穿龙薯蓣中薯蓣皂苷元含量的动态分析
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穿龙薯蓣的生长规律分析摘要:通过试验观测,分析了穿龙薯蓣(Dioscorea nipponica Makino)植株的形态生长和生物量生长规律,结合Logistic模型和Growth模型分别对穿龙薯蓣植株的形态生长和生物量生长进行了曲线方程拟合。
结果表明,对穿龙薯蓣植株的株高、叶片数、叶面积生长量的Logistic模型拟合的拟合优度(R2)分别为0.980、0.985、0.985;对地上部和地下部生物量干重增长的Growth模型拟合的拟合优度分别为0.810、0.905。
关键词:穿龙薯蓣(Dioscorea nipponica Makino);形态生长;生物量;生长曲线薯蓣科(Dioscoreaceae)植物穿龙薯蓣(Dioscorea nipponica Makino)的干燥根茎在中药里称作穿山龙,其味甘苦温,具有祛风湿、止痛、舒筋活血、止咳平喘、祛痰等功效[1],是东北地区常用的中草药。
穿山龙中含有薯蓣皂苷元,是合成甾体激素药的优质原料之一,其经济价值和药用价值已经引起广泛的关注,通过常规选育良种手段并配套高产栽培技术来提高穿龙薯蓣的生物量与薯蓣皂苷元含量是近年来研究的热点;药用植物形态指标的测量简单、直观,且与药用植物的遗传育种目标性状相关联[2];穿龙薯蓣的形态变化与生物量是与薯蓣皂苷元含量密切相关的形态指标,通过对穿龙薯蓣生长规律的研究,可以为运用农业技术手段创造适宜的外在条件来调节穿龙薯蓣的营养生长和生殖生长打下基础,并可为穿龙薯蓣的栽培技术制订提供可靠的理论依据。
1 材料与方法试验分别于2007年秋季(前期预备试验)、2008年春季在吉林市昌邑区左家镇、2010年春季在吉林市昌邑区九站乡的吉林农业科技学院试验基地实施穿龙薯蓣种子播种、苗期管理,试验地肥力中上等、地力均匀。
2008年4月27日栽种,5月20日出苗;2010年4月23日栽种,5月21日出苗;利用当地的材料选取大小、形状相近的栽子于出苗月下旬移栽。
穿山龙总皂苷提取方法研究【摘要】目的探讨穿山龙中总皂苷的提取方法,为后续的提取工艺研究奠定基础。
方法以总皂苷含量和浸膏得率为指标,考察超声提取法、回流提取法、索氏提取法,确定最佳提取方法。
结果超声提取法总皂苷含量8.67%,浸膏得率为3.66%;回流提取法总皂苷含量13.16%,浸膏得率为7.46%;索氏提取法总皂苷含量11.22%,浸膏得率为6.10%。
结论最佳提取方法为回流提取法。
【关键词】穿山龙;总皂苷;薯蓣皂苷元;提取方法穿山龙为薯蓣科植物穿龙薯蓣(dioscorea nipponica makino)的干燥根茎,味甘苦温,具有祛风湿,止痛,舒筋活血,止咳平喘祛痰功效[1]。
主治风湿性关节炎,筋骨麻木,大骨节病,跌扑损伤,慢性支气管炎、咳嗽气喘。
现代药理研究证明,其总皂苷类成分具有调节免疫、改善心血管功能、祛痰、抗肿瘤、抗炎镇痛等多种药理作用[2]。
穿山龙主要成分是甾体皂苷类,包括薯蓣皂苷(dioscin)、纤细皂苷(gracillin)和水溶性皂苷等[3]。
本品是近30年来从民间搜集而逐步广泛应用的,民间多用其浸酒或煎服,为治疗风湿病的三大常用药之一[4]。
