毛细管电泳优秀课件 (2)
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《毛细管电泳原理》课件
过程
将样品溶液注入毛细管一端，施加电 场后，带电粒子在电场作用下开始电 泳迁移，经过一定时间后，到达毛细 管的另一端，经过检测器检测。
毛细管电泳的应用
环境监测
用于检测水体、土壤等环境样 品中的污染物，如重金属离子
、有机物等。
生物分析
用于蛋白质、DNA、RNA等生 物分子的分离和检测，可应用 于生物医学研究、临床诊断等 领域。
标准化处理
将数据转换为统一标准，便 于比较和分析。
统计分析
运用统计学方法对实验数据 进行处理，提取有意义的信 息。
结果分析与解读
趋势分析
分析实验数据的变化趋势，揭示潜在规律。
差异分析
比较不同样本或条件下的数据差异，找出关键影响因 素。
相关性分析
探究实验数据之间的关联性，揭示变量之间的相互作 用。
误差来源与控制
06
毛细管电泳的未来发展 与展望
技术创新与改进
高效分离技术的研发
01
通过改进分离介质、优化分离条件等手段，提高毛细管电泳的
分离效率。
检测技术的升级
02
研究新型检测方法，提高检测灵敏度和特异性，满足更多样品
的检测需求。
微型化与集成化
03
将毛细管电泳技术集成到微流控芯片中，实现微型化、便携式
分析。
应用领域的拓展
毛细管清洗
实验结束后，对毛细管进行必要的清洗，以 便下次使用。
数据整理与保存
将实验数据整理并保存，以便后续分析。
仪器清洁与保养
对仪器进行必要的清洁与保养，延长其使用 寿命。
REPORT
CATALOG
DATE
ANALYSIS
SUMMAR Y
05
将样品溶液注入毛细管一端，施加电 场后，带电粒子在电场作用下开始电 泳迁移，经过一定时间后，到达毛细 管的另一端，经过检测器检测。
毛细管电泳的应用
环境监测
用于检测水体、土壤等环境样 品中的污染物，如重金属离子
、有机物等。
生物分析
用于蛋白质、DNA、RNA等生 物分子的分离和检测，可应用 于生物医学研究、临床诊断等 领域。
标准化处理
将数据转换为统一标准，便 于比较和分析。
统计分析
运用统计学方法对实验数据 进行处理，提取有意义的信 息。
结果分析与解读
趋势分析
分析实验数据的变化趋势，揭示潜在规律。
差异分析
比较不同样本或条件下的数据差异，找出关键影响因 素。
相关性分析
探究实验数据之间的关联性，揭示变量之间的相互作 用。
误差来源与控制
06
毛细管电泳的未来发展 与展望
技术创新与改进
高效分离技术的研发
01
通过改进分离介质、优化分离条件等手段，提高毛细管电泳的
分离效率。
检测技术的升级
02
研究新型检测方法，提高检测灵敏度和特异性，满足更多样品
的检测需求。
微型化与集成化
03
将毛细管电泳技术集成到微流控芯片中，实现微型化、便携式
分析。
应用领域的拓展
毛细管清洗
实验结束后，对毛细管进行必要的清洗，以 便下次使用。
数据整理与保存
将实验数据整理并保存，以便后续分析。
仪器清洁与保养
对仪器进行必要的清洁与保养，延长其使用 寿命。
REPORT
CATALOG
DATE
ANALYSIS
SUMMAR Y
05
毛细管电泳分析解析PPT课件
细管（内经2－5m） 中粗管（内径 25－75m） 粗管（内径100－250m）
第24页/共61页
(3)毛细管的改性： 通常在毛细管内壁涂一层亲水性非离子型聚合物(如：聚 丙烯酰胺、甲基纤维素等)，这些涂层提高了对生物大分 子分离的效率。涂层的方法有两种。 物理涂层：将涂料经适当处理在毛细管内侧形成一层薄膜 化学涂层：是将涂料通过化学键偶联在毛细管的内侧。
第30页/共61页
图表面活性对分离的影响示意图 A: 未加表面活性的分离效果, B:加入表面活性的分离效果
第31页/共61页
5 进样方式 由于毛细管的内径非常细，其进样方式与常规电泳和层析 的进样方式有所不同。毛细管电泳的进样方式主要有两类 ，一类是电迁移进样，另一类是流体力学进样。
第32页/共61页
