高中生物选修一优质学案：2.1 微生物的实验室培养(二)

微生物的实验室培养[学习目标]了解培养基的基础知识，进行微生物培养和无菌技术的操作。

[重点和难点]无菌技术的操作。

[课前预习]1.根据培养基外观的物理状态，可分为①培养基和②培养基。

各种培养基一般都含有③，此外还要满足微生物生长对④、⑤以及⑥的要求。

2.消毒是指是指使用①仅杀死物体表面或内部②。

常用的方法有③等消毒法。

灭菌则是指使用④杀死物体内外⑤，包括⑥。

常用的方法有⑦等。

3.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作步骤是：①、②、③、④、⑤。

倒平板要待培养基冷却至⑥℃左右时在⑦附近操作进行。

4.微生物接种最常用的是①法和②法，其结果是在培养基上得到③。

不论哪种方法都有在④进行操作。

[课堂探究]一、微生物培养基下表是某微生物培养基成分，据表分析：（1）该培养基是液体培养基还是固体培养基？①。

为什么？②。

（2）表中的KH2PO4、NaHPO4和MgSO4·7H2O主要为微生物提供①，葡萄糖为微生物提供②，尿素为微生物提供③。

（3）不同微生物所需的pH不同，培养细菌时需要将pH调至①；培养乳酸杆菌时要在培养基中添加维生素，目的是要满足乳酸杆菌的②。

二、无菌技术1.下列关于无菌技术的叙述正确的是①A.对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和灭菌。

B.将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行消毒。

C.为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。

D.实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。

2.消毒与灭菌的区别3.思考下列问题：（1）无菌技术除了防止培养物被污染外，还具有的目的是什么？①。

（2）哪些用具适于使用烧灼灭菌法？①。

（3）利用干热灭菌箱对玻璃器皿灭菌时物品不能摆得太挤，目的是什么？①。

（4）物品装入高压蒸汽灭菌锅灭菌后，要首先打开排气阀，煮沸并排除锅内冷空气，其目的是①；为达到良好的灭菌效果，一般要求的是②；灭菌结束后气压务必降至零时才能打开锅盖，其目的是③。

课题1 微生物的实验室培养一、学习目标1．了解有关培养基的基础知识2．进行无菌技术的操作3．进行微生物的培养4．实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌;常用的消毒方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法。

二、自主梳理1．培养基(1)概念：人们按照微生物对________的不同需求，配制出供其________的营养基质。

(2)培养基的种类(3)成分：a.主要成分：水、________、氮源、________。

b.其他成分：还需要满足微生物对________、特殊营养物质以及________的要求。

c.请连线表示牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成：d.请连线完成其他培养基的特殊要求：2．无菌技术(1)目的：获得________培养物。

(2)关键：防止________的入侵。

(3)两种无菌技术的比较：(4)连线选择如下材料或用具所需的无菌技术：3．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基计算：根据培养基________的比例，计算培养基中各成分的用量↓称量：牛肉膏比较________，可放在________上称取。

易吸潮，称取时动作要迅速，称后要及时盖上瓶盖↓溶化：牛肉膏和称量纸+水取出称量纸加蛋白胨和氯化钠加________(注意：要不断用玻棒搅拌，防止琼脂糊底而导致烧杯破裂)补加蒸馏水至100 mL↓灭菌：对培养基进行________灭菌↓倒平板：待培养基冷却至50°C左右时，在________附近倒平板4．平板划线法纯化大肠杆菌：(1)原理：通过________在琼脂固体培养基表面连续________的操作，将聚集的菌种逐步稀释________到培养基的表面。

(2)操作步骤：5．稀释涂布平板法纯化大肠杆菌：(1)原理：将菌液进行一系列的________，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。

(2)步骤：A.系列稀释操作步骤：B.涂布平板操作步骤：涂布器消毒：将涂布器浸在盛有________的烧杯中消毒↓取菌液：取少量菌液(不超过0. 1mL)，滴加到________表面↓涂布器灭菌：将沾有少量酒精的涂布器____，待酒精燃尽后，冷却8〜10 s↓涂布平板：用涂布器将菌液均匀地________在培养基表面。

专题2课题1 微生物的实验室培养一基础知识1.培养基（1）培养基的种类包括培养基和培养基等。

（2）培养基的化学成分一般都含有、、、四类营养成分，（3）在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对、以及等的要求。

例如：培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加；培养霉菌时需要将培养基的PH调至；培养细菌时需要将培养基的PH调至；培养厌氧微生物时需要提供无氧的条件【思考】为什么各种营养基的具体配方不同，但一般都有水、无机盐、碳源和氮源？2.无菌技术（1）获得纯净培养物的关键是。

避免杂菌污染的方法主要包括以下四个内容：①②③④（2）消毒是指灭菌是指【思考】消毒与灭菌的相同点与区别分别是什么？（3）实验室常用的消毒方法是，此外，人们也常使用化学药剂进行消毒，如用、等。

