临床微生物学检验的目的和要求

《医学微生物学》实验目的和要求及实验室规则及注意事项实验目的和要求医学微生物学实验目的，在于验证有关理论，加深对基本理论知识的理解；通过无菌操作，建立无菌观点，学习和掌握有关的基本操作，使学生养成实事求是的科学态度，培养独立工作，分析问题，解决问题的能力和科学研究能力。

实验形式分教师示教和学生操作两种，前者主要验证理论，后者可从不同角度进行基本技能训练和反复练习，掌握这些基本技能，从而掌握一些临床微生物学检查的基本程序和方法。

此外，通过学生自己设计实验并操作，有利于培养学生的科研能力和创造能力。

实验室规则及注意事项一、微生物学实验室规则在进行微生物学实验时，须时刻牢记实验的对象是病原微生物，任何疏忽都可能导致严重的后果，不仅自身有可能招致感染，且有可能将病原微生物传给他人。

因此决不能有丝毫侥幸心理和冒任何不必要的危险。

进入实验室时必须遵守下列规则。

1．进入实验室时必须穿白大衣，离室时脱下反折，白大衣要经常清洗消毒。

2．书包、衣物等勿带入实验室，必要的文具、实验指导、笔记等带入后，放在指定的地方。

3．在实验室内不准吃东西、喝饮料和吸烟，不可把任何东西放入嘴中，也不要用手抚摸头面等部位。

4．进入实验室后要保持安静，禁止高声谈话，不准打闹嘻笑。

5．必须按照老师指定的方法，小心地处理传染性材料、培养物和污染的物质，要正确地使用存放污染器材的各种消毒容器。

6．必须谨慎操作，避免任何有菌材料的溅出，若不慎污染了工作台、手、眼、衣服和地面等处，应立即报告老师，以便及时作适当处理。

7．培养物和传染性材料须放在工作台的安全部位，尽可能保持台面的清洁整齐。

8．爱护公物，合理使用实验材料和器材，如不慎损坏了某些器具，应及时报告老师，听候处理。

9．每次实验完毕后均用消毒药水擦洗工作台面，并用紫外线灯照射过夜。

10．实验完毕后清理台面，将需培养的标本及时放入培养箱。

关闭水、电、煤气和门窗后方可离开实验室。

11．离开实验室前，应用消毒液（2％来苏尔或0.1%新洁尔灭）将双手浸泡5－10分钟，再用清水洗净。

Ｇ＋菌肽聚糖厚、层数多、立体状坚固。
图 金黄色葡萄球糖细胞细胞壁的 肽聚糖结构
图 大肠杆菌细胞壁的肽聚糖结构
Ｇ＋菌细胞壁 特殊结构
膜磷壁酸 壁磷壁酸 表面蛋白：SPA、M蛋白
Ｇ－菌细胞壁 特殊结构 (外膜)
磷脂
脂蛋白
类脂Ａ：毒性部分
脂多糖（LPS，内毒素）： 核心多糖：属和组特异
特异多糖：种和型特异
革兰氏阴性菌多见
化学组成 蛋白质（分子量27，000～900，000）
磷脂一多糖一蛋白质复合物 （毒性主要为类脂A）
稳定性 不稳定，60℃以上能迅速破坏
耐热，60℃耐受数小时
毒性作用
强，微量对实验动物有致死作用（以ug计
稍弱，对实验动物致死作用的
量）。各种外毒素有选择作用，引起特殊病 量比外毒素为大。各种细菌内
目前检验科的主要任务。 ４．对医院感染进行监控。
五、临微学习方法：
重要性：与毕业后工作紧密相关。 （１）平时注意预习、复习； （２）对内容上，紧紧围绕诊断，诊断又是 由各种典型特性建立的方法来进行的 抓特性、去共性 （３）注意新动向。
第一篇 微生物学
细菌学总论
一、细菌(bacterium)的形态与结构
3．质粒可自行失去或经人工处理而消失。 4．质粒可以独立复制。 5．可有几种质粒同时共存在于一个细菌内。
（二）细菌的变异现象
形态与结构变异 培养特性变异 毒力变异 耐药性变异
（三）细菌变异的机制
突变
基因的转移和重组
转化（transformation）是受体菌直接摄取供体菌 游离的DNA片段，通过与染色体重组，获得了供体 菌的部分遗传特性。
医院感染：医院中发生的一切感染。包

的鼻祖
Robert Koch 在微生物学技术方面的杰出贡献 ：
发明了固体培养基
创造了细菌的染色方法 开创了实验性动物感染 发现炭疽病(1876)、结核(1882)、霍乱的病原 体，而获 1905年的医学生理学诺贝尔奖。 提出了郭霍原则： ① 必须能在可疑病例中发 现并分离出同一种微生物；②必须在体外获得纯培养 ；③这种培养的微生物接种于动物，应能引起典型的 疾病。
Florey 1940年提取青霉素 目前遇到的问题：滥用导致耐药性增高
欧立希：发明化学疗剂——砷凡纳明
3、现代微生物学时期：
（1）新病原微生物的发现：
传统病原卷土重来；
新型病原：如军团菌、幽门螺杆菌、莱姆病螺 旋体、肺炎衣原体、人类免疫缺陷病毒、SARS病毒 等。
发现了比病毒更小的微生物:类病毒、拟病毒、 朊粒.
注意：微生物无处不在，应树立无菌观念。 与人类的关系：大多对人类有益，少数有害。 病原微生物（pathogenic microorganisms） 条件致病微生物（机会致病微生物）
微生物学(microbiology)：
微生物的进化分类、生命活动规律及与动植物、 人类、自然相互关系。
按研究对象分：细菌、病毒、真菌学 按应用领域分：工业、农业、医学、兽医 按研究方向分：基础微生物、分子微生物学、
了解了微生物的发展简史，以及现代微生物学的 特征和发展趋势。
介绍了这门功课的特点和学习方法。
思考题：
1.什么是微生物？微生物分那些种类？
2.微生物与人类有何关系，为什么要学习微 生物？
3.预测微生物学下一阶段的发展趋势。 4.目前医学微生物学的研究热点有哪些？
（2）致病机制的研究进一步深入
采用新技术 各种致病因素的分子机理及调控。 完成了部分细菌、病毒的基因测序，从分 子和基因水平研究病原微生物的致病作用。

