小鼠肾脏发育中iNOS及iNOSmRNA的表达

诱导型一氧化氮合酶(iNOS)与寄生虫感染转载自中国科技信息网一氧化氮(NO)在体内由L－精氨酸在一氧化氮合成酶(NOS)的催化下生成。

它是一种重要的信使分子, 参与血管、气道平滑肌的调节,神经递质的传递,细胞杀伤, 肿瘤细胞的溶解及内分泌激素的释放过程, 与许多疾病的发生、发展密切相关; 既在机体多个系统多种细胞中具有广泛的生理功能，又可能参与多种疾病的发生过程。

NOS是合成NO的唯一限速酶，寄生虫感染时，动物机体内由其诱发产生各种细胞因子，细胞因子激发一氧化氮合酶基因,其转录产生iNOS (inducible nitricoxide synthase)mRNA,由iNOSmRNA指导一氧化氮合酶生成。

本文就NOS的类型和iNOS的表达及NO的生成和NO对寄生虫的作用以及影响NO抗寄生虫感染的因素做一简要综述。

1 NOS的类型和iNOS的表达及NO的生成许多研究表明,NO 是一种重要的细胞内信使和新的神经递质, 又是效应分子[1]。

它介导并调节多种生理机制, 在呼吸系统、神经系统、炎症和免疫反应中起着重要的作用, 但也导致病理生理状态。

由于NO 可在数种哺乳动物细胞内产生, 在体内又具有广泛的生理作用, 因而这种化学结构如此简单的小分子被美国《Science》杂志评为1992 年年度分子[2]。

NOS 根据所在组织类型，在细胞中的分布，效应方式，组织表达，对Ca 2＋/钙调蛋白的依赖性及对不同激动剂的反应，可分为以下3种类型[3]: I型:神经型NOS （ncNOS )，首先于脑组织中发现，所产生的NO为神经递质，也可能作为神经和血管之间的间介物。

为结构表达。

Ⅱ型:可诱导型NOS (iNOS)，主要存在于单核/巨噬细胞系统、肝脏、平滑肌、神经胶质细胞中，另外在内皮细胞、神经元中也有分布。

为非结构表达。

Ⅲ型:上皮型NOS(ecNOS)，存在于血管内皮细胞，与ncNOS类似，为结构表达，对Ca2＋/钙调蛋白依赖，分布于胞浆中。

中国糖尿病杂志2021 年5 月第29 卷第5 期Chin J Diabetes, M a y2021，Vol. 29，No. 5•371 ••糖尿病基础研究•血管紧张素（1-7)对糖尿病大鼠胰岛素分泌的影响及机制探讨李晶晶王瑞娇程海华刘雅琳杨锦慧何军华【摘要】目的探讨血管紧张素（l-7)[A n g-(l-7)]对S T Z诱导的D M大鼠In s分泌的影响及作用机制。

方法随机选取10只W istar大鼠为正常对照（N C)组，另取24只予高脂饮食喂养联合S T Z注射构建D M模型，造模成功的20只大鼠随机分为D M组、A ng~(l-7)组[Ang~(l-7) 300 fig/(kg-d)皮下注射]，每组各10只。

干预8周后检测F PG、FIns、血管紧张素II (A n g I I)水平，计算胰岛素抵抗指数(H O M A-IR);观察胰岛细胞病理变化;检测诱导型一氧化氮合酶(iN O S)、胰十二指肠同源框因子1(P d x l)和GluT2 m R N A及蛋白表达。

结果与N C组比较，D M组F P G、HOMA IR、Ang I I、iNOS m R N A及蛋白表达升高（P< 0. 05 ),体重、Fins、Pdx 1m R N A和蛋白、GluT2 m R N A和蛋白表达降低(尸<0.05)。

与D M组比较，Ang~(l_7)组FIns、Pdxl m R N A和蛋白、GluT2 m R N A和蛋白表达升高(尸<0.05),??0、只0\1八-11^、^\1屯11、丨1^051111^^\和蛋白表达降低(尸<0.05)。