常用的灭菌方法有、、，此外，实验室里还用或进行消毒。

二实验操作1.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基（1）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的方法步骤：→→→→倒平板【思考】⑴培养基灭菌后，需要冷却到50左右，才能用来倒平板。

你用什么方法来估计培养基的温度？⑵为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？⑶平板冷凝后，为什么要将平板倒置？⑷在倒平板的过程中，如果不小心瘵培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？2.纯化大肠杆菌（1）微生物接种的方法中最常用的是和。

平板划线法是指。

稀释涂布平板法是指。

【思考】①为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？②在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？③在作第二次以及其后的划线操作是赤什么总是从上一次划线的末端开始划线？（3）平板划线法和稀释涂布平板法的优缺点：（4）平板划线法和稀释涂布平板法的适用范围：1.菌种的保存为了保持菌种的纯净，需对菌种进行保藏。

对于频繁使用的菌种，我们可以采用法；对于需要长期保存的菌种，可以采用法。

专题2课题1 微生物的实验室培养一基础知识1.培养基（1）培养基的种类包括培养基和培养基等。

（2）培养基的化学成分一般都含有、、、四类营养成分，（3）在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对、以及等的要求。

例如：培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加；培养霉菌时需要将培养基的PH调至；培养细菌时需要将培养基的PH调至；培养厌氧微生物时需要提供无氧的条件【思考】为什么各种营养基的具体配方不同，但一般都有水、无机盐、碳源和氮源？2.无菌技术（1）获得纯净培养物的关键是。

避免杂菌污染的方法主要包括以下四个内容：①②③④（2）消毒是指灭菌是指【思考】消毒与灭菌的相同点与区别分别是什么？（3）实验室常用的消毒方法是，此外，人们也常使用化学药剂进行消毒，如用、等。

常用的灭菌方法有、、，此外，实验室里还用或进行消毒。

二实验操作1.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基（1）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的方法步骤：→→→→倒平板【思考】⑴培养基灭菌后，需要冷却到50左右，才能用来倒平板。

你用什么方法来估计培养基的温度？⑵为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？⑶平板冷凝后，为什么要将平板倒置？⑷在倒平板的过程中，如果不小心瘵培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？2.纯化大肠杆菌（1）微生物接种的方法中最常用的是和。

平板划线法是指。

稀释涂布平板法是指。

【思考】①为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？②在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？③在作第二次以及其后的划线操作是赤什么总是从上一次划线的末端开始划线？（3）平板划线法和稀释涂布平板法的优缺点：（4）平板划线法和稀释涂布平板法的适用范围：1.菌种的保存为了保持菌种的纯净，需对菌种进行保藏。

对于频繁使用的菌种，我们可以采用法；对于需要长期保存的菌种，可以采用法。

专题2 微生物的培养与应用课题1 微生物的实验室培养学习目标1.说出培养基的类型、用途和基本成分。

2.举例说明常用的消毒与灭菌方法。

3.阐明培养基配制的方法和接种的方法。

学习重点培养基的营养成分、无菌操作的基本方法、配制培养基的基本步骤、常用的微生物的接种方法。

学习难点配制培养基的基本步骤、常用的微生物的接种方法。

课前预习使用说明与学法指导生物选修一专题二课题一知识准备搜集微生物实验室培养的资料。

教材助读（一）培养基1.概念：人们按照微生物对的不同需求，配制出供其的营养物质。

2.培养基的化学成分包括四类营养成分。

除此之外，培养基还要满足微生物生长对、特殊营养物质以及的要求。

3.分类方式（二）无菌技术1.关键防止的入侵。

2.无菌技术包括：（1）对实验操作空间、操作者的衣着和手进行；（2）将培养器皿、接种用具和培养基等器具进行；（3）为避免周围微生物污染，实验操作应在旁进行；（4）避免已灭菌处理的材料用具与相接触。

3.比较消毒和灭菌（三）实验操作（大肠杆菌的纯化培养）1.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基①计算：根据比例，计算100mL培养基各成分用量。

②称量：牛肉膏较黏稠，可用玻棒挑取，同一同称量。

称取牛肉膏和蛋白胨时动作要迅速，目的是防止牛肉膏吸收空气中水分。

③溶化：加水加热熔化牛肉膏与称量纸→取出称量纸→加入蛋白胨和氯化钠继续加热→加入→用蒸馏水定容到100mL（整个过程不断用玻棒搅拌，目的是防止琼脂糊底而导致烧杯破裂）。

④灭菌：将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加塞包扎后用灭菌锅灭菌；所用培养皿用报纸包扎后用箱灭菌。

