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04第四章 药物定量分析与分析方法验证

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第四章 药物定量分析与分析方法验证

第四章 药物定量分析与分析方法验证

1、含卤素有机药物
含卤素有机药物是指分子结构中所含卤素直接与芳环
如果测得理论板数低于规定的最小理论板数， 应改变色谱柱的某些条件（如柱长、载体性能、色 谱柱填充的优劣等），使理论板数达到要求。
(2)分离度(R)
在定量分析时，要求定量峰与其他峰 或内标峰之间有较好的分离度。除另有规定 外，分离度应大于1.5。
分离度（R）的计算公式见下式：
R 2 t R2 t R1
含量（CX）= f
AX AS / CS

式中，AX为供试品峰面积或峰高；CX为供
试品的浓度 。
丙酸睾酮含量测定采用高效液相法：取本品 对照品适量，精密称定，加甲醇定量稀释成 每lmL中约含1mg的溶液。精密量取该溶液 和内标溶液（1．6mg/ml苯丙酸诺龙甲醇溶 液）各5ml，置25ml量瓶中，加甲醇稀释至 刻度，摇匀，取10μl注入液相色谱仪，记录
例
取盐酸麻黄碱0.1532g，精密称定， 加冰醋酸10ml溶解后，加醋酸汞试液 2ml与结晶紫指示液1滴，用HClO4滴 定至绿色，用去0.1022mol/L的高氯 酸滴定液7.50m1，空白试验消耗高氯 酸滴定液0.08ml。已知每1ml高氯酸 滴定液（0.1mol/L）当于20.17mg的 C10H15ON·HCl。试计算盐酸麻黄碱 的百分含量？（99.80％）
1.分离原理
吸附色谱 分配色谱 离子交换色谱 排阻色谱
吸附色谱
根据填充剂吸附活性 对样品的吸收系数不 同而分离
充填剂：硅胶
分配色谱
根据固定相与流动相的极性不同而分为 正相分配色谱和反相分配色谱 两者的区别如下图所示：
固定相
流动相
正相分配
极性

4药物定量分析与分析方法验证

4药物定量分析与分析方法验证

滴定度的计算 放大反应
2mIol碘苯酯→1molI2
1molI2→1molNaIO+1molNaI
1molNaIO→1/3molNaIO3+2/3molNaI
12 3
molNaI+Br2→
12 3
molNaIO3
即2mol碘苯酯→2molNaIO3
2mol NaIO3+10I→6molI2
即2mol碘苯酯→1molI2 →6molI2→12molI→12molNa2S2O3
（4）注意事项
①根据被燃烧分解的样品量选用适 宜大小的燃烧瓶。
ChP（2005）规定的燃烧瓶体积 为500、1000或2000ml三种，采用常 量或半微量分析
待分解样品量
3~5mg（微量分析）
燃烧瓶的体积
150~250ml
20~30mg（半微量分析） 300~500ml
50~60mg 0.6~0.7g或更多
CO
OCH2CH2N(C2H5)2 HCl
I O CH2CH2CH2CH3
盐酸胺碘酮
抗心律失常药
O
F
COOH
N HN
N C2H5
诺氟沙星
广谱抗菌药
HO CH3
CH2OCOCH3
C CH3
O
O
CH3 C
O CH3
H
FH
O F
醋酸氟轻松
肾上腺皮质激素类药，抗炎及抗过敏
Br
Br
Br
Br
CO
CO
HO SO3Na
反应摩尔比为1∶3
T cM n
0.1mol L 186.47 g mol 3
6.216 g L 6.216 mg ml

药物分析课件第4章药物定量分析与分析方法验证

药物分析课件第4章药物定量分析与分析方法验证
○ A．做空白试验 B．做对照实验 ○ C．做回收试验 D．增加平行测定次数 ○ E．选用多种测定方法
[B型题]
HPLC。
按分离方法分为：PC；TLC；柱色谱；GC；
（一）HPLC法
1. 对HPLC仪器一般要求 色谱柱、流动相按品种项下要求。
色谱柱的理论板数：n = 5.54(tR /Wh/2)2
2. 系统性试验 于1.5

