最新选修一2.2-土壤中分解尿素的细菌的分离与计数习题案

选修1专题2课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数（测）（满分60分，40分钟完成）班级姓名总分一、单选题（30分，每题3分）1.下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是（）A．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂、水B．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、琼脂、水C．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、尿素、琼脂、水D．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水【答案】A【解析】能合成脲酶的细菌才能分解尿素,选择的原则是只有能够利用尿素的微生物才能够生长。

该选择培养基应只含尿素一种氮源并能让该类细菌生长,需有碳源。

分离微生物要用固体培养基;分解尿素的细菌属于异养微生物,需要加葡萄糖作为碳源。

B无氮源、C无碳源,D中牛肉膏、蛋白胨可作为氮源。

答案是A。

2.分离土壤中分解尿素的细菌的实验操作中，对于获得纯化的尿素分解菌的单菌落影响最大的是（）A．制备浸出液的土壤取自土壤的表层B．涂布前涂布器未在酒精灯外焰上灼烧灭菌C．牛肉膏蛋白胨培养基中添加尿素作为氮源D．接种操作者的双手未用酒精棉进行消毒【答案】C【解析】土壤的表层含有细菌较少，但仍含有分解尿素的细菌，经过培养可以得到尿素分解菌，A错误；未灼烧灭菌的涂布器虽含有杂菌，但在以尿素为唯一氮源的培养基上不能生存，B 错误；分离土壤中分解尿素的细菌应以尿素为唯一氮源，牛肉膏蛋白胨培养基中含有氮，实验不能得到分解尿素细菌的单菌落，C正确；未用酒精棉进行消毒的双手，可能将杂菌带入培养基，但杂菌在以尿素为唯一氮源的培养基上不能生存，D错误。

3.可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是( )A．以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂B．以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂C．以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹Ⅲ试剂D．以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂【答案】A【解析】酚红指示剂只能用来检测尿素分解菌，故A正确；二苯胺试剂常用来进行DNA的鉴定，故B错误；苏丹Ⅲ试剂可以用来检测脂肪，故C错误；双缩脲试剂可以用来检测蛋白质，故D错误。

【优化设计】2018-2019学年高中生物专题2 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数课后习题（含解析）新人教版选修1 课时演练·促提升1.将硝化细菌接种到下列培养基中,其中可以长出硝化细菌菌落的是( )A.无氮培养基,试管密闭B.无氮培养基,试管口用棉塞塞住C.含氮培养基,试管密闭D.含氮培养基,试管口用棉塞塞住解析:硝化细菌需要氮源,因此培养硝化细菌需要含氮的培养基;硝化细菌是需氧型微生物,因此试管口用棉塞塞住以便于通气。

答案:D2.下表资料表明在各种培养基中细菌的生长,S、C、M为简单培养基;U、V、X、Y、Z代表加入培养基的不同物质。

该细菌不能合成( )培养基生长状态S、C、M -S、C、M+V+Z -S、C、M+U+Y +S、C、M+Z+X -S、C、M+V+Y +S、C、M+U+X -S、C、M+Y+Z +A.UB.VC.YD.Z解析:该细菌在简单培养基上不能生长,但只要在简单培养基中含有Y物质,细菌就能正常生长,因此该细菌无法合成Y物质。

答案:C3.下列方法可以鉴定出分解尿素的细菌的是( )A.以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂B.以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂C.以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹Ⅲ试剂D.以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂解析:分解尿素的细菌能分解尿素,产生氨,氨能使pH升高,酚红指示剂变红。

答案:A4.某同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234,那么每克样品中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1 mL)( )A.2.34×108B.2.34×109C.234D.23.4解析:根据计算方法“每克样品中的菌落数=(C÷V)×M”,则(234÷0.1)×106=2.34×109。

答案:B5.下列关于微生物分离和培养的叙述,错误的是( )A.微生物培养前,需对培养基进行消毒B.测定土壤样品中的细菌数目,常用菌落计数法C.分离土壤中不同的微生物,要采用不同的稀释度D.分离能分解尿素的细菌,要以尿素作为培养基中唯一的氮源解析:微生物培养前,需对培养基进行灭菌,而不是消毒;测定土壤样品中的细菌数目,常用菌落计数法而一般不用活菌计数;分离土壤中不同的微生物,要采用不同的稀释度以便能从中选择出菌落数在30~300的平板进行计数;分离能分解尿素的细菌,要以尿素作为培养基中唯一的氮源。