⑤倒平板：待培养基冷却至左右时在附近操作进行。

其过程是：a.在火焰旁右手拿锥形瓶，左手拔出棉塞；b.右手拿锥形瓶，使锥形瓶的瓶口迅速通过火焰；c.左手将培养皿打开一条缝隙，右手将培养基倒入培养皿，立刻盖上皿盖。

d.待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置。

2.纯化大肠杆菌①方法：微生物接种的最常用方法是和。

微生物的实验室培养一、学习目标1.了解有关培养基和无菌技术的基础知识，通过实际操作，掌握培养基的制备及制备过程中需要注意的问题，掌握无菌技术的操作过程。

2.掌握平板划线法和平板涂布法两种接种方法，并注意总结其优缺点。

二、重难点分析无菌技术的操作。

三、学习过程（一）预习导学知识点一：培养基1.概念：人们按照微生物对________的不同需求，配制出供其__________的营养基质——培养基。

2.种类：分为________培养基和________培养基。

3.营养构成：各种培养基一般都含有水、________、________和无机盐，此外还要满足微生物生长对________、特殊营养物质以及________的要求。

知识点二：无菌技术获得纯净培养物的关键是防止外来菌种的入侵，具体操作如下：1.对实验操作的__________、操作者的__________和________，进行清洁和消毒。

2.将用于微生物培养的________、__________和培养基等进行灭菌。

3.为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在__________附近进行。

4.实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与__________相接触。

消毒和灭菌1.消毒是指使用较为________的物理或化学方法仅杀死物体表面或________对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子）。

常用的方法有________消毒法和__________消毒法。

2.灭菌是指使用__________的理化因素杀死物体内外________的微生物（包括芽孢和孢子）。

常见的方法有：________灭菌、________灭菌、__________灭菌。

知识点三：制备牛肉膏蛋白胨固体培养基步骤：计算、称量、溶化、__________、倒平板。

知识点四：纯化大肠杆菌方法：微生物接种最常用的是__________划线法和________涂布平板法。

(1)平板划线法：通过________在琼脂固体培养基表面连续________的操作，将聚集的菌种逐步________分散到培养基的表面。

专题2 微生物的培养与应用课题1 微生物的实验室培养1、培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，是进行微生物培养的物质基础。

培养基按照物理性质可分为液体培养基半固体培养基和固体培养基。

在液体培养基中加入凝固剂琼脂（是从红藻中提取的一种多糖，在配制培养基中用作凝固剂）后，制成琼脂固体培养基。

微生物在固体培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落。

根据菌落的特征可以判断是哪一种菌。

液体培养基应用于工业或生活生产，固体培养基应用于微生物的分离和鉴定，半固体培养基则常用于观察微生物的运动及菌种保藏等。

按照成分培养基可分为人工合成培养基和天然培养基。

合成培养基是用成分已知的化学物质配制而成，其中成分的种类比例明确，常用于微生物的分离鉴定。

天然培养基是用化学成分不明的天然物质配制而成，常用于实际工业生产。

按照培养基的用途，可将培养基分为选择培养基和鉴定培养基。

选择培养基是指在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物生长，促进所需要的微生物的生长。

鉴别培养基是根据微生物的特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成的，用以鉴别不同类别的微生物。

培养基的化学成分包括水、无机盐、碳源、氮源、生长因子等。

·碳源：能为微生物的代谢提供碳元素的物质。

如CO2、NaHCO3等无机碳源；糖类、石油、花生粉饼等有机碳源。

异养微生物只能利用有机碳源。

单质碳不能作为碳源。

氮源：能为微生物的代谢提供氮元素的物质。

如N2、NH3、NO3-、NH4+（无机氮源）蛋白质、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨（有机氮源）等。

只有固氮微生物才能利用N2。

培养基还要满足微生物生长对PH、特殊营养物质以及氧气的要求。

例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时须将培养基的pH调至酸性，培养细菌是需要将pH 调至中性或微碱性，培养厌氧型微生物是则需要提供无氧的条件2、无菌技术: 获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，要注意以下几个方面：①对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。

2.1微生物的实验室培养教案（人教版选修1）•课标要求进行微牛物的分离和培养。

用大肠杆菌为材料进行平面培养，分离菌落。

•课标解读1.了解有关培养基的基础知识。

2.进行无菌技术的操作。

3.进行微牛物的培养。

•教学地位本课题介绍了最基本的微牛物技术，是开展其他两个课题的基础。

只有掌握了本课题所介绍的基本技术，才能完成本专题的其他课题。

同时，本课题小学习的无菌操作技术也有助于学习“植物组织培养技术”。

培养基的配置、微牛物的分离都是微牛物相关实验的必备操作技术。

•教法指导1.对于培养基的教学，首先介绍培养基的分类，在介绍液体培养基和固体培养基吋，教师可提供实物或图片，以加深学牛印象，并比较二者呈现不同物理状态的原因。

根据教材屮培养基配方的实例，以资料分析的形式，让学牛结合必修1屮“构成细胞的元素”这一•角度来分析培养基小为什么需要具备这些基本成分。

2.无菌技术的教学，首先应该结合学牛的牛活经验，让学牛意识到在我们H常牛活的环境屮，微牛物无处不在，在微牛物的培养过程屮，极有可能将环境屮的微牛物带入培养物屮，由此强调无菌操作的重耍性。