结论A ng-(l-7)可能通过调节iN O S/P d x l/G ln T2通路促进In s分泌，改善胰岛功能及糖代谢。

【关键词】血管紧张素（1-7);糖尿病；大鼠；胰岛素分泌；诱导型一氧化氮合酶/胰十二指肠同源框因子l/G luT2doi: 10. 3969/j. issn. 1006-6187. 2021. 05.010Effect of angiotensin-(1-7) on insulin secretion in diabetic rats and its mechanism LI Jingjing, W ANGRuijiao, CHENG H aihua, et al. Department o f Endocrinology, The Second Hospital o f Shanxi MedicalUniversity, Taiyuan 030001, ChinaCorresponding author: H E Junhua，E m ail••130****************【Abstract】Objective To investigate the effect of angiotensin-(1~7) [Ang-(1~7)] on insulin secretionin a rat model of streptozotocin (S T Z)-induced diabetes mellitus (D M) and its mechanism. Methods 10Wistar rats were randomly selected as normal control group (N C) and fed with a standard diet. The other 24rats were fed a high-fat diet combined with intraperitoneal injection of STZ to establish diabetic model. 20successfully modeled rats were randomly divided into DM group and A n g-(1_7) group [ (A n g-(1-7) 300\ig/(k g • d) ]. After 8 weeks intervention, levels of FPG, fasting insulin (Fins) and serum angiotensin II(Ang II) and homeostasis model assessment of insulin resistance (H O M A-IR) were compared. The isletmorphology was observed with HE staining. The mRNA and protein expressions of inducible N O S(iN O S),pancreatic duodenal homeobox-1 (P d x l) and glucose transporter - 2 (G luT2) were measured. ResultsCompared with NC group, the levels of FPG, HOM A-IR, Ang II and the expression of iNOS mRNA andprotein increased (P<0. 05), while body-weight, F in s, Pdxl mRNA and protein, GluT2 mRNA and proteinexpressions decreased in DM group (P<0. 05). Compared with DM group, F in s, Pdxl mRNA and protein,GluT2 mRNA and protein expressions increased(P<0.05), and F P G, HOM A-IR, Ang II concentration andthe expression of iNOS mRNA and protein decreased in Ang - (1~7) group (F<0.05). Conclusion基金项目：山西省自然科学基金（201901D111374);山西省回国留学人员科研资助项目（2017-117);山西省卫生健康委科研课题 (2019041)作者单位:〇3〇0〇1太原，山西医科大学第二医院内分泌科通信作者.•何军华,Email:130****************•372•中国糖尿病杂志 2021年 5 月第 29 卷第 5 期 Chin J Diabetes，M a y2021，Vol. 29，No. 5A n g-(l~7)m a y promote the secretion of insulin by regulating the iN O S/P d x l/G lu T2pathway, therebyimproving islet function and glucose metabolism.【Key words】Angiotensin-( 1~7) ；Diabetes mellitus ； Rats ； Insulin secretion ； iN O S/Pdxl/G luT2研究[13]表明，DM状态时交感神经兴奋，胰岛 局部RAS被异常激活，产生过多血管紧张素II (Ang II)，其与血管紧张素II 1型受体(AT,R)结 合，引起胰岛炎症反应、氧化应激、组织纤维化和 胰岛P细胞凋亡，影响胰岛功能。

网络出版时间：２０２１－５－２８１０：１２　网络出版地址：ｈｔｔｐｓ：／／ｋｎｓ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｅｔａｉｌ／３４．１０８６．Ｒ．２０２１０５２７．１４５８．０２０．ｈｔｍｌ消退素Ｄ１通过甲酰肽受体２调控小胶质细胞极化改善大鼠脑缺血／再灌注损伤刘玉莲，巫芳华，杨开令，周　颖，高宇容，刘　微（广州中医药大学基础医学院，广东广州　５１０００６）收稿日期：２０２１－０２－２０，修回日期：２０２１－０４－０５基金项目：国家自然科学基金资助项目（Ｎｏ８１６７３７７２）；广州中医药大学“青年英才培养工程”项目（ＮｏＱＮＹＣ２０１７０１０２）作者简介：刘玉莲（１９９４－），女，硕士生，研究方向：中医药防治心脑血管疾病，Ｅ ｍａｉｌ：１４２４８９５８３９＠ｑｑ．ｃｏｍ；刘　微（１９８０－），女，博士，教授，研究方向：中医药防治心脑血管疾病，通讯作者，Ｅ ｍａｉｌ：ｗｅｉｌｉｕ１９８０＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－１９７８．２０２１．０６．０１０文献标志码：Ａ文章编号：１００１－１９７８（２０２１）０６－０７９１－０７中国图书分类号：Ｒ ３３２；Ｒ３２２ ８１；Ｒ３４１；Ｒ３６４ ５；Ｒ７４３ ３１摘要：目的　探讨消退素Ｄ１（ｒｅｓｏｌｖｉｎＤ１，ＲｖＤ１）是否通过甲酰肽受体２（ｆｏｒｍｙｌｐｅｐｔｉｄｅｒｅｃｅｐｔｏｒ２，ＦＰＲ２）调节小胶质细胞极化，减轻脑缺血／再灌注后的炎症损伤。

方法　运用线栓法建立大脑中动脉栓塞（ＭＣＡＯ）模型，将造模后的大鼠随机分为模型组（ＭＣＡＯ），ＲｖＤ１组和ＲｖＤ１联合ＦＰＲ２抑制剂Ｂｏｃ ２（ＲｖＤ１＋Ｂｏｃ ２）组，另设假手术（Ｓｈａｍ）对照组。

