蝉拟青霉中虫草素提取工艺研究
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虫草素提取工艺的优化虫草素,又称冬虫夏草素,是一种珍贵的中草药成分,具有抗炎、抗氧化、免疫调节等多种生物活性。
虫草素的提取工艺对其品质和产量具有重要影响。
本文将探讨虫草素提取工艺的优化方法,以期提高虫草素的提取效率和纯度。
一、提取溶剂的选择虫草素是一种多环结构天然产物,具有较强的极性。
因此,在虫草素提取过程中,选择合适的溶剂对提取效果至关重要。
常用的溶剂包括乙醇、丙酮、醚类等。
经实验比较,乙醇是一种较为理想的提取溶剂,既具有良好的溶解性,又能保持虫草素的化学稳定性。
二、提取温度的控制提取温度是影响虫草素提取效果的重要因素之一。
一般来说,提取温度越高,虫草素的提取效率越高。
但过高的温度也会导致虫草素的分解,从而降低提取效果。
因此,需要在提取过程中控制合适的温度,一般在60-80摄氏度范围内进行提取。
三、提取时间的控制虫草素的提取过程是一个动态平衡的过程,提取时间的长短对提取效果有着直接影响。
一般来说,提取时间越长,虫草素的提取效果越好。
但过长的提取时间会导致其他杂质的提取,从而影响虫草素的纯度。
因此,需要在实际操作中选择合适的提取时间,一般在6-8小时为宜。
四、提取pH值的调控虫草素的溶解度随pH值的变化而变化,提取过程中合适的pH值对提取效果也有一定影响。
一般来说,虫草素在中性或弱碱性条件下的溶解度较高。
因此,在提取过程中,可以通过调节提取液的pH 值来增加虫草素的溶解度,提高提取效果。
五、提取工艺的优化除了以上几个方面的优化外,还可以通过优化提取工艺来提高虫草素的提取效果。
例如,可以采用超声波辅助提取、微波辅助提取等新型技术,提高虫草素的提取效率。
同时,还可以通过反复提取、浸提、萃取等多种工艺组合,提高虫草素的产量和纯度。
虫草素提取工艺的优化是提高虫草素提取效果的重要途径。
通过选择合适的提取溶剂、控制合适的提取温度和时间、调控提取液的pH 值以及优化提取工艺等方法,可以提高虫草素的提取效率和纯度,从而提高虫草素的应用价值。
M ycosystema菌 物 学 报15 March 2011, 30(2): 180-190jwxt@ISSN1672-6472 CN11-5180Q©2011 Institute of Microbiology, CAS, all rights reserved.虫草素的研究开发现状与思考杨涛1,2 董彩虹1*1中国科学院微生物研究所真菌地衣系统学重点实验室 北京 1001012中国科学院研究生院生命科学学院 北京 100049摘 要:虫草素是第一个从真菌中分离出来的核苷类抗菌素,具有抑菌、抗肿瘤、抗炎等非常广谱的生物学活性,目前已经成为一个研究热点。
对虫草素的菌株来源、生物合成、提取纯化、分子生物学研究现状等方面进行了总结,对有关专利进行了评价和分析,提出从种质资源入手拓宽虫草素来源,优化虫草素的提取纯化方法,深入研究其生物合成途径,并呼吁重视真菌研究中所用材料的科学名称。
关键词:虫草素,蛹虫草,纯化,产率,开发Cordycepin research and exploitation: progress and problemsYANG Tao1, 2 DONG Cai-Hong1*1Key Laboratory of Systematic Mycology and Lichenology, Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China2School of Life Sciences, Graduate University of Chinese Academy of Sciences, Beijing 100049, ChinaAbstract: Cordycepin, the first nucleoside antibiotic isolated from Fungi, has been a hotspot nowadays due to a variety of bio-activities, such as antimicrobial, anti-tumor, anti-inflammatory activities and so on. The previous studies on cordycepin, including the fungal sources, extraction, purification and molecular biology, were summarized in the present paper. The patents on cordycepin both at home and abroad have also been analyzed and evaluated. It was suggested that broadening the fungal strain sources, optimizing the method of extraction