ATP酶活性检测试剂盒

ATP酶活性检测试剂盒（样本无需高速离心样本无需高速离心，，可测Na+k+、Ca2+Mg2+、Ca2+、Mg2+_ATPase)说明书修订日期：2019.01.22 Cat number：KGT026Store at -20 for for 6 months℃For Research Use Only（科研专用）一、试剂盒介绍ATP酶存在于组织细胞及细胞器的膜上，是生物膜上的一种蛋白酶，它在物质运送、能量转换以及信息传递方面具有重要的作用。

本试剂盒的测定原理是依据ATP酶可分解ATP生成ADP及无机磷，测定无机磷的量可判断ATP酶活力的高低。

本试剂盒可测不需要高速离心的红细胞膜以及不需要高速离心的组织匀浆中的ATPase。

二、试剂组份组份名称KGT02650tests保存条件试剂A 10mL×3试剂B 10mL×1试剂C 10mL×12-8℃试剂D 粉剂×3 -20℃试剂E 粉剂×1试剂F 粉剂×12-8℃试剂G 10mL×2 RT试剂H 粉剂×3试剂I 粉剂×12-8℃试剂J：2.5 mol/L 硫酸100mL×1 RT 试剂K：10 m mol/L 标准磷储液10mL×1 2-8℃试剂D：-20℃以下保存6个月。

用时每支加双蒸水至5ml，现用现配。

余下的-20℃以下可保存一周。

试剂E：用时每支加双蒸水至5ml，适当加热溶解，4℃保存3个月。

试剂F：用时每支加双蒸水至10ml[注1]，充分加热使其完全溶解，室温保存。

试剂H：用时每瓶加双蒸水至40ml溶解，（溶解后避光4℃可保存一周）。

试剂I：用时加水至100ml溶解，室温保存3个月。

0.5umol/ml标准磷工作液配制：用时将试剂K作20倍稀释: 取0.5ml加蒸馏水定容至10ml。

定磷剂的配制：按双蒸水：2.5mol/L硫酸：试剂H：试剂I=2:1:1:1的比例配制，配好的定磷剂应为浅黄色，若无色则试剂失效，若是蓝色则为磷污染，定磷剂现用现配。