脑缺血后２４ｈ，运用ＴＴＣ染色法检测脑梗死体积和免疫荧光法检测髓过氧化物酶（ＭＰＯ），免疫荧光双染法进行标记ＦＰＲ２／Ｉｂａ １、ＣＤ１６／Ｉｂａ １和ＣＤ２０６／Ｉｂａ １的表达，ＲＴ ｑＰＣＲ法检测Ｍ１型释放的ＴＮＦ α、ｉＮＯＳ、ＩＬ １β和Ｍ２型释放的Ａｒｇ １、ＴＧＦ β１、ＩＬ １０ｍＲＮＡ的表达。

优 质 论 文硕博学位论文1／123优秀毕业论文学校代码 10285学号 20114021008博士学位论文学术学位 □专业学位论文题目 Corin mRNA 和蛋白在人肾小管中的表达及意义：一种可能的自分泌调控钠稳态的新机制题目英文翻译 Expression of Corin mRNA and Protein in Human Renal SegmentsA Possible Autocrine Mechanism for Sodium Homeostasis研究生姓名董 亮 指导教师姓名 吴庆宇专业名称 医学生物化学研究方向 心血管蛋白酶所在院系 医学部基础医学与生物科学学院论文提交日期 2016年5月优秀毕业论文优秀毕业论文II优秀毕业论文优秀毕业论文Corin mRNA 和蛋白在人肾小管中的表达及意义 中文摘要 ICorin mRNA 和蛋白在人肾小管中的表达及意义一种可能的自分泌调控钠稳态的新机制中文摘要研究目的：Corin 是一种II 型跨膜丝氨酸蛋白酶，其主要生物学功能是活化心房利钠肽（atrial natriuretic peptide ，ANP ）。

在心肌细胞中，corin 将心房利钠肽前体（pro-atrial natriuretic peptide ，pro-ANP ）转化为有活性的ANP 。

ANP 经血液到达外周組织，与靶细胞上的A 型心房利钠肽受体（atrial natriuretic peptide receptor-A ，NPR-A ）结合，提高细胞内的cGMP 水平，激活cGMP-依赖性蛋白激酶。

在肾脏，ANP 能提高肾小球滤过率，减少水钠重吸收，抑制肾素的释放；在外周血管，ANP 有舒张血管平滑肌的作用。

因此，ANP 能降低血容量，维持水钠平衡。

Corin 基因敲除小鼠表现为自发性高血压，而且在高盐饮食状态下高血压进一步加重。

在罹患高血压和心肌肥厚的非洲裔美国人中，有研究发现corin 基因的单核苷酸多态性；中国高血压病人中也发现有corin 基因的突变。

Journal of Comparative Chemistry 比较化学, 2018, 2(4), 125-133Published Online December 2018 in Hans. /journal/cchttps:///10.12677/cc.2018.24015Progress in Pharmacological Effectsof BerberineMenglei Fu1,2, Youle Qu1, Wenxiang Hu2*1Food and Drug College, Zhejiang Ocean University, Zhoushan Zhejiang2Jingdong Xianghu Microwave Chemistry Union Laboratory, Beijing Excalibur Space Military Academy of Medical Sciences, BeijingReceived: Sep. 20th, 2018; accepted: Oct. 16th, 2018; published: Oct. 23rd, 2018AbstractBerberine (Ber), also known as berberine, is oquinoline alkaloid extracted from the roots and skin of Coptis chinensis, which has a strong heat-clearing and detoxifying effect. In recent years, studies have shown that berberine has not only remarkable effects in antibacterial and an-ti-inflammatory aspects, but also has high clinical application value for diseases such as cancer, diabetes and cardiovascular diseases. This article reviews the pharmacological studies of ber-berine.KeywordsBerberine, Pharmacological Effects, Research Progress小檗碱药理作用研究进展付梦蕾1,2，曲有乐1，胡文祥2*1浙江海洋大学食品与医药学院，浙江舟山2北京神剑天军医学科学院京东祥鹄微波化学联合实验室，北京收稿日期：2018年9月20日；录用日期：2018年10月16日；发布日期：2018年10月23日摘要小檗碱(berberine, Ber)，是从毛莨科黄连属植物黄连的根和皮中提取的异喹啉类生物碱，有较强的清热*通讯作者。

西格列汀对2型糖尿病大鼠肾组织中NO／iNOS水平的影响王栋栋;魏彤;何素梅;张冠英;尹弟;魏群利【摘要】Objective To investigate effect of sitagliptin ( SIT) on the expression of inducible nitric oxide synthase ( iNOS) and nitric oxide ( NO) in type 2 diabetic nephropathy.Methods 30 rats were randomly divided into normal group (NC group), diabetic nephropathy group (DN group) and sitagliptin treatment group (SIT group).The type 2 diabetes mellitus (T2DM) rats were induced by a high fat diet (HFD) plus repeated low dose streptozocin (STZ) injections.At the end of the 12th week intreatment,there were 6 rats in each group, the NO level was determined by Griess method.mRNA levels of iNOS RT-PCR was detect ed by.The expression of iNOS protein was detected by western blot and immunohistochemical method. ResuIts Compared with the NC group, the expression of iNOS and NO of DN group increased significantly.However, compared with DN group, the expression of iNOS and NO of SIT group decreased significantly.ConcIusion SIT can decrease the expression of iNOS and NO, which implies SIT may protect the type 2 diabetic kidney.%目的：探讨西格列汀（ sitagliptin，SIT）对2型糖尿病大鼠肾组织中一氧化氮（ nitric oxide，NO）含量、诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase，iNOS）表达的影响。

