备成单细胞悬液。

4. 培养和扩增将制备好的单细胞悬液接种在干细胞培养基中，并放置于37℃、5% CO2的培养箱内进行培养和扩增。

在培养过程中需要定期更换培养基，并对干细胞进行观察和评估。

5. 鉴定和纯化经过一段时间的培养，可以通过流式细胞术等方法对干细胞进行鉴定和纯化。

通常情况下，WJ-MSCs表达CD73、CD90、CD105等特征性标志物，并且不表达CD34、CD45等血液细胞特征性标志物。

6. 冻存经过纯化和鉴定后，WJ-MSCs可以进行冻存。

在冻存过程中需要使用特殊的冻存液，并在低温下保存。

四、WJ-MSCs的应用前景WJ-MSCs具有广泛的应用前景。

目前已经有多项临床试验显示，WJ-MSCs可以用于治疗多种疾病，如心血管疾病、神经系统疾病、肝脏疾病等。

• 1262 .医学研究生学报 2020 年 12 月第 33 卷第 12 期 J Med A»fgT O ，V 〇l.33, IMo.12, December，2020论 著(临束研究）脐带间充质干细胞外泌体转运miR -21-5P 促进子宫 内膜间质细胞増殖的作用机制吕承晓，段华，汪沙，甘露，徐倩[摘要]目的脐带间充质干细胞（DCMSC)已被证实通过其外泌体发挥加速损伤子宫内膜修复的作用，但其具体作用机制仍不明确。

文中旨在探索UCMSC 外泌体所携带的m iR -2l-5p 对于子宫内膜间质细胞增殖的影响.:，方法增殖期子宫 内膜标本取自2018年1月至6月首都医科大学附属北京妇产医院妇科微创中心，因宫颈上皮内瘤变I I I 级、子宫肌瘤等行开 腹或腹腔镜下全子宫切除的3例患者。

通过胶原酶消化法原代分离培养子宫内膜间质细胞并鉴定：采用差速离心法提取 UCMSC 外泌体并鉴定。

荧光定量P C R 检测UCMSC 外泌体及其处理后的子宫内膜间质细胞内的miK-21-5P 的表达水平后，并通过CCK8和E dU 染色检测抑制组(转染miR-21-5P inhibitor)、对照组（转染miR inhibitor N C )、空白组（未转染）子宫内膜间 质细胞的增殖活性。

此外，采用生物信息学分析预测外泌体miK-21-5p 在子宫内膜间质细胞内的潜在靶mRNA 及其所参与的 主要细胞生物学进程。

结果（：《8结果显示，24、48、72 11，抑制组的吸光度显著低于对照组和空白组#<0.01)。

£昍染色结果显示,转染后48 h 后，抑制组的外泌体增殖活性[(7.47±0.44)%]显著低于对照组和空白组[(13.47士0.47)%、（ 14.60± 1.08)%],差异有统计学意义(P <〇.〇l )。

通过G O 分析和KEGG 通路富集分析，发现miR-21-5P 的潜在靶基因参与2162种生物学进程（P <〇.〇5)、300种分子生物学功能（P <0.05)和214种细胞学组分（P <0.05)，并富集到3条细胞信号通路（P <0.05)， 推测miR-2丨-5P 可能通过这些途径促进外泌体增殖和损伤子宫内膜损伤修复。

脐带间充质干细胞概述医学实验班70080103王雪彤脐带是胎儿时期连接母体与胎儿的索状结构，其外被羊膜，内含2条脐动华尔通氏脉、1条脐静脉，在动静脉之间含有特殊的胚胎粘液样结缔组织胶(WhartonpsJelly),从华尔通氏胶分离得到的基质细胞即为人脐带间充质干细胞(HUMSCs)。

1人脐带间充质干细胞(HUMSCs)的形貌分析：倒置显微镜下观察人脐带间充质干细胞贴壁生长，为形态相对均一的梭形细胞，呈平行排列生长或旋涡状生长，低密度时较扁平,密度增加趋于融合时细胞变细长。

扫描电镜下观察呈长条状纤维样，细胞膜表面不光滑，有小结节状物，细胞无明显突起，细胞间无网络状连接。

透射电镜观察核大，不规则，核仁明显，常染色质多，异染色质少，胞浆少。

胞质内细胞器较少，以粗面内质网和线粒体为主，内有大量游离核糖体，部分细胞可见内质网月中胀。

植块法培养获得的人脐带间充质干细胞(X200)例如三代细胞的形态学特征一一人体脐带间充质干细胞离体培养后，培养至第三代。

第三代人脐带间充质干细胞以均一长梭形的细胞为主，细胞周边有较多的丝状伪足，见图1,2;并形成毗邻细胞之间的网状连接，见图3;细胞核较大，核膜清晰，含两三个核仁，核质比较小，见图4。

