凝血酶时间(TT)操作程序 TT-SOP
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修改纪录:1目的本操作书的制定的目的是,为操作者进行血浆凝血酶时间测定提供正确的操作方法。
2适用范围适用于血浆凝血酶时间测定3定义凝血酶时间(TT)是一个快速而简易地评价纤维蛋白形成的试验,因子X III 缺乏时,TT保持正常。
当PT,APTT延长,不能解释结果时,在进行其他试验之前,应先测定TT,再做其他确诊测试。
4测定原理和临床意义4.1测定原理在过量的凝血酶存在下,被稀释血浆的凝固时间可直接反映血浆中纤维蛋白原水平。
4.2临床意义反映血浆中纤维蛋白的减少和FDP的增多,可作为异常纤维蛋白原的筛选试验。
延长:血循环中纤维蛋白(原)降解产物(FDP)(如DIC继发纤溶亢进、溶拴治疗后));肝素或类肝素物质增多;AT-Ⅲ活性增高;纤维蛋白原严重减少(如先天性无纤维蛋白血症、严重肝脏疾病)等。
异常FDP(骨髓瘤,风湿性关节炎)缩短:见于高凝状态。
5实验室条件5.1实验场所中心实验室临检室5.2温湿度要求室温:15-30℃湿度:20-80%6标本要求6.1标本种类6.1.1标本种类血浆6.1.2标本量最适量:3ml最小量:2ml分析量:200ul不适标本的处理:采集量过少、抗凝剂错误、血液凝固等情况下,拒收标本,及时与临床联系,并做好登记。
6.1.3容器枸橼酸钠抗凝管---9体积血采集到1体积0.109 M枸椽酸钠抗凝剂中(NCCLSH3-A3,H21-A21标准)6.1.4采集条件采集时间:检查对象生活饮食处于日常状态,安静。
拒收标准:采血量不足、严重乳糜血、抗凝不充分、严重乳糜血、抗凝剂有误等采集部位:静脉采血。
6.2使用条件6.2.1保存条件---标本血浆在20℃保存8小时,如果采用肝素治疗,标本保存2小时。
* 不要将血浆置于2 - 8℃保存。
6.2.2保存事项必须及时检验,放置过久可影响检验结果。
6.2.3保存天数:1天6.2.4保存场所:临检室6.2.5特殊容器:无6.2.6预防措施标本为可感染性标本,应注意人员及环境的防护,防护措施请使用眼镜,口罩,手套等。
凝血酶时间(TT)测定
1. 实验原理
将试剂加入抗凝血浆中,试剂中的牛凝血酶可直接作用血浆中的纤维蛋白原生成纤维蛋白凝块,通过660nm光照射血浆,凝血过程中血浆的混浊度可以通过测量散射光光强度的改变来测定,然后通过标准曲线求出凝血酶时间。
2. 标本采集
2.1 早晨空腹采血(空腹12小时左右),静脉采血。
2.2
3.8%(w/v)枸椽酸钠0.2ml+静脉血1.8ml,混匀。
3. 标本存放:全血贮存在4~10oC不超过2小时,最好1小时内(3000r/min×15min)分离血浆,此血浆在室温22~24oC下可存放2小时,在2~4oC可存放4小时,在-20oC 可存放2周,长时间保存需在冰冻条件下,在-70oC可存放6个月。
冷冻血浆融化时,应将盛血浆的容器置37oC水浴中,并轻轻摇动,使其迅速融化,以免凝血因子消耗,解冻后立即测试。
冷冻过的标本不能再次冷冻,否则结果不准确。
4. 标本运输:低温条件下运输。
5. 标本拒收的标准:抗凝剂不符合,采血量不准确,凝固,溶血,脂血标本不能作测定。
6. 实验材料:。
凝血酶时间测定(TT)一、测定原理:1、在凝血酶作用下,待检血浆中纤蛋白原变位纤维蛋白。