《医学微生物学》三大常规的微生物学检查从临床标本中分离细菌的目的是为疾病的病原学做诊断，或查找与疾病相关的微生物，以及对抗生素的敏感性，这对于临床诊断、治疗、预后和进行流行病学调查是很有价值的。

因此，对临床标本的处理和检测应掌握以下原则。

1．临床标本的正确采集和处理对于疾病的正确诊断关系很大。

病人标本一般应在应用抗菌药物前采集。

对血液、脑脊液或穿刺液等标本，应严格按照无菌技术进行采集；对鼻咽拭子、肛拭子、粪便等标本，虽无须严格无菌操作，但也应尽量避免杂菌混入。

2．采集容器上应贴好送检号及病人姓名的标签，连同检验单一起尽早送检验室。

若路途较远，应冷藏保存送检；对脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌等特殊标本，送检时应35℃～37℃保温。

3．人体很多部位与外界相通，存在有正常菌群，但不致病，故在涂片检查或分离培养时，应区别标本中是常居菌群的污染还是致病菌。

另外，对某些无菌的部位，如血液、骨髓、脑脊液等，如检查出细菌应视为致病菌，但必须要排除采样及操作中的污染。

4．根据标本来源和可能存在的病原菌，选定各种分离培养基和孵育环境。

如痰标本一般选用血平板，用于化脓性链球菌、无乳链球菌、肺炎链球菌、白喉棒状杆菌等的分离。

【血液标本检查】正常人的血液是无菌的。

当细菌侵入血流并在其中生长繁殖，产生毒素等，可引起菌血症或败血症。

细菌学检验对其诊断和治疗具有极其重要的意义。

一、标本采集l．标本采集必须严格遵守无菌操作，即应去除皮肤上的细菌，又应注意空气中的细菌。

穿刺部位以碘酒、酒精棉球消毒，用干燥的灭菌注射器抽取血液，立即注入选定的液体培养基瓶内，充分混匀以防凝固。

2．采血一般应在治疗前，并在高热、寒战时作培养。

伤寒在发病一周内即菌血症期间采血；化脓性脑膜炎，鼠疫应在发热1～2d内采血；亚急性细菌性心内膜炎也宜于发热高峰采血或多次采血，且每隔1～2h采血一次，连续3～4次，可获较高的阳性率。

3．采血量应相当于培养液的1／10，通常是50ml培养液采血5ml，这样可使存在于血液中的补体、抗体、调理素、溶菌酶等抑制因子被稀释，使之减弱或失去抑制作用。

临床微生物学检验引言临床微生物学检验是一种通过检测和分析患者体内微生物的存在和活动水平来帮助诊断和治疗感染性疾病的方法。

微生物学检验可以确定感染的原因和类型，并确定适当的抗生素治疗方案。

本文将介绍临床微生物学检验的概念、常见的检验方法和其在临床实践中的应用。

临床微生物学检验的概念临床微生物学检验是通过收集患者样本（如血液、尿液、血液培养物等）并对其中的微生物进行培养、分离和鉴定来确定感染病原体的方法。

它涉及一系列实验室操作和技术，包括细菌培养、抗生素敏感性测试、鉴定和分子生物学方法等。

这些方法可以帮助确认感染病原体的存在、确定其感染类型（细菌、真菌、病毒等）以及选择适宜的治疗药物。

临床微生物学检验的常见方法细菌培养细菌培养是一种常见的微生物学检验方法，它涉及将患者样本置于培养基中以促进微生物的生长。

不同类型的培养基可以支持不同类型的微生物生长，如常见的血液琼脂培养基可用于细菌培养。

细菌培养的时间可以从几小时到几天不等，具体取决于患者样本中微生物的增殖速度和种类。

抗生素敏感性测试抗生素敏感性测试是一种用于确定感染病原体对不同抗生素的敏感性和抵抗性的方法。

常见的抗生素敏感性测试方法包括纸片扩散法和微量稀释法。

这些测试可以帮助医生选择最适合的抗生素治疗方案，以避免抗生素的滥用和抵抗性的产生。

分子生物学方法分子生物学方法在临床微生物学检验中也扮演着重要的角色。

这些方法可以通过检测微生物的核酸（如DNA或RNA）来快速鉴定微生物的存在和类型。

其中常用的方法包括PCR （聚合酶链反应）和实时荧光定量PCR。

分子生物学方法具有高度的特异性和敏感性，可以快速准确地检测微生物。

临床微生物学检验的应用临床微生物学检验在临床实践中具有广泛的应用。

它可以帮助确定感染的病原体，指导治疗方案的制定和调整，并监测治疗的疗效。

以下是临床微生物学检验在不同感染疾病中的应用示例：细菌感染在细菌感染的诊断和治疗中，临床微生物学检验可以帮助确定感染的菌种、菌株的数量和敏感性，从而选择适当的抗生素治疗方案。