and purification as well as deepening the research on biosynthesis pathway are useful to overcome the bottleneck in cordycepin production. In addition,the importance of the scientific names used in the study of mycology was emphasized.Key words: cordycepin, Cordyceps militaris, purification, productivity, exploitation*Corresponding author. E-mail: dongch@收稿日期: 2010-11-28, 接受日期: 2011-02-23Vol.30 No.2 181菌物学报虫草素(cordycepin )又称虫草菌素、蛹虫草菌素、3′-脱氧腺苷(3′-deoxyadenosine ),是第一个从真菌中分离出来的核苷类抗菌素。
2019年第2020年第专dible 虫草素学名为3'-脱氧腺苷,分子式为C 10H 13N 5O 3,可以溶于水、乙醇、甲醇,但不溶于苯、乙醚等溶剂,属于嘌呤类生物碱。
1951年,CUNNINGHAM 等[1]从蛹虫草的培养滤液中,用离子交换树脂柱和活性炭柱层析法首次分离虫草素。
虫草素具有抑菌[2]、抗病毒[3-4]、调节机体免疫力[5]、抗恶性肿瘤[6]与治疗白血病[7]等多种功效。
虫草素的研究已成为生物医药及保健食品等领域中一个热点,尤其在临床抗肿瘤方面更为突出。
YOSHIKAWA 等[8]深入研究了虫草素对接种B16-BL6黑色素瘤细胞小鼠的影响,结果表明,将15mg /kg 的虫草素通过灌胃给药,可以有效抑制瘤块的生长,抑制率高达36%,而且并未在体内引发毒性反应,说明虫草素作为肿瘤药物制剂很安全。
丁蔚等[9]对40只小鼠做了对照试验,结果表明,虫草素可能通过PI3K/AKT/mTOR 通路有效抑制炎症反应,对亚硝基二乙基胺诱导的小鼠出现的原发性肝癌现象表现出了明显的防护作用。
LEE 等[10]进行了虫草素对促进人类结肠癌细胞凋亡的研究,结果显示,在虫草素治疗后的18h ,p53、Bax 、DR3、caspase-8、caspase -1、裂解的caspase-3、裂解的PARP 表达增加,表明虫草素可以诱导人类结肠癌细胞HT-29凋亡。
目前,虫草素主要通过以下几个方面获取:一是从蛹虫草或九州虫草等天然虫草的菌虫复合体中直接提取[11];二是从固体或液体发酵培养物中提取[12];三是人工化学合成,但化学合成工艺复杂,且投入的设备和化学试剂等成本相对昂贵[13],产率也比较低[14],所以很难实现大规模生产。
虫草素的广泛应用及在现代医药学上的卓著功效,使之价格越来越高。
当前,市场价格已达上千元每克(纯度98%以上)。
正因虫草素的贵而稀,其提取和分离纯化的研究成为当今的热点。
1虫草素的提取方法目前,虫草素较好的提取方法有微波辅助法、超声辅助法、超临界萃取法和加速溶剂萃取法等。
蝉拟青霉多糖的提取纯化工艺研究
蔡菊芬;芦柏震;侯桂兰
【期刊名称】《中华中医药学刊》
【年(卷),期】2007(25)10
【摘要】目的:确定蝉拟青霉多糖的最佳提取纯化工艺。
方法:用苯酚—硫酸紫外分光光度法测定蝉拟青霉多糖含量,采用正交实验设计,以多糖含量为指标,优化蝉拟青霉多糖水提取和醇沉淀工艺。
结果:蝉拟青霉多糖水提取最佳条件:加水量1:7,提取时间1h,提取次数3次;醇沉淀最佳条件:水提液浓度0.15g生药/mL,醇浓度60%,醇沉时间72h。
结论:优化的蝉拟青霉多糖水提醇沉工艺简便、合理、可行。
【总页数】3页(P2069-2071)
【关键词】紫外分光光度法;蝉拟青霉多糖;提取;纯化
【作者】蔡菊芬;芦柏震;侯桂兰
【作者单位】浙江省肿瘤医院
【正文语种】中文
【中图分类】R284.1
【相关文献】
1.淡紫拟青霉多糖提取工艺研究 [J], 刘青娥
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4.利用正交试验优化蝉拟青霉多糖的提取工艺 [J], 熊中奎;金丽琴;吕建新
5.利用正交试验优化蝉拟青霉多糖的提取工艺 [J], 熊中奎;金丽琴;吕建新
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《现代农业科技》2009年第16期早在1950,Cuningham等从蛹虫草(Cordyceps militaris)的原浆液中分离到一种腺苷类活性物质,命名为cordycepin,它是由腺苷和有碳支键的脱氧戊糖组成的一种核苷酸,被称为3’-脱氧腺苷(3’-deoxyadenosine,3’-dA),是第1个从真菌中分离出来的核苷类抗生素[1]。
后来该物质被证实是我国传统中药冬虫夏草(C.sinensis)的有效成分,其中文名称为虫草素,又称蛹虫草菌素、虫草菌素。
