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2.2 动物细胞工程第3课时动物体细胞核移植技术和克隆动物一、单选题1.随着生物科学技术的发展，动物的生殖方式变得越来越多样化。
如图表示胚胎工程技术研究及应用的相关情况，供体1是良种荷斯坦高产奶牛，供体2是健康的黄牛，下列相关叙述错误的是（）A. 应用1中获得的良种小牛，遗传物质来源于供体1和供体2个体B. 应用2、3、4所用的受精卵只能来源于体外受精，且精子必需进行获能处理C. 应用3过程中对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将内细胞团均等分割D. 应用4中细胞进行定向诱导，可分化形成各种组织和器官，用于器官移植研究2.下列关于动物体细胞克隆和胚胎工程的叙述，正确的是（）A. 克隆羊“多莉”的培育过程中不需要进行胚胎移植操作B. ES 细胞在饲养层细胞上会向不同类型的组织细胞分化C. 排异反应是胚胎工程需要重点克服的难题之一D. 同期发情处理可以使受体的生理状态更适宜来自供体的胚胎着床3.2009年山东省干细胞技术研究中心宣布，成功克隆出5枚人类囊胚。
其中4枚囊胚的供体细胞来源于正常人皮肤纤维细胞，1枚来源于帕金森患者的淋巴细胞，卵细胞通过健康志愿捐献者促排卵获得。
下列相关叙述正确的是（）A. 可以通过显微操作去除卵母细胞中的细胞核，通过核移植后获得囊胚B. 囊胚阶段的细胞处于未分化状态，可从囊胚中获得胚胎干细胞C. 获得的胚胎干细胞可在饲养层细胞上分化成所需要的器官D. 通过该技术可以达到科学家培养克隆人的目的4.下列有关动物细胞工程和胚胎工程的叙述，正确的是（）A. 培养早期胚胎的培养液中含维生素、激素等多种能源物质B. 细胞培养所需气体CO2的主要作用是维持培养液的pHC. 胚胎干细胞在体外培养能增殖但不能被诱导分化D. 体细胞核移植获得克隆动物的难度低于胚胎细胞核移植5.下列有关哺乳动物胚胎工程的叙述，正确的是（）A. 囊胚的内细胞团细胞和滋养层细胞功能上的差异是基因选择性表达的结果B. 胰蛋白酶处理卵裂球获得的细胞可直接移植到同期发情受体的子宫中继续发育C. 胚胎干细胞核移植可得到一群性状完全相同的个体D. 从卵巢中取出的卵母细胞与获能后的精子完成受精作用6.以下技术与应用匹配不正确．．．的是（）A. 核移植技术——培养鲤鲫核质杂交鱼B. 干细胞技术——提供用于移植的细胞或器官C. 细胞融合技术——培育单倍体植物D. 酶的固定化技术——固定α淀粉酶连续水解废水中的淀粉7.进行生物工程设计时，下表各组所选择的实验材料与实验目的配置，不正确的是（）组别实验目的实验材料材料特点1 动物细胞核移植卵母细胞细胞大，细胞质能有效调控核发育2 体细胞诱变育种愈伤组织细胞分裂能力强，易诱发突变3 植物体细胞杂交培育新品种花粉粒易于获取，易于培养4 烧伤患者皮肤细胞移植自体皮肤生发层细胞分裂能力强，且不会引起免疫排斥A. 1组B. 2组C. 3组D. 4组8.中国科学家应用体细胞核移植方法培育了克隆猴“中中”和“华华”。
第2章细胞工程第2节动物细胞工程一、动物细胞培养1.概念：从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。
2.原理：细胞增殖3.地位：动物细胞工程的基础4.关键操作：原代培养和传代培养。
（一）动物细胞培养的条件1.营养（1）成分①已知成分将细胞所需的营养物质（糖类、氨基酸、无机盐、维生素等）按其种类和所需量严格配制而成的培养基，称为合成培养基。
①未知成分使用合成培养基时，通常需加入血清等一些天然成分。
（2）培养基的物理性质培养动物细胞一般使用液体培养基，也称为培养液。
2.无菌、无毒的环境①对培养液和所有培养用具进行灭菌处理；①在无菌环境下进行操作；①还需要定期更换培养液。
3.温度、pH和渗透压（1）适宜的温度：哺乳动物细胞培养的温度多以36.5±0.5①为宜。
（2）适宜的pH：多数动物细胞生存的适宜pH为7.2~7.4。
（3）适宜的渗透压：维持适宜渗透压的目的维持细胞正常的形态和功能。
4.气体环境（1）组成：动物细胞培养所需气体主要有O2和CO2。