分离度：R = 2（tR1 – tR2)/(W1 + W2); 要大
拖尾因子：T = W /2d 应在0.9 ～
1. 原料药 可用已知纯度对照品或样品进行测定；或与已建准 确
度的另一方法测定的结果进行比较。 2. 制剂 要考察辅料对回收率的影响。采用在空白辅料中加入 原
料对照品的方法作回收率试验，然后计算RSD。 具体做法：测定高、中、低三个浓度，n=3, 共9个数据来评价
回收率的RSD＜2%；用UV和HPLC发时，一般
三．含量测定 常用的方法对照品比较
法:Ci = (Ri-Rib)/(Rr-Rrb) ×Cr
Ch.P收载地高辛片、利血平片、洋地黄毒苷片。
二．荧光分析仪 有二个单
色光器—激发单色光器与
发射单色光
器；且激发光源、样品池和检测器成直 角。
三、色谱分析法
按分离原理分为：吸附；分配；离子交换；排阻色 谱
方法分类
2. 用硫酸水解后测定法 例如：硬脂酸镁的含量测定
Mg(C17H35COO)2 + H2SO4
H2SO4 + 2NaOH
MgSO4 + 2C17H35COOH Na2SO4 + 2H2O
（三）经氧化还原后测定法
COOH
I
I

药物分析课件 第四章 药物定量分析与分析方法验证_OK

药物分析课件 第四章 药物定量分析与分析方法验证_OK
样品能在足够的氧气中燃烧分解完全样品能在足够的氧气中燃烧分解完全有利于将燃烧分解产物较快地吸收到吸有利于将燃烧分解产物较快地吸收到吸防止爆炸的可能性防止爆炸的可能性26燃烧瓶要洁净不能残留有机溶剂不能用有机润滑剂涂抹瓶塞要有防爆措施氧气要充足确保燃烧完全产物不能有黑色炭化物燃烧产生的烟雾要被完全吸收充分振摇和放置都是为了保证吸收完全例
③要有防爆措施 ④氧气要充足，确保燃烧完全，产物不能有黑色
炭化物 ⑤燃烧产生的烟雾要被完全吸收
充分振摇和放置都是为了保证吸收完全 例：碘产生紫色烟雾；氯、氟产生白色烟雾，烟
雾颜色完全消失后，即表示吸收完全 ⑥测定含氟有机化合物时要用石英燃烧瓶
26
4、应用
含卤素、硫、磷、氟及硒等有机药物的鉴别、杂 质的检查及含量测定
100%
注射剂：标示量％＝
V0
V T 标示量
100%
V VO
T F 标示量
100%
VO : 量取注射剂的体积， ml
36
(2)间接滴定法 1）生成物滴定法
供试品＋试剂 A 化合物 B
化合物 B＋滴定液 C 化合物 D
计量滴定液消耗的量，计算供试品的含量 计算同直接滴定法
37
2）回滴定法（剩余滴定法） 原理：先在待测样品溶液中加定量、过量的滴定
10
（一）湿法破坏
（1） 硝酸-高氯酸法 适用于血、尿、组织等生物样品的破坏，有
机金属药物经破坏后，得到的无机金属离子一 般呈高价态。
本法不能用于含氮杂环药物的破坏
干法灼烧法 11
（2） 硝酸-硫酸法 适用于大多数有机物质的破坏，破坏得到的
无机金属离子均为高价态。 不能用于含碱土金属有机药物的破坏
27
氧瓶燃烧

药物定量分析与分析方法验证

药物定量分析与分析方法验证

例3、枸橼酸铁铵的测定
ChP（2000）
ห้องสมุดไป่ตู้取本品约 0.5g ，精密称定，置具塞锥形瓶中。加
水15ml溶解后，加硫酸lml，加热至溶液由暗棕色变成
淡黄色，放冷至约 15℃，滴加高锰酸钾试液至溶液显 粉红色并持续 5s ，加盐酸 15ml 与碘化钾试液 15ml ，密 塞，静置 3min ，加水 50ml 稀释后，用硫代硫酸钠滴定 液(0.1mol/L)滴定至近终点时，加淀粉指示液2ml，继 每 lml 的硫代硫酸钠滴定液 (0.1mol/L) 相当于 5.585mg
续滴定至蓝色消失，并将滴定的结果用空白试验校正。 的Fe。
（二）经水解后测定法
1.碱水解后测定法 是将含卤素的有机药物溶于适当 溶剂（如乙醇）中，加氢氧化钠溶液或硝酸银溶液后， 加热回流使其水解，将有机结合的卤素经水解作用转 变为无机的卤素离子，然后选用间接银量法进行测定。 本法适用于含卤素有机药物结构中卤素原子结合不牢 固的药物，如卤素和脂肪碳链相连者。
(0.1mol/L)相当于25.29mg的汞撒利。
3、经还原分解后测定法 ①碱性还原后测定 卤素结合于芳环上时，由
于分子中碘的结合较牢固，需在碱性溶液中加还原
剂（如锌粉）回流，使碳-碘键断裂，形成无机碘 化物后测定。 ②酸性还原后测定法 两法均是将含卤素有机药物在碱性或酸性下，加
还原剂（如锌粉）加热回流，药物产生还原裂解反
C4H7Cl3O·1/2H2O。
反应摩尔比为1∶3
T——滴定度，每1ml滴定液相当于被测组分的mg数
c——滴定液浓度，mol/L
M——被测物的摩尔质量，g/mol n——1mol样品消耗滴定液的摩尔数，常用反应摩尔比体现，即 反应摩尔比为1∶n