临床微生物学问答题大全1.试述科赫（Robert Koch）原则。

1在同样的特殊疾病中发现同一种病原菌;2病原体能在体外获得纯培养;3将纯培养接种至易感动物能引起相同的疾病;4能从感染动物体内重新分离出这种病原菌的纯培养。

2.临床微生物学检验的任务有哪些?1研究感染性疾病的病原体特征:2提供快速、准确的病原学诊断;3指导合理应用抗菌药物;4对医院感染进行监控。

3.哪些环境因素可影晌细菌的形态?1培养温度、时间、培养基的成分、pH、离子浓度等;2机体内的生态环境;3环境中不利于细菌生长的物质,如抗菌药物、抗体、过高的盐份等。

4.试述细菌的结构及其相应的功能。

基本结构：细胞壁、细胞膜、细胞质和核质特殊结构:鞭毛、菌毛、荚膜、芽胞等。

细胞壁的主要成分是肽聚糖,肽聚糖是由多聚糖骨架、四肽侧链和五肽交联桥三部分组成。

外膜是革兰阴性菌细胞壁的主要结构,由磷脂、脂蛋白、脂多糖三部分组成。

细胞壁的主要功能是维持细菌的固有外形,起保护菌体的作用。

细胞膜的主要化学成分为脂类、蛋白质及少量多糖,其结构为平行的脂质双层,大多为磷脂,其中镶嵌有多种蛋白质,这些蛋白质可在呈液态的脂质双层中流动变化。

细胞膜的主要功能有:1物质转运作用;2分泌作用;3呼吸作用;4生物合成作用。

细胞质是细菌新陈代谢的重要场所。

核质包含有细菌的遗传物质。

鞭毛是细菌的运动器官,还可增强细菌的侵袭力。

菌毛存在于菌体表面,可分为普通菌毛和性菌毛,其中前者为一种粘附结构,后者具有致育性,可传递毒力和耐药性。

荚膜的功能包括:1保护作用;2致病作用;3免疫原性;4鉴别与分型。

芽胞是细菌的休眠体,可帮助细菌渡过不良的生存状况。

基本结构和特殊结构共同维持细菌的存活及其整体功能。

5.细菌L型有哪些特点?(1)细胞壁肽聚糖结构被破坏,或合成受到抑制,造成细胞壁缺陷。

(2)大小不一,形态各异,染色时不易着色,或着色不均匀。

(3)在含血清的高渗低琼脂培养基中能缓慢生长,一般2-7d后形成油煎蛋样小菌落(放大100倍左右才能看见)。

快速运输
03
在运输过程中应尽量缩短时间，选择适当的交通工具，保持容
器密封、避光、防震，以确保标本质量不受影响。
05
临床微生物学检验标本采集的常见问
题及解决方案
采集方法不当
总结词
采集方法不正确可能导致微生物污染或样本质量下降，影响检验结果的准确性。
详细描述
采集过程中应遵循无菌操作原则，正确使用采集工具，避免交叉感染。对于不同种类的标本，应采用不同的采集 方法和注意事项。
尿液标本
尿常规检查
检测尿液中的蛋白质、糖、酮体等成分，辅助诊断肾脏疾病和糖尿病等。
尿培养
用于检测尿液中的病原菌，如尿路感染等。
粪便标本
粪便常规检查
检测粪便中的红细胞、白细胞、寄生 虫等，辅助诊断消化道疾病。
粪便培养
用于检测粪便中的病原菌，如细菌性 痢疾等。
呼吸道标本
痰液检查
通过痰液中的细胞和病原菌，辅助诊断呼吸道感染。
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采集时机不当
总结词
采集时机不合适可能影响微生物的存活和繁殖，进而影响检验结果。
详细描述
应根据检验目的和要求选择合适的采集时机，如空腹采集血液、尿液等。同时，应注意采集过程中的 时间控制，避免长时间暴露在空气中。
采集容器选择不当
总结词
采集容器选择不当可能导致微生物死亡或繁殖受限，影响检验结果。
详细描述
量。
减少外界干扰
在采集过程中应尽量减少外界因 素的干扰，如避免过度挤压、避 免接触非采集部位等，以降低外
界微生物的混入。
采集后的保存和运
及时处理
01
采集后的标本应及时进行处理，避免长时间放置，以免影响微