atp效果测试方法ATP效果测试方法是一种常见的测试方法，主要用于测试细胞的活力和生物分子的活性。

ATP是细胞内能量的一种重要指标，因此测试ATP效果可以反映细胞的活力和生物分子的活性。

下面将介绍ATP效果测试的方法。

一、仪器和试剂ATP效果测试需要用到一些常见的仪器和试剂。

其中，ATP酶试剂盒是必不可少的试剂之一，它可以用于ATP酶的检测。

此外，还需要用到ATP标准品、反应物和缓冲液等试剂。

仪器方面，需要使用荧光光度计或发光光度计等仪器。

二、ATP酶试剂盒的使用ATP酶试剂盒是ATP效果测试的核心试剂之一。

具体使用方法如下：1.制备样品：将待测样品制备好，如细胞、生物分子等。

2.加入试剂：取一定量的ATP酶试剂盒，加入标准品和缓冲液，制备成一定浓度的反应液。

3.加入样品：将制备好的样品加入到反应液中，并混合均匀。

4.测量荧光或发光：将反应液加入到荧光光度计或发光光度计中，测量荧光或发光。

5.计算ATP含量：根据荧光或发光的测量结果，可以计算出样品中的ATP含量。

三、其他相关试验除了ATP酶试剂盒外，还有一些其他相关的试验可以用于ATP效果测试。

例如，ATP酶活性的测定、ATP水解反应的测定等。

这些试验都可以反映出ATP效果的好坏。

四、注意事项在进行ATP效果测试时，需要注意以下几点：1.样品的制备需要严格按照试剂盒的说明书进行，避免样品的影响。

2.反应液的制备需要准确，避免浓度过高或过低。

3.荧光或发光的测量需要准确，避免干扰因素的影响。

4.ATP酶试剂盒的储存需要在-20℃下，避免试剂的失效。

5.实验过程中需要注意安全，避免试剂的误食或误触。

ATP效果测试方法是一种常见的测试方法，可以用于反映细胞的活力和生物分子的活性。

在实验过程中需要注意各种细节，保证实验的准确性和可靠性。

ATP检测试剂盒(ATP Assay Kit)可以用于检测普通溶液、细胞或组织内的ATP(adenosine 5'-triphosphate)水平。

细胞和组织样品一步裂解即可完成样品制备，检测灵敏度高达1nmol/L，化学发光可以持续稳定达30分钟，并且获得的样品还可以同时进行Western检测。

ATP，作为最重要的能量分子在细胞的各种生理、病理过程中起着重要作用。

ATP水平的改变，会影响细胞的功能。

通常细胞在凋亡、坏死或处于一些毒性状态下，ATP水平会下降，而高葡萄糖刺激等对于一些细胞可以上调细胞内ATP水平。

通常ATP水平的下降表明线粒体的功能受损或下降，在细胞凋亡时ATP 水平的下降通常和线粒体的膜电位下降同时发生。

样品制备非常简单。

本试剂盒提供了可以用于细胞和组织裂解的ATP检测裂解液，简单裂解后即可用于ATP检测。

无需进行高氯酸或三氯乙酸(TCA)抽提，或样品裂解后的煮沸等繁琐操作。

本试剂盒根据萤火虫荧光素酶(firefly luciferase)催化荧光素产生荧光时需要ATP提供能量研制而成。

当萤火虫荧光素酶和荧光素都过量时，在一定的浓度范围内荧光的产生和ATP的浓度成正比。

这样就可以高灵敏地检测溶液中的ATP浓度。

本试剂盒在样品体积为100微升时可以检测浓度低达1nmol/L的ATP。

而常规的细胞或组织裂解液中ATP的浓度仅为0.1-1μmol/L，一些常见细胞的细胞内ATP水平约为10nmol/mg 蛋白。

并且本试剂盒的检测浓度范围非常大，检测上限可以高达10μmol/L，并在5nmol/L-10μmol/L范围内可以形成良好的标准曲线。

本试剂盒进行了特殊的优化设计，使检测ATP时的化学发光非常稳定。

对于ATP标准曲线的检测结果显示，在开始反应后10分钟内化学发光无明显下降，开始反应后30分钟内化学发光的下降不超过10%。

使用本试剂盒中的ATP检测裂解液裂解获得的细胞或组织样品，不仅可以用于ATP检测，还可用于检测蛋白浓度、进行SDS-PAGE或一些常规的较易溶解蛋白的Western检测。

ATP 含量检测试剂盒说明书紫外分光光度法注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。

货号：BC0300规格：50T/48S 产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

试剂名称规格保存条件提取液液体60 mL×1瓶2-8℃保存试剂一液体50 mL×1瓶2-8℃保存试剂二粉剂×1瓶2-8℃保存试剂三液体8 mL×1瓶2-8℃保存试剂四粉剂×3支-20℃保存试剂五粉剂×1瓶2-8℃保存试剂六粉剂×3支-20℃保存标准品粉剂×1支-20℃保存溶液的配制：1．提取液低温条件下，可能有结晶析出，放于60℃水浴加热溶解即可，不影响使用。

2．试剂二：临用前加入7 mL 蒸馏水充分溶解，可加热促进溶解；3．试剂四：临用前取1支加入0.2mL 蒸馏水溶解，用不完的试剂-20℃分装保存2周，避免反复冻融；4．试剂五：临用前加入3.2 mL 蒸馏水充分溶解，用不完的试剂-20℃分装保存4周，避免反复冻融；5．试剂六：临用前取1支加入0.25 mL 蒸馏水备用，用不完的试剂-20℃分装保存2周，避免反复冻融；6．标准品：5 mg ATP 。

临用前加入0.826 mL 蒸馏水配成10 μmol /mL的ATP 标准溶液，用不完的试剂-20℃分装保存4周，避免反复冻融；7．工作液的配制：临用前请按试剂二(mL)：试剂三(mL)：试剂四(mL)：试剂五(mL)：试剂六(mL)=1：1：0.1：0.4：0.1的比例配制（2.6mL ，约10T 的量），现配现用。

产品说明：ATP 广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是生物能量通货，能荷是描述细胞能量代谢状态的主要参数。

