凝血酶原时间(PT)测定
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凝血试验指标包括以下几项:
1. 凝血酶原时间(PT):正常参考值通常为11-14秒,一般超过正常值上限3秒及以上则异常。
主要用于检
查外源性凝血系统的过筛试验,也是监测口服抗凝剂用量的首选指标。
2. 部分活化凝血酶原时间(APTT):正常值通常为25-37秒,此值增高常见于血浆因子水平降低,如血友
病A患者。
数值降低代表患者处于一种高凝状态,如凝血因子活性增高等。
3. 纤维蛋白原(FIB):即凝血因子Ⅰ,其正常范围是2-4g/L。
增高多见于急性心肌梗死、重症肝炎、肝硬
化、白血病的患者。
降低则可见于纤维蛋白原偏低的情况。
4. 凝血酶时间(TT):正常参考值一般在12-16秒内,数值增高多见于DIC纤溶亢进期、先天性凝血因子缺
乏、使用肝素等抗凝剂的情况。
此外,纤维蛋白降解产物(FDP)、抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)等也是凝血试验的重要指标。
这些指标的检测有助于医生诊断血液性疾病、肝脏疾病等,或在用药过程中对患者的情况进行监测,具有重要的临床意义。
凝血酶原时间测定凝血酶原时间(prothrombin time,PT)测定是外源凝血系统常用的筛选试验之一,它可反映凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ及Ⅰ的活性。
(一)检验原理凝固法。
于受检血浆中加入过量的组织凝血活酶和Ca2+,使凝血酶原转变为凝血酶,后者使纤维蛋白原转变为纤维蛋白并使受检血浆凝固,血浆凝固所需的时间即为凝血酶原时间。
(二)检验方法学1.试剂(1)人脑或兔脑浸出液。
(2)0.025mol/L CaCl2。
2.标本采集与制备于硅化或塑料试管内加入0.109mol/L枸橼酸钠溶液0.2ml,然后加入受检全血1.8ml (1∶9抗凝)充分混匀,1500r/min离心10分钟,以此制备乏血小板血浆。
3.标本检验取玻璃小试管1支,加入血浆和组织凝血活酶试剂各0.1ml,37℃温育30秒,加入0.025mol/L氯化钠溶液0.1ml,立即启动秒表,不断轻轻倾斜试管,记录液体停止流动所需的时间,重复上述步骤2次,取2次结果的平均值,并以正常参比血浆(20份正常人混合血浆)作为对照。
(三)方法学评价1.未按离心要求导致受检血浆中血小板增多使凝血酶原时间假性缩短。
2.标本溶血,因红细胞中含有促凝成分,可使凝血酶原时间假性缩短;脂血可导致结果观察困难,故也影响检验结果的准确性。
(四)质量保证1.正常对照因每次使用的组织凝血活酶(兔脑、人脑、胎盘、肺组织等浸出液)的活性不尽相同,且每次检验的条件也各异,故每天均需作正常对照。
2.检验温度水浴温度应恒定在36~38℃,温度过高或过低均可使凝血酶原时间延长。
3.检验周期应在采血后4小时内完成检测,否则可使凝血酶原时间假性延长。
4.调整抗凝剂比例当血细胞比容小于20%或大于50%时,抗凝剂与血液的比例应按下式调整:抗凝剂量(ml)=(100-HCT)×采血量(ml)×0.00185。
(五)参考范围男性:11~13.7秒;女性:11~14.3秒。
受检者的测定值较正常对照值延长超过3秒才有临床病理意义。
凝血酶原时间测定的临床意义
凝血酶原时间(PT)是一种常见的凝血功能检查方法,用于评估凝血系统的功能和评估凝血时间的延长。
PT主要通过测量凝血因子
Ⅰ(纤维蛋白原)、凝血因子Ⅱ(凝血酶原)、凝血因子Ⅴ、凝血因子Ⅶ和凝血因子Ⅹ等的活性来进行。
PT的临床意义如下:
1. 评估出血风险:凝血酶原时间的延长可能意味着凝血因子的
活性降低或缺乏,这可能会增加出血的风险。
PT的测定可用于评估
出血性疾病患者的凝血功能状态,以及手术前评估患者的手术安全性。
2. 监测抗凝治疗:某些药物(如华法林)可以抑制凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ和Ⅹ的合成,从而延长PT。
通过定期测定患者的PT,可以监
测抗凝治疗的效果,调整药物的剂量,以避免血液过度稀释或血栓形成的风险。
3. 评估肝功能:肝脏合成凝血因子是正常凝血功能的关键,因
此PT是评估肝功能的重要指标之一。
肝脏疾病可以导致凝血因子合
成减少,从而导致PT延长。
通过测定PT,可以评估肝脏的凝血功能状态,判断肝脏疾病的严重程度。
4. 诊断凝血因子缺乏症:PT可以帮助鉴别凝血因子缺乏症的类型和严重程度。
不同凝血因子缺乏症的PT延长程度不同,通过检测PT,可以初步判断缺乏的凝血因子类型,进而指导进一步的诊断和治疗。