2人脐带间充质干细胞(HUMSCs)的生物学特性：HUMSCs既非胚胎干细胞又非成体干细胞，是别于两者之间的一类新的多能问充质细胞，它们之间既有联系又有差异。

根据国际细胞疗法间充质与组织干细胞委员会(theMesenchymalandTissueStemCellCommitteeoftheInternation2alSocietyforCellul arTherapy)制定的最低标准,脐带间充质干细胞(MSCs)需满足以下条件：1)MSCs在标准培养条件下呈贴壁生长；2)MSCs表达CD105,CD73和CD90,不表达CD45,CD34,CD14或CD11b,CD79a或CD19和HLA2DR;3)MSCs在体外至少能向成骨细胞、脂肪细胞和软骨细胞分化。

脐带血间充质干细胞的分离培养和鉴定概述脐带血间充质干细胞（Wharton’s jelly mesenchymal stem cells, WJ-MSCs）是一类来源于脐带的干细胞。

WJ-MSCs具有较强的增殖能力、多向分化潜能、免疫调节功能等，是目前研究领域中备受关注的干细胞类型之一。

在该文档中，我们将介绍如何从脐带血样中分离出WJ-MSCs，并进行相关的细胞培养和鉴定。

分离过程脐带血样获取首先需要从人体获得脐带血样。

脐带血样一般可以在婴儿出生后通过脐带穿刺等方式获取。

获取脐带血样需要得到母亲的同意，并通过相关机构进行规范化处理。

分离WJ-MSCs脐带血样获取后，需要将其中的WJ-MSCs进行分离。

具体分离步骤如下： 1.将脐带血样转移至离心管中； 2. 加入相同体积的PBS，并轻轻混合； 3. 通过低速离心分离脐带血样中的血细胞等成分； 4. 取下沉后的WJ组织，加入胶原酶等酶类消化物进行消化，离心分离细胞； 5. 通过细胞培养等方式扩增细胞数量。

细胞培养在分离得到WJ-MSCs之后，需要进行相关的细胞培养。

具体培养步骤如下：1. 将分离得到的WJ-MSCs转移至新的培养皿中； 2. 加入含有10% FBS的DMEM低糖培养基； 3. 定期更换培养基，并记录生长状况。

鉴定方法确定分离的细胞为WJ-MSCs的方法很多，常用的方法如下： #### 形态学鉴定通过显微镜观察细胞形态、吸附能力等，判断细胞是否符合WJ-MSCs的特征。

免疫学鉴定通过使用针对WJ-MSCs标记的分子抗体（如CD73、CD90等）对细胞进行标记，并使用流式细胞仪等方法进行检测。

活力检测通过MTT法、细胞增殖实验等，检测WJ-MSCs是否具备较强的增殖能力。

多向分化鉴定通过对WJ-MSCs进行分化培养，如脂肪细胞培养、软骨细胞培养等，检测WJ-MSCs是否显示多向分化的潜能。

结论通过脐带血样的分离，可以获得WJ-MSCs，并通过相关的培养和鉴定方法，确定其为WJ-MSCs，并进一步应用于生物医学实验中，具有潜在的临床应用前景。

脐带间充质干细胞-是指存在于新生儿脐带组织中的一种多功能干细胞，具有来源丰富、免疫原性低、移植后不需应用免疫抑制剂的情况下长期存活等诸多特性脐带间充质干细胞-是指存在于新生儿脐带组织中的一种多功能干细胞，具有来源丰富、免疫原性低、移植后不需应用免疫抑制剂的情况下长期存活等诸多特性，为其应用于临床开阔了更好的前景。

学术术语来源---人脐带间充质干细胞生物特性比较：胰酶冷消化和组织块法体外培养文章亮点：1实验创新性地采用胰酶冷消化法培养人脐带间充质干细胞，从细胞形态、生长曲线、细胞表面标记物及诱导分化能力4个方面与传统组织块法比较，为不同需求的科研工作者获得较多的脐带间充质干细胞、更完整的细胞结构及其功能以满足实验要求提供一些资料。

2结果显示组织块法培养原代细胞形态优于胰酶冷消化法，第3代细胞增殖速率显著快于胰酶冷消化法，两种方法获得的脐带间充质干细胞具有相同的表面标志，经诱导后均表达神经干细胞特征性标志物nestin，说明组织块法更适合用于培养脐带间充质干细胞。

关键词：干细胞；脐带脐血干细胞；胰酶冷消化法；组织块法；脐带间充质干细胞；组织工程；生物学特性主题词：脐带；间质干细胞；细胞培养技术；细胞，培养的摘要背景：以往采用胰酶冷消化法培养脐带间充质干细胞的研究较少。

