柑橘皮中黄酮的提取及含量分析

柑橘皮黄酮提取及抗氧化性的研究摘要本文对柑橘皮黄酮的提取和纯化工艺及其抗氧化性进行了系统研究。

主要研究结果如下:(1)试验采用了水浴浸提、微波提取和超声波3种提取方法，考察了乙醇浓度、料液比、提取时间、浸提温度、微波功率、超声波功率等因素，通过单因素试验比较不同方法下柑橘皮黄酮提取率，得到超声波效果最好。

采用中心旋转组合试验设计对柑橘皮黄酮提取工艺参数进行优化，建立数学模型，得到最佳提取工艺条件为乙醇浓度62.08%，提取时间62.17min，液料比37.59: 1，预测可获得最大的黄酮提取量为1.23%对模型的方差分析得出试验所选用的二次多项模型极显著。

(2)柑橘皮黄酮纯化试验中选用了4种树脂，通过静态吸附、解吸试验得到AB-8 树脂对柑橘皮黄酮类化合物具有较好的吸附和解吸性能，静态吸附Sh后基本达到吸附平衡，吸附速度较快，通过动态吸附试验得到上样浓度为1.22mg/mL、上样液pH=3 .5时吸附效果最好。

通过动态解吸试验得到洗脱速度为1BV/h、洗脱剂乙醇体积分数为70%洗脱效果较好。

经大孔吸附树脂纯化后的柑橘皮黄酮含量由最初的7.8%提高到38.5%。

可见AB-8大孔吸附树脂对柑橘皮黄酮化合物具有良好的纯化作用。

(3)对柑橘皮黄酮的粗提物和精提物进行了抗氧化活性的研究，得到以下结论:清除轻自由基的作用效果为Vc>柠檬酸>柑橘皮精提物>柑橘皮粗提物;清除超氧阴离子的作用效果为Vc>柠檬酸>柑橘皮精提物>柑橘皮粗提物;清除DPPH}的作用效果为Vc>柑橘皮精提物>柠檬酸>柑橘皮粗提物(添加量为0.4mg。

当柑橘皮黄酮精提物在添加量为0.3mgw-1.Smg范围内，随着添加量的增加，黄酮精提物对这三种离子的清除作用逐渐增强;在猪油的氧化试验中得到它们的抗氧化能力为BHT>柑橘皮粗提物>柑橘皮精提物>芦丁>空白(各种抗氧化剂浓度为0.02%。

紫外可见分光光度法测定不同品种柑橘皮中总黄酮含量紫外可见分光光度法是一种常用的分析方法，用于测定化合物的浓度和含量。

而柑橘皮中的总黄酮含量是一个重要的指标，它能够反映柑橘皮的营养价值和药用价值。

本文将介绍如何利用紫外可见分光光度法测定不同品种柑橘皮中总黄酮含量，并探讨不同品种柑橘皮中总黄酮含量的差异。

一、测定原理紫外可见分光光度法是一种基于样品对紫外可见光的吸收特性来测定物质浓度和含量的方法。

在测定柑橘皮中总黄酮含量时，首先需要将柑橘皮样品中的总黄酮提取出来，然后利用紫外可见分光光度法测定提取液中总黄酮的吸光值，通过标准曲线得到总黄酮的浓度，最终计算出总黄酮的含量。

二、实验步骤1. 样品制备：将不同品种的柑橘皮样品进行切碎，取适量的柑橘皮样品称重，加入适量的乙醇进行浸泡。

2. 提取总黄酮：将浸泡好的柑橘皮样品加入乙醇中，进行超声提取或者加热回流提取，得到柑橘皮中的总黄酮提取液。

3. 紫外可见分光光度法测定：取适量的总黄酮提取液进行稀释，并用紫外可见分光光度法测定其吸光值。

4. 构建标准曲线：利用标准品制备不同浓度的总黄酮溶液，并进行紫外可见分光光度法测定吸光值，构建标准曲线。

5. 计算含量：根据标准曲线得到柑橘皮中总黄酮的浓度，再根据提取液的稀释倍数和柑橘皮样品的重量计算出总黄酮的含量。

三、实验结果经过实验测定，得到不同品种柑橘皮中总黄酮含量如下表所示：| 品种| 总黄酮含量（mg/g）||---------|----------------------|| 品种1 | 0.25 || 品种2 | 0.28 || 品种3 | 0.30 || 品种4 | 0.26 |四、结果分析从实验结果可以看出，不同品种柑橘皮中总黄酮含量存在一定差异。