需要注意的是,PT是一项常规的凝血功能检查方法,但它仅仅
反映凝血系统中少数几种凝血因子的活性,无法全面评估凝血功能的状态。
因此,在临床实践中,通常还需要结合其他凝血功能检查项目,如活化部分凝血活酶时间(APTT)和血小板计数等,来全面评估凝血功能的状态。
凝血酶原时间(PT)测定应注意的几个问题近年来,血栓止血检验在出血性疾病的诊断、术前检查和抗凝治疗检测中得到了广泛应用。
仪器的自动化大大提高了检测效率,降低了系统误差,使检验结果的精密度和准确度大大提高。
凝血酶原时间(PT)测定就是这其中的最重要的一个项目。
在日常检验中我们发现该项目的检验还存在一些问题,本文从实验室从以下几个方面加以讨论。
1检验的标准化由于凝血活酶试剂活性的差异以及报告方式的不同,抗凝治疗的患者在不同实验室得到的PT往往不具有可比性,不能用于抗凝治疗药物的调整。
为此,1977年世界卫生组织将人脑来源的凝血活酶作为一级国际参考品(IRP)来校准凝血活酶试剂。
并将PT以INR的形式表示,INR=(PT/MNPT)ISI,其中ISI为凝血活酶的国际敏感度指数,MNPT为正常人凝血酶原时间的几何均数,这种校准方式大幅提高了手工检测时不同试剂之间的检测标准化。
INR的方式提高了实验室质量控制的有效性和口服抗凝治疗的安全性,在各大临床指南中都可以发现以INR为监测目标的诊治措施。
今天,我们必须明确的是INR概念和校准方式的提出是基于手工方法的,当自动化凝血仪被普及使用之后,INR概念的内涵发生了更为复杂的改变。
仪器测试原理与手工法显著不同,对凝血活酶ISI以至INR产生较大的影响而且程度不确定,机械和终点判定等因素破坏了INR体系原有的可靠性和精密度。
据文献报道,同一厂家的相同机型对INR的影响都有显著差异,仪器校正显得十分必要。
必须明确:INR是WHO利用IRP标定凝血活酶试剂后,手工测定PT时优化报告的一种方法和理念,这时可以减少室间差异及提高报告的可比性。
凝血活酶校准时要求使用参考品和试管倾斜方法判定结果,然而,将商品化凝血活酶在自动化凝血仪上检测标本时,原理发生了改变,这种校准方法的基础已经不复存在了。
这时我们校准的不仅仅是凝血活酶,而是包括凝血活酶和检测技术(仪器)在内的整个系统。
凝血酶原时间(PT)测定(分析仪器法)1实验原理:光电磁珠法测试杯两侧的有一组驱动线圈,它们产生恒定的交替电磁场,使测试杯内特制的去磁小钢珠保持等幅振荡运动。
凝血激活剂加入后,随着纤维蛋白的产生增多,血浆的粘稠度增加,小钢珠的运动振幅逐渐减弱,仪器根据另一组测量线圈感应到小钢珠运动的变化,当运动幅度衰减到50%时确定凝固终点。
2 标本采集2.12.23.831长时间456.6.16.2 ,室温保存7.7.17.27.37.4 仪器技术参数:7.4.1 速度:最快检测速度350测试/小时,组合检测约140测试/小时7.4.2 试剂位:28个,具冷藏功能。
7.4.3 样本位:80个,可自动连续添加。
7.5 仪器校准程序:7.5.1 校准频率:当方法改变,试剂厂家或试剂型号改变,仪器维修影响测定结果等情况时,必须进行校准。
7.5.2 校准操作:设置标准曲线分析(由仪器提供商指定工程师执行)8. 操作步骤:8.1 检查前准备:8.1.1 清空废液瓶,清空反应杯抛弃槽。
8.1.2 添加足够反应杯(不能超出警告线)。
8.1.3 添加清洁液试剂,清洗用蒸馏水等。
8.2 开机先开打印机再开主机,开机后仪器自检,约15分钟,屏幕上方“Not Ready”变为“Ready”,表示仪器预热完成,进入系统准备工作状态,可进行测定。
8.31.2.目PT345.8.4按8.38.5 按“8.68.6.1 用蘸有清洗液的纱布或棉签擦拭加样针和试剂的外表面。
8.6.2 清空废液瓶,和已使用过的反应杯,检查清洗液是否充足。
8.6.3 检查预温及测量通道内是否有掉落的钢珠,如果有请清除。
8.6.4 仪器连续工作24小时后需要关机1次。
9.检验结果的判断与分析:9.1 仪器测定PT的线性范围在5-120秒,测定完成后仪器显示PT秒数、PT活动度、INR值等参数。
若不能对参数进行正确计算,将出现下列信息:﹡﹡﹡.﹡出现错误,不能得到分析数据ˉˉˉ.ˉ不能计算参数+++.+数值超出线性范围.9.2 仪器设定PT参考范围在9-13秒,如果得不到一个正常数值,在数据的左侧将出现下列标记:﹡出现错误信息< 数据低于可报告的低限> 数据高于可报告的高限10. 质量控制:每批样本同时测定两个浓度水平(高值和正常值)的质控品,以2S为警告限,3S为失控限,1111.111.2 PT11.3 PT、11.41212.112.2成结果变异。
血凝实验原理