当待检血浆中抗凝物质增多是,凝血酶时间延长。
二、标本要求:1、凝血专用管(CTAD管,枸椽酸钠0.109M,蓝帽)抽取静脉血至刻度线,充分混匀。
1000转离心10分钟后2小时内测定完毕。
2、测定量 100ul血浆三、试剂:1、STAGO公司原装试剂STA®-THROMBIN®2、保存条件:2-8℃3、使用条件:使用前干粉与稀释液混匀,放入搅拌珠,以保持试剂为混悬液,条码扫描后放入仪器试剂柜特定位置。
四、仪器和材料:1、STA全自动血凝仪2、含有磁珠的反应杯五、标准和质控:1、预定标,标准曲线由厂家在试剂中提供。
2、质控品为原装STA-COAG CONTROL N+P两批号定值血浆干粉,保存条件2-8℃。
使用前加蒸馏水1ml,混匀即可使用,试剂开启后在试剂柜内稳定8小时。
编写:伍海波制定日期:2011.12.1六、操作程序:1、装卸试剂:F2键打开试剂柜,条码扫描后确认试剂量,放入特定孔(带搅拌珠混匀功能)即可。
2、定标与室内质控:更换试剂批号时仪器根据每批试剂的标准曲线自动定标,24小时室内质控自动测定一次,未通过则仪器会提示报警。
3、标本测定:F1键打开标本柜,输入号码后随机插入标本孔,选择测定项目后关闭标本柜。
吸样针加100ul血浆入反应杯,预温240秒后加入50ul TT试剂并开始计时。
秒数计算均由仪器根据曲线自动完成换算。
4、传送并核收结果。
5、注意事项:a、血量与抗凝剂比例适宜,离心时间充分以确保血浆中无血小板干扰测定结果。
b、标本无凝固。
七、计算和参考值由仪器自动完成,正常参考值:14-21秒编写:伍海波制定日期:2011.12.1。
凝血酶时间检测标准操作规程1.【目的】为保障血浆凝血酶时间(TT)测定结果的准确性,特制作本规程。
2.【职责】1.实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP,室负责人监督落实。
2.本SOP的改动,可由任一使用本SOP的工作人员提出,并报经下述人员批准签字:室负责人、科主任。
3.【标本类型及实验前准备】1.标本类型1小时内(3000r/min×15min)分离血浆,室温放置不超过2小时,2~8℃保存不超过4小时,长时间保存需在冰冻条件下,(-70℃不超过6个月),只能冻融1次,在37℃迅速解冻,以减低凝血因子的消耗,解冻后立即测试。
抗凝剂不符合,采血量不准确,凝固,溶血,脂血标本不能作测定。
2.患者准备早晨空腹采血(空腹12小时左右),静脉采血。
3.容器、添加剂类型3.8%枸椽酸钠0.2ml+静脉血1.8ml,混匀。
4.仪器设备1. 仪器名称: Sysmex CA-1500全自动血液凝固分析仪2. 仪器厂家:日本Sysmex公司3. 仪器型号:Sysmex CA-15004. 仪器技术参数:4.1 速度: 最快检测速度180测试/小时,组合检测约140测试/小时4.2 试剂位:36个,具冷藏功能。
4.3 样本位:50个,可自动连续添加。
5. 仪器校准程序:5.1 校准频率:当方法改变,试剂厂家或试剂批号改变,仪器维修影响测定结果等情况时,必须进行校准。
5.2 校准操作:设置标准曲线分析(由仪器提供商指定工程师执行)5.实验试剂德国Dade Behring Marburg 公司Test Thrombin Reagent测定试剂,每瓶加5ml 缓冲液溶解(50人份),未开封试剂2~8℃贮存到说明书上有效期,复溶试剂2~8℃保存不超过5天。