无菌操作贯穿整个微牛物实验屮，无论是培养基的配置、微牛物的接种，还是微牛物的培养，每--步都要注意无菌操作，熟练、规范的掌握无菌操作技术是成功培养微牛物的关键。

3.常用的消毒、灭菌的方法部分的教学，可先让学生阅读相关内容，然后建立比较表格，通过比较，理解并记忆消毒和灭菌的区别、二者的适用范围及具体操作方法。

可通过教材的旁栏思考题进行检测、巩固。

•新课导入建议专题1学习的传统发酵技术，所用的微牛物来自材料自身携带或者空气，教师可介绍工业发酵技术，所利用的微牛物是优良的菌种，而且是经过培养、纯化的菌种，然后设问：如何培养微生物？如何保证所使用的微生物屮没有混入其他微牛物？对人体健康有害的微牛物如何防止其扩散？这些问题不必给出答案，通过这些问题可引入本课题的学习。

•教学流程设计学牛课前预习：阅读教材比3 20,填写【课前自主导学】，完成“思考交流1、2”。

选修一生物2.1微生物的实验室培养学案（人教版）课题1 微生物的实验室培养问题导学一、培养基和无菌技术活动与探究1．配制培养基所用的琼脂的成分和作用是什么？．为什么有的微生物培养基中需加入特殊营养物质？．培养基是如何分类的？．消毒和灭菌的原理、实质相同吗？．请判断以下材料或用具是需要消毒还是灭菌。

培养细菌用的培养基与培养皿。

玻璃棒、试管、烧瓶和吸管。

实验操作者的双手。

迁移与应用1灭菌的标准是。

A．杀死所有的病原微生物B．杀死物体表面所有的微生物c．杀死所有的微生物，包括芽孢和孢子D．使病原菌不生长．培养基的类型及应用标准培养基类型配制特点主要应用物理性质固体培养基加入琼脂较多菌种分离，鉴定，计数半固体培养基加入琼脂较少菌种保藏液体培养基不加入琼脂工业生产，连续培养化学成分天然培养基含化学成分不明确的天然物质工业生产合成培养基培养基成分明确分类鉴定目的用途鉴别培养基添加某种指示剂或化学药剂菌种的鉴别选择培养基添加某种化学成分菌种的分离注：培养基中的营养物质是维持机体生命活动，保证生殖、发育所需的外源物质。

在人和动物中，营养物质包括水、无机盐、糖类、脂质、蛋白质、维生素六类；在植物中，营养物质包括矿质元素、水、二氧化碳三类；微生物共有的营养成分有水、无机盐、碳源、氮源，有些微生物还需要特殊营养物质。

．实验室常用的消毒或灭菌方法灭菌或消毒种类主要方法应用范围灼烧灭菌酒精灯火焰灼烧接种环、接种针及试管口等干热灭菌干热灭菌箱内，在160～170℃下加热1～2h玻璃器皿、金属用具等巴氏消毒70～75℃下煮30in牛奶、啤酒等一些不耐高温的液体高压蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌锅内，100Pa，121℃下持续加热15～30in培养基等紫外线消毒30紫外线灯照射30in接种室空气等化学药物消毒用体积分数为70%～75%的乙醇、碘酒涂抹等用于皮肤、伤口、动植物组织表面消毒，手术器械、玻璃器皿等消毒二、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基活动与探究2．用流程图表示该培养基的制备过程。

生物选修一《生物技术实践》教案专题2 微生物的培养与应用课题1 微生物的实验室培养江门市新会第二中学莫爱霞一、课题目标：了解有关培养基的基础知识，进行无菌技术操作，进行微生物的培养。

二、课题重点：无菌技术的操作。

三、课题难点：无菌技术的操作。

四、教学过程：（一）学习基础知识1、微生物的营养与功能知识要点：组成元素：C、H、O、N、P、S，其中C、H、O、N占细胞干重的90％以上。

这些元素最终来自外界环境中的各种无机化合物和有机化合物。

这些化合物归纳成碳源、氮源、生长因子、无机盐和水这五大类营养要素物质。

2、培养基知识要点：（1）配制原则①目的明确；②营养协调；③pH值要适宜（2）培养基的种类；（3）提供微生物生长的条件。

3、无菌技术（1）如何避免杂菌污染？（2）消毒与灭菌的区别4、阅读课本P14-P20，思考下列问题：（1）关于培养基：①按培养基外观物理状态来分，培养基可分为液体培养基和固体培养基，其中固体培养基用于菌种分离、鉴定菌落等。