微生物检验技术考试题（附答案）一、单选题（共100题，每题1分，共100分）1、常用的酸性染料有A、碱性复红B、伊红C、中国蓝D、结晶紫E、亚甲蓝正确答案：B2、卡他布兰汉菌在形态方面与何种细菌相似A、脑膜炎奈瑟菌B、流感嗜血杆菌C、支原体D、军团菌E、放线菌正确答案：A3、对非细胞型微生物结构和组成表述错误的是A、体积微小B、有产生能量的酶系统C、能通过细菌滤器D、结构简单E、无细胞结构正确答案：B4、支原体与细菌的主要区别是A、属于非细胞型微生物B、无细胞壁C、以DNA为遗传物质D、不能在人工培养基上生长E、需要在厌氧条件下生长繁殖正确答案：B5、关于幽门螺杆菌染色正确的是A、芽孢染色阳性B、革兰染色着色不匀C、荚膜染色阳性D、革兰阴性E、常用吉姆萨染色正确答案：D6、结核分枝杆菌所致结核病历经数年，从病程上来说属于A、全身感染B、急性感染C、隐性感染D、慢性感染E、亚急性感染正确答案：D7、大肠埃希菌与沙门菌、志贺菌具有鉴别性的生化反应是A、明胶水解试验B、发酵葡萄糖C、发酵乳糖D、发酵山梨醇E、硫化氢试验正确答案：C8、“荷包蛋”样菌落是哪种微生物的培养特性A、衣原体B、真菌C、细菌D、螺旋体E、支原体正确答案：E9、细菌生长繁殖中所需营养物质，其中葡萄糖、淀粉、甘露醇等属于哪一类物质A、维生素类B、碳源C、生长因子类D、无机盐类E、氮源正确答案：B10、细菌的非培养检测方法最恰当的是A、免疫学检测B、分子生物学检测C、细菌毒素检测D、动物实验E、以上都是正确答案：E11、治疗支原体肺炎首选药物应是A、磺胺类B、青霉素GC、氨苄西林素D、头孢霉素类E、红霉素类正确答案：E12、不属于蛋白质和氨基酸代谢试验的是A、硫化氢试验B、苯丙氨酸脱氨酶试验C、赖氨酸脱羧酶试验D、七叶苷水解试验E、尿素分解试验正确答案：D13、最适合于长期保存菌株的方法是A、冷冻干燥法B、快速冷冻法C、半固体保存法D、平板保存法E、肉汤法正确答案：A14、下列哪种菌种保存方法是目前最有效的保存方法A、冷冻干燥保存法B、半固体穿刺保存法C、干燥保存法D、脱脂牛奶保存法E、普通琼脂斜面保存法正确答案：A15、弯曲菌生化反应的特点是A、生化反应活泼B、发酵糖类C、液化明胶分解尿素D、VP试验和甲基红试验均阳性E、氧化酶试验阳性正确答案：E16、对于衣氏放线菌形态与染色正确的叙述是A、革兰染色阴性B、鞭毛阳性C、荚膜阳性D、革兰染色阳性E、芽胞阳性正确答案：D17、具有黏附作用的细菌结构是A、普通菌毛B、荚膜C、性菌毛D、鞭毛E、芽胞正确答案：A18、用高层琼脂保存细菌的最长期限为A、半年B、4天C、1个月D、1年E、7天正确答案：D19、用于细菌发酵反应的双糖是A、葡萄糖B、乳糖C、淀粉D、阿拉伯糖E、菊糖正确答案：B20、目前已知致泻毒素中毒性最强的是A、大肠埃希菌肠毒素B、伤寒沙门菌肠奉素C、霍乱肠毒素D、痢疾志贺菌肠毒素E、金黄色葡萄球菌肠毒素正确答案：C21、肠杆菌科细菌的菌体抗原是A、O抗原B、K抗原C、Vi抗原和K抗原D、Vi抗原E、H抗原正确答案：A22、测定细菌DNA中G＋C含量摩尔百分比可作为A、判断细菌致病力强弱的依据之一B、细菌分类的重要依据之一C、区分死菌和活菌的重要依据之一D、判断细菌对热抵抗力强弱的依据之一E、判断细菌繁殖速度的依据之一正确答案：B23、对微生物作用的表述错误的是A、微生物丛平衡失调可致病B、绝大多数微生物对植物有益处C、大多数微生物对人类致病D、绝大多数微生物对动物有益处E、绝大多数微生物对人类有益处正确答案：C24、关于实验室生物安全水平最合理的选项是A、一级生物安全水平（BSL-1）实验室：属基础实验室，常为基础教学、研究实验室，处理危险度1级微生物B、二级生物安全水平（BSL-2）实验室：属基础实验室，常为诊断、研究实验室，处理危险度2级微生物C、三级生物安全水平（BSL-3）实验室：属防护实验室，为特殊的诊断、研究实验室，处理危险度3级微生物D、四级生物安全水平（BSL-4）实验室：属最高防护实验室，供危险病原体研究，处理危险度4级微生物E、以上均正确正确答案：E25、关于菌毛的叙述，错误的是A、能直接用光学显微镜观察B、多见于革兰阴性菌C、普通菌毛与细菌的致病力有关D、有普通菌毛和性菌毛两种E、性菌毛与细菌的接合有关正确答案：A26、对原核细胞型微生物表述错误的是A、有原始核B、无核膜C、无核仁D、单个裸露DNA分子E、进行有丝分裂正确答案：E27、临床微生物学检验的目的是A、为临床感染性疾病的诊断提供病原学依据B、为临床感染性疾病的治疗提供参考用药的信息C、为医院感染提供病原微生物及其耐药性动态信息D、改进或更新临床微生物学检验的方法E、以上说法都正确正确答案：E28、治疗链球菌引起的感染，应首选A、红霉素B、多黏菌素C、克林霉素D、青霉素E、链霉素正确答案：D29、目前筛选伤寒带菌者的方法是检测血清中的A、O抗体B、Vi抗体C、K抗体D、H抗体E、M抗体正确答案：B30、主要流行的肠出血性大肠埃希菌的O血清型是A、O25B、O158C、O111D、O157E、O6正确答案：D31、有关实验动物解剖，错误的是A、接种动物已发病，可人工处死解剖B、解剖实验动物应在专用的实验台上进行C、接种动物观察期已满，可人工处死解剖D、若不能及时解剖，应将动物尸体置消毒剂中长期保存E、实验动物经接种死亡后，应立即解剖正确答案：D32、肠杆菌科细菌的鞭毛抗原是A、H抗原B、K抗原C、Vi抗原D、Vi抗原和K抗原E、O抗原正确答案：A33、波浪热的病原体是A、百日咳鲍特菌B、幽门螺杆菌C、嗜肺军团菌D、布鲁氏菌E、流感嗜血杆菌正确答案：D34、生化反应中，氧化酶和触酶均阳性的病原菌是A、链球菌B、卡他布兰汉菌C、肠球菌D、葡萄球菌E、大肠埃希菌正确答案：B35、血培养的培养基中常用的抗凝剂为A、EDTA-K2B、肝素C、聚茴香脑磺酸钠（SPS）D、枸橼酸钠E、EDTA-K3正确答案：C36、平板分区划线的目的是A、减少细菌间的相互抑制作用B、使细菌获得充分的营养C、加快细菌的生