课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数班级姓名学号【学习目标】研究培养基对微生物的选择作用，进行微生物数量的测定。

【自主探究】一、课题背景1.尿素是一种重要的氮肥，农作物不能直接吸收利用，而是首先通过土壤中的细菌将尿素分解为，这是因为细菌能合成。

2.PCR（）是一种在体外将。

此项技术的自动化，要求使用耐高温的DNA聚合酶。

思考：怎样找耐高温的酶呢？3.实验室中微生物的筛选应用的原理是：人为提供有利于生长的条件（包括等），同时抑制或阻止其他微生物生长。

4. 生物适应一定环境，环境对生物具有选择作用。

所以通过配制选择培养基、控制培养条件等选择目的微生物。

在本课题使用的培养基配方中，为微生物的生长提供碳源的是，提供氮源的是，琼脂的作用是。

该培养基对微生物（具有，不具有）选择作用。

如果具有，其选择机制是。

5. 常用来统计样品中活菌数目的方法是。

即当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的。

通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。

为了保证结果准确，一般选择菌落数在的平板进行计数。

另外，也是测定微生物数量的常用方法。

6.比较教材中两位同学的操作方法，哪位同学的结果接近真实值？你认为这两位同学的实验需要改进呢？如需要，如何改进？7. 统计的菌落数比活菌的实际数目。

这是因为当两个或多个细胞在一起时，平板上观察到的只是菌落。

因此，统计结果一般用来表示。

8. 设置对照的主要目的是。

9. 对照实验是指除了的条件外，其他条件都的实验。

满足该条件的称为，未满足该条件的称为组。

请设计本实验的对照实验组：。

二、实验设计1.实验设计的内容包括，，以及等。

2.根据图示2－7填写以下实验流程：3 .土壤微生物主要分布在距地表cm的近性土壤中，约为细菌。

4.分离不同的微生物采用不同的稀释度，其原因是，其目的是保证获得的平板。

细菌稀释度为，放线菌稀释度为，真菌稀释度为。

5. 培养不同微生物往往需要不同培养温度。

选修1专题2课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数（练）1.下列关于分解尿素的细菌，说法正确的是（）A．以尿素作为唯一碳源B．能分解尿素的原因是能合成并分泌蛋白酶C．环境中含有大量的尿素诱导该细菌产生了分解尿素的特性D．以尿素为唯一氮源且添加了酸碱缓冲剂的培养基来培养该细菌后不会使酚红指示剂变红【答案】D【解析】由于只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源，缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，所以分离分解尿素的细菌时以尿素作为唯一氮源，A项错误；分解尿素的细菌能分解尿素的原因是能合成并分泌脲酶，B项错误；该细菌产生脲酶是受基因控制的，而不是环境中的尿素诱导的，C项错误；细菌合成的脲酶将尿素分解成的氨会使培养基的碱性增强，pH升高，所以在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养该细菌后会使酚红指示剂变红，但如果培养基中添加了酸碱缓冲剂，则不会使酚红指示剂变红，D项正确。

2.下列有关生物工程与技术的叙述不正确的是（）A．PCR技术可用于目的基因的获取B．选择单核居中期向单核靠边期过渡的花粉进行离体培养成功率高C．在以尿素为唯一碳源的培养基上长出的菌落一定是尿素分解菌D．“三北防护林”建设中，应遵循协调与平衡原理和物种多样性原理【答案】C【解析】PCR可以用于外源目的基因的大量扩增，故A正确。

在花粉选择进行离体培养时应选择单核靠边期的成功率高，故B正确。

在以尿素为唯一碳源的培养基上长出的菌落有可能是尿素分解菌也有可能是以氮气为主的细菌，还要加入酚红指示剂进行鉴别，故C错误。

“三北防护林”建设中，应遵循协调与平衡和物种多样性原理，故D正确。

3.分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是( )①加尿素②不加尿素③加琼脂④不加琼脂⑤加葡萄糖⑥不加葡萄糖⑦加硝酸盐⑧不加硝酸盐A．①③⑤⑦ B．①③⑤⑧ C．②④⑥⑧ D．①④⑥⑦【答案】B【解析】要分离分解尿素的细菌应以尿素为唯一氮源，故1需要2错误，故C错误。