②按培养基的功能来分，可分为选择培养基和鉴别培养基。

③按照人们对培养基成分的了解程度来分，可分为天然培养基和合成培养基（2）关于无菌技术①实验室常用的灭菌方法有：灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌；常用的消毒方法有：煮沸消毒法、紫外线、化学药物。

②获得纯净培养基的关键是防止外来杂菌的入侵。

③如何避免杂菌污染？（二）实验设计（由于学校实验室条件有限，根据实际情况，把培养细菌改为培养真菌并进行纯化）：1、实验题目：检测草坪病原微生物并进行纯化2、实验目的：对学校操场或校园内草坪的病原微生物情况进行摸底调查，对草坪的发病情况进行统计，并学会培养基的制作，以及纯化一种微生物。

3、实验材料和器材：有斑点的草若干条剪刀酒精培养皿酒精灯马铃薯葡萄糖琼脂大小烧杯纱布蒸馏水小刀干热灭菌箱（可充当恒温箱）高压蒸汽灭菌锅镊子三角锥瓶棉花玻棒4、实验操作：（1）把有斑点的青草若干条剪到培养皿中，加入酒精润洗两次，最后用清水洗净待用。

微生物的实验室培养[学习目标]1．知道培养基的种类、营养要素及配制原则。

2．掌握消毒、灭菌的原理和方法。

3．学会配制培养基和纯化大肠杆菌的方法。

[学习过程]一、培养基及无菌技术 1．培养基(1)概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质。

(2)种类：按物理性质分⎩⎪⎨⎪⎧液体培养基：配制成的液体状态的基质(加入凝固剂，如琼脂)固体培养基：配制成的固体状态的基质(3)营养组成：各种培养基一般都含有水、碳源(提供碳元素的物质)、氮源(提供氮元素的物质)和无机盐，此外还需要满足微生物生长对pH 、特殊营养物质(如维生素、氨基酸和碱基等)以及氧气的要求。

2．无菌技术(1)无菌技术的目的是防止外来杂菌的入侵。

主要内容包括： ①对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。

②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。

③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。

④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。

(2)消毒和灭菌：[合作探讨]探讨1：虽然各种培养基的具体配方不同，但是一般都含有哪些成分？提示：虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源、无机盐和生长因子。

另外，还必须满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。

探讨2：对培养基、培养皿、接种环、实验者的双手、空气和牛奶常采用的灭菌或消毒方法分别是什么？提示：分别为高压蒸汽灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌、化学消毒、紫外线灭菌、巴氏消毒法。

探讨3：无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？提示：无菌技术还能有效避免操作者被微生物感染。

[思维升华]1.培养基的成分及功能(1)目的要明确：不同的微生物需求不同，根据培养目的进行配制。

(2)营养要协调：营养物质的浓度和比例要适宜。

(3)pH要适宜：为维持pH的相对恒定，可在培养基中加入缓冲剂，常用磷酸氢二钾－磷酸二氢钾。

课题1 微生物的实验室培养★学习目标：1.通过阅读教材，结合观看培养基相关素材，认识有关培养基的基础知识。

2.通过观看无菌操作视频，结合教师详细讲解，能够掌握无菌操作技术。

3.通过观看实验视频，结合实际实验操作，能够完成纯化大肠杆菌的操作。

★课题重点无菌技术的操作★课题难点无菌技术的操作★学情分析：通过前面对生物学知识的学习，学生具备生物所需条件的分析，并且知道生物之间存在着竞争，在同一个培养环境中，按所培养的生物种类调整所需的条件。

学生应该对微生物培养的条件能够理解。

不足在于缺少将理论应用于实践的整个操作技巧。

★教材分析：课题背景通过生产中的实例，首先引导学生认识在微生物的培养过程中，保持培养物纯净的重要性。

教师不必拘泥于教材中列举的实例，可以充分发挥学生的主动性，让学生搜集列举更多的生产生活中的实例，从中体会培养物纯净对于微生物培养的重要性。

在此基础上，教材让学生进一步明确培养微生物的要领，是为所需要的微生物提供良好的生存环境，同时阻止或抑制其他微生物的生长。

★教学建议：教师在介绍液体和固体培养基时，宜结合教材提供的图片进行讲解，以增进学生的感性认识。

教材以表格的形式提供了一个培养基配方的实例。

教师可以采用资料分析的形式，让学生通过主动的分析，认识培养基的基本组成成分，并结合必修模块“分子与细胞”中的知识，让学生从生物体构成的基本元素这一角度理解培养基中为什么都需要具备这些基本成分。