测定ATP 含量并且计算能荷，能够反映能量代谢状态。

HK 催化葡萄糖和ATP 合成6-磷酸葡萄糖，6-磷酸葡萄糖脱氢酶进一步催化6-磷酸葡萄糖脱氢生成NADPH ，NADPH 在340nm 有特征吸收峰，NADPH 和ATP 含量成正比，以此反应ATP 含量。

ATP含量试剂盒使用说明一、试剂盒的组成1.ATP酶：可催化ATP与啶酮核苷酸底物反应，产生荧光发射。

2.底物液：包含啶酮核苷酸底物、辅酶CoA、磷酸化底物和缓冲液等成分。

3.酶反应终止液：用于停止ATP酶的活性，停止荧光信号的产生。

4.荧光标准品：已知浓度的ATP溶液，用于绘制标准曲线。

5.读取缓冲液：用于在荧光分析仪上读取荧光信号。

二、使用步骤1.试剂室温平衡：将试剂盒中的所有试剂恢复到室温，并确保所有试剂充分均匀混合。

2.样品预处理：根据实验需要，选择合适的方法提取细胞或组织中的ATP，并计算样品的蛋白质含量。

3.准备标准曲线：取不同浓度的荧光标准品，并用读取缓冲液稀释到一系列已知浓度的溶液。

每个浓度至少重复3次。

将这些标准品稀释到试管中。

4.样品处理：将不同待测样品分别加入到试管中，各样品至少重复3次。

同时加入空白对照组，只加读取缓冲液而无待测样品。

5.加入试剂：将相应体积的底物液加入到每个试管中，充分混合。

立即向每个试管中加入适量的ATP酶，同时进行混合。

6.反应：将试管密封，并在37℃下孵育一段时间，一般为10-30分钟。

7.停止反应：向每个试管中加入相应体积的酶反应终止液，停止ATP酶的活性，停止荧光信号的产生。

8.读取荧光：将每个试管置于荧光分析仪上，使用适当的激发波长和发射波长对荧光信号进行测量，记录下荧光单位值。

9.绘制标准曲线：将标准曲线上的荧光单位值与标准品的ATP浓度进行对应，绘制标准曲线。

10.计算样品ATP含量：根据样品荧光单位值和标准曲线，计算出样品中的ATP含量。

三、注意事项1.所有试剂的操作应按照试剂盒说明进行，不同品牌可能有些许差异，应严格按照相应说明进行操作。

2.手术操作时应采取无菌操作，避免对样品的污染。

3.混合试剂时需充分振荡，确保试剂均匀混合。

4.在实验过程中，所有试管、吸头等实验用具应标注清楚，避免混淆和误操作。

5.反应时间会影响结果，不同实验目的可根据需要进行时间的调整，一般30分钟内可得到稳定的信号。

Na +K +-ATP 酶活性检测试剂盒说明书微量法货号：BC0065规格：100T/48S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

试剂名称规格保存条件试剂一液体60 mL×1瓶4℃保存试剂二液体4 mL×1瓶4℃保存试剂三粉剂×2支-20℃保存试剂四液体2 mL×1瓶4℃保存试剂五粉剂×1瓶4℃保存试剂六粉剂×1瓶4℃保存试剂七粉剂×1瓶4℃保存试剂八液体5 mL×1瓶常温保存标准品液体1 mL×1支4℃保存溶液的配制：1、试剂三：临用前用1 mL 蒸馏水溶解，现用现配。