课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1．研究培养基对微生物的选择作用。

2．进行微生物数量的测定。

一、研究思路1．筛选菌株尿素是一种重要的农业____肥，但不能直接被农作物吸收利用，只有当土壤中的细菌将尿素分解成____之后，才能被植物利用。

土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成______。

（1）实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于目的______生长的条件（包括营养、______、pH等），同时______或______其他微生物生长。

（2）选择培养基：在微生物学中，将允许________的微生物生长，同时______或______其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基。

2．统计菌落数目统计的菌落数往往比活菌的实际数目____。

这是因为当两个或多个细胞在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。

因此，统计结果一般用________来表示。

（2）____________也是测定微生物数量的常用方法。

（3）细菌的数目还可以通过______法来测定。

例如，测定饮用水中大肠杆菌的数目，可将________的水过滤后，将滤膜放到________培养基上培养，大肠杆菌的菌落呈现____色，可以根据培养基上________的数目，计算出水样中大肠杆菌的数量。

3．设置对照（1）设置对照的主要目的是排除实验组中__________对实验结果的影响，提高实验结果的________。

（2）对照实验是指除了________的条件以外，其他条件都______的实验，其作用是比照实验组，排除任何其他可能原因的干扰，证明确实是所测试的条件引起相应的结果。

二、实验设计实验设计包括对实验方案，所需仪器、材料，用具和药品，具体的________以及时间安排等的综合考虑和安排。

关于土壤中某样品细菌的分离与计数的实验操作步骤如下：1．土壤取样土壤中的微生物70%～90%是_____，绝大多数分布在距地表______ 的近____性土壤中。

课时训练5 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1.可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是( )。

A.以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂B.以尿素为唯一氮源的培养基中加二苯胺试剂C.以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹Ⅲ试剂D.以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂解析:细菌合成的脲酶可以催化尿素分解形成氨。

氨会使培养基的碱性增强,pH升高。

在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,培养某种细菌后,如果pH升高,指示剂变红,则说明该细菌能产生脲酶分解尿素。

答案:A2.关于微生物的培养,下列叙述错误的是( )。

A.细菌一般在30~37 ℃的温度下培养1~2 dB.放线菌一般在25~28 ℃的温度下培养5~7 dC.霉菌一般在25~28 ℃的温度下培养3~4 dD.不同种类的微生物,一般需要相同的培养温度和培养时间解析:不同种类的微生物,往往需要不同的培养温度和时间。

答案:D3.在培养基中加入尿素(唯一氮源),以分离出能分解尿素的细菌,这种加入尿素的培养基在功能上属于( )。

A.选择培养基B.固体培养基C.液体培养基D.半固体培养基解析:题中的培养基能分离出以尿素为唯一氮源的细菌,故从功能上讲是一种选择培养基。

答案:A4.需要在火焰旁操作的有( )。

①土壤取样②称取土壤③稀释土壤溶液④涂布平板⑤微生物的培养A.①②③④⑤B.②③④⑤C.③④⑤D.②③④解析:除了土壤取样和微生物的培养不便于在火焰旁进行外,其他均要在火焰旁进行,以防止杂菌污染。

答案:D5.以下关于分解尿素的细菌的说法,正确的是( )。

A.能分解尿素的原因是能合成分泌蛋白酶B.以尿素作为唯一的碳源C.环境中含有大量的尿素诱导该细菌产生了分解尿素的特性D.以尿素为唯一氮源且添加了酸碱缓冲剂的培养基培养该菌后不会使酚红指示剂变红解析:A项:酶具有专一性,分解尿素的细菌之所以能分解尿素是因为能合成分泌脲酶。

B项:该菌能以葡萄糖作为碳源。

C项:环境中含有大量的尿素对分解尿素的性状起了选择作用而非诱导作用。

土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1、如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀释示意图。