（2）气体作用：①O2：O2是细胞代谢所必需的；①CO2：CO2的主要作用维持培养液的pH。
（二）动物细胞培养的过程①原代培养：将分瓶之前的细胞培养，即动物组织经处理后的初次培养称为原代培养。
①传代培养：将分瓶后的细胞培养称为传代培养；①细胞贴壁：大多数体外培养的细胞需要贴附于某些基质表面才能生长增殖，这类细胞往往贴附在培养瓶的瓶壁上，这种现象称为细胞贴壁；①接触抑制：当贴壁细胞生长到表面相互接触时，细胞通常会停止分裂增殖。
1.取动物组织（1）取材：动物胚胎或幼龄动物的组织、器官。
（2）取材原因：细胞分化程度低，增殖能力强，容易培养。
2.制成细胞悬液（1）制成细胞悬液的步骤：①将组织分散成单个细胞；①用培养液将细胞制成细胞悬液。
（2）将组织分散成单个细胞的原因：①从动物体取出的成块组织中，细胞与细胞靠在一起，彼此限制了生长和增殖；①能使细胞与培养液充分接触，更易进行物质交换。
专题2细胞工程 2.2动物细胞工程班级：姓名：一、单选题1．用动、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是()A．都需用CO2培养箱B．都须用液体培养基C．都要在无菌条件下进行D．都可体现细胞的全能性2．下列有关体细胞核移植过程的叙述，错误的是()A．在体外将从卵巢采集到的卵母细胞培养到减数第一次分裂中期B．供体细胞不一定要来自珍稀动物C．通过显微操作技术去除卵母细胞的细胞核和第一极体D．使用电脉冲等方法激活重组细胞使其完成细胞分裂和发育3．绵羊的乳腺细胞是高度特化的细胞，但用乳腺的细胞核与卵细胞的细胞质融合成一个细胞后，这个细胞核仍然保持着全能性，这主要是因为()A．细胞核内含有保持物种发育所需要的全套遗传物质B．卵细胞的细胞质内含有物种发育所需要的全套遗传物质C．卵细胞细胞质为细胞核提供营养物质D．细胞核与细胞质是相互依存的关系4．下列关于动物细胞培奍的叙述，正确的是（）A．恶性细胞系的细胞可进行传代培养B．培养保留接触抑制的细胞在培奍瓶壁上可形成多层细胞C．克隆培养法培养过程中多数细胞的基因型会发生改变D．二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的5．用于动物细胞培养的组织和细胞，大都来自胚胎和出生不久的幼龄动物，其主要原因是这样的组织细胞()A．容易产生各种变异B．具有更强的分裂能力C．取材十分方便D．具有更强的全能性6．下列不属于克隆的是（）A．矮牵牛花的扦插繁殖B．PCR扩增人SRY基因C．受精卵发育成新个体D．杂交瘤细胞在小鼠体内培养7．关于动物体细胞培养过程中细胞的活动或特性，下列表述错误的是（）A．细胞通常贴壁生长B．细胞进行有丝分裂C．细胞之间有接触抑制现象D．细胞的遗传物质均发生改变8．下列对动物核移植技术的描述正确的是（）A．提供细胞核和去核卵母细胞的动物都应为雌性B．去除卵母细胞细胞核的操作必须在电子显微镜下进行C．成熟体细胞核移植比胚胎细胞核移植成功的难度大D．通过核移植方法培育的克隆动物遗传物质全部来自供体细胞核9．下列关于动物细胞所需的培养条件的叙述错误的是（）A．无毒、无菌的环境B．温度与动物体温相近C．合成培养基中通常需加入动物血清D．不需要氧气，需要二氧化碳调节培养液pH 10．下列关于克隆技术的叙述，正确的是（）A．植物组织培养和动物细胞培养的原理都是细胞的全能性B．植物体细胞杂交和动物细胞融合都可以克服生殖隔离得到新个体C．动物细胞工程需要在无菌条件下进行，植物细胞工程不需要D．植物组织培养可用于单倍体育种，动物体细胞核移植可以培养克隆动物11．动物细胞培养的特点是（）①细胞贴壁②有丝分裂③分散生长④接触抑制⑤减数分裂⑥传代培养的细胞一般传至十代后就不易传下去了A．①②④⑥B．②③④⑤C．①③④⑥D．③④⑤⑥12．关于动物细胞培养技术的应用的说法不正确的是（）A．大规模生产有重要价值的生物制品，如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等B．动物细胞是基因工程技术中常用的受体细胞，基因工程也离不开动物细胞的培养C．可以用于检测有毒物质，只能判断某种物质是否有毒，不能判断毒性的大小D．