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西安风华药业有限公司-操作规程Tel.: 86 29 84982466Fax: 86 29 84982310题目复方甘草酸铵注射液检验操作程序编号:SOP-ZLOP-12100制定人审核人批准人制定日期审核日期批准日期编定依据《中国药典》2010年版、部颁标准二部第五册生效日期颁发部门品管部制作份数分发部门品管部、QC室变更历史1 目的：建立复方甘草酸铵注射液的标准检验操作程序。
2 范围：适用于本公司生产的复方甘草酸铵注射液的检验。
3 职责：QC检验员对本程序的有效实施负责，QC负责人对本程序的执行情况实施监督4 内容：4.1名称及编号4.1.1名称：通用名：复方甘草酸铵注射液英文名：Compound Ammonium Glycyrrhizinate Injection汉语拼音：Fufang Gancaosuan’an Zhusheye4.1.2编号：C-3274.1.3分子式：甘草酸铵 C42H65O16N·5H2O甘氨酸 C2H5 NO2L-半胱氨酸盐酸盐 C3H7NO2S・HCl4.1.4分子量：甘草酸铵 839.98甘氨酸 75.07L-半胱氨酸盐酸盐 175.644.2试剂：盐酸、氯化溴、甲基红、氢氧化钠、甲醛、酚酞4.2仪器：STARTER3C型酸度计、UV-1700紫外-可见分光光度计4.3操作步骤4.3.1性状：本品为灭菌澄明水溶液。
4.3.2鉴别:4.3.2.1取本品2支，强力振摇，即产生持久性的泡沫。
取本品2ml，滴加稀盐酸2～4滴，放置片刻即产生白色沉淀，加氨试液适量，沉淀即溶解。
4.3.2.2取本品2ml ，加茚三酮数粒，溶液显蓝紫色。
4.3.2.3取本品4ml ，加氢氧化钠试液2ml ，滴加亚硝基铁氰化钠试液，溶液即显紫色。
4.3.3检查：4.3.3.1pH 值：应为6.4～6.8，具体操作见《pH 值测定标准操作程序》。
4.3.3.2 可见异物：取20支检查的供试品，按照《可见异物检查标准操作程序》检验，均不得检出明显可见异物。
RP-HPLC法测定复方甘草酸苷注射液中甘草酸苷的含量徐艳一;李进
【期刊名称】《药学研究》
【年(卷),期】2009(028)001
【摘要】目的建立复方甘草酸苷注射液中甘草酸的含量测定方法 .方法采用反相高效液相色谱法,C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,以0.1mol·L-1的醋酸铵溶液-乙腈-冰醋酸(70:30 : 0.5)为流动相,流速是1.0mL·min-1,检测波长254nm,进样量为20μL.结果甘草酸线性范围为0.05～0.25mg·mL-1(r=0.9999),平均回收率为100.3%(RSD=0.67%),最小检出量2.75ng.结论该方法能准确、可靠地对复方甘草酸苷注射液中的甘草酸进行定量检测,能有效地控制该制荆的质量.
【总页数】3页(P15-17)
【作者】徐艳一;李进
【作者单位】济南明锐医药科技有限公司,山东,济南,2500101;山东中医药大学,山东,济南,250355
【正文语种】中文
【中图分类】R927.2
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4.HPLC法测定注射用复方甘草酸苷中甘草酸单苷的含量 [J], 赵微;万立祥
5.氨基酸分析仪测定复方甘草酸苷注射液中甘氨酸的含量 [J], 张黎莉
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复方甘草酸单铵致过敏性休克3例
郎邰泽仁
【期刊名称】《新医学》
【年(卷),期】2006(37)9
【摘要】例1女，6岁。
因急性甲型病毒性肝炎（甲肝）入院。
既往健康，无药物过敏史和家族过敏史。
入院时体格检查：脉搏96次／分，血压92／62mmHg （10mmHg=1．33kPa）。
予复方甘草酸单铵（强力宁注射液）20mL加10％葡萄糖200mL静脉滴注，滴速为20滴／分（哈尔滨产，批号23022597）。
12min后，患儿诉胸闷、寒战、心悸、四肢麻木、恶心。
随即面色苍白，口唇、肢端青紫，呕吐胃内容物，非喷射状，神志恍惚。
【总页数】1页(P578)
【作者】郎邰泽仁
【作者单位】四川九龙县医院,626200
【正文语种】中文
【中图分类】R9
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放