据图分析正确的是( )A．3号试管的稀释倍数为103倍B．5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7×109个C．5号试管中稀释液进行平板培养得到的菌落平均数恰为4号试管的10倍D．该方法和平板划线法都可对微生物进行准确计数2、下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是( )A. KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4．7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂、水B. KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4．7H2O、葡萄糖、琼脂、水C. KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4．7H2O、尿素、琼脂、水D. KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4．7H2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水3、如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验示意图。

据图分析下列叙述正确的是( )A.3号试管中样品的稀释倍数为103倍B.用4号试管中稀释液进行平板培养得到的菌落平均数约为5号试管的10倍C.5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7×108个D.该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要高4、如图为纤维单胞菌（能产生纤维素酶）的获取过程。

下列有关叙述错误的是( )A.①②③④培养基都应以纤维素为唯一碳源B.图中所用培养基灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌法C.④所用的接种方法可对培养的微生物进行计数D.可用刚果红染料鉴定，看菌落周围是否出现透明圈5、某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下。

将各种物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL，再经高温灭菌，制成固体培养基备用。

(1))，原因是________________________________。

(2)培养基常用________法灭菌，培养皿常用________法灭菌，待培养基冷却到________(填“20”、“30”、“40”或“50”) ℃左右时，在________附近倒平板，等平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，可以防止________________，造成污染。

A ．指示剂变蓝能认定该菌能分解尿素B ．对菌种进一步鉴定C ．筛选分解尿素的细菌D ．培养基中缺乏酚红作营养物质 大洼高中高三生物一轮复习习题案８、请分析回答下列有关生物技术实践方面的问题： (1)微生物培养基一般都含有：水和无机盐以及(2)在微生物接种过程中，试管口需要通过酒精灯火焰1～2次，其目的是 。

(3)分离分解尿素的微生物的实验流程包括：土壤取样、梯度稀释、样品涂布到 培养基上、挑 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数选修一第二章 选菌落。

（4）在无氧条件下，酵母菌进行酒精发酵，其反应方程式为：___ ______；在果醋 制作人 张洪芬 审核人 高三生物组 使用日期： 高三实验班 适用范围制作中，在缺少糖原，氧气充足时，其反应方程式为：___ ______ ９、根据有关微生物的知识，分析回答问题：1、在分解尿素菌的分离和鉴定中，对先后用到的两种培养基，叙述正确的是（ ）(1)当水体过于纯净时，硝化细菌会形成休眠体，这种休眠体被称为________。

A ．加入酚红指示剂作为选择培养基，再加入唯一碳源作为鉴别培养基(2)对于混有硝化细菌、蓝细菌和大肠杆菌的悬浮液，可利用选择培养基进行微生物筛选。

筛选硝化细．加入唯一氮源作为鉴别培养基，再加入酚红指示剂作为选择培养基B菌的培养基成分包括____________________(供选：葡萄糖、纤维素、牛肉膏、(NH) C ．加入唯一氮源作为选择培养基，再加入酚红指示剂作为鉴别培养基SO 、KNO 、无机3424盐、琼脂、伊红美蓝染料、HO)，制备培养基时，灭菌与调 pH 的先后顺序是____________________。

D ．加入酚红指示剂作为选择培养基，再加入唯一碳源作为鉴别培养基2(3)如利用上述培养基筛选大肠杆菌菌落，则应另外添加的成分是 __________________，菌落特征为２、某实验小组欲从被石油污染过的土壤中筛选出能分解石油的细菌，下列操作中错误的是（ ）________。

选修一第二章课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数制作人 张洪芬 审核人 高三生物组 适用范围 高三实验班 使用日期：1、在分解尿素菌的分离和鉴定中，对先后用到的两种培养基，叙述正确的是（ ） A ．加入酚红指示剂作为选择培养基，再加入唯一碳源作为鉴别培养基 B ．加入唯一氮源作为鉴别培养基，再加入酚红指示剂作为选择培养基 C ．加入唯一氮源作为选择培养基，再加入酚红指示剂作为鉴别培养基 D ．加入酚红指示剂作为选择培养基，再加入唯一碳源作为鉴别培养基２、某实验小组欲从被石油污染过的土壤中筛选出能分解石油的细菌，下列操作中错误的是（ ） A ．利用平板划线法可对细菌进行计数 B ．以石油为唯一碳源的培养基可用于筛选 C ．目的菌不能利用无机碳源合成有机物D ．稀释土壤时需在火焰旁的目的是防杂菌污染B ．甲培养基适于选择培养毛霉C ．乙培养基适于选择培养自养型自生固氮菌D ．乙培养基适于选择培养酵母菌４、下图是微生物平板划线示意图。