海洋天然产物及其抗炎活性的研究进展赵博闻;刘雨晴;吴海歌【摘要】Inflammation is the defense reaction in response to stimulationsof various injury factors in the living tissues with vascular system,which plays an important role in the disease development,such asarthritis,asthma,Alzheimer's disease,etc.Drugs for inflammation diseases mainly include non-steroidal,steroidal anti-inflammatory drugs and biologicals,pitifully restricted in a way due to the certain side effects ofnon-steroidal and steroidal anti-inflammatory drugs,and the fancy price of biologicals.Recently,with the development of marine resources,a lot of natural products with anti-inflammatory activity have been extracted from marine organisms,grown in the complicated ocean,extremely rich in natural products.Those are classified asterpenoids,sterols,polysaccharides,alkaloids,fatty acid,protein and the others.Here,the research progress of the marine natural products and their derivatives with anti-inflammatory activity in recent years were reviewed,in order to provide some reference for developing efficient safety anti-inflammatory drugs.%炎症是具有血管系统的活体组织应对刺激所发生的防御反应,在疾病的发生发展中具有重要作用,如关节炎、哮喘和阿尔茨海默病等.目前常用的抗炎药主要有非甾体类抗炎药、甾体类抗炎药和生物制剂,但由于甾体类和非甾体类抗炎药常伴有副作用问题、生物制剂价格较昂贵而受到一定限制.海洋是生物的重要栖息地,蕴藏着极其丰富的天然产物,随着近年来对海洋资源的开发,人们从海洋生物中提取出了许多具有抗炎活性的天然产物,如萜类、甾醇类、多糖、生物碱、脂肪酸和蛋白质等,本文综述了近年来具有抗炎活性的海洋天然产物及其衍生物的研究进展,以期对开发高效安全抗炎药物提供一定帮助.【期刊名称】《天然产物研究与开发》【年(卷),期】2017(029)007【总页数】8页(P1248-1255)【关键词】炎症;抗炎;天然产物;海洋生物【作者】赵博闻;刘雨晴;吴海歌【作者单位】大连大学生命科学与技术学院辽宁省糖脂代谢研究重点实验室,大连116622;大连大学生命科学与技术学院辽宁省糖脂代谢研究重点实验室,大连116622;大连大学生命科学与技术学院辽宁省糖脂代谢研究重点实验室,大连116622【正文语种】中文【中图分类】Q71炎症是哺乳动物中具有血管系统的活体组织抵抗内外界感染和刺激的防御性反应，在免疫反应中具有重要作用。

Ass1在不同组织中的表达定位、调节及生理病理功能阐述-生理学论文-生物学论文——文章均为WORD文档，下载后可直接编辑使用亦可打印——精氨琥珀酸合酶（argininosuccinate synthase 1,Ass1）能够催化瓜氨酸和天冬氨酸形成精氨琥珀酸，在精氨琥珀酸裂解酶（argininosuccinate lyase,Asl）的作用下，生成精氨酸。

精氨酸通过精氨酸酶水解生成尿素和鸟氨酸，鸟氨酸既可以被鸟氨酸脱羧酶代谢，生成多胺；也可以在鸟氨酸转氨酶作用下重新生成瓜氨酸，形成尿素循环；另外，精氨酸还可以通过一氧化氮合酶（nitric oxide synthase,NOS）作用生成一氧化氮（nitric oxide,NO）和瓜氨酸，形成瓜氨酸---一氧化氮循环。