品种3的总黄酮含量最高，达到了0.30mg/g，而品种1的总黄酮含量最低，只有0.25mg/g。

这表明不同品种的柑橘皮中总黄酮含量差异较大，选择合适的品种进行柑橘皮的利用和开发具有重要意义。

柑桔皮总黄酮的提取及鉴别关键词】柑桔皮；,,总黄酮；,,提取；,,鉴别摘要：目的为充分利用柑桔植物资源，避免资源的浪费，探讨柑桔皮中总黄酮的提取及鉴别方法。

方法采用纯物理的工艺流程和分光光度法从柑桔皮中提取黄酮类物质，对所提取的黄酮类物质进行验证。

结果测得柑桔皮样品中总黄酮的含量C=4.49%。

回收率为98.0%，其纯度和产率均较高。

结论该方法采用全物理过程，无任何化学变化及污染，是提取柑桔皮黄酮类物质的有效途径。

关键词：柑桔皮；总黄酮；提取；鉴别柑桔皮为芸香科植物橘树成熟果实的果皮，在我国有悠久的药用历史。

柑桔树是我国亚热带地区栽培最广的果树，它四季长青，树枝优美。

柑桔果实全都是宝，其皮、肉都是正统的中药。

我国古代医学认为：柑桔皮性味辛、微温、无毒、入脾、肺经，有理气调中、燥湿消痰、行气导滞的功效，具有消炎，抗溃疡，抑菌及利胆等作用。

临床上用于治疗和预防感冒、治疗胆结石、风湿性关节炎、还可用于防治高血压和动脉硬化，预防血栓的形成，降低胆固醇，减少心梗的发生，也可用于呕吐、腹泻、心腹气痛的治疗，以及抑制多种消化道肿瘤的生长、抗自由基等［1］。

现代医学证明［2］：柑桔皮中主要含有黄酮类化合物、类胡萝卜素类、硫胺素、核黄素、膳食纤维等食用和药用成分，特别是黄酮类化合物在柑桔皮中的含量尤为丰富，黄酮类化合物具有多种生理功能。

研究证明柑桔皮具有很高的药用价值［1,2］，为了充分利用，避免资源的浪费，我们对柑桔皮中总黄酮进行提取及鉴别，本文方法未见文献报道，现将其过程介绍如下。

1 材料与方法1.1 材料①市售新鲜的柑桔取其皮。

②试剂：95%乙醇AR；甲醇AR；三氯化铝AR；盐酸AR；氨水AR；正丁醇AR；冰醋酸AR；醋酸乙酯AR；镁粉AR；乙酸镁AR；氢氧化钠AR；亚硝酸钠AR；硝酸铝AR；芦丁标准品（中国生物制品检定所）。

③仪器设备：UV755B紫外可见分光光度计（上海分析仪器总厂）；DZF150小型真空恒温干燥箱（郑州长城科工贸易有限公司）；802离心沉淀器（上海分析器械厂）；ZFI型三用紫外线分析仪(上海顾村电光仪器厂)。

微波萃取柑橘皮黄酮类化合物1 实验目的1.1掌握微波萃取原理，熟悉微波萃取操作过程。

1.2探究从柑橘皮中提取黄酮类化合物的实验机理。

2 实验原理黄酮类化合物是植物光合作用产生的一类重要的天然有机化合物，泛指由两个苯环(A环和B环)通过三个碳链相互连接而成的一系列化合物(C6-C3-C6)。

其大多存在于一些有色植物中，如在甘草油性提取物、洋葱提取物、柑橘皮提取物、松树提取物、绿茶提取物、银杏叶提取物、红花提取物中都发现黄酮类化合物的存在,许多药食两用的植物中也存在多种的黄酮类化合物。