4.【测定原理】凝血酶可使血浆标本中的纤维蛋白原转化为纤维蛋白,形成凝块。
形成凝块的时间即检测时间。
5. 【程序性操作步骤】1. 检查前准备:1.1 清空废液瓶,清空反应杯抛弃槽。
凝血酶时间试剂盒(凝固法)检测步骤【包装规格】4 x 8/5/2 ml牛凝血酶1 x 9ml缓冲液【预期用途】适用于体外诊断,在IL凝血系统上对人枸橼酸钠血浆进行凝血酶时间(TT)定量测定。
【检验原理】进行TT检验的主要意义:- 评估弥散性血管内凝血(DIC)- 监测肝素抗凝和纤溶治疗- 检测是否存在FDP (纤溶蛋白/纤溶蛋白原降解产物),遗传性或获得性纤维蛋白原质量和数量异常以及纤维蛋白溶解增加。
在样品中加入纯化的凝血酶,将其中的纤维蛋白原转化为纤维蛋白,测量形成凝块所需要的时间。
【主要组成成份】【储存条件及有效期】2-8℃冷藏保存,竖直放置。
未经开封的试剂,稳定期可持续至标签上所指明的有效期。
首次使用后的试剂保存于原装瓶中,2-8℃条件下稳定性可以维持15天,15-25℃环境下可以维持24小时。
为了达到最佳稳定性,应将试剂从检测系统中移出, 2-8℃ 环境下保存于原装瓶中。
【适用仪器】ACL血凝分析系统【样本要求】1.标本采集通过静脉穿刺,直接将标本采集到含有抗凝剂的蓝色帽真空采血管内。
2.如果采用注射器采集标本,应注意根据患者年龄、采血量及血管的粗细使用适当的针头和注射器容量。
注射器容量过大会增大血液凝固的机会,一般推荐使用容量<20ml的注射器。
针头过小,容易引起溶血。
3.抗凝剂及比例采用109mmol/L(3.2%)的枸橼酸钠作为抗凝剂(其他抗凝剂如草酸盐、肝素、EDTA盐不适用)。
血与枸橼酸钠(109mmol/L)的比例为9:1。
这个比例实际上是指抗凝剂与正常血细胞比容(Hct)条件下所含血浆的比例而言,故Hct异常时,应根据患者Hct来计算抗凝剂的用量。
如果HCT >55%,根据公式C = 1.85 ×10 -3 (100-H) V(注:C = 抗凝剂的体积(mL),V = 全血体积(mL),H = HCT (%))计算所需抗凝剂的量。
4.注意:如果采用注射器采集标本,血液抽出后应在1min内与适当量的抗凝剂混合。
凝血酶时间TT标准操作流程目录1 目的2 检测原理3 产品信息4 试剂配制5 试剂保存和稳定性6 预防和警告7 样本收集和准备8 检测需要但试剂盒中未提供的耗材9 质量控制10 操作流程11 结果12 局限性13 参考范围14 性能特征15 参考文献1 目的此程序提供在软件版本为2.0-2.6的ACL 8000-9000仪器上进行凝血酶时间(TT)测试的指导。
该测试特别用于弥散性血管内凝血(DIC)的评估,肝素抗凝治疗和溶栓治疗的监测,纤维蛋白或者纤维蛋白原降解产物(FDP)、遗传性或者获得性纤维蛋白原的数量或者质量异常、以及纤溶亢进等的检测。
2 测试原理在过量的纯化的牛凝血酶试剂的存在下,样本中的纤维蛋白原被转化为纤维蛋白,仪器检测凝固形成所需要的时间。
3 产品信息凝血酶试剂盒包括:缓冲液: 1 x 9 mL浓缩溶液,内含0.5mol/L的氯化钙,缓冲液和保存液。
牛凝血酶: 4瓶冻干粉牛凝血酶(15 UNIH/瓶),含牛血清白蛋白和缓冲液。
4 试剂准备缓冲液:用NCCLS II型或相同质量的去离子水按1:5 (1+4)倍数按需稀释浓缩缓冲液,用来溶解凝血酶,用前混匀。