科学家培养正常或各种病变的细胞，用于生理、病理、药理等方面的研究13．下列关于动物体细胞核移植技术和克隆动物的叙述，正确的是（）A．目前在实验中，科学家可以用类似植物组织培养的方法获得完整的动物个体B．体细胞的细胞核移植到受体细胞之前，要先去掉受体卵母细胞的核C．用于核移植的供体细胞一般都选用传代50代以内的细胞D．用体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体细胞供体动物进行100%的复制14．下图为克隆羊“多利”的培育过程示意图：下列各项有关表述错误．．的是（）A．克隆羊“多利”的主要性状与甲羊一致，因为其细胞核基因来自甲羊B．克隆羊“多利”的培育过程中采用的生物技术有转基因和核移植C．乙羊的去核卵细胞为重组细胞基因表达提供了细胞内的环境条件D．此过程说明高度分化动物细胞核具有全能性15．下图是某克隆羊培育过程模式图，试分析获得该克隆羊的生殖方式、该克隆羊的基因型以及该克隆羊发育成熟时所分泌的性激素依次是（）A．无性生殖、Aa、雌性激素B．无性生殖、aa、雄性激素C．有性生殖、aa、雄性激素D．有性生殖、AA、雌性激素16．用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中错误．．的是（）A．将特定抗原注入小鼠体内，获得能产生相应抗体的B淋巴细胞B．用纤维素酶和果胶酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞C．用灭活的病毒诱导能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合D．筛选杂交瘤细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体17．科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是( )A．经过免疫的B淋巴细胞B．不经过免疫的T淋巴细胞C．经过免疫的T淋巴细胞D．不经过免疫的B淋巴细胞18．对某种动物的肝肿瘤细胞进行细胞培养。
下列说法错误的是（）A．在利用肝组织块制备细胞悬液时，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理B．细胞培养应在含5％CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是刺激细胞呼吸C．为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的抗生素D．在合成培养基中，通常需加入血清、血浆等天然成分19．如图为动物细胞培养过程中细胞增殖情况的变化曲线，图中B、E两点表示经筛选、分装后继续培养。
有关叙述正确的是（）A．动物细胞培养选用的培养材料大多为动物的受精卵B．原代培养和传代培养的分界点是曲线中B点C．细胞培养过程中通常在培养液中通入5%的CO2刺激细胞呼吸D．培养过程中细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞20．下列对哺乳动物体细胞核移植技术的描述错误的是（）A．可通过显微操作法除去卵母细胞的细胞核B．该技术的难度明显高于胚胎细胞核移植C．通常采用减数第二次分裂期的卵母细胞作为受体细胞D．克隆动物是对提供体细胞的动物进行了完全的复制21．下图表示动物细胞培养的过程，下列有关该过程的说法，正确的是（）A．乙中进行动物细胞培养时应通入适量的CO2以调节pHB．宜用胃蛋白酶将甲中的动物组织块分散为单个的细胞C．甲中用于培养的动物细胞宜取自成年动物D．丙中细胞大量繁殖后，细胞之间相互接触能促进细胞的分裂22．动物细胞培养要处于无菌、无毒的环境中，下列操作与其无关的是（）A．对培养液和培养用具进行无菌处理B．在培养液，中添加一定量的抗生素C．定期更换培养液，防止代谢产物积累D．向培养液中添加促生长因子等成分23．据英国《卫报》披露，纽卡斯尔大学研究人员不久前成功实现一项生殖医学技术，将患有线粒体疾病妇女的受精卵中的细胞核移植到健康妇女捐献的去核卵子中，最终产下了健康的婴儿。