因此，Ass1 是生成精氨酸、尿素和NO 的关键限速酶。

根据精氨酸的代谢途径不同，Ass1 在组织中表达水平也是不同的。

本篇综述主要就Ass1 在不同组织中的表达定位、表达调节及生理和病理功能进行阐述。

一、Ass1 的生化结构Ass1 为编码精氨琥珀酸合酶的基因，位于第9号染色体。

Ass1 由同源四聚体构成，包含412 个氨基残基。

比较cDNA 序列发现，Ass1 在人、牛、大鼠和小鼠中高度同源。

它能催化瓜氨酸与天冬氨酸在ATP 的作用下生成精氨琥珀酸。

人的Ass1 结构包含三个主要部分：核苷酸结合部分、合成酶部分及多聚化的螺旋 C 端。

对瓜氨酸血症的病人研究发现，Ass1 有多种突变位点。

大多数位点突变后会破坏它们与周围单体形成二聚体或使它们与周围单体的作用缺失，导致构象改变和电子的重新分布。

此外，一些突变位点是直接与底物结合（如Gln40（Leu）和Arg127（Gln））,并很可能对催化活性起直接作用。

还有一些位点突变（如Val345（Gly））,使得一些和瓜氨酸相互作用的区域和大部分寡聚化区域缺失，使蛋白不能正确的折叠。

二、Ass1 的表达定位Ass1 早期发现于肝细胞中。

葛根素的抗炎作用及其对神经系统疾病影响的研究进展吴国庆1,李志刚1,杨佳一1,汪子栋1,张 洋2,林禹宏2摘要 目前研究表明炎症作用与神经系统疾病的产生密不可分,且通过调节炎性因子治疗神经系统疾病的文献报道逐年增加,葛根素是传统中药葛根的提取物,属于异黄酮类活性成分,其药理作用十分广泛,具有抗炎㊁抗氧化㊁抗凋亡㊁调节胰岛细胞㊁调节骨细胞㊁改善神经功能等作用,在神经系统疾病㊁心血管疾病㊁糖尿病㊁骨质疏松等疾病当中表现出独特的优势㊂本研究主要从葛根素的抗炎作用及其对神经系统疾病的治疗方面进行综述,以期为实验和临床用药提供新的思路和方法㊂关键词 神经系统疾病;阿尔茨海默病;葛根;葛根素;抗炎作用;神经保护d o i :10.12102/j.i s s n .1672-1349.2023.10.013 葛根(radix pueraria )是豆科植物葛属野葛的干燥根,首见于‘神农本草经“,记载其具有主消渴,身大热,呕吐,诸痹,起阴气,解诸毒,主下利的作用,中医药学经过千百年的发展,古代医家对葛根的认识远不止于此,历代文献中记载的葛根功效主要包括凉血止血㊁清热止呕㊁解酒毒醒酒㊁降逆平喘㊁清热解毒㊁解郁除烦㊁生肌敛疮㊁活血化瘀㊁通行经络㊁缓解腰痛和颈肩痛等㊂葛根素(puerarin ,PR )是葛根的重要提取物之一,是‘中华人民共和国药典“评价中药葛根饮片质量的重要指标,也是葛根发挥其有效作用的重要成分,近年来葛根素的作用备受关注,已经有大量研究表明其具有抗炎及神经系统保护作用㊂1 葛根素的抗炎作用铁死亡是一种新型的程序性细胞死亡,在脓毒症引起的肺损伤中起重要作用,有研究建立了脂多糖(LPS )诱导人肺泡上皮细胞A549形成脓毒症肺损伤模型,并检测到模型细胞中肿瘤坏死因子-α(TNF -α)㊁白细胞介素(IL )-8㊁IL -1β浓度显著增加,研究人员应用酶联免疫吸附实验(ELISA )法测定葛根素对LPS 诱导的A549细胞炎性细胞因子TNF -α㊁IL -8㊁IL -1β的影响,发现随着葛根素应用浓度的增加,TNF -α㊁IL -8㊁IL -1β的表达水平显著降低[1]㊂葛根素通过调节肾素-血管紧张素系统和核因子-κB (NF -κB )信号通路在火药烟雾诱导的大鼠急性肺损伤中发挥抗炎作用,有效降低肺损伤中IL -6㊁IL -1β㊁IL -17A 和TNF -α的水平[2]㊂ 心肌梗死(myocardialinfarction ,MI )是由于冠状基金项目 国家自然科学基金面上项目(No.81973938);国家级大学生创新创业训练计划一般项目(No.202210228054);黑龙江中医药大学大学生创新创业训练计划项目(No.X202110228003)作者单位 1.北京中医药大学(北京100029);2.黑龙江中医药大学通讯作者 李志刚,E -mail :*****************引用信息 吴国庆,李志刚,杨佳一,等.葛根素的抗炎作用及其对神经系统疾病影响的研究进展[J ].中西医结合心脑血管病杂志,2023,21(10):1807-1810.