体细胞杂交细胞融合

名词解释：体细胞杂交或细胞融合cell fusion engineering：两个细胞通过质膜的接触并相互融合形成一个细胞的过程。

融合后的细胞只有一个连续的细胞质膜。

是利用人工方法使2个或2个以上不同来源的体细胞合并在一起形成杂种细胞的技术。

为了使细胞的相互融合顺利进行并提高融合率，需在细胞融合的反应体系中加入灭活病毒或聚乙二醇或电场等促融因素。

Southern杂交：是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法。

其基本原理是：具有一定同源性的两条核酸单链在一定的条件下，可按碱基互补的原则特异性地杂交形成双链。

一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段，将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上，经干烤或者紫外线照射固定，再与相对应结构的标记探针进行杂交，用放射自显影或酶反应显色，从而检测特定DNA分子的含量Northern杂交：一种将RNA从琼脂糖凝胶中转印到硝酸纤维素膜上的方法。

Western blotting：采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。

经过PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。

以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应，经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。

克隆：是指生物体通过体细胞进行的无性繁殖，以及由无性繁殖形成的基因型完全相同的后代个体组成的种群。

原代细胞培养：也称初代培养，严格地说即从体内取出组织接种培养到第一次传代阶段，通常把第一代至第十代以内的培养细胞统称为原代细胞培养。

传代细胞培养：当原代培养成功以后，随着培养时间的延长和细胞不断分裂，一则细胞之间相互接触而发生接触性抑制，生长速度减慢甚至停止；另一方面也会因营养物不足和代谢物积累而不利于生长或发生中毒。

植物体细胞杂交与动物细胞融合
植物体细胞杂交与动物细胞的融合，都是在一定的条件下，将两个或多个细胞融合为一个细胞。

该过程称细胞融合又称细胞杂交。

两个细胞的融合过程可表示如下：
1.植物体细胞杂交是用两种不同植物的体细胞融合成一个杂种细胞，并且把杂种细胞培养成新植物体的方法。

它是在原生质体培养技术的基础上，借用动物细胞融合方法发展起来的一门新型生物技术。

植物体细胞的杂交过程包括原生质体的制备，原生质体融合的诱导，杂种细胞的筛选和培养以及杂种植株的再生与鉴定等环节。

2．植物体细胞杂交必须先脱去细胞壁而成为原生质体，有利于利用实验手段进行细胞杂交以及细胞器移植和大分子物质的引入。

原生质体在培养中不能进行细胞分裂，只有再生出新的细胞壁后可持续分裂，形成愈伤组织进一步分化成具有根、茎、叶等器官的植物体。

原生质体融合包括膜融合和核融合两个过程，诱导融合只能诱导细胞膜的融合，膜融合是细胞融合的关键，两个核的融合则是在杂种细胞第
一次有丝分裂时进行的，而植物体细胞融合完成的标志是产生出新的细胞壁。