用不完的试剂-20℃可保存一周。

2、试剂五：用时加入3 mL 双蒸水， 4℃保存。

3、试剂六：用时加入5 mL 双蒸水，溶解后4℃保存一周。

4、试剂七：用时加入5 mL 双蒸水，溶解后4℃保存一周。

5、标准品：10 μmol/m L 标准磷贮备液。

将标准品20倍稀释，即取 0.1 mL 标准品加1.9 mL 蒸馏水充分混匀，配成0.5 μmol/m L 标准磷应用液。

6、定磷剂的配制：按H 2O:试剂六:试剂七:试剂八=2:1:1:1的比例配制，配好的定磷剂应为浅黄色。

若无色则试剂失效，若是蓝色则为磷污染，定磷剂根据实验用量现用现配。

注意：配试剂最好用新的烧杯、玻璃棒和玻璃移液器，也可以用一次性塑料器皿，避免磷污染。

产品说明：Na +K +- ATP 酶广泛分布于植物、动物、微生物和细胞中，可催化ATP 水解生成ADP 和无机磷。

Na +K +-ATP 酶分解ATP 生成ADP 及无机磷，通过测定无机磷的量来确定ATP 酶活性。

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。

ATP发光检测试剂盒(ATP-Lite Assay Kit)产品说明：ATP，是生命体最基本的能量分子，一种通用的能量“货币”。

ATP参与多种酶促反应，维持正常的生命活动。

通过ATP检测，可以间接定量测定细菌、细胞的数量和活性状态，了解体外ATP参与的酶促反应的进程，在生物检定和生命科学研究中有广泛的应用。

本试剂盒采用生物发光(bioluminescent)法，依据荧光素酶(luciferase)催化底物荧光素的转化，高效利用ATP的能量，发射出光子。

萤火虫荧光素酶(Fireflyluciferase)催化的发光反应，与ATP浓度具有很好的线性依赖关系和极高的敏感性，ATP的检测灵敏度达到10-13 mol。

本试剂盒采用优化的酶反应体系，使发光反应持续数十分钟，以便于手工操作多个样品。

操作简便，可快速获得结果。

产品内容与储存方法：名称数量保存条件100x Lysis Buffer (细胞裂解液) 1 ml -20℃ATP Assay Buffer (反应缓冲液) 10 ml -20℃mlLuciferin 0.5-20℃Firefly luciferase 1 ml -20℃ATP (1 mM) 0.5 ml -20℃可作200次以上ATP检测。

低温运输，-20℃或-80℃避光保存。

有效期6个月。

所需其它试剂：使用者需准备PBS 、双蒸水等。

操作方法：样品准备：对于细胞或微生物样品，应首先提取ATP。

本试剂盒提供培养哺乳细胞的ATP提取方法如下。

其它标本来源的ATP提取，一般可用三氯乙酸的提取方法，或参照文献一些有效提取方法进行。

对体外酶促反应样品，一般可直接用双蒸水稀释后进行检测。

样品中ATP含量应稀释到0.1 mM一下，以保证在测定的线性范围内。

培养哺乳细胞样品准备：1)配制裂解液：临用前，取适量100x Lysis Buffer (ULB)，用双蒸水稀释至1xLB，混匀。

1xLB可长期冻存于-20℃。

植物V型ATP酶（V type ATPase）活性酶连续反应光谱法定量检测试剂盒产品说明书（中文版）主要用途植物V型ATP酶（V type ATPase）活性酶连续反应光谱法定量检测试剂是一种旨在使用V型ATP酶、丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶连续循环反应系统，通过排除P型和F型ATP酶干扰的前提下，测定ATP水解产生的ADP过程中，伴随的还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）的氧化反应，即采用光谱法测定其氧化后峰值的变化，以此进行测算单位酶活性的权威而经典的技术方法。

该技术经过精心研制、成功实验证明的。

其适合于各种植物组织，包括种子（seed）、叶片（leaf）、根（root）、胚胎叶（cotyledon）、上胚轴（epicotyl）等裂解悬液，以及内涵体、溶酶体、囊泡体、微粒体等V型ATP酶的特异活性检测。

产品不含污染性蛋白酶，严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，反应优化，检测敏感。

技术背景腺苷三磷酸酶，又称为ATP酶（adenosine triphosphatase；ATPase或ATP phosphohydrolase；EC3.6.1.3），属于磷酸水解酶，可以催化含磷的酸酐分解，即催化三磷酸腺苷分解为二磷酸腺苷和无机磷。

ATP酶的去磷酸化反应释放出能量，成为细胞生命代谢的能源。

ATP酶为跨膜蛋白（transmembrane），帮助传输各种代谢分子进出细胞。

根据ATP酶的结构和功能，分为五类不同的ATP酶，即F、V、A、P和E型。

F型，又称为F1F0型，主要在线粒体、叶绿体或细菌细胞膜上，进行氧化磷酸化或光合作用；P型，又称为E1E2型，存在于细菌和真核细胞膜和细胞器上，其功能在于水解ATP获得能量，跨膜运输各种化学分子，包括Ca2+传输性、Na+-K+/H+-K+传输性、H+传输性和所有细菌型等，其中胃氢/钾ATP酶，一种与胃酸分泌相关的质子泵，属于这一类型。