动脉阻塞,心肌细胞持续缺氧缺血,导致心肌细胞坏死的严重危害生命健康的疾病[3]㊂心肌梗死的病理状态中存在炎性细胞浸润[4],有研究表明,葛根素联合丹参酮ⅡA 阻断炎性细胞释放,调节炎性细胞因子[IL -1β㊁IL -6㊁IL -10和诱导型一氧化氮合酶(iNOS )]的表达,抑制炎症早期M1巨噬细胞的表达,增加心肌缺血小鼠M2巨噬细胞的表达㊂此外,丹参酮ⅡA 和葛根素联合使用可通过降低Toll 样受体4(TLR4)蛋白表达和促进CCAAT/增强剂结合蛋白-β蛋白表达来抑制炎症,以改善心肌梗死的炎症病理[5-6]㊂Liu 等[7]将40只健康成年Wistar 大鼠随机分为4组:假烧伤组㊁烧伤组㊁烧伤+葛根素组㊁葛根素组,来探究葛根素对烧伤心肌的保护作用,发现烧伤组血清IL -1β㊁TNF -α和IL -6水平明显高于假烧伤组,而烧伤+葛根素组的炎性因子明显低于烧伤组㊂单侧输尿管梗阻(UUO )介导的肾损伤在组织纤维化发展过程中出现持续的细胞死亡和炎性细胞浸润,葛根素能够通过调节NF -κB p65/信号转导和转录激活因子3(STAT3)通路显著抑制UUO 小鼠肾脏炎性因子IL -1β㊁单核细胞趋化蛋白-1(MCP -1)和IL -6的表达水平,有效抑制UUO 小鼠的炎性因子募集[8]㊂炎症在急性肝损伤的发病中起重要作用,研究人员为探究葛根素通过抑制炎症反应缓解肝损伤的作用,使用LPS (0.01μg/mL ,0.10μg/mL ,1.00μg/mL ,10.00μg/mL ,24h )在L -02细胞中建立了肝损伤模型,结果显示,LPS 可增强IL -1β㊁TNF -α和IL -6水平,而葛根素可降低IL -1β㊁TNF -α和IL -6水平,发挥护肝作用[9-10]㊂Yang 等[11]给骨关节炎(OA )小鼠模型喂食葛根素以评价葛根素在体内对骨关节炎的治疗作用,结果表明,葛根素能够抑制IL -1β处理软骨细胞诱导的炎症介质,还可以抑制IL -1β处理的软骨细胞中的细胞外基质(ECM )降解㊂髋膝关节的人工关节置换在骨科领域取得了成功,但问题也随之而来,植入材料的表面会产生磨损颗粒,这些磨损颗粒会激活免疫系统和炎症反应,这些反应导致了破骨细胞的募集和功能的增强,打破了成骨细胞和破骨细胞的平衡,出现骨溶解,从而导致人工关节固定不牢,发生松动的情况,而葛根素能够抑制破骨细胞的生成,促进成骨细胞产生,还可以抑制炎症反应减轻骨溶解[11]㊂葛根素在由炎症参与或导致的多系统疾病中发挥抗炎作用,能够对TNF-α㊁IL-8㊁IL-1β㊁IL-6㊁IL-17A㊁IL-10㊁iNOS和MCP-1等炎性因子起抑制作用,但葛根素的优势不仅仅在于抗炎,而是通过直接或者间接的抗炎参与系统组织损伤的恢复,作用位点十分广泛㊂2葛根素对神经系统疾病的影响有研究表明葛根素具有抗炎㊁抗氧化㊁抗肿瘤㊁保肝的作用,对阿尔茨海默病(AD)㊁帕金森病㊁脑缺血等神经系统疾病具有良好的治疗效果[12]㊂2.1AD郭珂一等[13]将Aβarc果蝇随机分为正常对照组㊁模型组㊁葛根素干预组(0.10mmol/L㊁0.20mmol/L㊁0.24mmol/L),对果蝇爬管能力及果蝇寿命㊁果蝇脑组织中淀粉样蛋白β(Aβ)蛋白表达(ELISA法)及果蝇脑组织中Aβ斑块面积(免疫荧光法)进行检测,发现0.20 mmol/L葛根素处理组果蝇爬管能力最佳,0.20mmol/L 葛根素干预组果蝇的中位生存期显著高于AD模型造成寿命缩短的果蝇组,0.20mmol/L葛根素干预组果蝇脑组织中Aβ表达水平显著低于模型组,且脑组织中Aβ斑块面积占比显著低于模型组(P<0.05)㊂马冬雪等[14]关于淫羊藿㊁黄芪㊁葛根有效组分复方铁调素调控淀粉样蛋白前体蛋白(APP)水解关键酶增进AD学习记忆的机制研究发现,通过上调肝脏铁调素基因(HAMP)的表达,促进APP水解关键酶解聚素样金属蛋白酶10(ADAM10)和解聚素样金属蛋白酶17 (ADAM17)的表达,抑制APPβ-位点裂解酶-1(BACE1)的表达,从而减少Aβ的生成,能够治疗AD㊂庞广福等[15]将80只6月龄SD大鼠采用D-半乳糖联合亚硝酸钠造模的AD大鼠随机分为对照组㊁模型组㊁葛根素治疗组和葛根素+乌圆补血口服液治疗组,通过测定血清及脑匀浆相关指标[超氧阴离子自由基㊁丙二醛(MDA)㊁谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)㊁超氧化物歧化酶(SOD)㊁乙酰胆碱酯酶(AChE)]发现,与对照组相比,治疗组血清和脑匀浆中GSH-Px和SOD活力明显升高㊁O2-浓度降低,脑匀浆的AChE活力和MDA含量明显降低(P<0.01),而且病理改变得到很好的改善,得出了小剂量的葛根素联合乌圆补血口服液对阿尔茨海默病的治疗有效㊂Liu等[16]通过计算