E = V/Lt V: 电压 Lt: 毛细管两端的总长度
第5页/共61页
(3)电泳淌度(Electric Field Mobility，简称ep ) 带电粒子在毛细管中，作定向运动的电泳速度与所在电 场强度之比。电泳淌度的单位用cm2/V.sec表示。
Ld/tm ep = Vep /E = ───
第25页/共61页
3.3检测器： 毛细管电泳配置的检测器与高效液相层析使用的检测器大 致相同，都属于超微量分析，对检测器的灵敏度要求比较 高，常用的检测器 . 紫外检测器 灵敏度可达到10-17g 激光诱发荧光检测器，灵敏度可达到10-19g 质谱检测器，灵敏度可达到10-21g 核磁共振检测器，灵敏度可达到10-21g
第13页/共61页
(8)热效应 (Joule Heating) 在高电场下毛细管中的电解质和电流发生剧烈的摩擦， 产生大量的热，这种自热现象，称之为热效应。
第14页/共61页
第24页/共61页
(3)毛细管的改性： 通常在毛细管内壁涂一层亲水性非离子型聚合物(如：聚 丙烯酰胺、甲基纤维素等)，这些涂层提高了对生物大分 子分离的效率。涂层的方法有两种。 物理涂层：将涂料经适当处理在毛细管内侧形成一层薄膜 化学涂层：是将涂料通过化学键偶联在毛细管的内侧。
第30页/共61页
图表面活性对分离的影响示意图 A: 未加表面活性的分离效果, B:加入表面活性的分离效果
第31页/共61页
5 进样方式 由于毛细管的内径非常细，其进样方式与常规电泳和层析 的进样方式有所不同。毛细管电泳的进样方式主要有两类 ，一类是电迁移进样，另一类是流体力学进样。
第32页/共61页
E = V/Lt V: 电压 Lt: 毛细管两端的总长度
第5页/共61页
(3)电泳淌度(Electric Field Mobility，简称ep ) 带电粒子在毛细管中，作定向运动的电泳速度与所在电 场强度之比。电泳淌度的单位用cm2/V.sec表示。
Ld/tm ep = Vep /E = ───
第25页/共61页
3.3检测器： 毛细管电泳配置的检测器与高效液相层析使用的检测器大 致相同，都属于超微量分析，对检测器的灵敏度要求比较 高，常用的检测器 . 紫外检测器 灵敏度可达到10-17g 激光诱发荧光检测器，灵敏度可达到10-19g 质谱检测器，灵敏度可达到10-21g 核磁共振检测器，灵敏度可达到10-21g
第13页/共61页
(8)热效应 (Joule Heating) 在高电场下毛细管中的电解质和电流发生剧烈的摩擦， 产生大量的热，这种自热现象，称之为热效应。
第14页/共61页
《毛细管电泳法》PPT课件
蛋白质、DNA等的电荷/质量比与分子大小无关， CZE方式很难分别，采用CGE能获得良好分别。
；
毛细管凝胶电泳综合了电泳技术和平板 凝胶电泳的优点 :
电泳峰锋利，柱效极高 短柱上实现极好的分别 试样容量为10－12g
主要缺陷:制备柱较困难，寿命较短 已成为分别分析生物大分子如蛋白质、 多肽、核 酸、DNA等强有力的工具。 例运用CGE分别与激光诱导荧光检测相 结合，用于DNA序列快速分析。
；
5 毛细管等电聚焦 CIEF
1、毛细管内充有两性电解质〔合成的具有不同等电点 范围的脂肪族多胺基多羧酸混合物〕，当施加直流电压 〔6～8V〕时，管内将建立一个由阳极到阴极逐渐升高 的pH梯度；
2、氨基酸、蛋白质、多肽等的所带电荷与溶液pH有 关，在酸性溶液中带正电荷，反之带负电荷。在其等电 点时，呈电中性，淌度为零；
vT=vA=vB=vC=vL 或：
TET= AEA= BEB= CEC= LEL
式中， ，有效淌度， E，电场强度
由于
T〉 A〉 B〉 C〉 L，
所以有: E T < E A < E B < E C < E L
各区带的电场强度不同。前导电解质区带的电场强度最 小。
；
假设某一区带的离子进入前一区带， 由 于电场强度变小而减速，由假设进入到 下区带，由于电场强度变大而加速， 都 退回到原区带, 结果导致各区带构成鲜 明的界面.