★导入设计导入一：从历史中的事件导入19世纪中期，关系到法国经济命脉的酿造业曾一度遭受毁灭性的打击。

在生产过程中，出现了葡萄酒变酸、变味的怪事。

经过一番研究，法国科学家巴斯德发现，导致生产失败的根源在于发酵物中混入了杂菌。

由此人们认识到保持培养纯净的重要性。

防止杂菌入侵，获得纯净的培养物，是研究和应用微生物的前提。

在实验室培养微生物，一方面需要为培养的微生物提供合适的营养和环境条件，另一方面需要确保无处不在的其他微生物无法混入。

2.1 微生物的实验室培养学习目标了解培养基的基础知识，进行微生物培养和无菌技术的操作。

学习重点无菌技术的操作学习难点无菌技术的操作学习过程一、培养基1．概念：人们按照微生物对的不同需求，配制出供其的营养基质叫培养基。

可分为培养基和培养基。

2．营养构成：各种培养基一般都含有、、和，此外还要满足微生物生长对、以及的要求。

3．培养乳酸杆菌时需在培养基中添加、培养霉菌时需将培养基PH调至、培养细菌时需将PH调至、培养厌氧微生物则需提供条件。

思考1：从细胞的化学元素组成来看，培养基中为什么都含有这些营养成分？补充1：碳源：如CO2、糖类、脂肪酸等有机物，构成微生物的结构物质和分泌物，并提供能量。

补充2：培养基包括哪些营养成分：碳源、氮源、水、无机盐、生长因子等，蔗糖是提供碳源的，也就是提供能源的，琼脂是凝固剂氮源：如N2、氨盐、硝酸盐、牛肉膏、蛋白胨等，主要用来合成蛋白质、核酸及含氮代谢物等。

含有C、H、O、N的化合物既可以作为碳源，又可以作为氮源，如氨基酸等。

二、无菌技术：阅读“无菌技术”，讨论回答下列问题：(一)获得纯净培养物的关键是，具体操作如下：1．对实验操作的、操作者的和进行。

2．将用于微生物培养的、和等器具进行。

3．为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在附近进行。

4．实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与相接触。

(二)消毒和灭菌1．消毒是指。

常用的方法有、、消毒法。

2．灭菌是指。

常用的方法有：、、灭菌。

分别适用于那些用具？思考2：无菌技术除了防止培养物被污染外，还具有的目的是什么？思考3：利用干热灭菌箱对玻璃器皿灭菌时物品不能摆得太挤，目的是什么？思考4：物品装入高压蒸汽灭菌锅灭菌后，要首先打开排气阀，煮沸并排除锅内冷空气，其目的是；随后关闭排气阀继续加热，气压升至，温度为，并维持min；最后切断热源，使温度自然降温，气压务必降至时打开锅盖，其目的是防止实验操作----大肠杆菌的纯化培养：本实验所用的培养基是，本实验可分成和两个阶段进行。

【情景创设】【问题设计】1、阅读“实验操作”部分（1）写出制备牛肉膏蛋白胨固体培养基步骤及如何操作？（2）描述倒平板具体操作步骤，并回答该处4个问题。

（3）列表比较，“平板划线法”和“稀释涂布平板法”。

（4）描述平板划线操作的步骤，并回答该处3个问题。

（5）描述系列稀释操作步骤。

（6）描述涂布平板操作步骤，注意并回答该处讨论问题。

（7）为什么要让接种后的培养基和未接种的培养基都放在恒温箱中培养？2、阅读“结果分析与评价”部分并回答该处问题。

3、阅读“课题延伸” 部分，回答：（1）回答对于频繁使用菌种如何保存？该方法的缺点是什么？（2）回答对于长期保存的菌种如何保存?具体如何操作？【达标检测】[必做]1、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序是（ ）A 计算、称量、倒平板、溶化、灭菌B 计算、称量、溶化、倒平板、灭菌C 计算、称量、溶化、灭菌、倒平板D 计算、称量、灭菌、溶化、倒平板2、牛肉膏蛋白胨培养基中常加入琼脂这一理想凝固剂。

下列关于琼脂作用的叙述中，不正确的是（ ）A 不被所培养的微生物分解利用，且对培养的微生物无毒害作用B 在微生物生长的温度范围内保持固体状态C 琼脂凝固点低，有利于微生物的生长D 琼脂在灭菌过程中不会被破坏，透明度好，凝固力强3、有关平板划线操作的叙述，不正确的是（ ）A 第一次灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物B 每次划线前灼烧接种环，是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种 【使用时间】 第 2 周 第 2 课时 【编辑】任丽伟 【审核】刘萍萍 【编号】2262022 【主题】 专题二 课题1 微生物的实验室培养（二） 2012.02.15C 在第二区域内划线时，接种环上的菌种直接来源于菌液D 划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者4、下列操作与灭菌无关的是（）A 接种前用火焰灼烧接种环B 培养皿等放在高压蒸汽锅中进行处理C 培养基在50℃时搁置斜面D 接种在酒精灯的火焰旁完成5、在涂布平板操作错误的是（）A 将涂布器在酒精灯火焰上灼烧，直至烧红B 取少量菌液滴加在培养基表面C 将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃尽后，冷却8~10s再用D 涂布时可转运培养皿，使涂布均匀6、获得纯净物的关键是（）A 将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌B 接种纯种细菌C 适宜环境条件下培养D 防止外来杂菌的入侵7、为了保持菌种的纯净需要进行菌种的保藏，下列有关叙述不正确的是（）A.对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法B.临时保藏的菌种一般是接种到试管的固体斜面培养基上C.临时保藏的菌种容易被污染或产生变异D.对于需要长期保存的菌种，可以采用4℃低温保藏的方法[选做]某学校打算开辟一块食用菌栽培基地，以丰富学生的劳动技术课内容。