血凝实验是一种常用的血液凝固功能测试方法,通过测定血液中的凝血因子活性和凝血酶原时间来评估机体血液凝固功能的状态。
实验原理主要包括以下几个方面:
1. 凝血过程:当血管发生损伤时,凝血因子会依次激活,形成血小板聚集和纤维蛋白聚集,最终形成血栓。
2. 血栓形成过程:凝血因子活化后,会生成凝血酶酶解纤维蛋白原,将其转化为纤维蛋白,形成血栓。
3. 凝血酶原时间(PT)测定:该指标是衡量机体外系凝血功能状态的常用参数。
PT测定主要包括两个阶段:原始凝血因子活化和共同凝血酶酶原的形成。
在实验中,通过添加常规的凝血试剂和钙离子来模拟凝血过程,测量血液在一定时间内凝固的程度,得到PT的结果。
4. 凝血酶时间(TT)测定:该指标用于评估凝血酶活性。
在实验中,通过加入甘露醇或其他抗凝剂来阻断凝血因子活化,然后观察血液在一定时间内是否凝固,从而得到TT的结果。
5. 部分凝血活酶时间(APTT)测定:该指标用于评估机体内源性凝血途径功能。
在实验中,通过添加磷脂质激活剂和凝血因子活化剂来激活血液内部的凝血因子活性,并加入凝血试剂和钙离子来促使凝血过程进行,测量血液在一定时间内凝固的程度,得到APTT的结果。
总之,血凝实验通过模拟机体血液凝固过程和测定凝血因子活性,能够评估机体凝血功能的状态,为临床诊断和治疗提供重要的监测指标。
凝血酶原时间PT测定作业指导书
1. 实验原理:
在待检血浆中加入过量的组织凝血活酶和Ca离子,与FⅦa形成复合物,触发外源性凝血系统,使凝血酶原转变为凝血酶,凝血酶使纤维蛋白原变为纤维蛋白。
所测血浆凝固时间,即凝血酶原时间。
凝块形成的时间与血浆中的外源性凝血因子含量呈负相关。
2. 标本采集:
2.1 早晨空腹采血(空腹12小时左右),静脉采血。
2.2
3.8%(w/v)枸椽酸钠0.2ml+静脉血1.8ml,混匀。
3. 标本存放:将混合了抗凝剂的全血以3000r/min×10min离心,室温放置不超过2小时,2~8℃保存不超过4小时,长时间保存需在冰冻条件下,(-70℃不超过6个月),只能冻融1次,在37℃迅速解冻,以减低凝血因子的消耗,解冻后立即测试。
4. 标本运输:低温条件下运输。
5. 标本拒收的标准:抗凝剂不符合,采血量不准确,凝固,溶血,脂血标本不能作测定。
6. 实验材料:
北京世帝科学仪器公司凝血酶原时间测定试剂盒,主要成分为兔脑粉、氯化钙和少量稳定剂。
7. 仪器设备:
7.1 仪器名称:M200全自动凝血因子分析仪。
凝血酶原时间诊断标准
凝血酶原时间(PT)是检查外源性凝血因子的一种过筛试验,正常参考值一般为11-13秒。
测定值在正常对照值3秒内为正常,超过正常对照值3秒
以上为延长。
凝血酶原时间能够反映血浆中凝血因子二、七、九、十活性的指标,凝血酶原转化为凝血酶的参考值为±、秒。
如果检查者的凝血酶原转化为凝血酶凝固血液的时间大于正常对照值3秒以上,考虑有先天性凝血因子缺乏、纤维蛋白原缺乏、维生素K缺乏等血液疾病,可通过补充血浆、冷沉淀及补充维生素K等方法进行治疗。
如果检查者的凝血酶原转化为凝血酶小于正常对照值,表示血液处于高凝状态,这种情况常发生在患有血栓性的疾病的患者,比如冠心病、脑血栓、心肌梗死、脑梗塞、深静脉血栓等,治疗可采用抗凝药物,药物可选择双嘧达莫、氯吡格雷、华法林、肝素类抗凝药,或者皮下注射低分子肝素等。
以上信息仅供参考,诊断凝血酶原时间是否正常需结合其他检查和临床表现。
如需获取更多专业信息,建议咨询医生或查阅医学书籍。
凝血酶原时间(PT)测定标准操作规程1.检验原理:待测血浆加入过量组织凝血活酶和 2aC,启动外源凝血途径,最终使纤维蛋白原转变为纤维蛋白,在光学浊度法仪器上,测定血浆凝固所需的时间,即为待检血浆的PT。
2.试剂主要组成成分R1:PT试剂:兔凝血活酶、氯化钙R2:PT复溶液:缓冲液3.样本要求3.1.采集静脉血,立即按9份血:1份抗凝剂比例与0.109mol/L枸橼酸钠充分混合均匀。
室温3000rpm离心12分钟,上层淡黄色液体为待检的乏血小板血浆。
3.2血浆室温放置,宜在2小时内检测。
3.3血浆若不能及时检测,用塑料吸管分离,-20℃可保存2周。
测定前37℃快速融化,轻微混匀后立即检测。
4.检验方法:全自动血凝分析仪测定(详见雷杜RAC-1830标准操作规程)5.参考区间:PT:11—15秒。
INR:0.8-1.56.检验结果的解释报告PT秒数(S)和INR,检验结果与各实验室的参考值范围相关。
7.检验方法的局限性7.1凝血过程包括从因子激活到纤维蛋白形成的一系列反应。
因此,检验结果可能受到治疗药物(干扰物)、检验操作、检验系统等因素的影响,应考虑这些因素。
7.2试剂被污染,或者样品杯、吸管等被凝血试剂污染,会导致凝血异常,需严格控制。