牛凝血酶:根据样本来源和具体应用的不同需要,复溶瓶中内容物:稀释缓冲液凝血酶浓度筛查测试 5.0 mL 3.0 UNIH/mL8.0 mL 1.9 UNIH/mL肝素治疗 2.0 mL 7.5 UNIH/mL盖上盖子,轻轻混匀。
确保充分溶解。
放15-25°C 平衡30分钟,用前颠倒混匀。
请勿用力振摇。
5 试剂保存和稳定性未开封的试剂可在2-8 o C稳定至试剂盒上标明的有效期。
稀释缓冲液:配制完成后,在15-25°C 环境下稳定一个月。
牛凝血酶:复溶后于原瓶中2-8 o C稳定15天;在ACL 8000-10000上(15o C)稳定24小时。
无需添加搅拌磁珠。
为了最佳试剂保存,建议不使用时,将试剂从仪器系统撤回,使用原瓶,保存于2-8 o C。
凝血酶时间TT标准操作流程目录1 目的2 检测原理3 产品信息4 试剂配制5 试剂保存和稳定性6 预防和警告7 样本收集和准备8 检测需要但试剂盒中未提供的耗材9 质量控制10 操作流程11 结果12 局限性13 参考范围14 性能特征15 参考文献1 目的此程序提供在软件版本为2.0-2.6的ACL 8000-9000仪器上进行凝血酶时间(TT)测试的指导。
该测试特别用于弥散性血管内凝血(DIC)的评估,肝素抗凝治疗和溶栓治疗的监测,纤维蛋白或者纤维蛋白原降解产物(FDP)、遗传性或者获得性纤维蛋白原的数量或者质量异常、以及纤溶亢进等的检测。
2 测试原理在过量的纯化的牛凝血酶试剂的存在下,样本中的纤维蛋白原被转化为纤维蛋白,仪器检测凝固形成所需要的时间。
3 产品信息凝血酶试剂盒包括:缓冲液: 1 x 9 mL浓缩溶液,内含0.5mol/L的氯化钙,缓冲液和保存液。
牛凝血酶: 4瓶冻干粉牛凝血酶(15 UNIH/瓶),含牛血清白蛋白和缓冲液。
4 试剂准备缓冲液:用NCCLS II型或相同质量的去离子水按1:5 (1+4)倍数按需稀释浓缩缓冲液,用来溶解凝血酶,用前混匀。
牛凝血酶:根据样本来源和具体应用的不同需要,复溶瓶中内容物:稀释缓冲液凝血酶浓度筛查测试 5.0 mL 3.0 UNIH/mL8.0 mL 1.9 UNIH/mL肝素治疗 2.0 mL 7.5 UNIH/mL盖上盖子,轻轻混匀。
确保充分溶解。
放15-25°C 平衡30分钟,用前颠倒混匀。
请勿用力振摇。
5 试剂保存和稳定性未开封的试剂可在2-8 o C稳定至试剂盒上标明的有效期。
稀释缓冲液:配制完成后,在15-25°C 环境下稳定一个月。
牛凝血酶:复溶后于原瓶中2-8 o C稳定15天;在ACL 8000-10000上(15o C)稳定24小时。
无需添加搅拌磁珠。
为了最佳试剂保存,建议不使用时,将试剂从仪器系统撤回,使用原瓶,保存于2-8 o C。
凝血四项标准操作程序(SOP)实验室名称项目编号制定日期安徽济民肿瘤凝血四项标准2014 年月日医院临检室操作程序(SOP)【测试项目】PT 凝血酶原时间APTT 活化部分凝血活酶时间FIB 纤维蛋白原TT凝血酶时间【该 SOP变动程序】本标准操作程序的改动,可由任一使用本 SOP 的工作人员提出,并报述人员批准签字:专业主管、科主任。
【适用范围】本产品适用于检测凝血因子。
【操作步骤】1、使用 1:9 枸橼酸钠抗凝管采血2ML ,离心速度为3000 转/分, 10分钟取用上层血浆。