V型，又称为V1V0型，主要存在于真核细胞的液泡（vacuole）中。

ATP检测试剂盒产品简介：ATP检测试剂盒(ATP Assay Kit)可以用于检测普通溶液中或细胞或组织内的ATP(adenosine 5’-triphosphate)水平。

ATP，作为最重要的能量分子在细胞的各种生理、病理过程中起着重要作用。

ATP水平的改变，会影响许多细胞的功能。

通常细胞在凋亡、坏死或处于一些毒性状态下，ATP水平会下降，而高葡萄糖刺激等对于一些细胞可以上调细胞内ATP水平。

通常ATP水平的下降表明线粒体的功能受损或下降，在细胞凋亡时ATP水平的下降通常和线粒体的膜电位下降同时发生。

本试剂盒根据萤火虫荧光素酶(firefly luciferase)化荧光素产生荧光时需要ATP提供能量研制而成。

当萤火虫荧光素酶和荧光素都过量时，在一定的浓度范围内荧光的产生和ATP的浓度成正比。

这样就可以高灵敏地检测溶液中的ATP浓度。

本检测试剂盒可以检测浓度低达0.1nmol/L的ATP。

而常规的细胞或组织裂解液中ATP的浓度仅为0.1-1μmol/L，一些常见细胞的细胞内ATP水平约为10 nmol/mg蛋白。

检测细胞或组织内ATP浓度时，用本试剂盒提供的裂解液裂解后即可以测定ATP浓度。

本试剂盒方便快捷，通常10-20个样品可以在30-60分钟内测定完毕。

本试剂盒至少可以检测200个样品。

保存条件：-20℃保存，半年有效。

-70℃保存，一年有效。

ATP检测试剂需避光保存。

注意事项：A TP检测试剂中含有荧光素酶，反复冻融会导致其逐渐失活。

为取得较好的使用效果，冻融的次数不宜超过3次。

A TP检测试剂稀释成ATP检测工作液后，最好一次用完，不宜冻存后再使用。

ATP，特别是裂解后样品中的ATP在室温不太稳定，需在4℃或冰上操作。

A TP在冰上可以稳定长达6小时。

本试剂盒需使用luminometer(检测荧光素酶报告基因时所用的仪器)。

如果没有luminometer，也可以使用液闪仪。

液闪仪的测定效果取决于液闪仪的检测灵敏度和检测精度。

ATP含量检测试剂盒（可见分光光度法）使用说明注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。

货号：BC0300规格：100T/48S产品内容：组分规格保存试剂一底物液Ⅰ粉剂×1瓶室温保存底物液Ⅰ配制：用时加10mL煮沸双蒸水溶解，并沸水浴使溶解完全；临用前观察如有结晶，可沸水浴溶解后置于37℃保存待测。

试剂二底物液Ⅱ20mL×1瓶4℃保存试剂三促进剂粉剂×2支-20℃保存稀释液760μL×2瓶4℃保存试剂三应用液（促进剂）配制：临用前取1支试剂三稀释液加入1支试剂三粉剂中，充分溶解备用。

试剂四沉淀剂液体 5.5mL×1瓶4℃保存试剂五显色剂甲液7mL×4瓶4℃保存乙液6mL×4瓶4℃保存显色应用液的配制：用时取一瓶显色剂甲液加入一瓶显色剂乙液中，充分混匀4℃待用，现用现配。

试剂六终止剂50mL×1瓶室温保存试剂七ATP标准品粉剂×2支4℃保存5mmol/L ATP标准品贮备液配制：用时加双蒸水定容至1mL，制备5mmol/L ATP标准品贮备液。