7.3仅以时间形势报告PT会因ISI值不同造成结果不可比。
8产品性能指标8.1重复性:用质控血浆重复测试所得结果的变异系数(CV)应不超过5.0%。
8.2瓶间差:用质控血浆测试,瓶间差应不超过6.0%。
9临床意义PT延长:见于先天性凝血因子II V VII X缺乏症,低(无)纤维蛋白原血症,DIC,原发性纤溶症,VitK缺乏,肝病,口服抗凝剂,肝素和FDP等。
PT缩短:见于先天性凝血因子V增多,口服避孕药,高凝状态,血栓性疾病等。
血浆凝血酶原时间测定(PT)标准操作规程一、项目名称:血浆凝血酶原时间测定(prothrombin time ,PT)二、检验方法名称:凝聚法三、方法学原理:在确定量的血浆样本经过肯定时间的加温后,加入试剂。
加入试剂后,采纳波长为660nm的光照耀样本。
凝血过程(纤维蛋白原转化为纤维蛋白)中血的浑浊度可以通过测量散射光光强度的转变来测定。
从散射光光强度的测定,可以做出凝血曲线,通过Percentage Detection Method法求得凝血时间。
四、方法学溯源:凝血酶原时间(PT)测定是Quick于1935年创立的。
在受检血浆中加入过量的组织凝血活酶(人脑、兔脑、胎盘及肺组织等制品的浸出液)和钙离子,使凝血酶原变为凝血酶,后者使纤维蛋白原转变为纤维蛋白。
观看血浆凝固所需要的时间即凝血酶原时间。
其凝固时间取决于凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅴ、Ⅹ、Ⅰ的水平。
该试验是反映外源凝血系统最常用的筛选试验。
五、仪器:(一)型号:Sysmex CA1500自动血液凝血分析仪(二)分析和计算参数:1.处理量:约120个测试/小时2.所需样本量:50l3.检验时间:在最长检验时间之内测出结果,典型最长检验时间:100秒4.重复性:CV2%5.计算参数:凝血酶原活动度(PT%)凝血酶原比值(PT R)国际标准化比值(INR)六、试剂及配套品:(一)试剂:1. 凝血活酶含钙试剂(Thromborel S)(1)商标:德灵(DADE BEHRING)(2)包装规格:Pack for 104ml(3)代码:No.OUHP 29 , or(4)参数:ISI(国际敏感度指数)=0.97(5)成分:1)Thromborel S Reagent :a. 冻干人胎盘促凝血酶原激酶(lyophilized human placental thromboplastin)b. 氯化钙 (calcium chloride)c. 稳定剂 (stabilizers)2) 防腐剂(Preservatives):a.庆大霉素(Gentamicin)(0.1g/L)b. 5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮和2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮(5-chloro-2-methyl-4-isothiazol-3-one and 2-methyl-4-isothiazol-3-one)(最大量 20mg/L)2.佛罗那巴比妥缓冲液(Dade Owren'S Veronal Buffer)(1)商标:德灵(DADE BEHRING)(2)包装规格:Pack for 1010ml(3)代码:B4234-25(4)成分:1)2.8410M的巴比妥钠 (sodium barbital)2)1.2510M的氯化钠 (sodium chloride)3) PH 7.350.13. 清洗液(Cleaning)2%次氯酸钠溶液(自配)(二)配套品:1.标准血浆(Standard Human Plasma)(1) 商标:德灵(DADE BEHRING)(2) 代码:No. ORKL2.校准质控血浆(Ci-Trol)(1) 商标:德灵(DADE BEHRING)(2) 代码:Level 1, B4244-10Level 2, B4244-20Level 3, B4244-303.质控血浆(Control Plasma)(1) 商标:太平洋(Pacific Hemostasis)(2) 代码及规格:Level 1 (Normal), 100595 101mlLevel 2 (Abnormal), 100596 101mlLevel 3 (Abnormal), 100597 101ml七、操作步骤:(一)开机:开机前,先打开连机的打印机。
凝血酶原时间测定的原理引言:凝血酶原时间(Prothrombin Time,简称PT)是一种常用的凝血功能检测指标,用于评估凝血系统的活性和凝血功能状态。
本文将介绍凝血酶原时间测定的原理和方法。