长速度D、利于细菌的大量生长E、获得足够的单个菌落正确答案：E37、在半固体培养基内可出现倒伞型生长的细菌是A、红斑丹毒丝菌B、产单核李斯特菌C、阴*道加特纳菌D、炭疽芽胞杆菌E、以上都不是正确答案：B38、能利用含硫氨基酸生成硫化氢的细菌是A、大肠埃希菌B、肺炎克雷伯菌C、产气肠杆菌D、奇异变形杆菌E、宋内志贺菌正确答案：D39、放线菌的感染特点是A、常为局部感染，不扩散B、外源性感染C、为非化脓性感染D、病灶常有瘘管形成，排出硫磺样颗粒E、脓汁黏稠正确答案：D40、下列关于副溶血性弧菌的说法错误的是A、一种嗜盐性弧菌B、在70g/LNaCl培养基中可生长C、能分解葡萄糖、麦芽糖D、产酸不产气E、营养要求高正确答案：E41、决定病毒体感染性的关键物质是A、衣壳B、刺突C、核酸D、核蛋白E、包膜正确答案：C42、一般不用作培养基抑制剂的是A、胆盐B、煌绿C、亚硫酸钠D、染料E、氯化钠正确答案：E43、结核分枝杆菌所致疾病最常见的是A、结核性脑膜炎B、肺结核C、结核性胸膜炎D、肠结核E、淋巴结核正确答案：B44、在细菌生长曲线中菌数增加最快的是A、稳定期B、对数期和稳定期C、对数期D、衰亡期E、迟缓期正确答案：C45、下列试验中，可用于革兰阴性杆菌及厌氧菌的鉴别的试验是A、ONPG试验B、七叶苷水解试验C、甲基红试验D、O/F试验E、糖类发酵试验正确答案：B46、流感嗜血杆菌不能引起A、流行性感冒B、心包炎C、鼻窦炎D、脑膜炎E、继发性肺炎正确答案：A47、处置肉毒中毒的关键环节是A、迅速隔离病人B、迅速给病人补液C、迅速给予镇定药物D、迅速给予抗菌药物E、迅速注射F、A、G、B、E三型多价抗毒素正确答案：E48、悉生动物是A、无菌动物引入已知细菌B、无菌动物C、突变动物D、清洁动物E、无特殊病原体动物正确答案：A49、细菌所含核糖核酸占细菌干重的A、5%B、15%C、20%D、10%E、25%正确答案：D50、钩端螺旋体的传染源和传播方式是A、接触或食入疫水、土壤B、吸入孢子C、性接触D、皮肤伤口感染芽胞E、犬咬伤正确答案：A51、下列描述的微生物特征中，哪项不是微生物的共同特征A、专性寄生B、繁殖迅速C、个体微小D、分布广泛E、结构简单正确答案：A52、关于病毒的描述正确的是A、以二分裂方式繁殖的微生物B、原核细胞型微生物C、较大微生物D、非细胞型微生物E、真核细胞微生物正确答案：D53、副溶血性弧菌在下列哪种培养基中不生长A、SS琼脂平板B、血液琼脂平板C、3.5%NaCl琼脂平板D、3.5%NaCl蛋白胨水E、无盐培养基正确答案：E54、下列实验室方法中哪种可确诊获得性免疫缺陷综合征（艾滋病）A、凝集试验B、酶免疫测定法C、动物接种D、免疫荧光法E、免疫印迹试验正确答案：E55、真菌感染不用青霉素治疗，是因为真菌A、亲和力低B、缺乏细胞壁C、产生耐青霉素的酶D、抗吞噬E、细胞壁缺乏肽聚糖正确答案：E56、下面有关原核生物说法错误的是A、无核膜B、基本成分肽聚糖C、只有拟核D、有完整的细胞器E、二分裂正确答案：D57、副溶血性弧菌引起食物中毒的传播途径是A、海产品或盐腌制品B、污染用水C、病鼠尿污染食物D、苍蝇污染食物E、病畜肉正确答案：A58、厌氧菌中耐氧菌A、在新鲜固体培养基表面生长、暴露1h后死亡B、在新鲜固体培养基表面生长、暴露2h后不死亡C、在新鲜固体培养基表面不生长、暴露数小时仍不死亡D、在新鲜固体培养基表面生长、暴露3h后不死亡E、在新鲜固体培养基表面生长、暴露数小时仍不死亡正确答案：E59、在悬滴标本中呈穿梭样运动的细菌是A、大肠埃希菌B、变形杆菌C、幽门螺杆菌D、伤寒沙门菌E、霍乱弧菌正确答案：E60、厌氧菌感染的危险因素不包括A、深部需氧菌感染B、机体免疫功能下降C、紫外线下照射D、长期应用抗菌药物E、组织缺氧或氧化还原电势降低正确答案：C61、病毒的衣壳是指A、核酸外围的蛋白质B、核酸C、核酸外围的糖蛋白D、核酸外围的脂类E、核酸外围的多肽正确答案：A62、下列除哪项外，均为肠道菌的主要抗原A、荚膜抗原B、芽胞抗原C、菌体抗原D、H抗原E、O抗原正确答案：B63、梅毒的唯一传染源是A、人B、蚤C、蚊D、鼠E、猫正确答案：A64、关于霍乱弧菌的生物学性状，错误的是A、碱性蛋白胨水可作为选择增菌培养基B、霍乱弧菌耐碱不耐酸C、霍乱病人粪便悬滴标本中，可见“鱼群样穿梭”运动D、El-Tor生物型霍乱弧菌抵抗力强，因为能形成芽胞E、革兰染色阴性正确答案：D65、典型L型细菌菌落是A、丝状菌落B、G型菌落C、F型菌落D、油煎蛋样菌落E、光滑型菌落正确答案：D66、下列对蛋白胨特点表述错误的是A、易溶于水B、遇酸不沉淀C、不因受高温而凝固D、两性电解质有缓冲作用E、吸水性差正确答案：E67、内源性感染的病原体来源于A、医院B、病人体内C、其他病人D、医护人员E、医疗器械正确答案：B68、下列说法中错误的是A、肠杆菌科细菌氧化酶试验阴性B、奈瑟菌属氧化酶试验阳性C、假单胞菌的氧化酶试验阳性D、莫拉菌属氧化酶试验阴性E、氧化酶是细胞色素呼吸酶系统的最终呼吸酶正确答案：D69、细菌哪种结构的功能类似真核细胞的线粒体A、中介体B、核糖体C、胞质颗粒D、质粒E、核质正确答案：A70、S-R变异是指A、毒力变异B、形态变异C、培养特性变异D、耐药性变异E、抗原性变异正确答案：C71、用于粪便污染检测指标的是A、大肠杆菌B、霍乱弧菌C、阴沟肠杆菌D、变形肠杆菌E、产气肠杆菌正确答案：A72、医院感染最重要的传染源是A、医院工作人员B、探视者C、病人D、陪同人员E、被病人接触过的物品正确答案：C73、产生ESBLs最常见的细菌是A、痢疾志贺菌B、肺炎链球菌C、肺炎克雷伯菌D、金黄色葡萄球菌E、阴沟肠杆菌正确答案：C74、下列哪项不是金黄色葡萄球菌的特点A、血浆凝固酶试验阳性B、产生耐热核酸酶C、分解甘露醇D、产生溶血素E、胆汁溶解试验阳性正确答案：E75、一腹泻患者，便中分离出一革兰阴性短杆菌，血平板上为灰白、光滑湿润凸起溶血大菌落，3～5天后菌落呈暗绿色，SS平板上为乳糖不发酵菌落。