1mmol/L ATP标准品应用液配制：将标准品贮备液与双蒸水1:4稀释，即5倍稀释。

产品说明：三磷酸腺苷（adenosine5'-triphosphate，ATP）是生物体内能量转换最基本的载体,其含量的变化直接关系到各器官的能量代谢。

ATP作为最重要的能量分子在细胞的各种生理、病理过程中起着重要作用。

ATP水平的改变，会影响许多细胞的功能。

通常细胞在凋亡、坏死或处于一些毒性状态下，ATP水平会下降，而高葡萄糖刺激等对于一些细胞可以上调细胞内ATP水平。

通常ATP水平的下降表明线粒体的功能受损或下降，在细胞凋亡时ATP水平的下降通常和线粒体的膜电位下降同时发生状态。

ATP含量测定试剂盒可以用于检测红细胞或组织内的ATP水平。

自备仪器和用品：分光光度计、水浴锅、可调式移液枪、台式离心机、研钵和蒸馏水。

线粒体膜H+-ATP酶检测试剂盒(ATP比色法)简介：线粒体(Mitochondria)是细胞呼吸的主要场所，细胞活动所需的能量主要由在线粒体内进行的氧化所产生的能量来供应。

制备线粒体的关键是保持线粒体的完整性和纯度，可通过分级分离法获得，即先低俗出去细胞核以及细胞碎片，再进行高速梯度离心分离线粒体,跨膜蛋白承担各种生物功能，在生物的各种发展过程中扮演重要角色。

Leagene线粒体膜H+-ATP酶检测试剂盒(ATP比色法)检测原理是ATP(Adenosinetr -iphosphatase，ATPase)可催化ATP水解生成ADP及无机磷，这一反应释放出大量能量以供需能生命过程，存在于细胞质膜、叶绿体类囊体及线粒体膜，50T试剂盒是指可以检测约50个样本或100次反应。

该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

组成：自备材料：1、液氮2、研钵或匀浆器3、离心管4、水浴锅5、比色杯6、分光光度计编号名称TE054350TStorage试剂(A): MP裂解液250ml 4℃试剂(B): 蛋白酶抑制剂混合液(100×) 2.5ml -20℃避光试剂(C): PMSF(100mM) 5ml -20℃试剂(D): 蛋白标准(1mg/ml) 1ml -20℃试剂(E): G250染色液50ml 4℃避光试剂(F): H+-ATP Assay buffer 60ml 4℃避光试剂(G): H+-ATP启动剂6ml -20℃试剂(J): 二硝基酚指示剂10ml RT 避光试剂(K): 碱性基液25ml RT试剂(L): H+-ATP显色液60ml 4℃避光说明书1份操作步骤(仅供参考)：1、配制线粒体膜蛋白提取液：取适量的MP裂解液、蛋白酶抑制剂混合液(100×)、PMSF(100mM)置于室温溶解混匀，按MP裂解液：蛋白酶抑制剂混合液(100×)：PMSF(100mM)=。

线粒体膜H+-ATP酶检测试剂盒(ATP比色法)简介：线粒体(Mitochondria)是细胞呼吸的主要场所，细胞活动所需的能量主要由在线粒体内进行的氧化所产生的能量来供应。

制备线粒体的关键是保持线粒体的完整性和纯度，可通过分级分离法获得，即先低俗出去细胞核以及细胞碎片，再进行高速梯度离心分离线粒体,跨膜蛋白承担各种生物功能，在生物的各种发展过程中扮演重要角色。

Leagene线粒体膜H+-ATP酶检测试剂盒(ATP比色法)检测原理是ATP(Adenosinetr -iphosphatase，ATPase)可催化ATP水解生成ADP及无机磷，这一反应释放出大量能量以供需能生命过程，存在于细胞质膜、叶绿体类囊体及线粒体膜，50T试剂盒是指可以检测约50个样本或100次反应。

该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

组成：自备材料：1、液氮2、研钵或匀浆器3、离心管4、水浴锅5、比色杯6、分光光度计编号名称TE054350TStorage试剂(A): MP裂解液250ml 4℃试剂(B): 蛋白酶抑制剂混合液(100×) 2.5ml -20℃避光试剂(C): PMSF(100mM) 5ml -20℃试剂(D): 蛋白标准(1mg/ml) 1ml -20℃试剂(E): G250染色液50ml 4℃避光试剂(F): H+-ATP Assay buffer 60ml 4℃避光试剂(G): H+-ATP启动剂6ml -20℃试剂(J): 二硝基酚指示剂10ml RT 避光试剂(K): 碱性基液25ml RT试剂(L): H+-ATP显色液60ml 4℃避光说明书1份操作步骤(仅供参考)：1、配制线粒体膜蛋白提取液：取适量的MP裂解液、蛋白酶抑制剂混合液(100×)、PMSF(100mM)置于室温溶解混匀，按MP裂解液：蛋白酶抑制剂混合液(100×)：PMSF(100mM)=。