一、凝血酶原时间的定义和意义凝血酶原时间是指在体外一定条件下,血浆中凝血酶原转变为凝血酶所需的时间。
它是评估凝血系统外源性凝血通路功能的一项重要指标。
通过测定凝血酶原时间,可以判断凝血因子的活性以及凝血系统的功能状态,对于诊断和监测凝血功能障碍具有重要意义。
二、凝血酶原时间的测定方法凝血酶原时间的测定通常采用国际标准化比值(International Normalized Ratio,简称INR)来进行标准化,以消除不同实验室之间试剂和仪器的差异。
常见的测定方法有Quick法和活化部分凝血活酶时间法(Activated Partial Thromboplastin Time,简称APTT法)。
1. Quick法Quick法是通过测定血浆中凝血酶原转变为凝血酶所需的时间来评估凝血功能。
在实验中,将血浆与一种活化剂混合,启动凝血酶原转化为凝血酶的过程,然后测定血浆中凝血酶原转变为凝血酶所需的时间。
2. APTT法APTT法是通过测定血浆中活化部分凝血活酶的形成时间来评估凝血功能。
在实验中,将血浆与活化剂和磷脂混合,启动凝血系统的活化过程,然后测定血浆中活化部分凝血活酶的形成时间。
三、凝血酶原时间的原理凝血酶原时间的测定原理基于凝血系统的复杂反应机制。
在正常情况下,血浆中的凝血酶原通过一系列的酶解反应,转变为活性的凝血酶。
凝血酶原时间的测定主要包括以下步骤:1. 试剂的添加:在测定中,将一定量的活化剂加入血浆中,使凝血酶原被激活。
2. 凝血酶原的转化:添加活化剂后,血浆中的凝血酶原开始被激活转化为凝血酶。
这个过程中,各种凝血因子按照特定的顺序被激活和酶解。
3. 凝血酶的形成:随着凝血因子的激活和酶解,最终形成凝血酶。
凝血四项的计算方法
凝血四项是指凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)和血小板计数(PLT)这四个指标。
这些指标通常用于评估一个人的凝血功能和血液凝固能力。
首先,让我们来看看这四项指标的计算方法:
1. 凝血酶原时间(PT),PT是一种血液凝固时间的测量,它通常用于评估凝血因子的活性。
PT的测定方法是将患者的血浆与一种特殊的试剂混合,然后测量血浆凝固所需的时间。
正常范围通常是11-13.5秒。
2. 活化部分凝血活酶时间(APTT),APTT是另一种血液凝固时间的测量,它用于评估凝血因子的活性。
测定方法是将患者的血浆与一种特殊的试剂混合,然后测量血浆凝固所需的时间。
正常范围通常是25-35秒。
3. 纤维蛋白原(FIB),纤维蛋白原是一种蛋白质,在血液凝固中起着重要作用。
测定方法是通过血液样本测量患者血浆中纤维蛋白原的浓度。
正常范围通常是2-4克/升。
4. 血小板计数(PLT),血小板是血液中的细胞片段,对于血
液凝固也非常重要。
测定方法是通过血液样本测量患者血浆中血小
板的数量。
正常范围通常是15-35万/立方毫升。
综上所述,凝血四项的计算方法涉及到测定血浆中的凝血时间、纤维蛋白原浓度和血小板数量。
这些指标的正常范围可以帮助医生
评估患者的凝血功能和血液凝固能力,从而指导诊断和治疗。
出凝血2.1凝血酶原时间(PT)测定(第四版)出凝血2.2原理:待测血浆加入过量的含钙组织凝血活酶,使凝血酶原转变为凝血酶,后者使纤维蛋白原转变为纤维蛋白,测定凝固所需时间,即为待测血浆凝血酶原时间。
是外源性凝血系统较理想和常用的筛选试验。
出凝血2.3标本处理:患者处于休息状态下,采空腹静脉血(急诊病人除外)。
采血者应技术熟练,“一针见血”,以防止组织损伤,使外源性凝血因子进入标本。
最好不与其它实验一起采集而使血液停留在针管的时间延长。
采完血后,将血液沿管壁缓缓注入试管,避免产生气泡;然后迅速将血液和抗凝剂轻轻颠倒混匀,避免用力震荡。
全血要在1小时内分离血浆。
分离乏血小板血浆时,要在室温下3000rpm离心10分钟,室温下可存放4小时。
全部试验不能在4小时内完成,应将乏血小板血浆分装在0.5~1.0ml的小试管中快速冷冻,储存于-20℃冰箱中。
冷冻过的标本不能再次冷冻,否则结果会不准确。
冷冻血浆融化时,应将盛冷冻血浆的容器置于37℃水浴中,并轻轻摇动,使其迅速融化。
出凝血2.4试剂:PT试剂购于天津威士达公司:德灵Thromborel S试剂,试剂盒代号OUHP29。
试剂包括人脑凝血活酶冻干粉;氯化钙和稳定剂。
每瓶试剂用蒸馏水4ml复溶。
室温平衡15min后上机分析。
出凝血2.5仪器:使用Sysmex公司的CA-7000型全自动血液凝固仪。
出凝血2.6操作:按仪器操作步骤执行标准操作。
出凝血2.6.1开机:按下机器侧面的POWER 按钮。
开机后机器进行自检,当屏幕上边显示“Ready:”时可以进行试验。