划线的顺序为1、2、3、4、5五个区域依次进行。

下列叙述正确的是（ ）A ．在五个区域中划线前后都要对接种环和培养基进行灭菌B ．划线操作时打开皿盖，划完立即盖上C ．接种时不能划破培养基，否则难以达到分离单菌落的目的D ．第1区和第5区的划线最终要相连接起来，以便比较前后的菌落数５、下列是对四种微生物的能源、碳源、氮源、新陈代谢类型的描述，正确的一组是（ ）６、下列有关微生物的实验室培养相关叙述，正确的是（ ）A ．对实验操作空间、操作者衣着和手，进行灭菌B ．培养基配制好应先灭菌，然后立即倒平板C ．接种操作应在酒精灯火焰附近进行D ．培养细菌时，需将pH 调至酸性７、对分解尿素细菌的初步筛选中，加入酚红指示剂的目的是（ ） A ．指示剂变蓝能认定该菌能分解尿素 B ．对菌种进一步鉴定C ．筛选分解尿素的细菌D ．培养基中缺乏酚红作营养物质 ８、请分析回答下列有关生物技术实践方面的问题：(1)微生物培养基一般都含有：水和无机盐以及(2)在微生物接种过程中，试管口需要通过酒精灯火焰1～2次，其目的是 。

课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数题型一选择培养基的作用及配制方法1．从混杂的微生物群体中选择优良的单一纯种的方法不包括( )A．根据微生物对碳源需求的差别，使用含不同碳源的培养基B．根据微生物对特殊营养物质的需求，在培养基中增减不同的特殊营养物质C．根据微生物对抗生素敏感性的差异，在培养基中加入不同的抗生素D．根据微生物耐热性的不同，利用高温、高压消灭不需要的杂菌答案 D解析利用高温、高压消灭不需要的杂菌的同时也会将需要筛选的微生物杀死，因此不能通过该方法得到目的微生物，D错误。

2．某混合样品中微生物R含量极少，要得到大量的R，比较理想的方法是采用( ) A．天然培养基B．稀释涂布平板法C．利用适合R生长但同时抑制或阻止其他种类微生物生长的选择培养基D．用显微镜直接观察、寻找，再培养答案 C解析在培养过程中可以通过选择该微生物能生长繁殖而抑制其他微生物生长繁殖的培养基，使微生物R能在该培养基上成为优势菌种而大量繁殖，C正确。

3．可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是( )A．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂B．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂C．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹Ⅲ试剂D．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂答案 A解析分解尿素的细菌与其他细菌的重要区别是分解尿素的细菌能以尿素为氮源，该细菌合成的脲酶将尿素分解成了氨，氨会使培养基的碱性增强，pH升高。

在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养某种细菌后，如果pH升高，指示剂将变红，我们可以准确地鉴定出该种细菌能够分解尿素。

题型二菌落数目的统计方法4．下列不属于菌种计数方法的是( )A．平板划线法B．稀释涂布平板法C．镜检法D．滤膜法解析平板划线法可用于菌种的纯化和分离，不能用于计数，A错误；稀释涂布平板法常用来统计样品中活菌数目，镜检法也是测定微生物数量的常用方法，B、C正确；滤膜法常用于检测水样中大肠杆菌数目，通常是将已知体积的水样过滤后，将滤膜放到伊红美蓝培养基上培养，根据培养基上黑色菌落的数目，计算出水样中大肠杆菌数量，D正确。

专题2 微生物的培养与应用课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养细菌后，指示剂将()A．变蓝色B．变红色C．变黑色D．变棕色[解析]细菌合成的脲酶将尿素分解成了氨，氨会使培养基的碱性增强，pH升高，加入酚红指示剂将变红。