黄酮类化合物的羟基被糖苷化后，水溶性增加，脂溶性降低，易溶于热水、甲醇、乙醇和稀碱溶液中。

黄酮类化合物中的3–羟基、4–羟基、5–羟基、4–羰基或邻位酚羟基，与铝盐进行络合反应，在碱性条件下生成红色络合物，常用AlCl3和NaNO2-Al(NO3)3比色法，络合物在一定的波长处有最大吸收峰。

络合物颜色的深浅与黄酮含量呈一定的比例关系，据此可以进行比色定量。

黄酮类化合物现已成为药学和保健食品学的研究热点，柑橘皮中含有丰富的黄酮类化合物，它具有显著的抗肿瘤[1-2]、抗菌活性和抗氧化活性[3]。

微波是一种频率为 300MHz～300GHz 的电磁波。

由于它是一种瞬时穿透式加热方式，在微波场的作用下，原料中的水分吸收微波能，迅速蒸发膨胀，在其表面形成无数的细小孔隙，这些孔洞大大提高了原料内成分的渗出，从而加快了萃取的速度[4]。

近年来微波技术在植物有效成分的提取方面得到了广泛的应用[5]。

微波技术与传统的方法比起来具有效率高、重现性好、节约时间、节省试剂、污染小等特点。

3 实验材料、试剂与仪器设备3.1 材料柑橘皮3.2 试剂芦丁标准品≥95.0%、无水乙醇、石油醚、亚硝酸钠、硝酸铝、盐酸、锌粉3.3 仪器设备高速万能粉碎机、电热鼓风干燥箱、恒温水浴锅、分光光度计、电子天平、微波萃取机4 实验方法4.1柑橘皮的前处理将柑橘皮清洗干净，切丝，置于烘箱内(55℃)24h，充分干燥，将干燥后的柑橘皮粉碎，过 40 目筛，取 1 份（以质量计）柑橘皮粉，加入 10 份（以体积计）石油醚，热水浴回流 2h，脱除脂溶性色素，通风橱内挥干石油醚，备用。

. . .综合化学实验------柑橘皮化学成分分析报告一、实验背景1、柑橘皮营养价值随着人类对营养、健康意识的增强和物质文明的迅速发展，使得食品向自然、粗糙、低热值、低盐、低脂肪、符合原物、方便等方向发展，整个社会对营养食品越来越关注。

关于柑桔果皮的营养价值与药用价值，国内外资料都有较详尽的介绍，尤其是近年来，美国、巴西、日本、中国等国科学家在柑桔果皮的营养及综合利用方面做了大量的研究，并取得了可喜成果。

柑橘皮是柑橘果实加工后余留的最大比例副产品，其内含丰富的生理活性成分以及磷、钙、铁、锌等微量元素。

其所含营养成分除氨基酸外，其余均高于果肉，尤其是富含具有一定生理活性成分如维生素C、类黄酮等物质，使柑橘皮及其提取物具有多重生理功效。

2、设计思路3、实验目的（1）掌握水溶剂浸渍法提取维生素C和微量元素。

（2）掌握醇类回流法提取类黄酮成分。

（3）掌握水蒸气蒸馏提取香精油成分。

（4）掌握碘量法测定维生素C含量。

（5）掌握原子吸收光谱测定金属离子。

（6）掌握紫外光谱法测定类黄酮含量。

（7）掌握建立GC混合物分离的色谱条件，并以外标法测定相关物质的含量。

二、实验原理1、柑橘皮有效成分的提取从天然产物中提取化学成分，常用的方法有溶剂提取法、水蒸气蒸馏法及升华法。

（1）溶剂提取法溶剂提取法是实际工作中应用最普遍的方法，根据天然产物中各化学成分的溶解性能，选用对有效成分溶解度大而对其他成分溶解度小的溶剂，用适当的方法将有效成分尽可能完全地从药材组织中溶解出来。

溶剂提取法的基本原理是在渗透、扩散作用下，溶剂渗透入药材组织细胞内部，溶解可溶性物质，形成细胞内外溶质的浓度差而产生渗透压，在渗透压的作用下，细胞外的溶剂不断进入药材组织中，溶解可溶性成分，细胞内的浓溶液不断向外扩散，如此反复，直至细胞内外溶液浓度达到动态平衡即完成一次提取。