微生物检测标准微生物检测是指对环境、食品、药品、医疗器械等进行微生物污染情况的检测。

微生物检测标准是指在微生物检测过程中所遵循的一系列规范和要求，其制定的目的是为了保证检测结果的准确性、可靠性和可比性。

微生物检测标准的制定对于保障公共卫生安全、提高产品质量、保护环境健康具有重要意义。

首先，微生物检测标准的制定需要考虑到微生物的种类和数量。

不同的微生物种类对人体健康和环境的影响程度不同，因此在制定微生物检测标准时需要根据具体的检测对象和用途确定需要检测的微生物种类和数量限制。

例如，在食品安全领域，常见的微生物包括大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等，针对不同食品的微生物检测标准也会有所不同。

其次，微生物检测标准还需要考虑到检测方法的选择和标准化。

目前常见的微生物检测方法包括培养法、PCR法、免疫学方法等。

不同的检测方法在准确性、灵敏度、特异性等方面存在差异，因此在制定微生物检测标准时需要明确具体采用的检测方法，并对该方法进行标准化操作，以确保检测结果的可靠性和可比性。

此外，微生物检测标准还需要考虑到样品的采集、保存和运输等环节。

样品的不合理采集和处理可能会导致微生物污染或者失活，从而影响检测结果的准确性。

因此，微生物检测标准需要明确样品采集的方法、保存条件和运输要求，以确保样品的完整性和真实性。

最后，微生物检测标准还需要考虑到检测结果的解读和评价。

微生物检测结果往往是一个数量化的指标，需要根据具体的标准进行解读和评价。

例如，食品中大肠杆菌的数量超过一定限制就可能会对人体健康造成风险，因此微生物检测标准需要明确对检测结果的评价标准和风险等级。

综上所述，微生物检测标准的制定需要考虑微生物种类和数量、检测方法的选择和标准化、样品的采集、保存和运输、检测结果的解读和评价等方面。

只有严格遵循微生物检测标准，才能确保检测结果的准确性和可靠性，为公共卫生安全和产品质量提供有力保障。

一、微生物学实验内容与目的微生物学实验内容包括：培养基的制备及灭菌；从土壤中分离和纯化微生物；细菌染色及形态观察；放线菌、酵母菌和霉菌形态观察；微生物显微计数和大小测量；E.coli生长曲线的测定；细菌的生理生化反应；环境因素对微生物生长的影响；微生物的诱变育种；产淀粉酶菌株的分离纯化；水和饮料中细菌学检查；食用真菌的采集、分离和培养；抗药性突变株的筛选。