2、用加珠器在每个样品杯中放一粒钢珠,把样本杯置于预温槽内。
3、进入主菜单,用光标键移动光标,选择“测试”,按键“确认” ,进入实验菜单。
4、将试剂放于相应位置,预温孔或室温孔。
5、将标本加入样品杯(PT50ul ,APTT50ul,FIB20ul 血浆加 180ulFIB 稀释液再取 100ul,TT100ul )按预温槽相应的ABCD 键,计时启动。
6、当达到预温时间时,发出嘟嘟声通知操作者,将样品杯从预温槽中移至测试槽中,加入试剂( PT100ul, APTT50ul 氯化钙, FIB100ul ,TT100ul )进行测试。
7、使用联动加样器时,加试剂的同时,仪器自动启动计时器开始计时。
8、实验完成,记下各结果。
【维护与保养】1,维护和保养方法1.1 保持清洁,特别是测试孔内的清洁尤为重要,严禁有异物进入。
防止受潮,腐蚀,远离强电磁场干扰源。
应使用干燥的软布进行仪器表面的清洁,不得使用强酸或强碱消毒剂擦拭仪器表面。
1.2 仪器应放置在平稳的工作台面上,不得摇晃与振荡。
避免阳光直晒,远离强热物体。
1.3电源电压:220V,频率:50HZ,如当地电压不稳定,应使用稳压电源。
输入功率:不大于100VA(W),不与大功率电器共线并用。
1.4 熔断器的更换:当用户更换熔断器内的保险管时,应先关闭本系统,拔下电源线,并严格按熔断器座旁标记的规格型号进行更换(熔断器规格:2A/250V/20mm)1.5仪器内△!标记警告用户:仪器装有加热装置,保持设定的恒温+-0.2 ℃,请不要在通电情况下触及。
凝血四项标准操作程序(SOP)实验室名称项目编号制定日期安徽济民肿瘤医院临检室凝血四项标准操作程序(SOP)2014年月日【测试项目】PT凝血酶原时间APTT活化部分凝血活酶时间FIB纤维蛋白原TT凝血酶时间【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动,可由任一使用本SOP的工作人员提出,并报述人员批准签字:专业主管、科主任。
【适用范围】本产品适用于检测凝血因子。
【操作步骤】1、使用1:9枸橼酸钠抗凝管采血2ML,离心速度为3000转/分,10分钟取用上层血浆。
2、用加珠器在每个样品杯中放一粒钢珠,把样本杯置于预温槽内。
3、进入主菜单,用光标键移动光标,选择“测试”,按键“确认”,进入实验菜单。
4、将试剂放于相应位置,预温孔或室温孔。
5、将标本加入样品杯(PT50ul,APTT50ul,FIB20ul血浆加180ulFIB稀释液再取100ul,TT100ul)按预温槽相应的ABCD键,计时启动。
6、当达到预温时间时,发出嘟嘟声通知操作者,将样品杯从预温槽中移至测试槽中,加入试剂(PT100ul,APTT50ul氯化钙,FIB100ul,TT100ul)进行测试。
7、使用联动加样器时,加试剂的同时,仪器自动启动计时器开始计时。
8、实验完成,记下各结果。
【维护与保养】1,维护和保养方法保持清洁,特别是测试孔内的清洁尤为重要,严禁有异物进入。
防止受潮,腐蚀,远离强电磁场干扰源。
应使用干燥的软布进行仪器表面的清洁,不得使用强酸或强碱消毒剂擦拭仪器表面。
仪器应放置在平稳的工作台面上,不得摇晃与振荡。
避免阳光直晒,远离强热物体。
电源电压:220V,频率:50HZ,如当地电压不稳定,应使用稳压电源。
输入功率:不大于100VA(W),不与大功率电器共线并用。
