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临床微生物检验标本采集程序1 标本采集的基本原则：1.1 严格的无菌操作，避免污染，避免来自寄生菌的污染，应当保证每份样本代表感染过程｡1.2 选择正确的解剖部位、合适时间、合乎规程技术，采集样本。
1.3 选择合适的部位采集用于厌氧菌培养的样本。
1.4 要收集足够量的样本，量少可能导致假阴性结果。
1.5 应尽可能在病人使用抗菌药物前采集样本，如不能停用抗菌药物，应于下次抗菌药物应用前采集。
1.6 血培养样本在病人寒颤和发热初起时为最佳时机。
1.7 导尿留取样本时，不可从尿袋中采集样本。
引流液样本不能直接从引流袋放出，因引流液在袋中潴留时间太长容易滋生细菌。
1.8 各类微生物样本不宜加防腐剂1.9 盛标本的容器须先经灭菌（煮沸、高热、或高压灭菌），但不得用消毒剂或酸类处理。
1.10 有些临床标本还要注意采集的时机和部位，如伤寒沙门菌的阳性检出率，发病的第1～2 周采集血液，第3～4 周采集大便和尿液，阳性率较高。
1.11 样本的运送处理和储存规定1.11.1 样本2h之内送到实验室。
1.11.2 血培养瓶如果不能及时送检，应置室温保存（但不得超过24 小时）。
禁止将不能及时送检的血培养瓶放置冰箱保存。
1.11.3 淋病奈瑟菌和脑膜炎奈瑟菌培养时，样本不能放4℃条件保存，应在30min内送检，并注意保温。
1.11.4 痰培养疑为嗜血杆菌、肺炎链球菌感染时，应立即送检，因为这些细菌在自然环境中极易死亡。
1.11.5 导管样本如不能在规定时间内送检，应在盛装导管的容器中加少量无菌生理盐水，以免导管干燥，病原微生物死亡。
1.11.6 活检组织样本和眼分泌物样本应在30min内送检，如样本较小或不能在规定时间内送检，应在盛装组织的容器中加少量无菌生理盐水，以免样本干燥，病原微生物死亡。
不可用纱布包裹组织样本。
2 常见临床微生物标本的采集方法。
2.1 血液及骨髓样本2.1.1 检验项目：血液及骨髓培养。
2.1.2 适应症病人出现以下临床表现：发热（38℃）或低温（36℃）、寒战、白细胞增多（白细胞数>10×109/L，特别有“核左移”时）、皮肤粘膜出血、昏迷、多器官衰竭、血压降低、C反应蛋白升高及呼吸加快、血液病患者出现粒细胞减少、血小板减少等临床可疑血流感染时应采集血液样本进行血培养及骨髓培养。
微生物检验在临床上有哪些用途？大家都知道，微生物具有分布广泛、生长繁殖能力强、种类繁多、易培养、易变异及代谢能力、适应能力强等特点，在临床疾病监测中也有着广泛的应用：一、常见的检测方法1、重量检测法重量检测法也就是通过称重的方式来进行，利用离心或过滤法测定。
一般情况下，干重是湿重的百分之十五左右，这种方式比较繁琐。
若是微生物为菌体，大部分都会采取这种方式，如活性干酵母这种，以微生物菌体为活性物质的饲料和肥料。
2、体积测量法体积测量法也就是平时所说的测菌丝浓度法，这种检测方法是通过测定一定体积培养液中所含菌丝的量来反映微生物的生长状况，这种类型的检测方式比较简单、快捷、粗放，由于离心沉淀物中会夹杂各种固体营养物，在检测之前需要设定一致的处理条件，不然会导致结果有很大的偏差，该检测方式目前已成为大规模工业发酵生产上微生物生长的一个重要监测指标。
二、临床应用1、重视显微镜检查对于留取标本进行革兰染色，一方面可以掌握标本质量以确定进行培养或重新留取标本;另一方面通过镜检对某些细菌可以作出初步分类。
对于脓性分泌物或穿刺液进行革兰染色镜检亦可作出大致分类或初步诊断。
对泌尿系男性尿道和女性分泌物涂片革兰染色镜检，查到白细胞内或外有革兰阴性双球菌，是诊断淋病的重要依据。
脑脊液墨汁染色检查新型隐球菌，对于临床诊断隐球菌性脑膜炎有重要价值。
痰、胸水涂片抗酸染色查抗酸杆菌，对于诊断肺结核有重要意义。
粪便球杆菌比例检查，对于肠道菌群失调的诊断有重要帮助。
粪便暗视野检测弧菌的运动情况，对于霍乱的诊断有意义。
2、用显色培养基对微生物快速鉴定在分离培养基中加入检测某些细菌特异性酶的底物（由产色基团和微生物代谢物如糖苷类，氨基酸或肽类两部分组成，通常为无色），在特异性酶作用下游离出产色基团并产生荧光或显示一定颜色，用紫外灯观察菌落产生的荧光或直接观察菌落颜色即可对细菌做出鉴定。