04第四章药物定量分析与分析方法验证

04第四章药物定量分析与分析方法验证
▪ 2010年，美国科学家理查德·赫克与日本科学家根岸荣一和铃木章因在 有机合成领域中钯催化交叉偶联反应方面的卓越研究成果而获奖。这 一成果广泛应用于制药、电子工业和先进材料等领域，可以使人类造 出复杂的有机分子。
▪ 2009年，英国科学家文卡特拉曼·拉马克里希南、美国科学家托马斯·施 泰茨和以色列科学家阿达·约纳特因对“核糖体的结构和功能”研究的 贡献而获奖。
H2O2-NaOH液 或NaOH液硫酸肼饱和液
NaOH液硫酸肼饱和液
测定方法
pH4.3 HAc-NaAc Buffer 茜素氟蓝 分光光度法
银量法 汞量法 分光光度法
银量法 分光法
银量法 碘量法 汞量法 分光法
碘苯酯含量测定
取本品约20mg，精密称定，照氧瓶燃烧法进行有机破坏，用NaOH T.S. 2ml与H2O 10ml为吸收液，待吸收完全后，加溴醋酸溶液10 ml，密 塞，振摇放置数分钟，加甲酸约1ml，用水洗涤瓶口，并通入空气流约 3~5min，以除去剩余的溴蒸气，加KI 2g，密塞，摇匀，用Na2S2O3液 (0.02mol/L)滴定，至近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失， 并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml的硫代硫酸钠液(0.02mol/L)相当 于1.388mg的C19H29IO2
（四）最低定量限LOQ 3～5倍t1/2，或1/10～1/20倍Cmax
（五）样品稳定性 室温、冻融、长期冰冻
（六）提取回收率（绝对回收率） 一般低于100％，须稳定
（七）质控样品 已知浓度样品均匀放入待测生物样品序列中，以
确保定量测定的准确度
样品 固相净化 及 反相高效液相色谱法 测定血浆中茶碱
测定条件稍有变动时，对测定结果的影响程度。
▪ HPLC法变动因素有：流动相组成与pH，色谱柱， 柱温，流速等。

药物分析药物定量分析与分析方法验证 ppt课件

药物分析药物定量分析与分析方法验证 ppt课件

单质溴还原为溴负离子。
测定含碘药物时，分解产生的碘化氢可被氧
气进一步氧化，其燃烧产物主要为单质碘，
并 含 有 少 量 的 五 价 碘 （ HIO3 ） 与 一 价 碘
吸
（HI）。当使用AgNO3滴定法测定含量时，
收 液 的
用H2O-NaOH溶液-SO2饱和溶液作为吸收液， 上述不同价态的碘均转变为负一价的碘
H2O2与水的混合液作为吸收液，燃烧产物经
吸收转变为H2SO4，加入盐酸溶液并煮沸除
去剩余的过氧化氢后，加入BaCl2，使硫酸生
吸
成BaSO4，以重量法测定含量。
收 液
含磷药物（有机膦酸类）的燃烧产物为P2O5，
的 以水为吸收液，加入少量硝酸溶液并经煮沸
选 择
使焦磷酸（H4P2O7）和偏磷酸[(HPO3)n]转 化为磷酸后，采用钼蓝比色法测定含量。
f. 砷盐的检查：有机结合的砷经与无水Na2CO3或 Ca(OH)2 、 Mg(NO3)2 共 热 （ <700℃ ） 转 化 为 无机砷酸盐后，依法检查。本法主要用于高分子 化合物（如：右旋糖酐铁）或植物提取物（如： 大豆油）中砷盐的检查，亦应用与少数有机药物 （如吡罗昔康、布美他尼等）.
② 氧瓶燃烧法：
1. 湿法破坏
适用于含氮有机合成药物分析的前处理，在生物制 品分析中用于氮（包括蛋白质）、磷、硫柳汞及氯 化钠测定法的前处理； 亦可用于生物样品中金属元素测定时生物基质的去除。 主要分解剂：硫酸 辅助分解剂：硝酸、高氯酸、过氧化氢。 湿法破坏可分为：硫酸-硝酸法、硫酸-高氯酸法、 硫酸-硫酸盐法、硝酸-高锰酸钾法。
选 （ NaI ） ； 若 使 用 间 接 碘 量 法 测 定 时 ， 用
择
H2O-NaOH溶液为吸收液，此时吸收液中的