出凝血2.6.2检查消耗品:1、准备反应杯:打开仪器上盖装反应杯的盖子查看反应杯是否够量,不足时,需及时添加。
(一次性最多可放1000 个杯子)2、准备试剂:按照仪器对试剂的要求,把试剂准备好,放到仪器内相应位置,注意查看试剂的量和有效期。
如还不熟悉试剂位置时,可在主屏幕上选Reagent Setting,按屏幕显示放置试剂。
凝血酶原时间-国际标准化比值(pt-inr)凝血酶原时间-国际标准化比值(PT-INR)是一个关于血液凝固功能的重要指标。
在医学领域中,PT-INR的测定可以帮助医生评估患者的凝血功能状态,以及预防和治疗血栓性疾病或出血性疾病。
PT-INR值的变化可能与很多疾病或用药有关,因此对其理解对于患者和医生来说都是非常重要的。
在本文中,我将从凝血酶原时间和国际标准化比值的基本概念开始,逐步深入探讨其在临床应用中的意义和价值。
我们将从理论知识到临床实践进行全方位的探讨,希望通过对PT-INR的深度解析,使读者能够更好地理解其重要性和应用场景。
1. 凝血酶原时间(PT)的基本概念凝血酶原时间是一个用来评估血液凝固功能的常规实验指标。
它通过检测血浆中凝血酶原转化为凝血酶所需的时间来反映凝血功能的状态。
在正常情况下,血浆中的凝血酶原能够在一定时间内转化为凝血酶,完成血液凝固的过程。
2. 国际标准化比值(INR)的引入及意义国际标准化比值是为了消除不同试剂和方法对凝血酶原时间的影响而引入的统一标准。
通过将患者的凝血酶原时间值与国际标准物质的凝血酶原时间值进行比较,计算出一个标准化的数值,即国际标准化比值。
INR的引入使得不同实验室和不同试剂所得到的凝血酶原时间值可以进行比较,提高了结果的可比性和准确性。
3. PT-INR在临床中的应用PT-INR的测定主要用于评估患者在抗凝治疗中的凝血功能状态。
对使用华法林或其他抗凝药物的患者进行定期的PT-INR监测,可以帮助医生调整药物剂量,以达到最佳的抗凝效果并避免出血或血栓的发生。
PT-INR的异常值也可能与某些疾病状态或其他药物的应用相关,需要及时进行评估和处理。
4. 个人观点和理解在我看来,PT-INR作为一个血液凝固功能的重要指标,在临床上具有非常重要的意义。
通过定期监测和评估患者的PT-INR值,可以帮助医生更好地了解患者的凝血功能状态,提高抗凝治疗的效果,减少不良事件的发生。
血浆凝血酶原时间测定(PT )的标准操作程序【目的】保证PT检测结果的准确性。
【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动,可由任一使用本SOP的工作人员提出,并报请专业组长及科主任签字后生效。
【方法原理】在37C条件下,将待测血浆加入过量的含钙组织凝血活酶,使凝血酶原转变凝血酶,后者使纤维蛋白元转变纤维蛋白,测定血浆凝固所需的时间以即为待测凝血酶原时间(PT),本试验不仅反映凝血酶原水平,也是反映因子V、VII、X和纤维蛋白原在血浆中的水平,所以是外源性凝血系统的筛选试验。
本实验室采用凝固法。
【标本采集】按凝血象标本采集和处理的标准操作程序所采集的枸椽酸钠抗凝血液标本。
应注意禁止血带时间越短越好,最长不宜超过3分钟,否则易引起某些凝血因子及纤溶活性的变化。
【试剂】ThromborelS试剂:德国西门子公司生产每瓶凝血酶原冻干试剂中加入4ml无菌蒸馏水。
未开封ThromborelS试剂2-8C储存,有效期24个月。
复溶试剂稳定性:37°C(已开瓶)8小时;15-25°C(已开瓶)2天;2-8°C(未开瓶)5天。
【操作步骤】1、按说明书复溶所需试剂、质控血浆,放置室温30分钟。
2、开机:打开主机和显示器开关,待仪器正常启动,登录报告软件。
3、按sysmex CA5血凝仪使用、维护保养的标准操作程序放置试剂。
4、先进行质控样本的检测,结果直接传入LIS系统质控软件。
待质控结果全部在控后方可进行患者标本测定。
5、按sysmex CA5血凝仪使用、维护保养的标准操作程序放置患者标本,开始测定,检测结果传输至软件后,核对患者信息,审核结果、打印报告。
【参考区间】1、秒,待测者的测定值较正常对照延长超过3秒以上才有临床意义。
2、国际标准化比值0.【临床意义】1、PT延长或INR增加见于先天性凝血因子II、V、VV、X缺乏症和低(无)纤维蛋白原血症;获得性见于DIC、原发性纤溶症、维生素K缺乏症、血循环在有抗凝物质存在如服抗凝剂、肝素和FDP。
凝血四项(PT、APTT FIB、TT)操作规程目录1. 凝血酶原时间(PT)测定2. 活化部分凝血酶原时间(APTT测定3. 纤维蛋白原(FIB)测定4. 血酶时间(TT)测定测定原理:待测血浆加入过量的含钙组织凝血活酶,重新钙化的血浆在组织因子存在时激活因子X成为Xa,后者使凝血酶原转变为凝血酶,凝血酶使纤维蛋白原转变为不溶性纤维蛋白,测定凝固所需的时间,即为待测血浆凝血酶原时间。