目的：比较两种方法体外培养人脐带间充质干细胞的生物学特性。

方法：采用胰酶冷消化法和组织块法从人脐带中分离、纯化和传代培养人脐带间充质干细胞，记录首次出现贴壁细胞时间及原代培养周期，倒置相差显微镜观察脐带间充质干细胞的形态及生长情况，制作第3代脐带间充质干细胞生长曲线，流式细胞仪分析检测第3代脐带间充质干细胞表面标志的表达，第3代脐带间充质干细胞加入成神经诱导培养基诱导分化第3天行荧光免疫化学染色检测Nestin的表达。

结果与结论：使用上述两种方法均可获得脐带间充质干细胞，胰酶冷消化法首次出现贴壁细胞时间早于组织块法(P < 0.05)；原代培养周期差异无显著性意义(P > 0.05)。

脐带间充质干细胞制备存储标准脐带间充质干细胞（Wharton's Jelly Mesenchymal Stem Cells，WJ-MSCs）是一种来源于脐带的多潜能干细胞，具有广泛的临床应用前景。

为了确保脐带间充质干细胞的制备和存储质量，制定脐带间充质干细胞制备存储标准非常重要。

脐带间充质干细胞的制备和存储标准应包括以下几个方面：1.取材标准：脐带是脐带间充质干细胞的主要来源，因此在制备和存储过程中需要确保脐带的质量。

取材时，应确保脐带来自经过筛选和检测的健康母亲，脐带的无菌处理应符合相关规定。

2.分离和培养标准：脐带间充质干细胞的分离和培养是制备过程中的关键步骤。

应采用符合相关规定的分离和培养方法，确保脐带间充质干细胞能够获得最佳生长和增殖环境。

3.鉴定标准：在制备过程中，需要对脐带间充质干细胞进行鉴定。

鉴定标准可以包括表面标记物的检测、多向分化潜能的检测等指标，以确保制备的细胞具有干细胞的特性。

4.冻存标准：为了确保脐带间充质干细胞的长期保存，应采用合适的冻存方法和条件。

冻存标准可以包括冷冻液的选择、冷冻速率的控制、冷冻样品的保存温度等指标。

5.质量控制标准：脐带间充质干细胞的制备和存储过程中应进行严格的质量控制。

质量控制标准可以包括细胞数目的检测、细胞活力的检测、无菌检测等项目，以确保制备的细胞符合质量要求。

在制定脐带间充质干细胞制备存储标准时，需要参考国内外相关的法规和标准。

同时，制定标准时需要考虑到国内的实际情况和相关研究的最新进展。

制定标准应充分结合实际情况和科学研究，确保标准的可行性和科学性。

脐带间充质干细胞的制备和存储标准对于保证脐带间充质干细胞的质量和应用的安全性具有重要意义。

符合标准的脐带间充质干细胞可以应用于临床医学领域，对于治疗一些疾病和促进组织再生具有重要的作用。

因此，制定脐带间充质干细胞制备存储标准是当务之急，对于推动相关领域的研究和应用具有重要的意义。

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 202010973002.4(22)申请日 2020.09.16(71)申请人 生物岛实验室地址 510300 广东省广州市海珠区广州国际生物岛螺旋三路6号(72)发明人 徐洪杰　秦大江　(74)专利代理机构 广州华进联合专利商标代理有限公司 44224代理人 汪贝贝(51)Int.Cl.C12N 5/0775(2010.01)A61K 35/28(2015.01)A61P 19/02(2006.01)A61P 37/02(2006.01)(54)发明名称脐带来源的间充质干细胞及其制备方法和应用(57)摘要本发明涉及一种脐带来源的间充质干细胞及其制备方法和应用，该制备方法包括以下步骤：将去除了静脉血管和动脉血管后的所有脐带组织剪碎，得到多块组织块；及将同一块组织块在含有完全培养基的不同培养容器中培养，制备间充质干细胞。

上述脐带来源的间充质干细胞的制备方法可以提高带来源的间充质干细胞的产量，便于现有的手工操作转化为自动化设备。

权利要求书1页 说明书8页 附图10页CN 112280735 A 2021.01.29C N 112280735A1.一种脐带来源的间充质干细胞的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将去除了静脉血管和动脉血管后的所有脐带组织剪碎，得到多块组织块；及将同一块组织块在含有完全培养基的不同培养容器中培养，制备间充质干细胞。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述将同一块组织块在含有完全培养基的不同培养容器中培养的步骤包括：待组织块边缘有细胞爬出后，将所述组织块移入新的完全培养基中培养；进一步地，所述待组织块边缘有细胞爬出后将所述组织块移入新的完全培养基中培养的操作重复四次。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，在将所述组织块移入新的完全培养基后，还包括以下步骤：将移除了组织块的培养容器中的培养上清去除，然后向去除了培养上清的培养容器中加入完全培养基；当培养容器中的细胞的细胞融合度达到80％～90％时，进行传代培养。