其分子式为C10H13N5O3,分子量为251D,熔点230~231℃,溶于水、热乙醇和甲醇,不溶于苯、乙醚和氯仿,紫外光的最大吸收波长为259nm[2]。
1虫草素的产生蛹虫草、冬虫夏草、香棒虫草(C.barnessii)等虫草产虫草素。
野生虫草生长环境非常特殊,多生于高寒山区、草原、河谷中,数量非常稀少,再加上当前人们对虫草的需求增加,对虫草的采集挖掘力度加大,导致虫草资源枯竭,并对生态环境造成极大的破坏。
近年来,国内外不少科研生产单位开发以人工培养生产虫草的方法。
虫草素的存在与否因虫草及其无性型菌种不同而异,目前研究多集中于蛹虫草,冬虫夏草亦有相关报道。
Kaczha等1964年就已经从无冠构巢曲霉(Spergillus nidulans)中分离出虫草素,但对于无冠构巢曲霉产虫草菌素能力的菌株差别,培养条件的影响等并未进行进一步的研究[3]。
通过固体、液体培养蛹虫草来生产虫草素,已取得较好效果;目前有些科研单位用蚕蛹培育冬虫夏草、蛹虫草,在江苏、浙江及广东均取得成功,蛹虫草的药用效果及滋补作用已得到食品及卫生部门的肯定,柞蚕蛹虫草在吉林辽宁等省均有生产,其中子实体的虫草素与天然虫草比,略有优胜[4]。
安徽农业大学在虫草研究中发现,一些虫草的无性型产虫草素,像细脚拟青霉(Paecilomyces tenuipes)、轮枝孢(Vertici-llium)等,但产量不高[5]。
蝉拟青霉杀虫作用的研究的开题报告一、研究背景青霉菌是一种常见的真菌,已被广泛应用于农药、医药、食品等领域。
其代表性代谢产物――青霉素被称为“抗生素之王”,已拯救了无数人类的生命。
除此之外,青霉菌还是一种有着广泛杀虫活性的生物制剂,已被广泛应用于害虫防治领域。
而近年来,研究者们发现,在青霉菌中还存在其他具有杀虫作用的化合物,如蝉拟青霉素。
蝉是夏季常见的昆虫,其繁殖能力极强,数量也较为庞大。
蝉对农作物的危害非常严重,经常发生大面积的蝉害,给农民带来巨大的经济损失。
目前,对于蝉的防治方法主要是采用化学合成农药,但其对生态环境的影响较大,还存在一定的安全隐患。
因此,寻找一种高效、绿色的蝉害防治方法变得极为重要。
二、研究目的本研究旨在探究蝉拟青霉素的杀虫作用,为其在蝉害防治领域的应用提供理论基础和技术支持。
具体包括:1、筛选蝉拟青霉素对蝉的杀虫作用,确定其最佳使用浓度和时间。
2、研究蝉拟青霉素对农作物的安全性及不良反应。
3、对蝉拟青霉素进行物理、化学性质及结构鉴定,进一步了解其杀虫机理。
三、研究内容本研究将执行以下任务:1、采集蝉样本,以实验室蝉为基础,构建并优化蝉拟青霉素的处理方法。
2、通过药液喷雾、接触、食饵毒杀等方式,探究不同浓度蝉拟青霉素的杀虫效果,确定其最佳使用浓度和时间。
3、对蝉拟青霉素进行毒理学安全性评估,研究其对目标农作物、作物用地土壤的影响。
4、运用化学分析技术,对蝉拟青霉素进行结构鉴定,探究其杀虫机理。
四、研究意义本研究将进一步完善蝉害防治技术体系,提高农作物生产的质量和效益,并为推广“绿色防治”理念提供技术支持。
同时,为生物制剂在农业领域的应用提供了新的思路和方法,为推动农业可持续发展作出了贡献。
五、研究方法1、实验室育成蝉样本,制备蝉拟青霉素药液。
2、采用药液喷雾、接触、食饵毒杀等方式进行杀虫实验,并对结果进行统计分析。
3、采用体外毒理实验对蝉拟青霉素的安全性进行评估,并运用现代分析方法对样品进行测试分析。
虫草素提取工艺的优化
虫草素是一种天然的生物活性物质,具有广泛的药用价值。
虫草素的提取工艺对于其药用价值的发挥具有重要的影响。
本文将从虫草素提取工艺的优化方面进行探讨。
虫草素的提取工艺主要包括原料处理、提取溶剂的选择、提取时间、提取温度、提取压力等方面。
其中,原料处理是提取工艺的关键环节。
在原料处理过程中,应注意去除杂质和不良部分,保证原料的纯度和质量。
此外,还应注意原料的粉碎程度,以便提高提取效率。
提取溶剂的选择也是提取工艺的重要环节。
常用的提取溶剂包括乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯等。
不同的提取溶剂对虫草素的提取效率和纯度有着不同的影响。
因此,在选择提取溶剂时,应根据实际情况进行选择。
提取时间、提取温度、提取压力等因素也对虫草素的提取效率和纯度有着重要的影响。
在提取时间方面,应根据实际情况进行调整,以保证提取效率和纯度的最大化。
在提取温度方面,应注意控制温度,避免过高或过低的温度对虫草素的影响。
在提取压力方面,应根据实际情况进行调整,以保证提取效率和纯度的最大化。
虫草素的提取工艺是一个复杂的过程,需要综合考虑多个因素。
在实际操作中,应根据实际情况进行调整,以保证提取效率和纯度的最大化。
通过对虫草素提取工艺的优化,可以提高虫草素的药用价
值,为人类健康事业做出更大的贡献。
正交设计优选蛹草拟青霉中虫草素和虫草多糖的提取工艺黄婷婷;马云淑;阳丹;王维丽;谭麒冉【摘要】目的:采用正交设计优化蛹草拟青霉菌丝体中虫草素和虫草多糖的提取工艺。
方法:建立高效液相色谱测定指标成分虫草素含量的方法,采用正交试验法考察醇浓度、加醇量、提取次数与时间的组合3个因素对虫草素乙醇提取率的影响。