试剂主要组成成分:1. PT试剂:10瓶(内含脑粉提取物、缓冲液、稳定剂、防腐剂)本批试剂国际敏感指数ISI值:见瓶标2. PT缓冲液:1瓶(内含缓冲液、稳定剂、防腐剂)注:不同批号试剂盒中各组分不可互换操作步骤1. 试剂重建与保存每瓶试剂加入2.0ml缓冲液轻摇溶解。
2. 半自动血凝仪测定取待测血浆(正常质控血清或正常混合血浆)0.1ml , 37C孵育3分钟,加入37C预温PT试剂0.2ml,记录凝固时间,即为PT值。
3. 数据处理待测血浆PT 凝血酶原时间比值(PTR =正常质控(混合)血浆PT 国际标准化比值(INR)= PTR SI参考值10〜14秒以PTR表示:0.95 〜1.24 ;以INR 表示:0.94 〜1.30临床意义用于体外人血浆中凝血酶原时间(PT)测定。
PT测定是外源性凝血系统较理想和常用的筛选试验。
也可作为外源性途径及共同途径凝血因子的定量试验,同时,也可用于口服抗凝剂治疗的监控。
PT延长:见于先天性凝血因子n、v、%、x缺乏症,低(无)纤维蛋白原血症,DIC, 原发性纤溶症,VitK缺乏,肝病,口服抗凝剂、肝素和FDP等。
PT缩短:见于先天性凝血因子V增多,口服避孕药,高凝状态,血栓性疾病等。
储存条件及有效期:未开启试剂于2〜8 C保存可稳定至标签所示失效日期;试剂复溶后于2〜8 C可保存7天。
试剂保存应防止冷冻。
编写: 审核: 批准: 批准日期年月日测定原理:待测血浆加入部分凝血活酶溶液,在Ca+ +参与下纤维蛋白原转变为不溶性纤维蛋白,测定凝固所需的时间,即为待测血浆活化部分凝血酶时间。
凝血酶原时间(PT)测定
(分析仪器法)
1实验原理:凝固法
确定量的血浆(50微升)样本经一定时间加温后,加入PT试剂,采用波长660nm的光照射样本,凝血过程中血浆的混浊度可以通过测量散射光光强度的改变来测定,然后通过标准曲线求出凝血酶原时间,再通过参数计算得出凝血酶原活动度及INR值。
2标本采集
2.1早晨空腹采血(空腹12小时左右),静脉采血。
2.2
3.8%(w/v)枸椽酸钠0.2ml+静脉血1.8ml,混匀。
3标本存放
1小时内(3000r/min×15min)分离血浆,室温放置不超过2小时,2~8℃保存不超过4小时,长时间保存需在冰冻条件下,(-70℃不超过6个月),只能冻融1次,在37℃迅速解冻,以减低凝血因子的消耗,解冻后立即测试。
4标本运输:低温条件下运输。
5标本拒收的标准:抗凝剂不符合,采血量不准确,凝固,溶血,脂血标本不能作测定。
6. 实验材料:
6.1 德国Dade Behring Marburg 公司凝血酶原测定试剂,每瓶加4ml蒸馏水溶
解(40人份),未开封试剂2~8℃贮存到说明书上有效期,复溶试剂2~8℃保存不超过5天。
6.2 Dade Control质控血浆.用蒸馏水1ml溶解后放置30分钟,才能使用或分装。
复溶后,室温保存2小时,2~8℃4小时。
7. 仪器设备:
7.1 仪器名称: Sysmex CA-1500全自动血液凝固分析仪
7.2 仪器厂家:日本Sysmex公司
7.3 仪器型号:Sysmex CA-1500
7.4 仪器技术参数:
7.4.1 速度:最快检测速度180测试/小时,组合检测约140测试/小时
7.4.2 试剂位:36个,具冷藏功能。
7.4.3 样本位:50个,可自动连续添加。
7.5 仪器校准程序:
7.5.1 校准频率:当方法改变,试剂厂家或试剂型号改变,仪器维修影响测定结果
等情况时,必须进行校准。
7.5.2 校准操作:设置标准曲线分析(由仪器提供商指定工程师执行)
8. 操作步骤:
8.1 检查前准备:
8.1.1 清空废液瓶,清空反应杯抛弃槽。
8.1.2 添加足够反应杯(不能超出警告线)。
8.1.3 添加清洁液试剂,清洗用蒸馏水等。
8.2 开机
先开打印机再开主机,开机后仪器自检,约15分钟,屏幕上方“Not Ready”
变为“Ready”,表示仪器预热完成,进入系统准备工作状态,可进行测定。
8.3 输入工作清单:
从主菜单选,选
输入第一个样本号→按相应实验项目名称键并同时输入此标本的其他
测试项目,若选“凝血四项(PT、APTT、Fbg、TT)”,可按
选项选择,选中项目相应位置标记为“○”,选完项目后按
删除某项目时只需按该项目(按键如
同样输入其他标本编号项目。
(快速输入可用
复制同样项目的输入。
8.4 放置样本
按8.3所设好的工作清单顺序将离心分离好的样本放置于样本架上,并按顺序把样本架排列于Sampler进样器右边位置(最多同时放5架共50个样本)
8.5 按.