[答案]B2．下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是()A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板B．取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL，分别涂布于各组平板上C．将实验组和对照组平板倒置，37 ℃恒温培养24～48 hD．确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数[解析]检测细菌总数，用蒸馏水配制培养基，常用高压蒸汽灭菌法灭菌后，取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL，分别涂布于各组平板上，将实验组和对照组放置在适宜条件下培养，在确定对照组无菌后，选择菌落在30～300的平板为代表进行计数，D错误；A是培养基的灭菌方法，B设置了一系列对照实验，C是细菌的培养方法。

[答案]D3．用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数时，通过统计平板上的菌落数就能推测出样品中的活菌数。

原因是()A．平板上的一个菌落就是一个细菌B．菌落中的细菌数是固定的C．此时的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌D．此方法统计的菌落数一定与活菌的实际数相同[解析]用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数时，平板上的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌，但偶尔也能来自两个细菌，所以此方法统计的菌落数可能与活菌的实际数不相同。

[答案]C4．分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是()①加尿素②不加尿素③加琼脂④不加琼脂⑤加葡萄糖⑥不加葡萄糖⑦加硝酸盐⑧不加硝酸盐A．①③⑤⑦B．②④⑥⑧C．①③⑤⑧D．①④⑥⑦[解析]要分离土壤中分解尿素的细菌，培养基中尿素应是唯一的氮源，不能加硝酸盐；在固体培养基上形成菌落，要加琼脂作凝固剂；分解尿素的细菌是异养生物，要加有机碳源(如葡萄糖)。

2019-2020年高中生物 2.2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数导学案新人教版选修1学习目标：1.简述尿素在生产实践中的作用及分解尿素的细菌的作用。

2.研究培养基对微生物的选择作用。

3.进行土壤中分解尿素细菌的分离与计数。

4.简述活菌计数技术的应用。

预学案一、理论基础1.筛选菌株(1)实验室中微生物筛选的原理:人为提供有利于①生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时②或③其他微生物生长。

(2)选择培养基:在微生物学中,将允许④种类的微生物生长,同时⑤或⑥其他种类微生物生长的培养基,称作选择培养基。

2.统计菌落数目:常用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的数目。

当样品的⑦足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个⑧。

通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。

为了保证结果准确,一般选择菌落数在⑨的平板进行计数。

此外,测定微生物数量的常用方法还有⑩直接计数。

3.设置对照:设置对照的主要目的是排除实验组中对实验结果的影响,提高实验结果的。

例如为了排除培养基是否被杂菌污染了,需有。

二、实验设计土壤中某样品细菌的分离与计数实验的操作步骤1.取样:从肥沃、湿润的土壤中取样。

先铲去表层土3 cm左右,再取样。

2.制备:准备牛肉膏蛋白胨培养基和选择培养基,将菌液稀释相同的倍数,在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目,因此,牛肉膏蛋白胨培养基可以作为对照,用来判断选择培养基是否起到了选择作用。

3.微生物的与观察:将10 g土样加入盛有90 mL无菌生理盐水的锥形瓶中(体积为250 mL),充分摇匀,吸取上清液,转移至盛有的生理盐水的无菌大试管中,依次等比稀释至107稀释度,并按照由107~103稀释度的顺序分别吸取进行平板涂布操作。

每个稀释度下需要3个选择培养基、1个牛肉膏蛋白胨培养基。

将涂布好的培养皿放在30 ℃温度下培养,及时观察和记录。

挑选选择培养基中不同形态的菌落接入含培养基的斜面中,观察能否产生颜色反应。

课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数(时间：30分钟满分：50分)考查知识点及角度难度及题号基础中档稍难选择培养基的制备 1 8微生物的分离3、4 6微生物的计数2、5 7一、选择题(每小题4分，共20分)1．在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时又能抑制或者阻止其他种类微生物生长的培养基称做()。

A．鉴别培养基 B．加富培养基C．选择培养基 D．基础培养基解析选择培养基可选择目标微生物，同时抑制或杀死其他微生物。

答案 C2．平板划线法和稀释涂布平板法是纯化微生物的两种常用方法，下列描述正确的是()。

A．都要将菌液进行一系列的梯度稀释B．平板划线法是将不同稀释度的菌液通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作C．稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液倒入液体培养基进行培养D．都会在培养基表面形成单个的菌落解析平板划线法不需要进行梯度稀释，稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液滴加到固体培养基的表面。