有报道用穿山龙注射液治疗风湿和类风湿关节炎,有效率达89%[4]。
可见该药的用途是极其广泛的,开发利用穿山龙的前景广阔,因此其提取及含量测定的工艺方法至关重要。
本实验拟以总皂苷含量和浸膏得率为指标,考察超声提取法、回流提取法、索氏提取法,确定最佳提取方法。
为后续的单因素及正交相结合的方法确定穿山龙总皂苷最佳工艺研究奠定基础。
1材料与仪器穿山龙药材购于广州清平药材市场,经广东药学院中药鉴定教研室李书渊教授鉴定均为薯蓣科薯蓣属穿龙薯蓣(dioscoreanipponica makino)的干燥根茎。
uc-1800型紫外可见分光光度计(北京瑞利分析仪器公司);tc-15型恒温电热套(海宁市华星仪器厂);dfy-400型摇摆式高速万能粉碎机(温岭市林大机械有限公司);岛津ay120托盘电子分析天平;hh-6恒温水浴锅(江苏省金坛市宏华仪器厂);上海亚荣生化仪器厂旋转蒸发仪。
薯蓣皂甙含量测定方法的综述摘要:本文主要探究了两种薯蓣皂甙含量的测定方法,本次的论述可以为今后系统地了解薯蓣皂甙元的定量方法,并比较各方法的优劣,为后续课题做铺垫。
希望本文对探求更好更新的测定方法具有基础作用与意义。
关键词:薯蓣皂甙含量,测定方法,综述1、引言薯蓣皂甙,既是生产治疗心血管疾病药物的主要药源,对降血脂、平喘、抗炎和抗肿瘤有一定疗效,又是用于合成多种甾体激素类和避孕类药物的薯蓣皂甙元的重要来源之一。
此类皂甙的种类繁多,结构复杂,制备含量测定用对照品比较困难,但它们具有相同的基本骨架(薯蓣皂甙元)和某些官能团,可以借助骨架的通性或官能团的特性进行测定,下面简要介绍两种测定方法:2、黄精中薯蓣皂苷元的含量测定2、1方法原理本品粗粉加乙醇回流提取,经液相色谱仪分离,在在203nm处测定峰面积,外标法计算含量。
2、2仪器设备及实验条件仪器设备:lc 210avp高效液相色谱仪;spd210avp紫外检测器。
色谱条件:色谱柱:shim-pack vp-ods c18(150mm×4. 6mm,5μm);流动相:乙腈-水(94∶6);检测波长:203nm;流速:1ml/min;柱温:25℃;进样量:20μl。
2、3试样制备对照品溶液的制备:精密称取薯蓣皂苷元对照10.13mg,置25ml 的量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,作为对照品溶液。
供试品溶液的制备:取经干燥粉碎后的黄精药材粉末(过四号筛)2g,精密称定,置茄形烧瓶内,精密加入乙醇50ml,摇匀,称重,加热回流4h,放冷,再称定重量,用乙醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密取续滤液20ml,蒸干乙醇,残渣加80ml、3mol/l的盐酸溶液溶解,沸水回流水解4h,冷却,移至分液漏斗中,加氯仿40ml (20 ml、10ml、10ml)萃取3次,合并氯仿液,用水洗涤2次,每次20ml ,减压回收氯仿至干,残渣加甲醇使溶解,移至1ml 量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,进样前用0.45μm的微孔滤膜过滤,作为供试品溶液。
设计性试验穿山龙薯蓣皂苷的提制和鉴识穿山龙为薯蓣科薯蓣属植物穿龙薯蓣Dioscorea nipponica Makino的根状茎,又名穿龙薯蓣、野山药、串地龙,能舒筋活血,止咳化痰,祛风止痛。