微生物学实验课的目的在于通过一系列实验项目，使学生能比较熟练地掌握微生物学实验的操作方法和技能；学会进行综合实验的设计、准备、操作和结果分析；培养学生对实验原理、方法和结果的正确理解，仔细观察，认真思考的科学素养和分析问题和解决问题的科学能力。

二、微生物学实验室要求与安全为了确保微生物学实验课质量，提高实验效果，并保证实验室的安全，特提出如下要求，希望共同遵守。

（1）实验前须预习实验内容，了解实验目的、方法和注意事项，写出实验设计方案。

在课堂上注意聆听老师对实验内容的讲解，注意观察教师的示范操作，以掌握实验操作的要领。

（2）进入实验室必须穿工作服，必要时还须戴口罩、帽子和手套，并做好实验前的各项准备工作。

（3）非必需物品禁止带入实验室，带入实验室的物品应远离操作区，放在指定的区域。

（4）实验室内不准大声喧哗、嬉戏，应保持实验室的安静、整洁和有序。

不准在实验室内吸烟、饮水和进食，尽量避免用手触摸头、面部，防止感染，尽量减少室内活动，以免引起风动。

（5）实验中注意正确使用试剂，按操作规程使用仪器，遇到仪器故障时请老师帮助解决，切勿擅自折卸，否则因此而损坏仪器，应予以赔偿。

（6）用过的污染物品应放到指定的地点，经专人消毒灭菌之后再进行清洗，切勿乱丢或冲入水池中。

禁止将本实验室的物品带出实验室外。

需送温箱培养的物品，应标记好材料名称、姓名、日期后送到指定位置。

（7）实验过程中，切勿使用乙醇、乙醚、丙酮等易燃药品接近火焰。

如遇火险，应关闭电源，用湿布阻燃灭火，必要时使用灭火器。

《临床微生物学与检验》教学大纲程编号：05280020课程名称：临床微生物学与检验(Clinical microbiology & laboratory)学分：6.5总学时：120学时理论学时：56学时实验学时：64学时先修课程要求：人体解剖学、生物化学、医学免疫学适应专业：医学检验专业参考教材：1、临床微生物学与检验，倪语星、尚红主编，第四版，人民卫生出版社2、临床微生物学检验，洪秀华主编，第一版，中国医药科技出版社3、Murray PR. Manual of Clinical Microbiology.8th ed.Washington:American Society for Microbiology一、课程在培养方案中的地位、目的和任务临床微生物学与检验是医学微生物学、临床微生物学以及微生物学技术密切结合的一门新兴学科，是医学检验专业的一门专业主干课程，它综合了临床医学、免疫学、临床抗生素学和医院流行病学等几方面的知识和技能，研究感染性疾病的病原体特征，提供快速、准确的病原学诊断，密切结合临床提出及时有效的治疗方案，对医院内感染进行动态监控。

二、课程基本要求临床微生物学与检验是一门实践性、应用性很强的课程，该课程包括医学微生物学和临床微生物学两部分，前者主要研究与医学有关的病原微生物的生物学特性、致病性、免疫性、以及防治措施的学科。

后者侧重于研究感染性疾病，快速、准确的诊断病原体的策略与方法，为临床诊断提供依据。

通过本课程的学习，学生应该掌握微生物的基本特性，病原微生物对人体的致病性以及人体的抗感染免疫，微生物学检验的基本技术。

各类临床标本的采集方法、检验程序及常规检验方法。

三、学时安排四、考核考核方式：理论考试笔试，实验课采用考核及评估方式评定成绩。

成绩构成：理论考试70%，实验和平时成绩30%。

五、课程基础内容（理论教学）绪论[目的要求]1、掌握有关微生物及微生物学的概念；2、了解微生物学的发展简史。

1.微生物microorganism：是存在于自然界的一大群形体微小、结构简单、肉眼直接看不见，必须借助光学显微镜或电子显微镜放大数百至数万倍才能观察到的微小生物。

2.微生物学microbiology：是生物学的一个分支，是研究微生物的类型、分部、形态结构、生命活动及其规律、遗传、进化，以及人类、动物、植物等相互关系的一门科学。

3.医学微生物学medical microbiology：主要是研究与医学和疾病有关的病原微生物的生物学特性、致病性、免疫性，以及特异性诊断和防治措施的学科，目的是控制和消灭微生物引起的感染性疾病，以保证和提高人类的健康水平。

4.细菌L型bacterial L form：细菌在体内外受到各种直接或间接的理化或生物因素影响后导致细胞壁肽聚糖直接破坏或合成被抑制进而形成一种细胞壁缺失或缺陷的细菌。