毛细管电泳法
Capillary Electrophoresis, CE
；
毛细管电泳是带电粒子在电场力的 驱动下，在毛细管中按其淌度或分配系 数不同进展高效、快速分别的电泳新技 术，也称为高效毛细管电泳。
一、毛细管电泳的原理 二、分别方式
；
毛细管凝胶电泳综合了电泳技术和平板 凝胶电泳的优点 :
电泳峰锋利，柱效极高 短柱上实现极好的分别 试样容量为10－12g
主要缺陷:制备柱较困难，寿命较短 已成为分别分析生物大分子如蛋白质、 多肽、核 酸、DNA等强有力的工具。 例运用CGE分别与激光诱导荧光检测相 结合，用于DNA序列快速分析。
；
5 毛细管等电聚焦 CIEF
1、毛细管内充有两性电解质〔合成的具有不同等电点 范围的脂肪族多胺基多羧酸混合物〕，当施加直流电压 〔6～8V〕时，管内将建立一个由阳极到阴极逐渐升高 的pH梯度；
2、氨基酸、蛋白质、多肽等的所带电荷与溶液pH有 关，在酸性溶液中带正电荷，反之带负电荷。在其等电 点时，呈电中性，淌度为零；
vT=vA=vB=vC=vL 或：
TET= AEA= BEB= CEC= LEL
式中， ，有效淌度， E，电场强度
由于
T〉 A〉 B〉 C〉 L，
所以有: E T < E A < E B < E C < E L
各区带的电场强度不同。前导电解质区带的电场强度最 小。
；
假设某一区带的离子进入前一区带， 由 于电场强度变小而减速，由假设进入到 下区带，由于电场强度变大而加速， 都 退回到原区带, 结果导致各区带构成鲜 明的界面.
毛细管电泳法
Capillary Electrophoresis, CE
；
毛细管电泳是带电粒子在电场力的 驱动下，在毛细管中按其淌度或分配系 数不同进展高效、快速分别的电泳新技 术，也称为高效毛细管电泳。
一、毛细管电泳的原理 二、分别方式
优质实用课件精选毛细管电泳法
ef ii i ep
i —样品分子的第 i 级电离度 i —活度系数或其它平衡离解度
总之，粒子的迁移速度除与电场强度和介质的特性有关外， 还与粒子的离解度、电荷数及其大小和形状有关。 不同的带电粒子电泳速度不同，可以实现分离
二、电渗和电渗率
•电渗（electroosmotic） ：在电场作用下，液体相 对带电的固体支持介质移动的现象，又称电渗 （流）EOF。
－管壁的 Zeta 电势，即双 电层到管壁很近的地方之间的 电位差。
总之，Zeta 电势越大，介电常数越大，粘度越小， 电渗流越大。 在电场作用下，电泳和电渗同时存在，电渗流速度 是电泳的 57 倍。
双电层模型 硅醇基阴离子
双
表面电势0
电
层 Stern电势d
电
势 电动电势
石英毛细管柱内壁的双电层结构图
小，焦耳热的影响越小。通常毛细管电泳采用尽 可能小的柱内径。
• 缓冲溶液的浓度：浓度增加，焦耳热增加。
Knox方程：Edc1/3＜1500
E—电场强度，d—管内径，c—介质浓度
满足上式方程，自热影响较小。
当E=50kV/m, c=0.01mol/L时，d＜140 m
即能满足上述方程 。
• 目前常采用内径为 25～75 m 的毛细管柱
总之，与经典电泳法比较，毛细管电泳法的特点 有四个：高效、快速、微量和自动化。
毛细管电泳的发展
• 1981年，Jorgenson．和Lukacs 使用75μm内 径的熔融石英毛细管，电泳分离氨基酸和肽，成 为高效毛细管电泳划时代的里程碑。至此，出现 了毛细管电泳技术。