如CHRO真菌培养基:白色念珠菌（绿色），热带念珠菌（蓝色），克柔念珠菌（粉红色）。
规范化标本采集是微生物检验分析前质量控制的重要内容微生物标本采集的基本原则1.及时采集微生物标本作病原学检查2.收集真正感染的病灶处之样本，且不受邻近区域微生物的污染；3.收集样本时应执行严格的无菌操作技术，将污染情形降至最低；4.尽量在抗菌药物使用前采集标本5.采样后立即送检以保持微生物的生物活性，床旁接种可提高病原菌检出率6.使用无菌、密闭容器，但不得含有消毒剂、防腐剂7.送检标本应注明来源和检验目的一、血培养标本的采集1.血培养的临床指征：患者出现以下一种或同时具备几种临床表现时可作为血培养的重要指征：①发热（≥38 ℃）或低温（≤36 ℃），以间歇驰张型多见，革兰阴性杆菌，如大肠埃希菌引起的感染可见双峰热；②寒战；③白细胞增多（>10.0×109/ L，特别是有“核左移”时）；④粒细胞减少（<1.0 ×109/ L）；⑤血小板减少；⑥皮肤、黏膜出血，常见于溶血性链球菌感染的菌血症，伤寒病人第4-10天可出现玫瑰疹，斑疹伤寒第4-6天可出现暗红色斑丘血疹；⑦昏迷；⑧多器官衰竭；⑨血压降低；⑩呼吸加快（呼吸率>20/分或CO2分压<32mmHg）；以及肝脾肿大；关节疼痛；C反应蛋白、内毒素、降钙素原升高等；2.血培养的采集时间①对怀疑菌血症、真菌血症的患者，在考虑使用抗菌药物之前，应立即采集血培养标本。
②研究表明细菌通常在寒战或发热前1h入血，此时为采血的最佳时机。
③发热后细菌很快会从血液中清除，超过发热峰值后，病原菌的检出率会随之降低。
3.血培养的采集部位①对怀疑菌血症、真菌血症的患者，应同时或短时间间隔（10分钟内）从不同部位（如双臂）采集2～3套血培养标本，做到“双瓶双侧”。
②推荐从外周静脉采集血液标本。
③不推荐动脉血，因其诊断价值没有比静脉血更大。
④不推荐静脉留置导管，因其常伴有高污染率。
如果必须从留置导管内采血，也应同时从外周静脉采集另外一个血培养标本以助于对比和结果解释。
临床标本微生物检验概述● 考点临床标本微生物学检验（血液、脑脊液、痰、尿液、粪便、性传播疾病、创伤）（1）常见病原菌（2）标本采集及运送（3）检验方法（4）临床意义一、临床标本细菌检验的基本程序二、血液感染◆正常人的血液是无菌的。
◆菌血症是指在血液中可检测到细菌，包括一过性和持续性在血中存在。
◆败血症是指病原菌侵入血流后，在其中大量繁殖并产生毒性产物，引起全身中毒症状。
◆脓毒血症是指化脓性细菌败血症时，细菌通过血流扩散至全身其他组织或器官，产生新的化脓性病灶。
（一）常见病原菌（二）标本采集1.采血时间和频率◆病人发热初期或高峰期采集，或在未用抗生素前采集。
但怀疑细菌性心内膜炎时，血培养不少于三次。
2.采血量◆一般为静脉采血，成人采血量10～20ml，儿童3～5ml，婴儿1～2ml。
3.床边直接注入血液培养基，否则用SPS抗凝剂送检，不得用EDTA，枸橼酸钠抗凝。
4.检查血管内导管有无细菌污染，可无菌操作，剪下导管5cm远侧段，置无菌容器内送检。
（三）微生物分离培养和鉴定1.培养基的选择◆用自动血培养分析仪时选用相应的血培养瓶，如需氧＋厌氧，需氧＋高渗等。
2.分离和鉴定当观察有细菌生长时或血培养仪阳性报警时，应及时作如下检验：◆（1）涂片染色镜检，结果及时与临床联系；◆（2）转种血平板、巧克力平板、厌氧血平板或其他特殊培养基等分离培养纯菌再进行鉴定；◆（3）同时做药敏试验，结果及时报告临床作治疗参考。
（四）报告方式阴性结果：◆7d报告无细菌生长。
◆疑为亚急性细菌性心内膜炎、布鲁菌病、厌氧菌血症、真菌血症时，血培养至少连续培养2～3周，仍无细菌生长者可报告为阴性。
阳性结果——三级报告方式：◆第一级报告告知标本已出现阳性并报告直接细菌涂片结果，同时做初步药敏试验；◆第二级是报告初步药敏结果，同时做正式鉴定和药敏试验；◆第三级报告正式鉴定和药敏试验结果。
（五）临床意义◆葡萄球菌菌血症常由疖、痈、脓肿及烧伤创面等原发感染灶继发，也可由呼吸道感染引起。