3.动物细胞融合与植物体细胞杂交的基本原理和方法类似但有所不同，诱导手段也不尽相同。

动物细胞的融合过程包括细胞膜融合、细胞质融合和细胞核融合，在这里细胞膜的融合仍是先导。

因无细胞壁，经过不同方法诱导总是先诱导膜的融合。

像诱导剂聚乙二醇能够有效的促进植物原生质体及动物细胞的融合，它的作用是强烈的吸水使蛋白质凝聚和沉淀。

而灭活的病毒也常用于诱导动物细胞融合，其作用是使细胞发生集聚，在两个细胞间的病毒会同时感染两个细胞，使两个细胞间有了一个通道，细胞膜的融合也就开始了。

就两者的有关区别列表比较：。

体细胞杂交与细胞融合的区别体细胞杂交和细胞融合是两种重要的生物学现象，在细胞学和遗传学的研究中都具有重要的意义。

虽然它们都涉及到细胞之间的融合，但体细胞杂交和细胞融合在过程和结果上存在着一些区别。

1. 定义体细胞杂交是指两个不同个体的体细胞之间发生的融合现象，通过融合后的细胞形成杂种。

而细胞融合是指同一或不同个体的细胞之间发生的融合现象，合并成一个细胞。

2. 参与细胞类型体细胞杂交通常发生在植物的某些组织如根或茎。

而细胞融合可以是体细胞之间的融合，也可以是生殖细胞之间的融合。

3. 过程体细胞杂交需要进行前期处理，如细胞的处理和培养条件的提供。

首先，需要将体细胞分离出来，然后经过一系列处理后与另一组体细胞融合。

最后，融合的体细胞培养到一定阶段，发育成新的个体或组织。

而细胞融合主要通过两个细胞膜融合来实现，形成一个共享细胞质的细胞，并逐步合并为一个细胞。

4. 结果体细胞杂交的结果是形成新的杂种个体，具有两个体细胞的某些特征，但也存在一些不稳定的表现。

而细胞融合的结果是形成一个具有两个细胞核的细胞，它可以继续分裂，形成新的细胞或个体。

5. 应用领域体细胞杂交广泛应用于植物育种，通过将不同植物胚胎的体细胞融合，产生新的优良品种。

细胞融合则广泛应用于细胞实验中，如细胞治疗和修复等领域。

总结：体细胞杂交和细胞融合虽然在过程中涉及融合现象，但在定义、参与细胞类型、过程和结果等方面存在显著差异。

体细胞杂交主要用于植物育种，产生新的杂种品种。

细胞融合主要用于细胞实验和细胞治疗中。

这两种现象在不同领域中发挥着重要的作用，并对生物学研究做出了积极贡献。

植物体细胞杂交技术的原理
植物体细胞杂交技术是通过将两个不同的植物体细胞融合在一起，使其融合后的细胞具有两个植物的特性。

其原理主要包括细胞的融合和融合后的细胞的培养。

首先，要进行细胞融合，需要选择两个不同的植物体细胞作为材料。

这两个细胞通常来自于同一物种的不同个体，或者来自于不同物种的植物。

然后，通过分离和处理细胞，使其融合在一起。

融合的方法包括化学融合、电融合以及基因工程技术等。

在细胞融合完成后，接下来就是培养融合细胞。

培养过程中需要提供适当的培养基和条件，使融合细胞能够进行分裂和生长。

培养基中通常含有营养物质、植物生长调节剂和抗生素等。

通过培养，可以使融合细胞形成植物体细胞的配子体，即胚胎。

最后，通过培养的融合细胞可以发育成为植物体。

这样的植物叫做杂种植株，具有两个不同植物的特性。

杂种植株可以通过无性繁殖的方式进行繁殖，以获得更多具有两个植物特性的后代。

植物体细胞杂交技术的原理正是通过细胞的融合和培养，使两个不同的植物体细胞相互融合，并发育成杂种植株，以实现植物特性的组合和改良。

这项技术广泛应用于植物育种和基因工程领域，有助于培育出更加优良的植物品种。

体细胞杂交应用的原理1. 引言体细胞杂交，也称为物质杂交或体细胞融合，是一种生物技术，用于将两个或更多种不同的细胞融合在一起。

体细胞杂交应用的原理是基于细胞的能力合并成一个无性繁殖细胞，从而创造有特定特征或功能的细胞或生物体。

2. 核心原理体细胞杂交应用的核心原理是通过融合两个或多个不同种类的细胞，将它们的遗传物质合并在一起，创造出新的细胞或生物体。

这个过程可以通过以下步骤来实现：•细胞收集：选择需要进行杂交的细胞类型，并进行细胞培养，使其处于最佳状态。

•细胞融合：将不同种类的细胞放置在适当的环境中，以促使细胞融合。

常用的方法包括化学诱导、电融合和病毒介导的融合。

•杂交细胞的培养：融合后的细胞需要在特定的培养基中进行培养和繁殖，以保持其生存和繁衍。

•杂交细胞的筛选：对培养后的杂交细胞进行筛选，选择具有特定特征或功能的细胞或生物体。

•杂交细胞的繁殖：选定的杂交细胞或生物体可以被用作进一步的繁殖和应用。

3. 应用领域体细胞杂交应用在多个领域中具有重要意义，包括：3.1 作物改良体细胞杂交被广泛应用于作物改良中，以改良作物的品质、抗病性、产量等方面。

通过融合不同种类的作物细胞，研究人员可以创造出具有抗虫、抗逆性以及其他重要农艺性状的新品种。

3.2 动物繁殖体细胞杂交也被用于动物繁殖领域。

通过将不同种类的动物细胞进行融合，可以创造出具有特定特征的新动物品种。

这对于家畜品种改良和保护濒危物种都具有重要意义。

3.3 人类医学研究体细胞杂交在人类医学研究中也有应用。

例如，通过将人类细胞与小鼠细胞融合，研究人员可以创造出带有人类基因的小鼠模型，用于研究人类疾病、药物测试等方面。

3.4 细胞治疗体细胞杂交还被应用于细胞治疗领域。

通过融合患者体内的成熟细胞与多能干细胞，可以创造出具有再生能力和修复功能的细胞，用于治疗各种疾病和创伤。

4. 优势和挑战体细胞杂交应用具有以下优势：•提供了创造新品种和改良特性的方法。

•可以用于研究和理解遗传物质的功能。

高中生物植物体细胞杂交技术基础知识点1、植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。

2、过程：(1)诱导融合的方法：物理法包括离心、振动、电刺激等。

化学法一般是用聚乙二醇(PEG)作为诱导剂。

(2)细胞融合完成的标志是新的细胞壁的生成。

(3)植物体细胞杂交的终点是培育成杂种植株，而不是形成杂种细胞就结束。

(4)杂种植株的特征：具备两种植物的遗传特征，原因是杂种植株中含有两种植物的遗传物质。

3、意义：克服了远缘杂交不亲和的障碍。

高中生物植物体细胞杂交技术重要进展1960年，Kocking用酶法制备高等植物原生质体首次获得成功;1970年，Power首次用硝酸钠进行为诱导剂进行了较大规模的原生质体诱导融合;1971年，Takebe首次从离体烟草原生质体培养中获得再生完整植株;1972年，Carlson首次获得粉蓝烟草和郎氏烟草的细胞杂种，这也是第一个植物细胞杂种;1974年，Kao将聚乙二醇诱导融合法应用于植物细胞融合并建立了相应的融合技术;1978年，Melchers获得了第一个属间细胞杂种(番茄+马铃薯);1981年，Zimmerman发明了电融合仪，并首次提出了电融合概念;1987年，Schweiger建立了单对原生质体电融合技术程序。

高中生物植物体细胞杂交技术1.PEG诱导融合法PEG诱导融合的特点：其优点是融合成本低，勿需特殊设备;融合子产生的异核率较高;融合过程不受物种限制。

其缺点是融合过程繁琐，PEG可能对细胞有毒害。

PEG的作用机理： Kao等认为，由于PEG分子具有轻微的负极性，故可以与具有正极性基团的水、蛋白质和碳水化合物等形成H键，从而在在原生质体之间形成分子桥，其华中农业大学创建国家精品课程——细胞工程学文本教案(第七章) 主讲教师：柳俊博士、教授结果是使原生质体发生粘连进而促使原生质体的融合;另外，PEG能增加类脂膜的流动性，也使原生质体的核、细胞器发生融合成为可能。