《药物分析》复习题带答案

《药物分析》复习题带答案

药物分析试题及答案第四章药物定量分析与分析方法验证一、选择题1．氧瓶燃烧法测定盐酸胺碘酮含量，其吸收液应选( B )(A)H2O2+水的混合液(B)NaOH+水的混合液 (C)NaOH+ H2O2混合液(D)NaOH+HCl混合液 (E)水2．用氧瓶燃烧法破坏有机药物，燃烧瓶的塞底部熔封的是( D )(A)铁丝 (B)铜丝 (C)银丝 (D)铂丝 (E)以上均不对3．测定血样时，首先应去除蛋白质，其中不正确的是去除蛋白质的方法是( B )(A)加入与水相互溶的有机溶剂 (B)加入与水不相互溶的有机溶剂(C)加入中性盐 (D)加入强酸 (E)加入含锌盐及铜盐的沉淀剂4．氧瓶燃烧法破坏有机含溴/碘化物时，吸收液中加入( A )可将Br2或I2还原成离子。

(A)硫酸肼 (B)过氧化氢 (C)硫代硫酸钠 (D)硫酸氢钠5．准确度表示测量值与真值的差异，常用( B )反映。

(A)RSD (B)回收率 (C)标准对照液 (D)空白实验6．常用的蛋白沉淀剂为( A )(A)三氯醋酸 (B)β-萘酚 (C)HCl (D)HClO4二、填空题1．破坏有机药物进行成分分析，可采用_干_法、_温_法和_氧瓶燃烧_法。

三、是非题(√)1．准确度通常也可采用回收率来表示。

(√)2．在测定血样中的药物时，首先应去除蛋白，去除蛋白的方法之一是加入与水相混溶的有机溶剂。

(√)3．提取生物样品，pH的影响在溶剂提取中较重要，生物样品一般在碱性条件下提取。

(×)4．用氧瓶燃烧法测定盐酸胺碘酮含量吸收液应选水四、简答题1．在测定血样时，首先应去除蛋白质，去除蛋白有哪几种方法？答：(1)加入与水相混溶的有机溶剂；(2)加入中性盐；(3)加入强酸；(4)加入含锌盐及铜盐的沉淀剂；(5)酶解法。

2． 在测定血样时，首先应去除蛋白质，加入水相混溶的有机溶剂可以将蛋白去除，此法的机理是什么？答：加入与水相混溶的有机溶剂，可使蛋白质的分子内及分子间的氢键发生变化而使蛋白质凝聚，使与蛋白质结合的药物释放出来。