第5课时微生物的实验室培养(二)学习目标 1.掌握配制培养基的步骤和倒平板操作的过程。

2.理解并掌握利用平板划线法和稀释涂布平板法来纯化微生物的方法。

3.了解菌种保藏的主要方法。

一、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基1．牛肉膏蛋白胨培养基的成分及各成分提供的营养培养基组分提供的主要营养物质牛肉膏5.0 g 碳源、氮源、磷酸盐和维生素蛋白胨10.0 g 碳源、氮源和维生素NaCl 5.0 g 无机盐琼脂20.0 g /蒸馏水定容至1 000 mL 氢元素、氧元素2.制备步骤特别提醒制备固体培养基的一般步骤可简记为：算、称、溶、灭、倒，即计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。

3．倒平板操作1．培养基灭菌后，需要冷却至50 ℃左右时，才能倒平板的原因是什么？你用什么办法来估计培养基的温度？提示琼脂是一种多糖，在98 ℃以上熔化，在44 ℃以下凝固，倒平板时高于50 ℃则会烫手，低于50 ℃时若不及时操作，琼脂会凝固。

可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。

2．分析下图，回答下列问题：(1)为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？提示通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。

(2)从防止杂菌污染的角度思考，平板冷凝后将平板倒置的原因是什么？提示平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染。

3．怎样判断制备的培养基是否合格、成功，是否受到污染？提示未接种的培养基在恒温箱中保温一段时间后，如果无菌落生长，说明培养基制备成功、合格，未受到污染。

1．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的过程中，下列关于倒平板的具体描述正确的是()①待培养基冷却至40 ℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板②将灭过菌的培养皿放在桌面上，左手拔出棉塞③右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰④用左手的拇指和食指完全打开皿盖⑤右手将锥形瓶中培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖⑥等待平板冷却5～10 s，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上A．①③④⑤B．④⑤⑥C．③⑤D．①②④⑥[答案] C[解析]琼脂是一种多糖，在98 ℃以上熔化，在44 ℃以下凝固，倒平板时高于50 ℃则会烫手，低于50 ℃时若不能及时操作，琼脂会凝固；无菌操作应贯穿于操作的全过程，皿盖全打开则空气中的微生物会进入培养基；等待平板冷却凝固(大约需5～10 min)后，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上。

《微生物的分离和培养》教学设计银川九中叶萍一、教学目标知识与能力目标1.通过教师讲解、阅读文本，能够说出稀释涂布平板法和平板划线法的操作步骤和方法。

2.通过观看视频，能够熟练运用稀释涂布平板法和平板划线法进行微生物接种。

3.通过观看图片、教师讲解，能够体会无菌操作技术在实验操作过程中的重要性，并在质疑的过程中实现知识的内化。

学科素养（1）基础知识（稀释涂布平板法和平板划线法的操作步骤和方法；转录的步骤；转录和DNA复制的共同之处）；（2）基本技能（通过阅读图文资料，熟练运用稀释涂布平板法和平板划线法进行微生物接种，培养自主学习的能力）；（3）基本思想（体验实验操作领悟实验原理，交流实验体会，形成勇于实践、严谨求实的科学态度和科学精神）；（4）基本活动经验（通过引课的介绍和课堂小结，体悟看不见的微生物也能带来“美”的视觉享受，感悟大千世界的神奇多彩）。

二、内容与学情分析通过前两个课时的学习，学生掌握了微生物培养过程中的基本原理，学会了倒平板和梯度稀释的方法，对于如何在实验室的条件下培养微生物充满了好奇心和实际操作的渴望。

在这种情况下，学生有能力快速复习回忆微量可调移液器的使用方法，为稀释涂布平板法的实验操作节省了大量的课堂时间，也能预留出更多的时间进行平板划线法的操作。

但是由于微生物具有一定的危险性，而且实验进程的周期长，需要多个课时才能完成一次完整的实验。

所以运用稀释涂布平板法和平板划线法进行微生物接种，并熟练掌握操作过程中的无菌技术是本节课重难点。

为了完成重难点知识的学习，又同时保证实验操作过程的安全性，本节课借助了鸿合i学软件的“仿真实验室”，在课前让学生熟悉实验操作的过程，熟知实验操作过程中的注意事项，而课堂上仅针对于微生物的稀释涂布平板法和平板划线法进行集中的教学，使微生物的接种方法能够在一课时的时间内完整呈现，增强课程的完整性，也避免了与微生物的多次接触，有效的降低了课堂实验操作过程中的出错率。