熔断器的更换:当用户更换熔断器内的保险管时,应先关闭本系统,拔下电源线,并严格按熔断器座旁标记的规格型号进行更换(熔断器规格:2A/250V/20mm)仪器内△标记警告用户:仪器装有加热装置,保持设定的恒温+℃,请不要在通电情况下触及。
凝血酶时间(TT)测定标准操作规程1.检验原理:待测血浆加入适量的凝血酶,使纤维蛋白原转变为不溶性纤维蛋白,在光学浊度仪器上测定凝固所需的时间,即为待测血浆的TT。
2.试剂主要组成成分R1:TT试剂:牛凝血酶、稳定剂;R2:TT复溶液:缓冲液。
3.样本要求3.1.采集静脉血,立即按9份血:1份抗凝剂比例与0.109mol/L枸橼酸钠充分混合均匀。
室温3000rpm离心12分钟,上层淡黄色液体为待检的乏血小板血浆。
3.2血浆室温放置,宜在2小时内检测。
3.3血浆若不能及时检测,用塑料吸管分离,-20℃可保存2周。
测定前37℃快速融化,轻微混匀后立即检测。
4.检验方法:全自动血凝分析仪测定(详见雷杜RAC-1830标准操作规程)5.参考区间:11—17秒6.检验结果的解释:报告TT秒数(S),检验结果与各实验室的参考值范围相关。
7.检验方法的局限性7.1凝血过程中从因子激活到纤维蛋白激活到纤维蛋白形成的一系列反应。
因此,检验结果可能受到治疗药物(干扰物)、检验操作、检验系统等因素的影响,应考虑这些因素。
7.2试剂被污染,或者样品杯、吸管等被凝血试剂污染,会导致凝血异常,需严格控制。
8产品性能指标8.1重复性:用质控血浆重复测试所得结果的变异系数(CV),应不超过5.0%。
8.2瓶间差:用质控血浆测试,瓶间差应不超过6.0%。
9临床意义凝血酶时间延长包括以下几种情况:(1)低(无)纤维蛋白原血症,纤维蛋白原浓度通常为0.9g/L或更低。
(2)血中存在肝素或类似肝素的抗凝物质,如SLE、肝病、肾病等。
(3)在纤溶状态下,纤维蛋白原的功能降低。
(4)存在异常纤维蛋白原。
(5)如果患者和正常质控血浆混合液的凝血酶时间值更接近于患者的血浆凝血酶时间值,并且如果该患者在抽血测定前6h内并没有摄入肝素,则该患者血浆中很可能存在异常纤维蛋白原或纤维蛋白降解产物。
异常纤维蛋白血症和巨球蛋白血症,有造成凝血酶时间缩短的可能。
凝血功能检测方法有:
1.血浆凝血酶原时间(PT):于受检血浆中加入组织凝血活酶悬
液和Ca2+,观察血液凝固所需时间,正常参考值为12±1s;
2.凝血酶时间(TT):系检查血浆中纤维蛋白原的一种试验,纤维
蛋白原是由肝脏产生的一种重要凝血因子,如缺少可发生凝血机制障碍;
3.活化部分凝血活酶时间(APTT):在受检血浆中加入活化的部
分凝血活酶时间试剂和Ca2+,观察血液凝固所需时间,是内源凝血系统较为灵敏和最为常用的筛选试验;
4.纤维蛋白原(FIB):在受检血浆中加入一定量的凝血酶,使血
浆中的纤维蛋白原转变为纤维蛋白,通过比浊原理来判定纤维蛋白原的含量。
血浆凝血酶时间(TT)检测及临床意义一、概述1、凝血酶时间(thrombin time,TT)是反映血浆中纤维蛋白原转变为纤维蛋白过程有无异常的筛检指标之一。
2、TT 延长主要反映纤维蛋白原浓度减少或功能异常以及血液中存在相关的抗凝物质(肝素、类肝素等)。
二、实验原理在凝血过程中,纤维蛋白原在凝血酶的作用下转变为纤维蛋白,是凝血的共同途径。