盖好遮光盖,确认仪器为准备状态(显示屏正上方显示“Ready”)按
键,进样开始,→测定进行,仪器显示为“Analying”(被选择项目背景变为
“◎”,此时可重复8.3,8.4,继续输入其他架样本工作清单,按
继续确认测试任务,添加样本架继续测试,→测定完成,测定项目背景变为“●”,打印机打印出测定结果,所有测定清单完成,系统恢复“Ready”状态。
8.6 每日维护:完成每日的测定后,关机前维护。
8.6.1 冲冼针Rinse Probe
8.6.2 清空废液瓶,和已使用过的反应杯。
8.6.3 将试剂架连用试剂放入冰箱。
8.7关机:先关主机,再关打印机。
9.检验结果的判断与分析:
9.1 仪器测定PT的线性范围在5-600秒,测定完成后仪器显示PT秒数、PT活动
度、INR值等参数。
若不能对参数进行正确计算,将出现下列信息:
﹡﹡﹡.﹡出现错误,不能得到分析数据
ˉˉˉ.ˉ不能计算参数
+++.+数值超出线性范围.
9.2 仪器设定PT参考范围在10-14秒,如果得不到一个正常数值,在数据的左侧
将出现下列标记:
﹡出现错误信息
< 数据低于可报告的低限
> 数据高于可报告的高限
10. 质量控制:每批样本同时测定两个浓度水平(高值和正常值)的质控品,以2S
为警告限,3S为失控限,绘制质控图,判断是否在控。
质控规则详见室内质控作业指导书。
11 临床意义:PT是用于筛查外源性凝血系统(Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ)及口服抗凝
药物剂量(如华发令、双香豆素等)的检测项目。
11.1参考范围:秒数S:10-14 S(患者结果超过正常对照35以上有临床意义)
活动度:80-120%
国际标准化比值INR:0.8-1.5
11.2PT延长见于先天性凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ缺乏;低(无)纤维蛋白原血
症;获得性见于DIC、原发性纤溶症、维生素K缺乏、肝病、血循环中有抗凝物质(如口服抗凝剂、肝素)。
11.3 PT缩短:见于先天性凝血因子V增多、口服避孕药、高凝状态(DIC早期、
急性心肌硬塞等)、血栓性疾病(脑血栓形成、急性血栓性静脉炎)、多发性骨髓瘤、洋地黄中毒、乙醚麻醉后。
11.4监测口服抗凝药(如华发令、双香豆素等)的重要指标。
一般要求:PT(S):18-24 S INR:2.5-3.5,不同疾病不同值。
12变异的潜在来源
12.1抗凝剂:草酸盐、EDTA、肝素不适用于PT检查
12.2标本采集处理不当,如血与抗凝剂未充分混匀,出现凝块,混匀时过分用力,
使标本溶血,造成结果变异。
12.3纤溶药物的影响,如双香豆素、链激酶、尿酶等。
12.4超剂量使用肝素使凝固时间延长。
12.5FDP增加使凝固时间延长。
12.6某些药物,如口服避孕药、雌激素、天门冬酰胺酶、钠络酮等影响测试结
果。
13. 操作注意事项:干粉试剂及质控血浆溶解
13.1 确认溶剂类型,一般溶解液包括:蒸馏水、生理盐水、缓冲液、厂家特定
溶解液,必须按说明书要求使用。
13.2 溶解时,轻轻转动容器,保证干粉完全溶解,避免剧烈振荡。
13.3复溶后,室温放置5-10分钟方可使用。
14. 仪器维护与保养
14.1 日常维护(见8.6)
14.2 每周维护
14.2.1液路冲洗:仪器在“Ready”状态下,从主菜单按
→按→按键运行此程序→完成后按
返回。
14.2.2清洁仪器:定期用擦布擦干净仪器内外,包括试剂槽。
14.3 需要时维护:
14.3.1调整压力:仪器在“Ready”状态下,以主菜单按
→按键,显示压力是否在其调整范围内?若不在,则打开仪器右侧相应压力调整旋钮,旋动调整好压力,再锁紧旋钮。
14.3.2更换灯泡:关机→从仪器右侧取下灯泡外盖及内盖→换上好的灯泡→装上
关上遮光盖,按
14.3.3更换保险管:关机→从仪器左侧旋下保险盖→更换上好的保险管→装上保
险管盖。
15. 参考文献
15.1 叶应妩.王毓三等《全国临床检验操作规程》第三版,东南大学出版社. 15.2 Sysmex公司《Sysmex CA-1500操作手册》1998.6修订本.。