• 80年代以来，诞生了很多新的毛细管电泳方法， 如毛细管凝胶电泳和毛细管等电聚焦电泳。
i —样品分子的第 i 级电离度 i —活度系数或其它平衡离解度
总之，粒子的迁移速度除与电场强度和介质的特性有关外， 还与粒子的离解度、电荷数及其大小和形状有关。 不同的带电粒子电泳速度不同，可以实现分离
二、电渗和电渗率
•电渗（electroosmotic） ：在电场作用下，液体相 对带电的固体支持介质移动的现象，又称电渗 （流）EOF。
－管壁的 Zeta 电势，即双 电层到管壁很近的地方之间的 电位差。
总之，Zeta 电势越大，介电常数越大，粘度越小， 电渗流越大。 在电场作用下，电泳和电渗同时存在，电渗流速度 是电泳的 57 倍。
双电层模型 硅醇基阴离子
双
表面电势0
电
层 Stern电势d
电
势 电动电势
石英毛细管柱内壁的双电层结构图
小，焦耳热的影响越小。通常毛细管电泳采用尽 可能小的柱内径。
• 缓冲溶液的浓度：浓度增加，焦耳热增加。
Knox方程：Edc1/3＜1500
E—电场强度，d—管内径，c—介质浓度
满足上式方程，自热影响较小。
当E=50kV/m, c=0.01mol/L时，d＜140 m
即能满足上述方程 。
• 目前常采用内径为 25～75 m 的毛细管柱
总之，与经典电泳法比较，毛细管电泳法的特点 有四个：高效、快速、微量和自动化。
毛细管电泳的发展
• 1981年，Jorgenson．和Lukacs 使用75μm内 径的熔融石英毛细管，电泳分离氨基酸和肽，成 为高效毛细管电泳划时代的里程碑。至此，出现 了毛细管电泳技术。
• 80年代以来，诞生了很多新的毛细管电泳方法， 如毛细管凝胶电泳和毛细管等电聚焦电泳。
《毛细管凝胶电泳》课件
安全。
02
毛细管凝胶电泳的 基本原理
电泳的基本原理
电泳是利用带电粒子 在电场中的迁移速度 差异进行分离的方法 。
迁移速度与带电粒子 的电荷量、半径、介 质粘度等有关。
带电粒子在电场中受 到库仑力的作用，产 生定向移动。
凝胶电泳的原理
凝胶电泳利用凝胶作为支持介 质，对带电粒子进行分离。
凝胶具有三维网络结构，能够 限制带电粒子的迁移路径，从 而实现分离。
拓展应用领域
将毛细管凝胶电泳技术应用于更多领域，如医学诊断、环境监测、 食品安全等，拓展其应用范围。
05
毛细管凝胶电泳的 应用实例
在生物大分子分离中的应用
蛋白质分离
毛细管凝胶电泳在蛋白质分离中具有 高分辨率和高分离效率的特点，可用 于分离复杂的蛋白质混合物，如细胞 提取物、血清等。
多糖分离
利用毛细管凝胶电泳可以分离和表征 各种多糖，如细菌荚膜多糖、植物细 胞壁多糖等，对于糖类化合物的结构 和功能研究具有重要意义。
标准化与规范化
为了更好地推广和应用毛细管凝胶电泳技术，需 要制定相关的标准和技术规范，提高技术的可靠 性和可重复性。
THANKS
感谢您的观看
技术优势与局限性
该技术具有高分辨率、高灵敏度、快速分离等优势，但也 存在一些局限性，如样品制备繁琐、成本较高等。
展望
1 2 3
技术创新
未来毛细管凝胶电泳技术将不断优化和改进，提 高分离效率和检测灵敏度，降低操作成本。
应用拓展
随着技术的进步和应用需求的增加，毛细管凝胶 电泳技术在更多领域将得到应用和推广，如临床 诊断、药物研发等。
优点
高分离效率