专题2 微生物的培养与应用课题2.1 微生物的实验室培养一、【课题目标】（一）知识与技能了解有关培养基的基础知识；掌握培养基的制备、高压蒸汽灭菌和平板划线法等基本操作技术（二）过程与方法分析实验思路的确定和形成的原因，分析实验流程，对比前面的实验设计，归纳共性，分析差异，增加印象（三）情感、态度与价值观形成勇于实践、严谨求实的科学态度和科学精神二、【课题重点】无菌技术的操作三、【课题难点】无菌技术的操作四、【教学方法】启发式教学五、【教学工具】多媒体课件六、【教学过程】（一）引入新课在传统发酵技术的应用中，都利用了微生物的发酵作用，其中的微生物来自于制作过程中的自然感染。

而在工业化生产中，为了提高发酵的质量，需要获得优良菌种，并保持发酵菌种的纯度。

这就要涉及到微生物的培养、分离、鉴别等基本技术。

现在我们开始学习微生物的培养和应用专题。

（二）进行新课1．基础知识1．1 培养基的种类包括固体培养基和液体培养基等。

〖思考1〗琼脂是从红藻中提取的多糖，在配制培养基中用作为凝固剂。

【补充】培养基的类型及其应用：【补充】碳源：如CO2、糖类、脂肪酸等有机物，构成微生物的结构物质和分泌物，并提供能量。

氮源：如N2、氨盐、硝酸盐、牛肉膏、蛋白胨等，主要用来合成蛋白质、核酸及含氮代谢物等。

含有C、H、O、N的化合物既可以作为碳源，又可以作为氮源，如氨基酸等。

1．3 培养基除满足微生物生长的 pH 、特殊营养物质和氧气等要求。

【补充】生长因子：某些微生物正常生长代谢过程中必须从培养基中吸收的微量有机小分子，如某些氨基酸、碱基、维生素等。

〖思考3〗牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供糖、维生素和有机氮等营养物质。

〖思考4〗培养乳酸杆菌时需要添加维生素，培养霉菌时需要将培养基pH调节为酸性，培养细菌时需要将pH调节为中性或微碱性。

活动2：阅读“无菌技术”，讨论回答下列问题：1．4 获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。

1．5 无菌技术包括：（1）对实验操作空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒；（2）将培养器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌；（3）为避免周围微生物污染，实验操作应在酒精灯火焰附近旁进行；（4）避免已灭菌处理的材料用具与周围物品相接触。

微生物的实验室培养教师姓名年级课时教材内容分析本专题涉及三个实验课题，它们的关系及学习要求如下图所示。

在下图中，课题1涉及微生物培养的基础知识和基本的操作技能，是其他两个课题的基础，课题2和课题3涉及特定的微生物的分离、计数和鉴定，难度较大，课题2强调选择性培养基的配制和作用，课题3是在选择性培养基的基础上，又相应地增加了鉴别性培养基的知识及其应用。

学生分析配制培养基的基础知识是培养、观察和研究微生物的基础。

教学时，可以先展示有菌落生长的培养基平板，给学生以视觉刺激，让他们体会到要观察和研究微生物，必须创设一定的条件让微生物大量快速地繁殖起来，只有形成具有一定特征的菌落，才能更好地研究微生物。

学习目标阶段目标1：通过阅读教材P14、15，阐述微生物的作用、分类及营养成分阶段目标2：阅读勾画教材、列表分析，区分消毒和灭菌，举例说明不同物品的灭菌方法重点无菌技术的操作难点无菌技术的操作教学过程教师活动目标评价阶段目标1：1．设置适当情境----有效导入虽然微生物无处不在，但由于其一般个体微小，肉眼不可见，须在光学显微镜或电子显微镜下才可看见，所以学生对微生物的相关知识总体比较陌生。

我们可以尝试以如下情境导入：情境一中展示一杯红葡萄酒、一小蝶香醋、一块腐乳、一盒酸奶，让学生思考这些食品分别主要是由何种微生物发酵而产生的。

情境二通过投影仪展示水华和赤潮等与日常生活关系比较密切的生1、通过阅读教材，对于教材的挖空内容，100%的同学可以完成“基础感知”物。

“微生物的实验室培养”这一课题，就当前普通高中学生学情和各学校实验条件而言是一个难度很大的课题，要保证该课题的有效展开，必须高度重视基础理论知识的探究学习。

基础知识部分主要就是弄清楚三个概念：培养基、菌落和无菌技术。

关于培养基，教师在授课前可以先制备一个常用的固体培养基和液体培养基，在课上进行展示，这样学生可以对培养基有个初步的形象认识，同时还可以结合多媒体简单介绍一下其他培养基的类型及分类依据，在师生共同讨论的基础上概括出培养基分类的基本知识。