脐带间充质干细胞恶性分化并促进肺癌A549细胞移植瘤生长及转移肖恒;赵成岭;陈诗军;张庚艳;陈余清【摘要】目的探讨人脐带来源的间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)对裸鼠肺癌移植瘤生长及转移的影响.方法将24只裸鼠随机分为4组,分别为A549细胞单独注射组(A549组)、hUCMSCs 单独注射组(MSCs组)、A549细胞与正常人皮肤成纤维细胞(skin fibroblasts,SKs)共同注射组(A549+SKs组)、hUCMSCs与A549细胞共注射组(A549+MSCs 组).HE染色和免疫组织化学染色确定hUCMSCs注射裸鼠皮下结节性质;流式细胞分选技术分选出各组移植瘤瘤组织中的A549细胞;实时荧光定量PCR和Westernblot检测A549细胞中上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关分子标志物的表达差异.结果 hUCMSCs注射后,hUCMSCs发生恶性分化,hUCMSCs与A549细胞共注射后肺癌移植瘤体积明显大于单独A549注射组和A549与SKs共注射组;2只A549与hUCMSCs共注射组裸鼠出现了肺癌肝脏转移,而A549组与A549+SKs组的全部6只裸鼠均没有发现肝脏转移.A549与MSCs共注射组A549细胞中上皮表型特征分子E-cadherin、β-catenin mRNA相对表达量和β-catenin蛋白表达水平高于A549组与A549+SKs组,E-cadherin蛋白表达水平明显高于A549+SKs组,间质表型特征分子N-cadherin和vimentin蛋白表达水平明显低于A549组与A549+SKs组,EMT转录调控因子twist蛋白表达水平低于A549组与A549+SKs组.结论hUCMSCs可以自我恶性分化;hUCMSCs能促进肺癌A549细胞移植瘤的生长与转移;hUCMSCs增强A549细胞侵袭、转移的机制不是通过诱导A549细胞发生EMT(上皮-间质转化).%Objective The present study aimed to investigate theeffect of human umbilical cord-derived mesenchymal stem cells (hUCMSCs) on lung cancer xenograft growth and metastasis in nude mice.Methods Twenty-four nude mice were randomly divided into four groups:A549 cells injection alone (group A549),hUCMSCs injection alone (group MSCs),A549 cells co-injection with normal human skin fibroblasts (group A549 and SKs),A549 cells co-injection with hUCMSCs (group A549 and MSCs).HE staining and immunohistochemistry were used to characterize subcutaneous nodules in group MSCs.A549 cells from tumor tissues were sorted out by flow cytometry.The expression of epithelial-mesenchymal transition (EMT) molecular markers in A549 cells was evaluated by quantitative real-time PCR and Western-blotting.Results HUCMSCs undergo spontaneous malignant transformation after being injected into nude mice.The volume of transplanted tumor in group A549 and MSCs was significantly higher than that in group A549 as well as group A549 and SKs.While two nude mice in group A549 and MSCs had liver metastases,none was observed in group A549 or group A549 and SKs.The expression of E-cadherin,β-catenin at mRNA level and β-catenin at protein level were significantly higher in group A549 and MSCs than in groupA549 and group A549 and SKs.The expression levels of N-cadherin,vimentin and EMT transcription factor Twist were significantly lower in group A549 and MSCs than in group A549 and group A549 and SKs.Conclusion HUCMSCs undergo spontaneous malignant transformation and promote the growth as well as the metastasis of subcutaneousxenografts in nude mice,the mechanism of which is unlikely through inducing EMT in A549 cells.【期刊名称】《中国组织化学与细胞化学杂志》【年(卷),期】2017(026)004【总页数】7页(P342-348)【关键词】人脐带间充质干细胞;恶性转化;A549细胞;肺癌;上皮-间质转化【作者】肖恒;赵成岭;陈诗军;张庚艳;陈余清【作者单位】蚌埠医学院第一附属医院呼吸与危重症医学科,呼吸系病基础与临床安徽省重点实验室,蚌埠233000;蚌埠医学院第一附属医院呼吸与危重症医学科,呼吸系病基础与临床安徽省重点实验室,蚌埠233000;蚌埠医学院第一附属医院呼吸与危重症医学科,呼吸系病基础与临床安徽省重点实验室,蚌埠233000;蚌埠医学院第一附属医院呼吸与危重症医学科,呼吸系病基础与临床安徽省重点实验室,蚌埠233000;蚌埠医学院第一附属医院呼吸与危重症医学科,呼吸系病基础与临床安徽省重点实验室,蚌埠233000【正文语种】中文【中图分类】R734间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSCs）是一种无造血功能的干细胞，具有多向分化的潜能。