下列叙述错误的是（）A．此项技术的基础是动物的细胞和组织培养B．此项技术的原理与克隆羊“多莉”完全相同C．健康妇女捐献的卵子的细胞质具有调控移入细胞核发育的作用D．婴儿出生后具有患病夫妇以及捐献健康卵子的妇女三方的遗传特征24．研究人员将猴胚胎细胞（a）中的细胞核取出，移植入一雌猴的去核卵母细胞（b）中，得到重组细胞（c），经培养获得胚胎并移植到另一雌猴（d）体内进一步发育，获得克隆猴（e）。
下列叙述正确的是（）A．e的细胞内的全部基因都来自a，b不提供基因B．c经一系列增殖和分化形成e的过程中，细胞核起控制作用C．d为胚胎发育提供遗传物质和其他适宜条件D．e的形成过程中没经过受精作用，其体细胞中无同源染色体25．课外小组欲在体外完成hela（宫颈癌）细胞的培养，相关描述错误．．的是（）A．体外培养条件应模拟细胞生长的内环境条件B．定期更换培养基可及时为细胞补充营养C．CO2培养箱提供的CO2可促进细胞呼吸D．贴壁生长的hela细胞可用胰蛋白酶处理后进行传代培养26．下列有关动、植物细胞工程的叙述，正确的是（）A．动物细胞培养与植物组织培养依据的原理都是细胞的全能性B．在动物细胞培养及植物组织培养中，都需要对培养基灭菌，还都要用到CO2培养箱C．可以用灭活的病毒促进动物细胞融合，也能促进植物细胞融合D．动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖植物组织培养可用于植物脱除病毒27．生物技术发展速度很快，已灭绝生物的“复生”将不再是神话。
如果世界上最后一只野马刚死亡，以下提供的“复生”野马个体的方法中能够成功的是（）A．将野马的体细胞取出，利用组织培养技术，经脱分化、再分化，培育成新个体B．将野马的体细胞两两融合，再经组织培养培育成新个体C．取出野马的体细胞核移植到母家马的去核卵细胞中，经孕育培养成新个体D．将野马基因导入家马的受精卵中，培育成新个体28．某研究小组为测定某种药物对体外培养细胞的毒性，准备对某种动物的肝肿瘤细胞（甲）和正常肝细胞（乙）进行动物细胞培养。
下列叙述正确的是（）A．制备肝细胞悬液时，可用胃蛋白酶处理肝组织块B．培养液需含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、生长素和动物血清等C．为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的抗生素D．甲、乙细胞在持续的传代培养过程中，均会出现停止增殖的现象29．犬细小病毒(CPV)单克隆抗体(Cpv McAb)可抑制病毒对宿主细胞的侵染及病毒的复制，进而杀灭幼犬体内病毒。
下列相关叙述，错误的是（）A．在Cpv McAb的制备过程中用到了动物细胞培养和动物细胞融合技术B．给幼犬注射CPV后，CPV抗体检测呈阳性，说明发生了体液免疫反应C．经选择性培养基筛选出来的杂交瘤细胞即可直接生产Cpv McAbD．对杂交细胞培养时，需要无菌无毒环境，且温度、气体环境等要适宜30．我国科学家以雌性猕猴胎儿成纤维细胞为核供体，成功克隆出两只猕猴，成为全球首例细胞克隆灵长类动物。
有关叙述错误的是（）A．培育出的两只猕猴均为雌性B．若取猕猴的体细胞核进行克隆则难度明显较高C．这项技术证明高度分化的动物体细胞具有全能性D．克隆猕猴的成功为大量培育灵长类遗传病模型动物提供可能二、非选择题31．埃博拉病毒是一种能引起人类和灵长类动物产生埃博拉出血热的烈性传染病病毒，有很高的死亡率。
下图是针对埃博拉病毒的单克隆抗体制备流程的简明示意图。
请回答下列问题：（1）分析上图，制备埃博拉病毒单克隆抗体涉及的生物技术主要有____________、____________。
（2）利用小鼠制备埃博拉病毒单克隆抗体的过程中，先给小鼠注射一种纯化的埃博拉病毒核衣壳蛋白，再从小鼠脾脏中获得________________________。
通过②过程获得的③是_____________________，再经过筛选最终可获得④，该细胞群的特点是________________________。
（3）若要大量制备单克隆抗体，可将④细胞置于培养液中进行体外培养，在培养液中通入一定浓度的_____________，以维持培养液的pH。