机方法筛选葛根素对AD的潜在治疗作用,并通过Aβ-肽诱导的AD大鼠模型证实,葛根素具有穿透血脑屏障的潜力,在与AChE㊁环氧合酶2(COX-2)和Caspase-3的分子对接和动力学模拟中葛根素的作用效果具有高稳定性㊂体内实验表明,葛根素能够抑制AChE活性,使抗氧化防御物质活性恢复至正常水平,降低脑内炎性因子和凋亡基因的表达,尤其是下调COX-2和Caspase-3的表达[16]㊂硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)的表达在AD神经元的发育过程中增加,且TXNIP与TXNIP-硫氧还蛋白复合物分离,TXNIP-NOD样受体蛋白3(NLRP3)复合物组装ASC和pro-Caspase-1形成NLRP3炎性体,从而引发AD炎症和细胞凋亡的研究采用CB-dock分子对接探索21种天然类黄酮和酚类是否靶向TXNIP,结果显示,葛根素等药物能够有效抑制TXNIP,从而减轻AD中枢炎症,抑制细胞凋亡[17]㊂然而葛根素改善AD的作用途径不止于此,有研究使用氯化铝(AlCl3)破坏健康雄性Wistar大鼠神经系统,使其产生学习和记忆障碍(这种处理方法被广泛应用于AD等认知障碍性疾病的实验造模),结果显示,黄酮类药物处理组大鼠相比于AlCl3毒性组在Morris水迷宫实验目标象限的游泳时间和穿越平台的频率增加(P<0.05);经AlCl3处理后大鼠海马神经元大量凋亡,而经过黄酮类药物作用之后观察染色的组织切片发现其几乎没有凋亡的神经元,有效证明了葛根素等黄酮类药物能有效改善大脑海马区神经元凋亡的病理情况;葛根素组显著降低了大鼠海马凋亡相关基因mRNA㊁大鼠海马凋亡相关蛋白(Bcl-2蛋白)和自噬相关蛋白(Bax蛋白)的表达[18]㊂以上研究表明葛根素在治疗AD中表现出了独特的作用效果,为其成为一种治疗AD的新药物提供了理论和实验基础㊂同为黄酮类物质的芦丁㊁水飞蓟素也表现出治疗AD的疗效,说明挖掘中草药中黄酮类活性成分对治疗AD具有重要意义㊂2.2帕金森病神经系统疾病是目前全球疾病导致残疾的主要原因之一,而帕金森病又是神经系统疾病中增长最快的,受人口老龄化的影响,预计到2040年,将达到1200万例以上,如果加上其他致病因素,帕金森病病人将达到1700万例以上,虽然帕金森病不具有传染性,但是其大流行趋势还是引起了科研人员和临床医生的担忧[19]㊂那么寻找有效的方法治疗现存的病人以及阻止帕金森病大流行具有重要意义㊂有研究评估了葛根素在体外和体内对帕金森病模型的多巴胺(DA)细胞的增殖和分化作用,在体外,不同浓度葛根素处理1周后,β-微管蛋白(TUJ1)㊁酪氨酸羟化酶(TH)和多巴胺转运体(DAT)蛋白及mRNA表达和多巴胺释放显著增加㊂在体内,使用细胞替代治疗方法,移植葛根素处理的多巴胺产生细胞后,移植后第2周帕金森病症状明显改善;更多的移植细胞存活并沿注射线迁移到更广泛的区域;更多的移植细胞增殖并分化为Th细胞;在6周的观察期间,纹状体中检测到更多的多巴胺,而帕金森病多是由多巴胺缺乏所导致的,研究证明葛根素可促进多巴胺神经元存活㊁增殖和分化,有效缓解帕金森病[20]㊂Singh等[21]发现葛根素能够激活磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)通路,防止1-甲基-4-苯基碘化吡啶诱导的帕金森病模型中多巴胺神经元死亡,阻断p53的积累以及通过p53介导的Puma㊁Bax和Caspase-3依赖性细胞凋亡防止1-甲基-4-苯基吡啶离子诱导的细胞死亡㊂2.3缺血性脑卒中缺血性脑卒中已经成为全球第二大死亡原因[22],对大脑神经元的损害是不可逆转的,近年来,关于葛根素治疗脑缺血性神经损伤的报道逐渐增多,葛根素的多种作用(抗氧化应激㊁抗炎㊁抗神经细胞凋亡㊁调控自噬等)可从多途径改善脑缺血导致的认知障碍和神经细胞损伤[23]㊂有研究从PI3K/Akt1/糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)信号通路探索葛根素对脑缺血模型大鼠的运动和认知缺陷以及海马神经元损伤的减轻作用,使用开放和封闭场测试以及Morris水迷宫实验对大鼠进行行为学检测,结果表明葛根素减弱了缺血的影响,从而改善了运动活动和认知行为的缺陷,通过观察染色后的脑组织切片发现葛根素预处理组的皮质和海马组织中的死亡神经元细胞数量显著减少,且葛根素预处理显著增强了Akt1(Ser473)㊁GSK-3β磷酸化,髓样细胞白血病-1(MCL-1)积累增