中医用于腰腿疼痛、风湿关节痛、筋骨麻木、跌打损伤、气管炎、支气管炎。
穿山龙的有效成分主要是是甾体皂甙(薯蓣皂苷:dioscin C45H72O16;纤细薯蓣皂苷:gracillin C45H72O17)和水溶性皂苷。
其总皂苷含量在3%左右本实验经提取,可得到薯蓣皂苷。
他们的物理性质如下:薯蓣皂苷,白色粉末,熔点294~296℃,薯蓣皂苷不溶于水、石油醚、苯,可溶于甲醇、乙醇、醋酸,微溶于丙酮、戊醇。
纤细薯蓣皂苷,白色粉末,熔点287~289℃(分解);298~302℃; 290~293℃。
纤细薯蓣皂苷不溶于水、石油醚。
一、实验目的1.掌握各种苷与苷元的分离纯化方法,包括水溶性苷与水难溶性苷分离,不同极性水难溶性苷的分离,水难溶性苷与苷元的分离。
2.学习苷与苷元的各种鉴识方法,包括:层析方法(TLC),沉淀反应等。
3.学习各种实验技能提取:超声提取分离:柱层析鉴识:层析法、化学法二、实验原理根据薯蓣皂苷不溶于水、石油醚、苯,可溶于甲醇、乙醇的特性,提取分离脂溶性总皂苷和水溶性蛋白质、多糖,利用薯蓣皂苷和纤细薯蓣皂苷结构上的差别,用吸附柱层析分离二者。
本实验涉及的知识点有:溶剂提取法、色谱法等。
三、实验流程穿山龙药材总皂苷薯蓣皂苷四、实验步骤1.总皂苷的提取称取穿山龙药材200g ,研碎,量取80%乙醇溶液500mL ,浸泡20min,超声提取1h,T=70℃,减压抽滤至无醇味。
第二次提取,加400mL 乙醇,二次超声30min,减压抽滤至无醇味,合并滤液。
滤液用正丁醇萃取(50ml ×3),回收正丁醇,得穿山龙中总皂苷粗品。
2.总皂苷的分离(无水条件)干燥:烧杯(100ml,2个)、锥形瓶(500ml,1个、50ml,20个)、蒸发皿、玻璃棒(2支)、量筒(100ml,1个、10ml ,1个),色谱柱、滴管2支。
穿龙薯蓣种子化学成分研究摘要:通过酸水解法对穿龙薯蓣种子中的皂苷元进行了含量测定,结果表明:相对于根茎,薯蓣种子中所含皂苷元较少,并含有糖,生物碱,萜类等多种化合物。
关键词:穿龙薯蓣种子;酸水解法;薯蓣皂苷元中图分类号:s6321文献标识码:adioscorea nipponica makino为薯蓣科薯蓣属植物,根茎入药,具有治疗冠心病、心绞痛[1]、风湿类风湿关节炎[2]、抑制癌细胞增殖[3] 等作用,近代药理研究表明,它还具有镇咳、祛痰、平喘、调节免疫和改善心血管功能等作用[4]。
主要药用成分为薯蓣皂苷(dioscin)及水解后产生的薯蓣皂苷元(diosgenin)[5],后者属于甾体类化合物,是合成多种甾体激素类和避孕类药物的重要原料之一[6]。
近年来随着市场对合成甾体激素类药物需求量的激增,对能够用于合成多种甾体激素类药物的穿龙薯蓣皂素的需求量也随增加之。
然而,由于植物生存环境的破坏和人为无序的大规模采挖,穿龙薯蓣野生资源已经不多,接近濒危状态,现被国家列为二级保护植物[7]。
因此,为了实现穿龙薯蓣资源的可持续利用,满足市场需求,必须加强野生资源保护和大力发展人工栽培,然而人工栽培存在许多不足之处:采用根茎进行无性繁殖,不仅需种量大,繁殖系数低,而且无性繁殖材料在贮藏及栽培过程中易感染病害,造成组织衰老退化[8];采用种子繁殖,不仅苗期长,而且定植后5年才可收获根茎[9]。