平板划线法和稀释涂布平板法都能在培养基表面形成单个菌落。

答案 D3．本课题以土壤中的细菌为研究对象，要达到的目的是()。

①从土壤中分离出能够分解尿素的细菌②从土壤中分离出能够分解氨的细菌③统计每克土壤样品中究竟含有多少分解尿素的细菌④统计所取土壤样品中究竟含有多少分解尿素的细菌A．①③B．②④C．①②D．③④解析从土壤中分离分解尿素的细菌并对其计数，统计的是每克土壤样品中含多少分解尿素的细菌，用公式“每克样品中菌落数＝(C/V)×M”进行推测，其中，C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积/mL，M代表稀释倍数。

答案 A4．下列关于土壤取样的叙述，错误的是()。

A．土壤取样，应选取肥沃、湿润的土壤B．先铲去表层土3～8 cm左右，再取样C．取样用的小铁铲和信封在使用前不用灭菌D．应在火焰旁称取土壤解析土壤取样过程中，为防止杂菌污染，取样用的小铁铲和信封在使用前必须灭菌。

选修1专题2课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数（练）1.在分解尿素菌的分离和鉴定中，对先后用到的两种培养基，叙述正确的是（）A. 加入酚红指示剂作为选择培养基，再加入唯一碳源作为鉴别培养基B. 加入唯一氮源作为选择培养基，再加入酚红指示剂作为鉴别培养基C. 加入唯一氮源作为鉴别培养基，再加入酚红指示剂作为选择培养基D. 加入唯一碳源作为选择培养基，再加入酚红指示剂作为鉴别培养基2.测定土壤中细菌的数量一般选104、105和106倍的稀释液进行平板培养；而真菌的数量一般选用102、103和104倍稀释，其原因是（）A. 细菌个体小，真菌个体大B. 细菌易稀释，真菌不易稀释C. 细菌在土壤中的含量比真菌高D. 随机的，没有原因3.分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是( )①加尿素②不加尿素③加琼脂④不加琼脂⑤加葡萄糖⑥不加葡萄糖⑦加硝酸盐⑧不加硝酸盐A．①③⑤⑦ B．①③⑤⑧ C．②④⑥⑧ D．①④⑥⑦4.从土壤中分离以尿素为氮源的细菌，下列实验操作不正确的（）A.将土壤用无菌水稀释，制备10﹣3～1O﹣5土壤稀释液B.将不同浓度的土壤稀释液涂布于不同平板上C.用加入刚果红指示剂的选择培养基筛选分解尿素的细菌D.从周围出现红色环带的菌落中挑取能够分泌脲酶的菌株5.下图表示从土壤中分离能降解酚类化合物对羟基苯甲酸的微生物的实验过程。

下列与该实验相关内容的叙述中不正确．．．的是（）A．实验中所用的培养基①②③④均属于选择培养基B．通过图中I、Ⅱ过程目的是增加目标微生物的数量C．统计⑤处培养基中的菌落数并不一定代表接种到④上的活菌数D．在⑤处培养基上能生长的一定是能降解对羟基苯甲酸的微生物6.下列叙述不正确的是 ( )A．因为土壤中各类微生物的数量不同，所以，为获得不同类型的微生物，要按不同的稀释倍数进行分离B．测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围不同C．如果得到了多个菌落数目在30—300的平板，则说明稀释操作比较成功D．牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数目明显少于选择培养基上的数目，说明选择培养基已筛选出一些细菌菌落7.选择培养基是根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求或对一些物理、化学抗性而设计的培养基。

2021年高中生物 2.2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数同步作业（含解析）新人教版选修1一、单项选择1. 在做土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验时，甲组实验用只含尿素作氮源的培养基，乙组实验用另加入硝酸盐的培养基，其他成分都相同，在相同条件下操作、培养与观察，则乙组实验属于（）。