ATP-柠檬酸裂解酶（ACL）活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

货号:BC4240规格:50T/48S产品简介：ATP-柠檬酸裂解酶（ATP-citrate lyase，ACL）是催化柠檬酸生成乙酰辅酶A的关键胞质酶，其催化产生的乙酰辅酶A是合成脂肪酸与胆固醇等脂类物质的主要原料，并可参与相关重要蛋白的修饰作用，是体内能源物质代谢的枢纽性物质。

在ATP和辅酶A存在的情况下，ACL能将柠檬酸催化裂解为乙酰辅酶A、草酰乙酸、ADP和磷酸盐，苹果酸脱氢酶进一步催化草酰乙酸和NADH生成苹果酸和NAD+，导致340nm处光吸收下降。

试验中所需的仪器和试剂：紫外分光光度计、天平、台式低温离心机、1mL石英比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、水浴锅、冰盒。

产品内容：提取液一：液体50mL×1瓶，4℃保存；提取液二：液体0.5mL×1支，-20℃避光保存；试剂一：液体60mL×1瓶，4℃保存；试剂二：粉剂×1支，-20℃避光保存。

临用前加入1mL试剂一，充分溶解待用；可分装后-20℃保存，避免反复冻融；试剂三：粉剂×1瓶，-20℃保存。

临用前加入5mL试剂一，充分溶解待用；可分装后-20℃保存，避免反复冻融；试剂四：粉剂×1支，-20℃避光保存。

临用前加入1mL试剂一，充分溶解待用；可分装后-20℃保存，避免反复冻融；试剂五：液体30μL×1支，4℃避光保存。

临用前加入1mL试剂一，充分溶解待用；可分装后-20℃保存，避免反复冻融；提取液的配制：按提取液一︰提取液二=990︰10（V︰V）的比例配制，根据样本量现配现用，禁止将提取液二一次性全部加入提取液一混匀分装待用。

操作步骤：一、粗酶液的提取：组织：按照质量（g）︰提取液体积(mL)为1︰5~10的比例（建议称取约0.1g，加入1mL提取液）进行冰浴匀浆。

U scn L ife S cience Inc.Wuhan网址:电话:+862784259552传真:+862784259551E-mail:***************人三磷酸腺苷人三磷酸腺苷(ATP)(ATP)(ATP)酶联免疫吸附测定试剂盒使用酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书产品编号：E0349Hu规格：96T本试剂盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断本试剂盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断!!预期应用本酶联免疫吸附测定试剂盒运用双抗体夹心ELISA 法定量测定人细胞裂解液或组织匀浆中ATP 含量。

本试剂盒试剂盒已提供的试剂已提供的试剂本试剂盒试剂盒未提供但需自备的设备及试剂未提供但需自备的设备及试剂1、450±10nm 滤光片的酶标仪（建议仪器使用前提前预热）2、单道和多道微量加液器及吸头3、稀释样品的EP 管4、蒸馏水或去离子水5、吸水纸6、盛放洗液的容器试剂名称数量96孔板(预包被)1标准品(冻干)2标准品稀释液1×20ml 检测溶液A1×120μl 检测溶液B1×120μl 检测稀释液A(2x)1×6ml 检测稀释液B(2x)1×6ml TMB 底物1×9ml 终止液1×6ml 浓洗涤液(30x)1×20ml 96孔板覆膜4使用说明书1试剂盒的储存及有效期所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。

请注意，收到试剂盒后请尽快将标准品、检测溶液A、检测溶液B以及96孔板保存于-20。

开封后的酶标板要密封加干燥剂后保存于-20，避免潮湿。

有效期为6个月。

实验原理将ATP抗体包被于96孔微孔板中，制成固相载体，向微孔中依次加入标准品和标本，其中的ATP与连接于固相载体上的抗体结合，洗板之后加入生物素化的ATP抗体，将未结合的生物素化抗体洗净后，加入HRP标记的亲和素，再次彻底洗涤后加入底物(TMB)显色。

TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。