药物分析第四章定量分析与分析方法验证

药物分析第四章定量分析与分析方法验证

标准偏差
三、专属性 系指在其它成份（如杂质、降解产物、辅料等） 系指在其它成份（如杂质、降解产物、辅料等）可能存在 采用的方法能准确测定出被物的特性。 下，采用的方法能准确测定出被物的特性。 四、检测限（LOD） 检测限（ ） 指试样中被测物能被检出的最低浓度或量。 指试样中被测物能被检出的最低浓度或量。 五、定量限（LOQ） 定量限（ ） 指样品中被测物能被定量测定的最低量， 指样品中被测物能被定量测定的最低量，其测定结果具有 一定的准确度和精密度。 一定的准确度和精密度。 六、线性 系指在设计的范围内， 系指在设计的范围内，测试结果与试样中被测物浓度直接 呈正比关系的程度，相关系数R-->1 ,用软件可得回归方程 用软件可得回归方程. 呈正比关系的程度，相关系数 用软件可得回归方程
VT 含量% = × 100% W
T—滴定度 滴定度;V—消耗滴定液体积 消耗滴定液体积;W—供试品取量 滴定度 消耗滴定液体积 供试品取量 校正因子F: 校正因子 当滴定液浓度与药典中规定浓度不相同时,要校正 要校正: 当滴定液浓度与药典中规定浓度不相同时 要校正 实际摩尔浓度 F= 规定摩尔浓度 在药检部门实验里的试剂瓶子一般不标浓度,而是 值 在药检部门实验里的试剂瓶子一般不标浓度 而是F值. 而是 实际滴定度:T’=TF 实际滴定度
二、光谱分析法 光照在物质上，物质内部发生能级跃迁而产生辐射， 光照在物质上，物质内部发生能级跃迁而产生辐射，利用 光谱进行定性或定量的结构分析称为光谱分析法。 光谱进行定性或定量的结构分析称为光谱分析法。 1、紫外-可见分光光度法（200nm—760nm) 、紫外 可见分光光度法 可见分光光度法（ (1)朗伯 比耳定律 朗伯-比耳定律 朗伯 A=ELC A-吸光度；L-液层厚度；C-溶液浓度；E-吸收系数 吸光度； 液层厚度 液层厚度； 溶液浓度 溶液浓度； 吸收系数 吸光度 （2）百分吸收系数 ）百分吸收系数E 1% 溶液浓度为1%（ 溶液浓度为 （W/V）厚度为 ）厚度为1cm的吸收度 E1cm 的吸收度 A （3）吸收系数法测含量 ） ×D 1% E1cm 含量%= ×100% W × l ×100 A-供试品吸光度；D-供试品稀释倍数； 供试品吸光度； 供试品稀释倍数 供试品稀释倍数； 供试品吸光度 W-供试品取量（标示量）（ ）； 液层厚度（cm） 供试品取量（ ）（g）； 液层厚度（ ） 供试品取量 标示量）（ ）；L-液层厚度

第四章 药物定量分析与分析方法验证(药物分析)学习参考资料

第四章 药物定量分析与分析方法验证(药物分析)学习参考资料
分析
案例的实施和实验操作
案例选择：选择具有代表性的药物品种和相应的分析方法 实验设计：根据药物品种和分析方法，设计合理的实验方案 实验操作：按照实验设计进行实验，注意实验操作的规范性和准确性 数据分析：对实验数据进行处理和分析，评估方法的可行性和可靠性
案例的总结和经验教训
案例分析：介绍具体的药物定量分析与分 析方法验证案例，包括实验设计、操作过 程、结果分析和结论。
生产控制：药物定量分 析可确保生产过程中的 药物成分一致，提高产 品质量和生产效率。
药品质量控制：通过药 物定量分析，可对药品 进行质量控制，确保药 品的安全性和有效性。
临床应用：药物定量 分析有助于医生根据 患者的病情制定合理 的用药方案，提高治 疗效果。
药物分析方法验证的定义和目的
定义：药物分析方法验证 是通过一系列实验，证明 所建立的分析方法是否符 合药品质量控制的要求和 标准的过程。
解释
实验设计的目的和原则
目的：确保药物分析方法的准确性和可靠性 原则：对照原则、重复原则、随机原则、均衡原则
实验操作的流程和注意事项
实验前准备：确保实验室环境、 仪器和试剂符合要求，制定详 细的实验计划和操作步骤。
样品处理：根据实验需要，对 药物样品进行适当的处理，如 溶解、稀释、离心等。
仪器操作：按照仪器说明书进 行操作，确保仪器处于正常状 态，并记录仪器使用情况。
注意事项：确保 实验操作规范， 避免误差，保证 实验结果的准确 性和可靠性
实验数据分析和处理的方法
实验数据的收 集和整理：确 保数据的准确
性和完整性
数据分析方法 的选择：根据 实验目的和数 据类型选择合
适的方法
数据处理流程： 对数据进行预 处理、统计分 析和可视化处