醇提后残渣以水提取多糖,采用苯酚-浓硫酸比色法在490 nm 处测定虫草多糖的含量,以单因素法筛选多糖提取工艺。
结果:HPLC 色谱条件下精密度的RSD 为0.30%,稳定性的 RSD 为1.27%,重复性的RSD 为2.93%。
以乙醇浓度为90%,加醇量为10倍量,提取3次,每次1 h 虫草素的提取率最高;而以乙醇浓度为95%,加醇量为6倍量,提取3次,每次1 h 提取虫草素后的残渣再以水提取,虫草多糖得率最高。
结论:所优化的提取工艺虫草素和虫草多糖提取率均较高,采用的含量测定方法稳定可靠。
%Objective:To optimize the extraction processes of cordycepin and cordycepic polysaccharides from mycelia of Paecilomyces militaris by using Orthogonal design.Methods:A HPLC method was established to determine the content of cordycepin which was taken as indexes,and orthogonal test method was used to investigate three factors of alcohol concentration,alcohol volume ratio,and the combination of extraction times with time to influence on the extraction efficiency of cordycepin.Detection was performed at wavelength of 260 nm.The column temperature was 30 ℃ and the injection volume was 1 0 μL.After extracted by alcohol,the residue of mycelia was dealt with water to extracted cordycepic polysaccharides, and colorimetric method by using phenol—concentrated sulfuric acid as chromogenic agent was usedto determine the content of cordycepic polysaccharides in the extract under 490 nm.Results:Under the condition of HPLC,the precision of RSD was 0.30%,the stability of RSD was 1 .27% and the RSD of reproducibility was 2.93%.The results showed the extract ratio of cordycepin was the highest with the process parameters of 90% alcohol,1 0 times of alcohol volume ratio,3 times with 1 h for every time.And the water extract ratio of Cordyceps polysaccharide in the mycelia residue was the highest after cordycepin was extracted from mycelia with 95% alcohol,6 times of alcohol volume ratio,3 times,with 1 h each time.Conclusion:The extraction efficiency of cordycepin and Cordyceps Polysaccharide was high under the optimum process,and the methods of the content determination were stabile and reliable.【期刊名称】《中国现代中药》【年(卷),期】2016(018)002【总页数】5页(P203-207)【关键词】蛹草拟青霉菌丝体;正交试验;虫草素;虫草多糖;高效液相色谱法【作者】黄婷婷;马云淑;阳丹;王维丽;谭麒冉【作者单位】云南中医学院药学院,云南昆明 650500;云南中医学院药学院,云南昆明 650500;云南中医学院药学院,云南昆明 650500;云南中医学院药学院,云南昆明 650500;云南中医学院药学院,云南昆明 650500【正文语种】中文蛹草拟青霉(Paecilomyces mil itaris Liang sp.nov.)是从蛹虫草Cordyceps milltaris(ex Fr)Link中分离而得的一种真菌,现多用作蛹虫草的代用品。