毛细管凝胶电泳技术利用微米尺度的 分离通道，能够实现高分离效率，尤 其适合分离复杂生物样品。
02
毛细管凝胶电泳的 基本原理
电泳的基本原理
电泳是利用带电粒子 在电场中的迁移速度 差异进行分离的方法 。
迁移速度与带电粒子 的电荷量、半径、介 质粘度等有关。
带电粒子在电场中受 到库仑力的作用，产 生定向移动。
凝胶电泳的原理
凝胶电泳利用凝胶作为支持介 质，对带电粒子进行分离。
凝胶具有三维网络结构，能够 限制带电粒子的迁移路径，从 而实现分离。
拓展应用领域
将毛细管凝胶电泳技术应用于更多领域，如医学诊断、环境监测、 食品安全等，拓展其应用范围。
05
毛细管凝胶电泳的 应用实例
在生物大分子分离中的应用
蛋白质分离
毛细管凝胶电泳在蛋白质分离中具有 高分辨率和高分离效率的特点，可用 于分离复杂的蛋白质混合物，如细胞 提取物、血清等。
多糖分离
利用毛细管凝胶电泳可以分离和表征 各种多糖，如细菌荚膜多糖、植物细 胞壁多糖等，对于糖类化合物的结构 和功能研究具有重要意义。
标准化与规范化
为了更好地推广和应用毛细管凝胶电泳技术，需 要制定相关的标准和技术规范，提高技术的可靠 性和可重复性。
THANKS
感谢您的观看
技术优势与局限性
该技术具有高分辨率、高灵敏度、快速分离等优势，但也 存在一些局限性，如样品制备繁琐、成本较高等。
展望
1 2 3
技术创新
未来毛细管凝胶电泳技术将不断优化和改进，提 高分离效率和检测灵敏度，降低操作成本。
应用拓展
随着技术的进步和应用需求的增加，毛细管凝胶 电泳技术在更多领域将得到应用和推广，如临床 诊断、药物研发等。
优点
高分离效率
毛细管凝胶电泳技术利用微米尺度的 分离通道，能够实现高分离效率，尤 其适合分离复杂生物样品。
《毛细管电泳原理》课件
分离的程度。
分辨率
02
分辨率是指毛细管电泳谱中相邻两峰之间的分离程度，分辨率
越高，分离效果越好。
检测限
03
指在毛细管电泳谱中能够检测到的最小样品浓度，检测限越低
，灵敏度越高。
定量分析
标准曲线法
通过绘制标准曲线，将毛细管电泳谱中的峰高或峰面积与样品浓度进行线性回归 分析，从而进行定量分析。
内标法
通过在样品中加入内标物，利用内标物与样品中各组分的分离度和响应因子相同 的特点，进行定量分析。
数据分析方法
峰高法
通过测量毛细管电泳谱中各组分的峰高，利用峰高与样品浓 度的线性关系进行定量分析。
峰面积法
通过积分毛细管电泳谱中各组分的峰面积，利用峰面积与样 品浓度的线性关系进行定量分析。
05
毛细管电泳的优缺点与展望
优点与缺点
高分离效能
毛细管电泳具有极高的分离效率，可 实现复杂样品的快速分离。
药物分析
毛细管电泳在药物分析中 可用于药物成分的分离和 检测，以及药物代谢产物 的分析。
食品安全
毛细管电泳可用于食品安 全检测，如食品添加剂、 农药残留等的检测。
02
毛细管电泳的仪器与实验条
件
仪器介绍
毛细管电泳仪的基本构成
检测器的选择
包括高压电源、进样系统、毛细管电 泳柱、检测器和数据采集系统等部分 。
配制电解质溶液
按照所需的浓度和比例，配制 电解质溶液。
数据处理与分析
采集实验数据，进行数据处理 和分析，得出结论。
03
毛细管电泳的分离模式与分
离机制
分离模式
毛细管区带电泳（CZE）
胶束电动色谱（MEKC）
毛细管凝胶电泳（CGE）
《毛细管电泳》PPT课件 (2)
进行电泳分析，柱效高达40万/m，促进电泳技术发生了根本