(整理)药分习题4,18,5

(整理)药分习题4,18,5

第四章药物定量分析与分析方法验证一、最佳选择题（从A、B、C、D、E五个备选答案中选择一个最佳答案）1．用于原料药或成药中主药含量测定的分析方法认证不需要考虑（）A．定量限和检测限B．精密度C．选择性D．耐用性E．线性与范围2．回收率属于药物分析方法效能指标中的（）A．精密度B．准确度C．检测限D．定量限E．线性与范围3．用于原料药中杂质或成药中降解产物的定量测定的分析方法认证不需要考虑（）A．精密度B．准确度C．检测限D．选择性E．线性与范围4．欲确定两个分析方法测定结果的均值有无显著性差异，应选用下列哪一方法？（）A．F检验B．方差分析C．均匀设计D．t 检验E．正交试验5．选择性是指（）A．有其他组分共存时，该法对供试物准确而专属的测定能力B．表示工作环境对分析方法的影响C．有其他组分共存时，该法对供试物能准确测定的最低量D．不用空白试验可准确测得被测物的含量的能力E．不用标准对照可准确测得被测物含量的能力6．精密度是指（）A．测得的测量值与真值接近的程度B．测得的一组测量值彼此符合的程度C．表示该法测量的正确性D．在各种正常试验条件下，对同一样品分析所得结果的准确程度E．对供试物准确而专属的测定能力7．用分析天平称得某物0.2541 g，加水溶解并转移至25 mL容量瓶中，加水稀释至刻度，该溶液每mL含溶质为（）A．0.010 g B．10.164 mg C．10.20 mg D．1.0164×10-2 g E．10.16 mg 8．检测限与定量限的区别在于（）A．定量限的最低测得浓度应符合精密度要求B．定量限的最低测得量应符合准确度要求C．检测限是以信噪比（2:1）来确定最低水平，而定量限是以信噪比（3:1）来确定最低水平D．定量限的最低测得浓度应符合一定的精密度和准确度要求E．检测限以ppm、ppb 表示，定量限以%表9．分子中的氮不能被凯氏定氮法完全转变为氨的化合物是（）A．脂肪族胺类B．芳香族胺类C．硝基化合物D．氨基酸类E．酰胺类10．氧瓶燃烧法破坏下列哪一药物时，应采用石英燃烧瓶（）A．含硫药物B．含氟药物C．含碘药物D．含溴药物E．含氯药物11．测定卤素原子与脂肪碳链相连的含卤素有机药物（如三氯叔丁醇）的含量时，通常选用的方法是（）A．碱性氧化后测定法B．直接溶解后测定法C．碱性还原后测定法D．直接回流后测定法E．原子吸收分光光度法12．在用H2SO4－K2SO4湿法破坏中，K2SO4的作用是（）A．催化剂B．氧化剂C．防止样品挥发D．还原剂E．提高H2SO4沸点，防止H2SO4分解13．凯氏定氮法的测定方法有三种，其中甲醛法的特点是（）A．直接用标准硫酸液滴定B．用硼酸作吸收液C．省去蒸馏D．样品用量少E．用硫酸作吸收液14．取含巴比妥的血浆样品5 mL，酸化后，精密加入25 mL氯仿萃取，过滤，取滤液4.0 mL，用0.45 mol/L NaOH 4.0 mL振摇提取，取此碱性水层于260 nm处测得吸收度A1为0.606，另取滤液 4.0mL，加1 mol/L硼酸-KCl缓冲液（pH约为10）4.0 mL振摇提取，取水层于260 nm处测得A2为0.229。