在37℃条件下,在待检乏血小板血浆中,加入一定量的“标准化”凝血酶后直接将纤维蛋白原转变为纤维蛋白,使血浆发生凝固所需的时间即为 TT。
三、检测方法(一)试剂1、0.109mol/L枸橼酸钠溶液。
2、凝血酶溶液:可将浓凝血酶液加生理盐水直至正常人对照血浆的凝固时间为16~18秒。
3、健康人对照血浆。
(二)器材离心机、37℃水浴箱、微量加样器、注射器、试管、秒表或全自动血液凝固仪等。
(三)操作1、试管法①标本采集和处理常规静脉采血1.8ml加人含0.109mol/L枸橼酸钠溶液0.2ml的试管中,充分混匀,3000r/min离心20分钟,分离乏血小板血浆。
②预温将正常对照血浆和待测血浆0.1ml分别加人试管中,放置37℃水浴预温5分钟。
③测定试管中分别加入0.1ml凝血酶溶液,立刻混并启动秒表计时。
④观察计时在明亮处观察试管内液体的流动状态,当液体流动减慢或出现混浊时,停止计时,记录凝固时间。
重复测定2~3次取平均值作为正常对照TT值。
⑤采用同样方法测定受检血浆的TT值。
2、血凝仪法:按仪器说明书进行操作。
四、参考区间16~18 秒,超过正常对照值3秒为异常。
由于试剂中凝血酶浓度不同,其检测结果存在差异。
因此每个实验室应建立相应的参考区间。
五、注意事项1、标本需用枸橼酸钠抗凝, 肝素或 EDTA抗凝血浆不宜作本试验。
2、采血后宜在1小时内完成检测,室温下保存不应超过3小时,4℃下保存不超过4小时。
3、已稀释好的凝血酶溶液要尽快使用,若置于4℃下须在3天内使用。
4、TT测定时,所加入血浆的凝血酶试剂的浓度对其结果影响极大,将对照血浆的TT值调在16~18秒,再测标本较为合适。
凝血酶时间TT测定作业指导书
1. 实验原理:
在待测血浆中加入标定的凝血酶溶液,在凝血酶的作用下,血浆中的纤维蛋白原转变为纤维蛋白,血浆凝固所需的时间即为凝血酶时间。
当待测血浆中的抗凝物质增多或纤维蛋白含量异常时,凝血酶时间会发生相应的改变。
2. 标本采集:
2.1 早晨空腹采血(空腹12小时左右),静脉采血。
2.2
3.8%(w/v)枸椽酸钠0.2ml+静脉血1.8ml,混匀。
3. 标本存放:1小时内(3000r/min×10min)分离血浆,室温放置不超过2小时,2~8℃保存不超过4小时,长时间保存需在冰冻条件下,(-70℃不超过6个月),只能冻融1次,在37℃迅速解冻,以减低凝血因子的消耗,解冻后立即测试。
4. 标本运输:低温条件下运输。
5. 标本拒收的标准:抗凝剂不符合,采血量不准确,凝固,溶血,脂血标本不能作测定。
6. 实验材料:
北京世帝科学仪器公司凝血酶时间测定试剂盒,主要成分由液态凝血酶试剂组成。
其中凝血酶的主要成分为猪凝血酶。
7. 仪器设备:。
凝血四项标准操作程序(SOP)【】PT凝血酶原时间APTT活化部分凝血活酶时间FIB纤维蛋白原TT凝血酶时间【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动,可由任一使用本SOP的工作人员提出,并报述人员批准签字:专业主管、科主任。
【适用范围】本产品适用于检测凝血因子。
【操作步骤】1、使用1:9枸橼酸钠抗凝管采血2ML,离心速度为3000转/分,10分钟取用上层血浆。
2、用加珠器在每个样品杯中放一粒钢珠,把样本杯置于预温槽内。
3、进入主菜单,用光标键移动光标,选择“测试”,按键“确认”,进入实验菜单。