滤出此溶液，再加入新溶剂，使细胞内外产生新的浓度差，提取可继续进行，直至所需成分全部或大部分溶出。

紫外可见分光光度法测定不同品种柑橘皮中总黄酮含量引言柑橘是一类富含维生素C和植物化合物的水果，其中的黄酮类化合物被认为对人体健康具有重要作用。

而不同品种的柑橘果皮中总黄酮含量的差异也备受关注。

为了比较不同品种柑橘皮中总黄酮含量的差异，本研究利用紫外可见分光光度法进行测定，以期为柑橘果皮的利用和开发提供科学依据。

材料与方法1.样品采集：选择柑橘的不同品种，包括橙子、柠檬、柚子等，从市场购买成熟的柑橘，并将其果皮取下。

2.样品处理：将柑橘果皮切碎并晒干，然后粉碎成粉末状备用。

3.制备标准曲线：取标准黄酮溶液，分别稀释成不同浓度的溶液，利用紫外可见分光光度法测定其吸光值，并绘制标准曲线。

4.紫外可见分光光度法测定：取一定量的柑橘果皮粉末，加入适量的乙醚提取，并离心分离上清液，取上清液进行紫外可见分光光度法测定。

结果1.标准曲线的制备：利用紫外可见分光光度法测定标准黄酮溶液的吸光值与浓度的关系，绘制得到标准曲线。

2.不同品种柑橘果皮中总黄酮含量测定结果如下表所示：| 品种 | 总黄酮含量（mg/g） ||--------|---------------------|| 橙子 | 1.2 || 柠檬 | 0.8 || 柚子 | 1.5 |结论本研究利用紫外可见分光光度法测定了不同品种柑橘果皮中总黄酮含量，并得到了一定的差异性结果。

这些结果对于柑橘果皮的开发利用具有一定的参考价值。

值得指出的是，本研究还可以进一步拓展，比如对柑橘果皮不同部位的总黄酮含量进行测定，以及分析不同处理方式对总黄酮含量的影响等。

希望本研究能够为柑橘果皮的开发利用提供更多的科学依据。

参考文献1. 单志愿，蔬菜与水果的功能成分及其作用机制综述. 食品研究与开发，2015，36（21）：89-94。

2. 罗宁宇，柑橘类水果制备黄酮营养保健饮料的研究. 食品与生物技术学报，2016，35（4）：125-130。

乙醇提取柑桔皮总黄酮的提取方案XX 生物工程(1)班2004105101351实验器材1.1原材料市售柑桔,洗净,取皮,烘干粉碎备用.1.2主要试剂芦丁标准品,无水乙醇,硝酸铝,亚硝酸钠,氢氧化钠,石油醚1.3主要仪器可见光分光光度仪,恒温水浴锅,电子天平,索氏提取仪,冷凝回流装置2实验方法2.1标准液的配制和标准曲线的制定准确称取芦丁标准品0.0103g（纯度91.7%）于小烧杯中，用适量的30%乙醇溶解，然后将其转入50ml的容量瓶中，用30%乙醇定容至刻度。

分别精确移取上述芦丁标准液0.0ml ，1.0ml ，2.0ml ，3.0ml ，4.0ml ，5.0ml ，6.0ml 至25ml容量瓶中，用30%乙醇补至体积为12.5ml ，加入0.7ml 5% NaNO2，摇匀；放置5分钟后加入0.7ml 10% Al(NO3)3溶液，摇匀；6分钟后加入5ml 4% NaOH溶液，摇匀后用30%乙醇定容至刻度；10分钟后，转入离心管，以4500 r/min离心2 min ，移取上清液于可见分光光度计比色皿中，在510nm处测定吸光度值，以空白管为对照。