加,阻断凋亡蛋白Caspase-3的活化[24]㊂黄亚光等[25]将40只雄性SD大鼠随机分为假手术组㊁模型组㊁50mg/kg葛根素组㊁100mg/kg葛根素组4组,线栓法制备大鼠大脑中动脉栓塞模型,缺血1.5h再灌注24h后进行神经功能评估和腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)-苏氨酸蛋白激酶-失调51样激酶1(Ulk1)信号通路相关蛋白检测,结果表明葛根素能有效调控AMPK-mTOR-Ulk1信号通路抑制自噬的过度发生,从而减轻脑缺血再灌注损伤的发生㊂2.4其他神经系统损伤非动脉炎性前部缺血性视神经病变(NAION)是老年人中最常见的急性视神经病变形式,NAION是以急性㊁无痛㊁视力丧失㊁视盘肿胀导致视盘萎缩为主要临床症状[26],然而对于NAION 并没有十分有效的治疗方法,因诸多研究表明葛根具有抗炎和神经保护作用,所以研究人员使用前部缺血性视神经病变(rAION)大鼠模型,观察葛根素对rAION 大鼠的作用,为NAION的治疗寻找有效的治疗方法,研究结果显示,葛根素可减少rAION急性期的视乳头水肿,葛根素抑制了巨噬细胞到视神经组织中浸润,此外降低了促炎细胞因子的表达并诱导了抗炎细胞因子的表达,以及在rAION模型中维持Akt1活化并诱导转录因子CCAAT增强子结合蛋白β(C/EBPβ)表达[27]㊂有研究使用高脂饮食(HFD)慢性不可预见性温和应激(CUMS)诱导的抑郁样大鼠模型探讨葛根素抗抑郁的作用机制,与HFD/CUMS组相比,辛伐他汀+氟西汀或葛根素治疗拮抗了海马组织和血浆中IL-6㊁TNF-α和IL-10的异常蛋白表达(P<0.05),与HFD/CUMS 组相比,接受氟西汀㊁辛伐他汀㊁辛伐他汀+氟西汀或葛根素(30mg/kg㊁60mg/kg和120mg/kg)治疗的大鼠TLR4阳性细胞数减少至70.35%㊁37.78%㊁30.36%㊁65.20%㊁29.64%和17.02%(P<0.01)㊂且辛伐他汀㊁辛伐他汀+氟西汀或葛根素(30mg/kg㊁60mg/kg和120 mg/kg)组大鼠海马区的TLR4水平显著降低(P< 0.05),葛根素还可以改善海马组织中的异常脂质代谢,说明葛根可通过修复TLR4诱导的炎症损伤和磷脂代谢紊乱来缓解高脂饮食和慢性不可预测的轻度压力引起的抑郁样行为[28]㊂蛛网膜下腔出血导致许多脑功能障碍,研究团队基于以往葛根素保护神经系统的相关研究试图探索葛根素对蛛网膜下腔出血神经损伤的恢复作用,葛根素可有效缓解脑水肿,减轻了小鼠的神经功能缺损,减少了血脑屏障(BBB)的破坏;蛋白免疫印迹测定发现葛根素可逆转Bcl-2/Bax表达比例并保护SOD2活性,减轻蛛网膜下腔出血小鼠的神经功能缺损[29]㊂3小结随着研究的不断深入,葛根素的药理作用逐渐被了解,葛根素作用于多系统疾病发挥抗炎作用从而改善其因TNF㊁IL等增加所导致的炎症反应介导的相关损伤㊂在神经系统疾病中葛根素既能够治疗中枢神经系统疾病又能够治疗外周神经系统疾病[30],表现出抑制神经系统炎症反应㊁调控多个神经损伤通路㊁减轻凋亡因子表达㊁调节相关蛋白的表达等功效㊂值得注意的是,同样作为黄酮类的中草药成分芦丁㊁水飞蓟素,以及同属多酚类物质的黄芩素㊁白藜芦醇㊁木犀草素㊁姜黄素等都具有神经系统保护作用,这为拓宽中药的功效以及将中药主要有效成分作为疾病治疗的潜在药物提供了研究基础和思路㊂参考文献:[1]XU B Y,WANG H D,CHEN Z.Puerarin inhibits ferroptosis andinflammation of lung injury caused by sepsis in LPS induced lungepithelial cells[J].Frontiers in Pediatrics,2021,9:706327.[2]ZHANG F,W ANG Y,LIU P P,et al.Puerarin exhibits antiinflammatoryproperties in gunpowder smog-induced acute lung injury in ratsvia regulation of the renin-angiotensin system and the NF-κBsignaling pathway[J].Experimental and Therapeutic 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