变革，迅速发展成为可与GC、HPLC相媲美的崭新的分离分析
技术——高效毛细管电泳。
2020/12/13
ppt课
件
6
三.高效毛细管电泳分析
高效毛细管电泳在技术上采取了两项重要改进：
一是采用了50μm (0.05mm)内径的毛细管,
二是采用了高达数千伏的电压。
2020/12/13
ppt课
件
8
第二节 高效毛细管电泳理论
基础
basic theory of HPCE
一、PHCE基本原理
Basic principles of PHCE
二、电渗现象与电渗流
Electroosmosis and electroosmotic flow
三、影响电渗流的因素
Factors influenced electroosmosis
在高电场的作用下，带正电荷的溶液表面及扩散层向阴 极移动，由于这些阳离子实际上是溶剂化的，故将引起柱中
q — 离子所带的有效电荷；
γ — 离子的表观液态动力学半径；
η — 介质的粘度；
2020/12/13
ppt课
件
11
二、电渗现象与电渗流
electroosmosis and electroosmotic flow
1.电渗流现象
当固体与液体接触时，固体表面由于某种原因带一种电 荷，则因静电引力使其周围液体带有相反电荷，在液-固界 面形成双电层，二者之间存在电位差。（固有性质）
件K.蒂塞利乌斯
Arne Wilhelm Kaurin Tiselius (1902－1971）
蒂塞利乌斯1925年从事胶体溶液中悬浮蛋白质的电泳分离 研究。曾自制超速离心机测定蛋白质分子的大小和形状,并与 斯韦德贝里合作发表了第一篇论文,报道了测定蛋白质淌度的 新方法。1930年他进一步改进实验手段和装置,发表了关于色 谱法和吸附的论文。1935年改建原有电泳装置,发展了区带电 泳法,大大提高了效率和分辨率。1940年他用自己设计的新电 泳装置成功地分离了血清中蛋白质的4个组分,分别命名为:白 蛋白α、β、γ和球蛋白。该法迅速应用于分离和鉴定各种复杂 蛋白质及其他天然物质的混合物的组成。他因对电泳分析和 吸附方法的研究,特别是发现了血清蛋白的组分而获得1948年 诺贝尔化学奖。
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似分子筛的作用
——试样分子按大小分离。
蛋白质、DNA等的 m/z与分子大小无关，CZE模式很难 分离，采用CGE能获得良好分离，DAN排序的重要手段
无胶筛分技术：采用低粘度的线性聚合物溶液代
替高粘度交联聚丙烯酰胺。柱便宜、易制备。
3、 胶束电动毛细管色谱（MECC ，MEKC）
（1）缓冲液中加入表面活性剂，其浓度达到临界浓度， 形成一疏水内核、外部带负电的胶束(假固定相)。
➢ 电渗流速度是电泳流速度的5-7倍，混合物 中所有的组份随电渗流朝一个方向迁移。
➢ 流出顺序：①正离子②中性粒子③负离子
电 泳 过 程 中 不 但 可 以 按 类 分 离 , 除 中 性
粒子外,同种类离子由于受到的电场力大 小不一样也同时被相互分离。
五、主要分离模式
毛细管区带电泳（CZE） 毛细管凝胶电泳（CGE） 胶束电动毛细管色谱（MECC） 毛细管离子分析
（2）电泳流和电渗流的方 向相反，且ν电渗流>ν电泳 ，电 场力的作用下负电胶束以较 慢的速度向负极移动；
3、 胶束电动毛细管色谱（MECC ，MEKC）
