x3-2-22.2 动物细胞工程
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2动物细胞工程导学案〉这篇文档的全部内容.2。
2 动物细胞工程一、知识与技能目标1、掌握动物细胞培养的过程和条件、动物体细胞核移植的过程,并了解它们的前景及存在的问题。
2、知道动物细胞融合的概念、方法及单克隆抗体的制备与应用,并正确理解动物细胞融合的原理。
二、过程与方法目标1、运用细胞的基础知识,深刻理解这两项技术的原理,并理解这些技术的新进展。
2、结合免疫原理、融合原理以及动物细胞培养,全面理解单克隆抗体的制备过程,利用动物细胞培养技术对杂交瘤细胞进行体外培养和体内培养可生产出专一性强,灵敏性高的抗体.三、情感与价值观目标1、收集相关报道,在同学中开展应用前景及存在问题的讨论,来加强对科技的认识,形成正确的价值观念。
高二生物选修三2.2动物细胞工程知识点高二生物选修三2.2动物细胞工程知识点动物细胞工程动物细胞工程常用技术:动物细胞培养细胞核移植动物细胞融合单克隆抗体的制备其中动物细胞的培养,是动物细胞工程的基础,也即动物细胞培养是细胞核移植,动物细胞培养,单克隆抗体的制备的基础。
动物细胞培养1. 概念:就是从动物机体中取出相关组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。
2. 原理:细胞增殖3. 动物细胞培养过程动物组织块剪碎组织用胰蛋白酶处理分散成单个细胞制成细胞悬液原代培养原代培养4. 细胞贴壁:悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,(单层)要求:培养瓶(皿)内表面光滑无毒易于贴附。
接触抑制:细胞在贴壁生长过程中,随着有丝分裂,数量不断增多,当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的接触抑制。
原代培养:动物组织消化后的初次培养称为原代培养。
特点:10代以内,能保持正常的二倍体核型。
目前使用或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内,以保持细胞正常的二倍体核型。
传代培养:原代培养接触抑制时用胰蛋白酶处理后的分瓶培养称之为传代培养。
细胞株:10-50代,遗传物质没有发生改变细胞系:50代后,遗传物质发生改变5. 细胞培养条件(1)无菌,无毒无菌:添加抗生素无毒:定期更换培养,以便清除代谢产物,防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害。
(2)营养糖,促生长因子,无机盐,氨基酸,血清,血浆,微量元素加入血清,血浆的目的:血清,血浆可以补充培养基中缺乏的物质。
(3)温度,pH 温度:36.5+0.5 pH:7.2-74 (4)气体环境95%空气加5%CO2 O2是细胞代谢所必须的CO2主要作用是维持培养液pH 6. 动物细胞培养与植物组织培养的培养基相比其特点是:动物细胞培养:液体培养基,含有血清和血浆植物细胞培养:固体培养基,含有植物激素动物细胞核移植技术与克隆动物1.概念:将动物的一个细胞的细胞核,移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育成新的个体。
⽣物选修三专题2细胞⼯程2.2动物细胞⼯程专题2细胞⼯程 2.2动物细胞⼯程⼀、动物细胞⼯程:动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合(⽣产单克隆抗体)★动物细胞培养技术是其他动物细胞⼯程技术的基础⼆、动物细胞培养:从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞⽣长和增殖。
(原理:细胞增殖)2、动物细胞培养的过程:注:①细胞株和细胞系的区别:细胞株遗传物质未改变,细胞系发⽣基因突变,遗传物质已改变,细胞系具有癌细胞的特点,失去接触抑制,获得不死性,容易传代培养。
原因:传代细胞传⾄10代~50代左右时,增殖分化缓慢以⾄于完全停⽌,这时可能细胞核型会发⽣变化。
故⽬前使⽤的或保存的正常细胞通常为10代以内。
②原代培养:从机体取出后⽴即培养的细胞为原代细胞(即动物组织消化后的初次培养)。
培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代培养。
③传代培养:将原代细胞从培养瓶中取出,配制成细胞悬浮液,分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养,称为传代培养。
④细胞贴壁:将细胞悬液放⼊培养瓶内,置于适宜环境中培养。
悬液中分散的细胞很快就能贴附在瓶壁内,称为细胞贴壁。
⑤接触抑制:当贴壁细胞分裂⽣长到表⾯相互接触时,细胞就会停⽌分裂增殖,这种现象称为细胞的接触抑制。
⑥细胞间的成分主要是蛋⽩质。
加⼊胰蛋⽩酶或胶原蛋⽩酶分散细胞⽽不加⼊胃蛋⽩酶。
原因:胃蛋⽩酶适宜的PH约为2,当PH>6时,胃蛋⽩酶就会失去活性,⽽胰蛋⽩酶作⽤的适宜环境PH为7.2----8.4,多数动物细胞培养的适宜PH为7.2----7.4,胃蛋⽩酶在此环境中没有活性。
胰蛋⽩酶在此环境中活性较⾼,因此胰蛋⽩酶适宜⽤于细胞培养时的消化。
3、动物细胞培养的条件①⽆菌、⽆毒的环境:添加⼀定量的抗⽣素,定期更换培养液②营养:葡萄糖、氨基酸、⽆机盐、微量元素、动物⾎清、⾎浆(补充合成培养基中缺乏的物质)等。
③温度和PH:36.5 ±0.5度;PH为7.2~7.4。