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指用规定的对照品对色谱系统进行试验， 指用规定的对照品对色谱系统进行试验， 应符合要求。包括理论板数 （ n）、 分 应符合要求 。 包括理论板数（ ） 离度（ ） 重复性和拖尾因子（ ） 离度 （ R） 、 重复性和拖尾因子 （ T） 等四个指标。 等四个指标。
CH CH C O O O O− + Sb Sb 2K 3H2O O− O O O O C CH CH C O
O C O
酒石酸锑钾
Mg(C17H35COO)2
硬脂酸镁
O
C O
C C CH O Fe
O
富马酸亚铁
CH2OH HOCH2 CHOH HOCH CHO OH O OCH CHO Sb O Sb OCH Na3·9H CHO OCH COO OOC
结构特点： 结构特点：C—X
（一）卤原子的活泼性
卤原子与碳原子直接相连，卤原子的活泼 性和它直接相连的烃基的结构有很大关系。 乙烯型卤和芳卤不活泼
CH2 CH X
X
（一）卤原子的活泼性
烯丙型卤和苄卤
CH2 CH CH2 X
活泼
CH2X
卤代烷型
介于两者之间
CH2 CH (CH2)n X
n≥2
（一）卤原子的活泼性
R∝C ∝
对照品比较法
供试品溶液试剂空白的荧光强度
RX − RXb CX = Rr − Rrb Cr RX − RXb CX = Cr × Rr − Rrb
色谱法
利用物质在流动相与固定相两相中分配系数差异 而得以分离， 并在检测中能检出其信号， 而得以分离 ， 并在检测中能检出其信号 ， 从而达到 分离、分析的一类分析方法。 的一类分析方法。 分离、分析的一类分析方法 GC HPLC
第二节 定量分析方法特点
化学分析法
常用的 含量测 定方法
仪器分析法 生物学方法 酶化学方法
经典化学分析 现代仪器分析技术
电 化 学 分 析 法
容 量 分 析 法
重 量 分 析 法
光 谱 分 析 法
色 谱 分 析 法
容量分析法 酸碱滴定法
容量分析法 （滴定分析法） 滴定分析法）
氧化还原滴定法 配位滴定法 沉淀滴定法
一、定量分析样品前处理方法
Pretreatment of sample used in quantitative analysis 1
含卤素有机药物的分析 含金属有机药物的分析
2
1. 含卤素有机药物的分析
含卤素有机药物系指药物分子结构中所含 卤素直接与芳环或脂肪链相连者，而不包 括某些有机药物的卤酸盐或氢卤酸盐。
液相色谱的基本流程图 液相色谱的基本流程图
流动相
色谱柱
A B C进样阀检测器 NhomakorabeaD
E F
G
泵
泵输液
进样
分离
检测
记录
色谱图
← 色谱峰 峰高 峰宽 基线 ↓ 保留时间（ 保留时间（分） 色谱图即色谱柱流出物通过检测器时所产生的响应信号对时间的 色谱图 曲线图，其纵坐标为信号强度，横坐标为保留时间。
色谱系统适用性试验
第四章
药物定量分析与分析方法验证
结构
性质（物理、化学性质） 性质（物理、化学性质）
分析方法 （鉴别、检查、含量测定） 鉴别、检查、含量测定）
R OH
OH
OH
醇 酚 酚羟基
C C
烯醇羟基
R NH2
NH2
胺
芳胺 芳伯氨基
R COOH
COOH
羧酸
芳酸
主要内容
1 2 3
定量分析样品前处理方法 定量分析方法特点 药品质量标准分析方法验证
(Ksp=1.0×10−12 ) × Fe3+ + SCN¯
过量的硝酸银， 为指示剂， 过量的硝酸银，以Fe3+为指示剂，用硫氰 酸铵液回滴定。 酸铵液回滴定。
Fe (SCN) 2+ 淡棕红色） （淡棕红色）
碱性或酸性还原后测定法
本法是将含卤素有机药物在碱性或酸性下， 本法是将含卤素有机药物在碱性或酸性下，加还原 如锌粉）加热回流，药物产生还原裂解反应， 剂（如锌粉）加热回流，药物产生还原裂解反应， 使有机结合的卤素转变为无机的卤素离子， 使有机结合的卤素转变为无机的卤素离子，然后采 用银量法（ 用银量法（Fajans法）测定。 法 测定。 本法适用于测定结构中碘与苯环直接相连， 本法适用于测定结构中碘与苯环直接相连，且一个 苯环上含多个碘原子的含卤素有机药物。 苯环上含多个碘原子的含卤素有机药物。
容量分析法的计算
滴定度
每1ml规定浓度的滴定液所相当的被测药 规定浓度的滴定液所相当的被测药 物的质量。 物的质量。
百分含量的计算 原料药
光谱分析法 紫外—可见分光光度法 紫外 可见分光光度法 UV—Vis 光谱分析法 原子吸收分光光度法 AAS 荧光分析法