A．空白对照 B．标准对照C．相互对照 D．条件对照2. 下列有关微生物培养与应用的说法正确的是（）A. 分离分解尿素的细菌时，尿素是培养基中唯一的氮源和碳源B. 大肠杆菌的纯化培养过程包括培养基的配置和纯化大肠杆菌两个阶段C．平板划线接种法中划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连D．稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液倒入液体培养基进行培养3. 若将酵母菌的线粒体DNA进行诱变，使其线粒体DNA不再具有自我复制能力，再将此突变的酵母菌接种在含有葡萄糖的培养基上培养，可观察到的现象是（）A．因为子代中没有线粒体，所以无菌落形成B．酵母菌仍能进行有机物的氧化分解，所以有小菌落形成C．因为线粒体DNA对真核细胞不重要，所以有正常大小的菌落形成D．因为酵母菌对糖类的彻底氧化分解可不依赖线粒体，所以有正常大小的菌落形成4. 下列关于生物技术实践的说法正确的是（）A．蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较大的移动速度较慢B．细菌能在液体培养基中以有丝分裂方式扩增C．自养微生物能在缺少有机碳源的培养基上生长D．参与果酒和果醋发酵的微生物都含有多种细胞器5. 下列关于微生物的培养和应用的叙述，错误的是（）A．通过消毒不能杀死物体内所有的微生物B．根据培养皿中菌落数可以准确计算样品中含有的活菌实际数目C．平板划线法不可用于微生物的计数D．使用过的培养基及培养物必须经过灭菌后才能丢弃6. 鉴定分解纤维素的微生物要用刚果红染色，加入刚果红的操作可在（）①制备培养基时②梯度稀释时③倒平板时④涂布时⑤培养基上长出菌落时A．①③ B．②⑤ C．③⑤ D．④⑤7. 测定饮用水中大肠杆菌的数目可用( )A.选择培养基B.鉴别培养基C.基础培养基D.加富培养基8. 下列几个图形中（数字代表划线区域顺序，箭头代表划线方向），正确的平板划线操作是（）A B C D9. 消毒和灭菌是两个不同的概念，灭菌是指彻底杀灭微生物使其永远丧失生长繁殖的能力。

生物ⅰ人教新资料2.2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数练习1、在微生物学中，将同意特定种类的微生物生长，同时又能抑制或者阻止其他种类微生物生长的培养基称做()。

A、鉴别培养基B、加富培养基C、选择培养基D、基础培养基解析选择培养基可选择目标微生物，同时抑制或杀死其他微生物。

答案C2、用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数时，通过统计平板上的菌落数就能推测出样品中的活菌数。

缘故是()。

A、平板上的一个菌落确实是一个细菌B、菌落中的细菌数是固定的C、如今的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌D、此方法统计的菌落数一定与活菌的实际数相同解析用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数时，平板上的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌，但间或也能来自两个细菌，因此此方法统计的菌落数可能与活菌的实际数不相同。

答案C3、本课题以土壤中的细菌为研究对象，要达到的目的是()。

①从土壤中分离出能够分解尿素的细菌②从土壤中分离出能够分解氨的细菌③统计每克土壤样品中毕竟含有多少分解尿素的细菌④统计所取土壤样品中毕竟含有多少分解尿素的细菌A、①③B、②④C、①②D、③④解析从土壤中分离分解尿素的细菌并对其计数，统计的是每克土壤样品中含多少分解尿素的细菌，用公式“每克样品中菌落数＝(C/V)×M”进行推测，其中，C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积/mL，M代表稀释倍数。

答案A4、以下关于土壤取样的表达，错误的选项是()。

A、土壤取样，应选取肥沃、湿润的土壤B、先铲去表层土3～8cm左右，再取样C、取样用的小铁铲和信封在使用前不用灭菌D、应在火焰旁称取土壤解析土壤取样过程中，为防止杂菌污染，取样用的小铁铲和信封在使用前必须灭菌。

答案C5、用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，正确的选项是()。

A、涂布了一个平板，统计的菌落数是230B、涂布了两个平板，统计的菌落数是215和260，取平均值238C、涂布了三个平板，统计的菌落数分别是21、212和256，取平均值163D、涂布了三个平板，统计的菌落数分别是210、240和250，取平均值233解析在设计实验时，一定要涂布至少3个平板，作为重复组，才能增强实验的说服力与准确性，因此A、B不正确。