2017-2018学年高二生物选修一课件：2-2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 精品

(2)实验室中目的菌株的筛选
①原理：人为提供有利于 目的菌株 生长的条件(包括营养、温度、pH等)，
同时 抑制或阻止 其他微生物生长。
②实例：从土壤中筛选能分解尿素的细菌。 ③方法：利用 选择 培养基进行微生物的筛选。
2.选择培养基 (1)概念：允许 特定 种类的微生物生长，同时 抑制或阻止 其他种类微生 物生长的培养基。 (2)举例：筛选土壤中分解尿素的细菌的选择培养基是以 尿素 为唯一氮源， 按物理性质归类为固体培养基。
蛋白胨培养基上的菌落数明显多于选择培养基上的菌落数，则说明选择
培养基的确起到了筛选能分解尿素的细菌的作用。
(2)如何设计对照实验验证所用的选择培养基没有受到污染？
答案 设置一个未涂布平板的能筛选分解尿素的细菌的选择培养基。
答案
归纳ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ总结
选择培养基的分类 (1)利用营养缺陷型选择培养基进行的选择培养：通过控制培养基的营养 成分，使营养缺陷型微生物不能正常生长。 (2)利用化学物质进行的选择培养：在完全培养基中加入某些化学物质， 利用加入的化学物质抑制某些微生物的生长，同时选择所需的微生物。 (3) 利用培养条件进行的选择培养：改变微生物的培养条件 ( 如高温、特 殊pH等)，筛选特定微生物。
(3)微生物的培养与观察 ①培养：根据不同微生物的需要，控制适宜的培养 温度 和培养时间。 ②观察 a.观察方法：每隔24 h统计一次菌落数目，最后选取菌落数目稳定时的记 录作为结果。 b.菌落的特征：包括菌落的 形状 、 大小 、隆起程度和 颜色 等。 (4)菌种鉴定 ①原理：细菌合成的 脲酶 将尿素分解成氨，使培养基的 碱性 增强。 ②方法：以尿素为唯一氮源的培养基中加入 酚红 指示剂， 培养某种细菌后， 若指示剂变 红 ，可初步鉴定该种细菌能够分解尿素。
(NH4)2SO4 KH2PO4 FeSO4 CaCl2 0.4 4.0 0.5 0.5
A.此培养基可用来培养自养型微生物
B.此表中的营养成分共有三类，即水、无机盐、氮源
C.若除去①，此培养基可培养圆褐固氮菌
D.培养基中若加入氨基酸，则它可充当碳源、氮源和生长因子
解析 答案
技巧链接 选择培养基的常见类型 (1)分离微生物所用的选择培养基一定是固体培养基，因为菌落只能在固 体培养基上形成。 (2)常见的选择培养基 ①加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌。 ②加入高浓度的食盐可得到金黄色葡萄球菌。 ③无氮源培养基可以分离固氮微生物。 ④以石油为唯一碳源的培养基，可以分离能消除石油污染的微生物。 ⑤将培养基放在高温环境中培养，可以分离耐高温的微生物。
专题2 微生物的培养与应用
第6课时
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
学习导航 1.通过分析具体培养基的配方，归纳选择培养基的选择作用，理解筛 选微生物的原理。 2.结合实验设计，分析微生物数量测定实验中产生偏差的原因及解决 措施，学会微生物的计数方法，并对培养结果进行分析和评价。 重难点击 1.研究培养基对微生物的选择作用，进行微生物数量的测定。 2.能利用选择培养基分离细菌，运用相关技术解决生产生活中有关微 生物的计数问题。
(2)分离分解尿素的细菌的选择培养基是如何进行选择的？
答案 该选择培养基的配方中，尿素是培养基中的唯一氮源，因此，只
有能够利用尿素的微生物才能够生长。 (3)为什么只有能分解尿素的微生物才能在该培养基上生长？
答案 分解尿素的微生物能合成脲酶，而脲酶可将尿素分解成氨，从而 为微生物提供氮源。
答案
2.设计对照实验 (1)如何设计对照实验验证该选择培养基的确筛选到了能分解尿素的细菌？ 答案 增设牛肉膏蛋白胨基础培养基并进行涂布平板操作，如果牛肉膏
拓展应用
1.下列有关微生物筛选的叙述中，不正确的是
A.用全营养牛肉膏蛋白胨培养基筛选大肠杆菌
B.用高NaCl的培养基筛选抗盐突变菌株
C.含酚红的尿素培养基筛选鉴别出分解尿素的菌株
D.利用高温条件筛选耐热的Taq细菌
解析
答案
2.下表是微生物培养基的成分。下列有关说法错误的是 编号 成分 含量/g ① ② ③ ④ ⑤ H2O 100 mL
(4)计算公式：每克样品中的菌株数＝(C÷V)×M，其中C代表某一稀释度下 平板上生长的 平均菌落数 ，V代表涂布平板时所用的 稀释液的体积(mL) ， M代表 稀释倍数 。 2.设置对照 (1)对照实验：是指除了 被测试条件 以外，其他条件都相同的实验。 (2)主要目的：排除实验组中 非测试因素 对实验结果的影响，提高实验结 果的可信度。例如，为了确认培养基是否被杂菌污染，需以不进行接种 的培养基培养作为空白对照。
问题探究
1.筛选分解尿素的细菌的选择培养基
下面是本课题使用的培养基的配方，请分析：
KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4· 7H2O 葡萄糖 尿素 琼脂 1.4 g 2.1 g 0.2 g 10.0 g 1.0 g 15.0 g
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL
(1)在培养基的配方中， 为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是什么物质？ 答案 碳源是葡萄糖，氮源是尿素。
内容索引
一、研究培养基对微生物的选择作用 二、进行微生物数量的测定 当堂检测
一、研究培养基对微生物的选择作用
基础梳理
1.筛选菌株
(1)自然界中目的菌株的筛选
①原理：根据目的菌株对 生存环境 的要求，到相应的环境中去寻找。 ②实例：能产生耐高温的Taq DNA聚合酶的 Taq细菌 就是从热泉中筛选 出来的。
3.实验操作流程 (1)土壤取样 ①取样原因：土壤有“微生物的 天然培养基 ”之称，同其他生物环境相比， 土壤中的微生物数量 最大 ，种类 最多 。 ②土壤要求：富含 有机质 ，pH接近 中性 且潮湿。 ③取样部位：距地表约 3～8 cm 的土壤层。 (2)样品稀释 ①稀释原因：样品的 稀释程度 直接影响平板上生长的 菌落数目 。 ②稀释标准：选用一定稀释范围的样品液进行培养，以保证获得菌落数 在 30～300 之间，便于计数。
二、进行微生物数量的测定
基础梳理
1.统计菌落数目 (1)方法： 活菌计数法、显微镜直接计数法 。 (2)统计依据：当样品的 稀释度 足够高时，培养基表面生长的一个菌落， 来源于样品稀释液中的一个 活菌 。通过统计平板上的菌落数，就能推测 出样品中大约含有多少活菌。 (3)操作 ①设置重复组，增强实验的说服力与准确性。 ②为保证结果准确，一般选择菌落数在 30～300 的平板进行计数。 ③统计的菌落数往往比活菌实际数目低 。