因此,靠自然资源已难满足生产需要。
虽然有少量的关于穿龙薯蓣的组培快繁的报道[10-12],但是都还没有形成系统的可行的生产规模,因此要解决这个问题只能从提高资源本身的利用率上来考虑,本实验对穿龙薯蓣的种子的化学成分进行了初步的研究,以便于更好的、充分的利用其种子资源。
1材料和方法11实验材料穿龙薯蓣种子采于辽宁省青原县穿龙薯蓣基地,经吉林农业大学中药材学院赵淑春教授鉴定为穿龙薯蓣种子。
12实验仪器索氏提取器、旋转蒸发器re-52a、zk072型电热真空干燥箱、rs2105型电子天秤等。
收稿日期:2003 10 15修订日期:2003 11 20薯蓣皂苷元测定方法的研究概况彭晓英1,周朴华1,裴 刚2,蒋道松1(1.湖南农业大学,湖南长沙 410128; 2.湖南中医学院,湖南长沙 410007)摘 要:薯蓣皂苷元是薯蓣皂苷的水解产物,它是许多重要甾体激素的重要前体物质。
本文主要介绍近年来薯蓣皂苷元的分析测定方法。
薯蓣皂苷水解为薯蓣皂苷元的方法有常规酸水解法和两相溶剂法等,当前含量测定常用的方法有重量法、分光光度法、高效液相色谱法、气相色谱法、薄层色谱法等方法。
关键词:薯蓣皂苷元;甾体激素;高效液相色谱法;气相色谱法;薄层色谱法中图分类号:Q 949.71+8.27 文献标识码:A 文章编号:1003 5710(2004)01 0027 03 薯蓣皂苷元(Diosgenin)是多种薯蓣科薯蓣属植物根状茎中所含主要皂苷成分的水解产物,化学名为 5 20 E ,22 E ,25 F 螺甾烯 3 醇,简称为 5 异螺甾烯 3 醇,是异螺甾烷的衍生物。
由于薯蓣皂苷元A/B 环处5-烯3-醇结构很易转变成为4 烯 3 酮结构,故常用来作为甾体抗炎药(如地塞米松等)、性激素类药物(如黄体酮、睾酮等)、避孕药(如炔诺酮、炔雌醇等)的重要前体物质。
由于薯蓣属植物的根状茎中除含少量的薯蓣皂苷元外,还含有大量的淀粉、纤维素及其它成分,所以如何将它们进行有效分离并快速、准确的进行薯蓣皂苷元的含量测定,已成为薯蓣皂苷元生产加工单位和相关研究院所关注的焦点。
本文将就近年来薯蓣皂苷元测定方法研究进展作一概述,以便为更好的开发利用薯蓣属资源和加速甾体激素工业的发展提供技术理论参考。
1 薯蓣皂苷元的提取薯蓣属植物根状茎中的薯蓣皂苷是以皂苷元与糖基相结合的形式存在,所以需要将皂苷进行水解才能得到薯蓣皂苷元。
已报道的常用提取方法有:常规酸水解法、自然发酵法、酶酵解法及两相溶剂水解法。
1.1 常规酸水解法常规酸水解法通常是将含有薯蓣皂苷元的根状茎鲜样适量置于烘箱(60 )鼓风干燥至恒重后研磨成粉末,称取适量置圆底烧瓶内,加稀硫酸或盐酸于电热套中加热(80~90 )回流数小时,倾出、抽滤,并将滤渣洗至中性,在索氏抽提器中用石油醚回流进行提取数小时,浓缩回收,60 下真空干燥,可得薯蓣皂苷元粗提物。