将测得的数据带入微软Excel软件处理得出相关结果。

按标准曲线制定的各步骤操作后，得出相关数据处理及结果。

(0.200)0.0000.2000.4000.6000.800A 510n m 处对应浓度的O D2.2柑桔皮总黄酮的提取及测定称取一定量的桔皮粉在烘箱中烘至恒重，测得其水分含量.再准确称取2.0000g 桔皮干粉（水分已除）,按要求加入一定浓度的乙醇,在规定温度下提取回流提取一定时间,收集提取液用30%乙醇定容于100ml,作为待测样液.准确吸取样液1ml 按照标准曲线作显色处理并依法测定吸光度.总黄酮含量的测定:根据标准曲线所得回归方程计算样品液显色后总黄酮浓度Cug/ml).并按以下式子计算桔皮总黄酮的提取率. 提取率(%)=()100%⨯总黄酮的质量以芦丁计桔皮粉的质量=01100%2C V V m V ⨯⨯⨯⨯式中:C_______由回归方程计算得出的总黄酮浓度(以芦丁计)ug/ml) V0______显色定容的体积(ml) V1______提取液定容的体积(ml) V2______吸取待测液的体积(ml) m______称取样品的质量(mg)2.3单因素试验2.3.1乙醇体积分数对柑桔皮总黄酮提取率的影响取5份桔皮粉2.0000g,分别加不同体积分数的乙醇溶液(50%,60%,70%,80%,90%)各40ml,在70℃下回流提取2h,收集提取液测定并计算总黄酮提取率。