5.☺原生质体protoplast：细菌变成为L型后，细胞壁完全缺失，细菌仅被一层细胞膜包裹。

6.原生质球spheroplast：源于革兰阴性菌的L型。

7.中介体mesosome：细菌细胞膜可内陷形成一种特有的结构，是部分胞膜折叠形成的泡囊状、管状或薄层状结构，在电子显微镜下方能看到。

8.☺质粒plasmid：是细菌染色体外的遗传物质，存在于细胞质中，是小的双股闭合环状DNA分子，可独立于染色体存在并复制，也可整合到染色体上。

9.芽孢：很多革兰阳性菌在一定条件下可在菌体内部形成具有多层膜包裹的原型或卵圆形的小体，是细菌代谢处于相对静止状态、维持生存、具有特殊抵抗力的休眠结构。

10.热原质pyrogen：是细菌合成的一种注入人体或动物体内能引起发热的的物质。

11.☺噬菌体bacteriophage or phage：是感染细菌、真菌、放线菌和螺旋体等微生物的病毒，只能在活的宿主菌内复制，噬菌体的DNA不仅随着它的感染可在宿主菌之间及宿主菌与噬菌体之间传播，而且还能赋予宿主菌某些生物学性状。

检验科微生物学常见检测项目解读微生物学是生物学的一个重要分支，研究微生物的结构、生理、遗传、生态等方面的基本规律。

在临床检验中，微生物学的应用非常广泛，通过对微生物的检测可以准确判断疾病的病因以及治疗方案。

本文将详细介绍检验科微生物学常见的检测项目及其解读。

一、培养和鉴定1.细菌培养和鉴定细菌培养和鉴定是微生物学常见的一项检测项目。

通过对病原体细菌的培养和鉴定，可以确定致病菌的种类以及对抗生素的敏感性。

在细菌培养过程中，检验者需要取得适量的临床标本，如胸水、尿液、血液等，并进行相应的培养试验，最终通过鉴定技术确定致病菌的种类及其抗生素敏感性。

2.真菌培养和鉴定真菌培养和鉴定也是微生物学中常见的检测项目之一。

真菌是一类单细胞或多细胞真核生物，它们广泛存在于自然界中，有些真菌对人体造成感染。

在真菌培养和鉴定中，检验者同样需要获取合适的临床标本，并经过一系列培养和鉴定试验，最终确定致病真菌的种类和药敏结果。

二、微生物快速检测1.微生物快速培养技术随着科技的发展，微生物快速培养技术逐渐应用于临床检验。

相比传统的培养方法，快速培养技术可以在较短的时间内得到细菌或真菌的培养结果，从而提高了疾病的诊断速度和准确性。

常见的微生物快速检测技术包括PCR、MALDI-TOF等。

2.微生物RNA检测微生物RNA检测是一种通过检测细菌或真菌RNA分子来确定病原微生物种类的技术。

该技术具有高灵敏度和特异性，能够帮助医生迅速确定病原微生物，从而指导临床治疗。

在一些特殊感染疾病的诊断中，微生物RNA检测技术发挥了重要作用。

三、药敏试验1.药敏试验药敏试验是一种检测细菌对抗生素敏感性的方法。

在治疗感染性疾病时，合理选用敏感的抗生素对病原微生物进行针对性治疗至关重要。

通过药敏试验可以明确细菌对不同抗生素的敏感性，为临床用药提供科学依据。

2.耐药检测除了敏感性检测，耐药检测也是非常重要的项目。

近年来，随着抗生素的滥用和耐药菌株的增多，耐药检测显得尤为重要。

二、染色标本
· 细菌标本经染色后，除能清楚看到细菌的形态、大小、 排列方式外，还可根据染色反应将细菌进行分类，因 此染色标本的检查在细菌的初步鉴定中应用最广，起 着非常重要的作用。
· （一）常用染料：酸性染料、碱性染料、复合染料。 · （二）常用的染色方法：革兰染色、抗酸染色、
荧光染色。
革兰染色
三、生化反应
（一）碳水化合物的代谢试验 1.糖（醇、苷）类发酵试验
原理：不同种类细菌含有发酵不同糖（醇、苷）类的酶， 因而对各种糖（醇、苷）类的代谢能力也有所不同，即使能分 解某种糖（醇、苷）类，其代谢产物可因菌种而异。检查细菌 对培养基中所含糖（醇、苷）降解后产酸或产酸产气的能力， 可用以鉴定细菌种类。
方法：将待试菌接种于葡萄糖磷酸盐蛋白胨水中， 35℃孵育48~96h后，于5ml培养基中滴加5~6滴甲基红指示 剂，立即观察结果。
结果判定：呈现红色者为阳性，桔黄色为阴性，桔 红色为弱阳性。
应用：常用于肠杆菌科内某些种属的鉴别，如大肠 埃希菌和产气肠杆菌，前者为阳性，后者为阴性。肠 杆菌属和哈夫尼亚菌属为阴性，而沙门菌属、志贺菌 属、枸橼酸杆菌属和变形杆菌属等为阳性。
3
革兰阳性菌细胞内含有大量核糖核酸镁盐，可与结
晶紫和碘牢固的结合成大分子复合物，不易被乙醇脱色；而革
兰阴性菌细胞内含极少量的核糖核酸镁盐，吸附染料量少，形
成的复合物分子也较小，故易被乙醇脱色。
2. 染色方法
1 标本涂片、干燥和固定。 2 染色：在已固定细菌涂片上滴加结晶紫染液数滴， 室温作用1min，用细流水轻轻冲洗，甩去积水。再滴 加碘液数滴，室温作用1min，冲洗。滴加95%酒精数滴， 轻轻摇动玻片几秒钟，使均匀脱色，然后斜持玻片， 使脱掉的染料随酒精流去，再滴加酒精，直到流下的 酒精无色为止（约需30s），立即用细流水将酒精冲掉。 再滴加稀释石炭酸复红液复染约30s后用细流水冲洗。 3 标本染色后，晾干或用吸水纸吸干，滴香柏油后 用油镜观察。