穿山龙现代研究概况王宝庆;李学彬;田志发;孙凯云;邢桂菊;高文远【摘要】@@ 穿山龙为薯蓣科植物穿龙薯蓣(Dioscorea nipponica Makino.)的干燥根茎.味甘苦温,具有祛风湿,止痛,舒筋活血,止咳平喘祛痰功效.主治风湿性关节炎,筋骨麻木,大骨节病,跌扑损伤,慢性支气管炎、咳嗽气喘.民间多用其浸酒或煎服,为东北地区常用草药.穿山龙中含有薯蓣皂苷元,也是较好的合成甾体激素药的原料之一[1],现已成为医药工业原料.本文从7个方面综述现代研究进展.【期刊名称】《中国林副特产》【年(卷),期】2010(000)005【总页数】2页(P96-97)【作者】王宝庆;李学彬;田志发;孙凯云;邢桂菊;高文远【作者单位】天津大学药物科学与技术学院,天津,300072;牡丹江市药品检验所,黑龙江,牡丹江,157011;牡丹江市药品检验所,黑龙江,牡丹江,157011;牡丹江市药品检验所,黑龙江,牡丹江,157011;牡丹江市药品检验所,黑龙江,牡丹江,157011;牡丹江市药品检验所,黑龙江,牡丹江,157011;天津大学药物科学与技术学院,天津,300072【正文语种】中文穿山龙为薯蓣科植物穿龙薯蓣(Dioscorea nipponica Makino.)的干燥根茎。
味甘苦温,具有祛风湿,止痛,舒筋活血,止咳平喘祛痰功效。
主治风湿性关节炎,筋骨麻木,大骨节病,跌扑损伤,慢性支气管炎、咳嗽气喘。
民间多用其浸酒或煎服,为东北地区常用草药。
穿山龙中含有薯蓣皂苷元,也是较好的合成甾体激素药的原料之一[1],现已成为医药工业原料。
本文从7个方面综述现代研究进展。
1 生药学研究穿山龙在历代本草著作中无此药名,《植物名实图考》所载穿山龙非薯蓣科植物。
今考证《图经本草》中所指的成德军萆薢很可能就是这一种,因《名医别录》载“生真定山谷”,即今河北正定县;再从薯蓣科植物在我国的分布来看,我国黄河以北,除山药(Dioscorea opposita Thunb.)外,只有穿龙薯蓣(D.nipponica Miq.)一种。
穿山龙溶剂循环动态提取及醇沉工艺研究本文重点在于穿山龙提取工艺研究以及水提取浓缩液的醇沉工艺研究。
穿山龙是龙加通络胶囊主要药材之一,采用热浸提法,提取液减压浓缩后进行醇沉。
本文采用不同的试验设计及优化方案,以多指标分别对穿山龙提取及醇沉工艺进行评价,最终筛选出最佳提取工艺及醇沉工艺。
通过验证试验,确定了最佳工艺的稳定性。
主要研究内容如下:穿山龙提取工艺采用水循环动态提取工艺,以薯蓣皂苷含量为优选目标,最终确定工艺为薯蓣皂苷的最优工艺料液比1:5,提取时间为3.94h,回流速度为6ml/min,薯蓣皂苷的含量为7.576mg/g,干浸膏得率为
0.2145g/g。
采取乙醇循环动态提取工艺,以薯蓣皂苷含量为优选目标,优化结果为液料比7.6ml/g、回流时间4.7h、回流速度10.3ml/min,薯蓣皂苷含量为13.83mg/g,干浸膏得率为0.1849g/g。
以薯蓣皂苷转移率作为评价指标对药厂热浸提法、水循环动态提取工艺和乙醇循环动态提取工艺进行了比较,薯蓣皂苷转移率为药厂热浸提法19.76%,水循环动态提取工艺33.26%,乙醇循环动态提取工艺83.31%,得出乙醇循环动态提取穿山龙中薯蓣皂苷转移率最大。
本文对穿山龙浓缩液进行醇沉工艺研究,通过单因素试验,确定了不同因素对醇沉工艺的影响。
通过正交试验,以相对密度、醇浓度、醇沉浓缩液温度、静置温度等作为考察因素,以薯蓣皂苷转移率和总固体去除率作为评价指标,对醇沉工艺进行了优化,得到的最佳醇沉工艺为相对密度1.08,乙醇浓度70%,醇沉浓缩液温度30℃,静置温度20℃,薯蓣皂苷转移率83.77%,总固体去除率为34.67%。