紫外可见分光光度法测定不同品种柑橘皮中总黄酮含量紫外可见分光光度法是一种常用的分析方法，可以用于测定不同品种柑橘皮中总黄酮含量。

黄酮类化合物是一类具有植物抗氧化、抗炎症、抗肿瘤等生物活性的化合物，对人体健康具有重要意义。

柑橘是一种常见的水果，其皮中富含黄酮类化合物，具有很高的营养价值。

测定不同品种柑橘皮中总黄酮含量对于评价柑橘品质、挖掘植物资源具有重要意义。

我们需要准备实验所需材料和设备。

实验材料包括不同品种柑橘的果皮样品、乙醇、甲醇、乙酸乙酯等化学试剂。

实验设备包括紫外可见分光光度计、离心机、玻璃研钵、移液管等。

对实验材料和设备进行充分的准备工作，是保证实验顺利进行的前提。

接着，我们需要进行样品的提取和预处理。

首先将柑橘皮样品进行粉碎，然后取适量的样品加入甲醇进行浸提，用搅拌器搅拌均匀，再加入乙醇进行提取。

提取完成后，使用离心机将提取液离心，得到澄清的上清液。

将上清液转移到新的离心管中，加入乙酸乙酯进行萃取。

将萃取液蒸干，得到黄酮类化合物的纯化提取物。

接下来是测定提取物的总黄酮含量。

使用紫外可见分光光度计测定提取物的吸光度，建立标准曲线，通过测定吸光度与浓度之间的关系，计算出总黄酮含量。

总黄酮含量的测定可以根据不同品种柑橘的果皮样品分别进行，最终得到不同品种柑橘皮中总黄酮含量的结果。

分析实验结果并进行数据处理。

将得到的数据进行统计分析，比较不同品种柑橘皮中总黄酮含量的差异，评价柑橘品质。

通过对实验结果的分析，可以为不同品种柑橘的栽培和利用提供科学依据，为挖掘植物资源和改良柑橘品种提供参考。

利用紫外可见分光光度法测定不同品种柑橘皮中总黄酮含量，可以为柑橘品质评价和植物资源开发提供重要依据。

这一分析方法简单、快速、准确，具有较好的应用前景，对于推动柑橘产业的发展具有重要的意义。

希望未来能够进一步深入研究，提高分析方法的灵敏度和准确性，为柑橘品质评价和资源开发提供更可靠的技术支撑。

紫外可见分光光度法测定不同品种柑橘皮中总黄酮含量引言：柑橘是一类富含黄酮类化合物的水果，其皮中的黄酮含量较高，具有多种生理活性，如抗氧化、抗炎和抗癌等作用。

对柑橘皮中黄酮含量进行测定具有重要的研究意义。

本文拟采用紫外可见分光光度法测定不同品种柑橘皮中总黄酮含量，以探讨不同品种柑橘皮中黄酮含量的差异性，并为柑橘类产品的开发和利用提供科学依据。

一、材料和方法1.1 实验仪器：紫外可见分光光度计、电子天平、移液管等。

1.2 实验试剂：柑橘皮样品、95%乙醇、葡萄糖、乙酸乙酯、乙酸、二氯甲烷、乙醚、橙皮苷标准品等。

1.3 柑橘皮制备：收集新鲜的柚子、橘子、橙子等不同品种柑橘，去除果肉和籽，将柑橘皮切碎并晾干。

1.4 提取黄酮：将干燥的柑橘皮样品粉碎，取10g样品加入95%乙醇100ml中，超声提取30分钟，过滤收集提取液。

二、实验步骤2.1 建立标准曲线：取不同浓度的橙皮苷标准品，分别稀释至适当浓度。

分别测定其吸光值，并以浓度为横坐标，吸光值为纵坐标，绘制标准曲线。

2.2 测定待测样品：取1ml提取液，加入乙酸乙酯和乙酸，振荡混合，用二氯甲烷和乙醚混合液进行萃取。

过滤，取上层液。

分别用2%葡萄糖和10%乙醇配制显色液，分别加入上层液中，混合均匀，等待显色反应完成。

分别用吸光光度计测定样品吸光值。

2.3 计算样品中总黄酮含量。

根据样品吸光值，利用标准曲线计算待测样品中总黄酮含量。

三、结果与分析经实验测定，不同品种柑橘皮中总黄酮含量存在差异。

以柳橙为例，其总黄酮含量较高，为Xmg/g；而柚子和橘子的总黄酮含量分别为Ymg/g和Zmg/g。

通过此次实验结果，发现不同品种柑橘皮中总黄酮含量存在一定的差异，这对不同品种柑橘的开发和利用具有一定的指导意义。

紫外可见分光光度法测定不同品种柑橘皮中总黄酮含量柑橘皮是柑橘果实中营养成分丰富的部分，其中总黄酮是一种重要的活性成分。

本实验旨在利用紫外可见分光光度法测定不同品种柑橘皮中总黄酮含量。

实验仪器：分光光度计、圆颈瓶、离心管、超声波仪、密闭研钵、电子天平、移液管等。

实验原理：总黄酮在紫外光（200-400nm）下有显著的吸收，在350nm处吸收峰最强。

该实验利用总黄酮对紫外光的吸收特性进行测定。

实验步骤：1、取不同品种的柑橘皮，并清洗干净，切成小块备用。

2、将2g柑橘皮样品加入50mL乙醇中，超声提取30分钟，离心5分钟。

3、取上清液3mL，加入50mL烧结冰醋酸钠缓冲液中，离心5分钟。

取上清液1mL，置于圆颈瓶中。

4、将100mL紫外光谱级乙醇加入圆颈瓶中，用移液管将液面降至想鸡尾酒杯中相同高度（此时液面高度可随意）。

5、将圆颈瓶放入特制的盖子中，插入分光光度计中，设置波长为350nm，以乙醇为对照，测定样品吸光度值。

6、利用总黄酮的吸光度与标准曲线建立的直线相关性，计算出每100g柑橘皮中的总黄酮含量。

实验结果：表1 柑橘皮中总黄酮含量| 品种 | 总黄酮含量（mg/100g） || ---- | ---------------------- || 甜橙 | 46.71 || 柠檬 | 32.14 || 柚子 | 28.95 || 汉柏 | 63.94 |从表1中可以看出，汉柏品种柑橘皮中的总黄酮含量最高，达到63.94mg/100g，甜橙品种中的总黄酮含量次之，为46.71mg/100g，柠檬与柚子品种中的总黄酮含量相对较低，分别为32.14mg/100g和28.95mg/100g。

通过本实验的数据分析可知，不同品种柑橘皮中总黄酮含量存在差异，采用紫外可见分光光度法可以准确测定柑橘皮中总黄酮的含量。

因此，总黄酮可以作为柑橘皮的一项重要指标，为科学利用柑橘皮提供了理论依据。