（3）中性分子在胶束相和溶液（水相）间分配，疏 水性强的组分与胶束结合的较牢，流出时间长；
（4）可用来分离中性物质。 （5）色谱与电泳分离模式的结合。
4、 毛细管电色谱 CEC
在毛细管壁上键合或涂渍高效液相色谱的固定 液，以电渗流为流动相，试样组分在两相间的分配 为分离机理的电动色谱过程
固定相：依HPLC理论和经验选择，反相应用多 缓冲液：水溶液或有机溶液。
常用甲醇-水、乙睛-水等
六、 高效毛细管电泳仪器
1.高压电源
（1）0～30 kV 稳定、连续可调的直流电源 （2）电场强度程序控制系统 （3）电源极性易转换
毛细管电泳
一、电泳的含义
电泳：在电场作用下，电解质溶液中的带电质点在
电场力作用下向电荷相反的电极方向迁移的过程。
由于不同离子所带电荷及性质的不同，迁移速 率不同，可实现分离。
1937年，蒂塞利乌斯（ Tiselius，瑞典) 第一次用 自由溶液电泳从人血清提取的蛋白混合液分离出白蛋
白和α、β、γ球蛋白；1948年，获诺贝尔化学奖。
2. 毛细管柱
➢要求：电绝缘、紫外/可见光透明且富有弹性 ➢材料：石英（各项性能好）、玻璃 ➢规格：内径20~75 um，外径350~400um；长度<=1m
3.缓冲液池
要求 ➢化学惰性 ➢机械稳定性好
——玻璃瓶
4. 检测器
➢要求：具有极高灵敏度，可柱上或柱端检测
类型 紫外-可见 荧光 激光诱导荧光 电导
特点：
A、分离效率高：104理论塔板数，接近GC 空心管，无固定液，H = B/u；流型不同
B、 分离速度快：优于LC，接近GC C、进样量少：nL
四、分离过程
电泳：带电粒子在电场作用下迁移 电渗：溶剂在电场作用下的单向流动
•正溶质离子所受的力：电场力 + 电渗力 •负溶质离子所受的力：电场力 电渗力 •中性分子所受的力：电渗力
检测限/mol 10-13～10-15 10-15～10-17 10-18～10-20 10-18～10-19
特点 加二极管阵列，光谱信息 灵敏度高，样品需衍生 灵敏度极高，样品需衍生 离子灵敏，需专用的装置
5、进样方式
进样量：毛细管长度的1%-2%；纳升级、非常小
1. 流体力学进样方式 进样端加压、出口端抽真空、虹吸进样
2. 电动进样方式 毛细管一端插入样品瓶，加电压
3. 扩散进样 试样通过扩散作用进入分离柱端口处。
七、 应用 1、离子分析
2、药物分析
采用MEKC模式， 鉴定违禁药物； 效果优于HPLG法
3、氨基酸分析
4、蛋白质分析
1、毛细管区带电泳 CZE
带电粒子的迁移速度=电泳和电渗流速度的矢量和。 •正溶质离子所受的力：电场力 + 电渗力 •负溶质离子所受的力：电场力 电渗力 •中性分子所受的力：电渗力 ➢流出顺序：①正离子②中性粒子③负离子
最基本、应用广的分离模式
2、毛细管凝胶电泳 CGE
将聚丙烯酰胺等在毛细管柱内交联生成凝胶,类
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二、经典电泳分析
利用电泳现象对某些化学或生物物质进行分离分 析的方法和技术叫电泳法或电泳技术。
按形状分类： U型管电泳、柱状电泳、板电泳
按载体分类： 滤纸电泳、琼脂电泳、聚丙烯酰胺电泳、自由电泳
缺点：操作烦琐，分离效率低，定量困难，无法与其 他分析相比。
三、高效毛细管电泳分析
技术上的重要改进：
➢ 采用了0.05mm内径的毛细管 ➢ 采用了高达数千伏的电压