4、将试剂放于相应位置,预温孔或室温孔。
5、将标本加入样品杯(PT50ul,APTT50ul,FIB20ul血浆加180ulFIB稀释液再取100ul,TT100ul)按预温槽相应的ABCD键,计时启动。
6、当达到预温时间时,发出嘟嘟声通知操作者,将样品杯从预温槽中移至测试槽中,加入试剂(PT100ul,APTT50ul氯化钙,FIB100ul,TT100ul)进行测试。
7、使用联动加样器时,加试剂的同时,仪器自动启动计时器开始计时。
8、实验完成,记下各结果。
【维护与保养】1,维护和保养方法保持清洁,特别是测试孔内的清洁尤为重要,严禁有异物进入。
防止受潮,腐蚀,远离强电磁场干扰源。
应使用干燥的软布进行仪器表面的清洁,不得使用强酸或强碱消毒剂擦拭仪器表面。
仪器应放置在平稳的工作台面上,不得摇晃与振荡。
避免阳光直晒,远离强热物体。
电源电压:220V,频率:50HZ,如当地电压不稳定,应使用稳压电源。
输入功率:不大于100VA(W),不与大功率电器共线并用。
熔断器的更换:当用户更换熔断器内的保险管时,应先关闭本系统,拔下电源线,并严格按熔断器座旁标记的规格型号进行更换(熔断器规格:2A/250V/20mm)仪器内△标记警告用户:仪器装有加热装置,保持设定的恒温+℃,请不要在通电情况下触及。
加珠器严禁放入搅拌孔内,也不要放入邻近孔内,以免钢珠磁化。
修改纪录:1目的本操作书的制定的目的是,为操作者进行血浆凝血酶时间测定提供正确的操作方法。
2适用范围适用于血浆凝血酶时间测定3定义凝血酶时间(TT)是一个快速而简易地评价纤维蛋白形成的试验,因子X III 缺乏时,TT保持正常。
当PT,APTT延长,不能解释结果时,在进行其他试验之前,应先测定TT,再做其他确诊测试。
4测定原理和临床意义4.1测定原理在过量的凝血酶存在下,被稀释血浆的凝固时间可直接反映血浆中纤维蛋白原水平。
4.2临床意义反映血浆中纤维蛋白的减少和FDP的增多,可作为异常纤维蛋白原的筛选试验。
延长:血循环中纤维蛋白(原)降解产物(FDP)(如DIC继发纤溶亢进、溶拴治疗后));肝素或类肝素物质增多;AT-Ⅲ活性增高;纤维蛋白原严重减少(如先天性无纤维蛋白血症、严重肝脏疾病)等。
异常FDP(骨髓瘤,风湿性关节炎)缩短:见于高凝状态。
5实验室条件5.1实验场所中心实验室临检室5.2温湿度要求室温:15-30℃湿度:20-80%6标本要求6.1标本种类6.1.1标本种类血浆6.1.2标本量最适量:3ml最小量:2ml分析量:200ul不适标本的处理:采集量过少、抗凝剂错误、血液凝固等情况下,拒收标本,及时与临床联系,并做好登记。
6.1.3容器枸橼酸钠抗凝管---9体积血采集到1体积0.109 M枸椽酸钠抗凝剂中(NCCLSH3-A3,H21-A21标准)6.1.4采集条件采集时间:检查对象生活饮食处于日常状态,安静。
拒收标准:采血量不足、严重乳糜血、抗凝不充分、严重乳糜血、抗凝剂有误等采集部位:静脉采血。
6.2使用条件6.2.1保存条件---标本血浆在20℃保存8小时,如果采用肝素治疗,标本保存2小时。
* 不要将血浆置于2 - 8℃保存。
6.2.2保存事项必须及时检验,放置过久可影响检验结果。
6.2.3保存天数:1天6.2.4保存场所:临检室6.2.5特殊容器:无6.2.6预防措施标本为可感染性标本,应注意人员及环境的防护,防护措施请使用眼镜,口罩,手套等。