紫外— 紫外—可见分光光度法
Lambert -Beer定律 定律 物质对单色光 单色光（ ～ 浓度、 物质对单色光（200～760 nm）吸收强弱与吸光物质浓度、液 ）吸收强弱与吸光物质浓度 层厚度成正比 成正比。 层厚度成正比。
COOH I I
+ 11NaOH + Zn
H 3COCHN I NHCOCH3
泛影酸
COO Na
回流
△
H2 N N H2
+ 3NaI + 2CH3COONa
+ 2Na2ZnO2 + H2O
氧瓶燃烧分解后测定法
本法是将分子中含有卤素或硫等元素的有机 本法是将分子中含有卤素或硫等元素的有机 含有卤素或硫等元素 药物在充满氧气的密闭燃烧瓶中进行燃烧， 氧气的密闭燃烧瓶中进行燃烧 药物在充满氧气的密闭燃烧瓶中进行燃烧， 并将燃烧产物吸收于适当的吸收液中，再采 并将燃烧产物吸收于适当的吸收液中 吸收液 用适宜的分析方法来检查或测定卤素或硫等 元素的含量。 元素的含量。
2O
葡萄糖酸锑钠
O HO As OH
HgOCOCH3
NHCONH2
卡巴胂
醋酸苯汞
O HO As OH
HgOCOCH3
NHCONH2
卡巴胂
醋酸苯汞
含金属有机药物定量分析前的处理方法
不经有机破坏的分析方法 直接测定法;经水解后测定法; 直接测定法;经水解后测定法; 经还原-汞齐化后测定法 经还原经有机破坏的分析方法 湿法破坏(硝酸-高氯酸法;硝酸-硫酸法; 湿法破坏(硝酸-高氯酸法;硝酸-硫酸法; 硫酸-硫酸盐法等);干法破坏 硫酸-硫酸盐法等);干法破坏 );
（三氯叔丁醇） 三氯叔丁醇）
CCl3−C(CH3)2−OH + 4NaOH
回流 (CH3)2−CO + 3NaCl + HCOONa + 2H2O △
NaCl + AgNO3
AgCl↓ + NaNO3 (Ksp=1.56×10–10 ) ×
AgNO3 + NH4SCN
AgSCN ↓ + NH4NO3
吸光度
A= E
1% 1cm
⋅ L⋅ C
A C（ g/100m ） 1% l = E1cm ⋅ L
液层厚度， 液层厚度， cm，如无 ， 特别注明， 特别注明， L=1cm
A C（ l ） 1% g/m = E1cm ⋅ L×100
百分吸收系数 可在手册或文献中查到
（2）对照法 AX = E CX L ） 1% AR = E1cmCRL
NaOH溶液 溶液 H2O2-NaOH液 液 或NaOH液液 硫酸肼饱和液 NaOH液液 硫酸肼饱和液
含碘有机药物
（三） 含金属有机药物的分析
含金属的有机药物： 含金属的有机药物：金属原子不与碳原子直接相 连，通常为有机酸及酚的金属盐或配位化合物 如酒石酸锑钾、葡萄糖酸锑钠、富马酸亚铁 如酒石酸锑钾、葡萄糖酸锑钠、 有机金属药物： 有机金属药物：金属原子直接与碳原子以共价键 相连， 相连，结合比较牢固 如卡巴胂、醋酸苯汞、 如卡巴胂、醋酸苯汞、汞撒利
1% 1cm
供试品溶液的吸光度
AX E CX L = AR E CRL
1% 1 cm 1% 1 cm
供试品溶液的浓度
AX CX = AR CR
对照品溶液的吸光度
AX CX = CR × AR
对照品溶液的浓度
荧光及荧光分析法
物质受光照射时， 物质受光照射时，在吸收某种波长光的同时又发射出比 原来波长更长的光 激发光停止照射，光线随之消失， 更长的光， 原来波长 更长的光 ， 激发光停止照射 ，光线随之消失， 这 种光称为荧光。荧光为发射光。 种光称为荧光 。 荧光为发射光。 利用荧光的物理特性进行 定性与定量测定的方法称为荧光分析法。 定性与定量测定的方法称为荧光分析法。 当激发光强度、波长、所用溶剂及温度等条件一定时， 当激发光强度、 波长、 所用溶剂及温度等条件一定时， 较稀浓度范围内药物的荧光强度与溶液中该物质的浓度 在 较稀浓度范 围内药物的荧光强度与溶液中该物质的浓度 成正比。 成正比。
吸收系数
l A = lg = ECL T
百分吸收系数
E
1% 1cm
当吸光物质溶液浓度为1%（ ），液层厚度为 时的吸光度。 当吸光物质溶液浓度为 （1g/100ml），液层厚度为 ），液层厚度为1cm时的吸光度。 时的吸光度
4. 在含量测定中的应用
（1）吸收系数法（绝对法） ）吸收系数法（绝对法）
点 燃 C − C + O2 H l ↑ l → C
N l → aC
NaOH 液 溶
氧瓶燃烧装置及称样方法
A.燃烧瓶 B.铂丝网 C.D.盛固体样品滤纸及其折叠法 E.F.G.称取液体样品方法 燃烧瓶 铂丝网 盛固体样品滤纸及其折叠法 称取液体样品方法