5.复方甘草酸单铵对急性髓系白血病化疗性肝损伤的预防效果分析 [J], 任旭因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
HPLC同时测定复方甘草片中吗啡和甘草酸铵摘要：目的：采用高效液相色谱法同时测定复方甘草片中的吗啡和甘草酸铵的含量。
方法：采用Waters C18（5μm×4.6mm×250mm）色谱柱，流动相为乙腈-0.02%磷酸梯度洗脱，流速1.0mL·min，检测波长为吗啡220nm、甘草酸铵250nm。
结果：吗啡、甘草酸铵的峰面积与质量的线性关系良好（r＞0. 9996）；加样回收率为分别为98.73%，99.53%。
结论：该方法可用于复方甘草片中吗啡、甘草酸铵2个成分快速检验。
关键词：复方甘草片；HPLC；吗啡；甘草酸铵复方甘草片为保护性祛痰镇咳药，临床上用于一般性咳嗽及上呼吸道感染、急性气管炎初期等的咳嗽治疗，能有效缓解症状，疗效确切且经济实惠。
其主要是由甘草浸膏粉、罂粟果提取物粉等组成的复方制剂，质量标准收载于《中国药典》2015年版二部［1］。
现行标准分别对组方成分阿片粉或罂粟果提取物粉中吗啡及甘草浸膏粉中甘草酸铵采用不同的系统进行含量测定，其中吗啡含量测定需采用固相萃取小柱进行预处理，操作烦琐，易产生误差；甘草酸含量测定流动相系统含盐量高，色谱柱损耗快。
二者所用色谱柱类型也不同，吗啡用C8柱，甘草酸铵用C18柱。
本方法采用高效液相色谱法法同时测定甘草酸和吗啡的含量，实现一侧多评。
方法简便、快捷、准确、环保、重复性好，对快检初筛该药品质量提供重要的依据。
1 仪器与试药Waters e2695高效液相色谱仪、XS105 型电子天平对照品：吗啡（批号：171201-201123，含量97.1%）、甘草酸铵（批号：110731-201418，含量93.1%），均购自中国食品药品检定研究院；乙腈（色谱纯，Fisher Scientific，美国）；甲醇（分析纯，天津市康科德科技有限公司）；磷酸（分析纯，天津佳兴化工玻璃仪器工贸有限公司）；水为娃哈哈纯净水。
2 溶液的制备2.1 对照品溶液制备分别精密称取吗啡对照品0.01034g、甘草酸铵对照品0.01109g，置同一100ml量瓶中，加入50%甲醇溶液适量溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。
HPLC法测定注射用复方甘草酸苷中甘草酸单苷的含量摘要：注射用复方甘草酸苷通常是应用在慢性肝炎和肝功能异常的治疗和改善当中，注射用复方甘草酸苷中甘草酸单苷是最为主要的成分，其含量对于药品的有效会产生非常明显的影响，所以其含量的测定就显得格外的重要。
本文主要分析了HPLC法测定注射用复方甘草酸苷中甘草酸单苷的含量，希望能够给相关的研究人员提供一定的参考和借鉴。
关键词：HPLC法;含量测定;甘草酸苷注射用复方甘草酸苷当中主要有甘草酸单铵盐、甘草酸和L-盐酸半胱氨酸三种物质，它对慢性肝炎有着十分有效的治疗效果，而这种药物的疗效和主要成分甘草酸单苷的含量有着十分密切的关系，所以我们在研究的过程中对注射液中的甘草酸单苷的含量进行测定是有着十分重大的现实意义的，在测定的过程中最为常用的就是HPLC法，以下本文对其进行研究。
一、仪器与试药高效液相系统(Waters2695泵，Waters2996二极管阵列检测器，WatersEmpower色谱工作站);乙腈为色谱纯。
样品来源：江苏扬州中宝药业有限公司;样品批号：20030729、2003073、20030731。
参比样品来源：日本米诺发源制药株式会社(进口注册证号：H20030185)，参比样品批号：00344。
甘草酸单铵对照品：成都圣诺科技发展有限公司，HPLC纯度99.5%。
二、方法与结果2.1 色谱条件色谱柱：KromasilC18，5μ，4.6×250mm，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，检测波长254nm，流动相：乙腈-0.01mol/L磷酸溶液(38∶62)，流速1.0ml/min，在室温下操作，理论板数按甘草酸苷计算应不低于2000。
2.2 供试品溶液的制备精确称取本品10mg，将其用适量的注射水溶解，用5ml的胡涉水将其放置在25ml的容量瓶当中，加入适量的流动相到刻度的位置，使溶液的浓度能够达到400μg/ml的溶液，这样就完成了供试品溶液的制备。
HPLC法测定不同产地甘草中甘草苷及甘草酸铵的含量发布时间：2021-08-30T11:06:06.795Z 来源：《健康世界》2021年8期作者：李芳[导读] 采用HPLC法，对内蒙、新疆、宁夏等产地的甘草进行了初步的分析研究。
包头市第八医院内蒙古 014040摘要：目的用RP-HPLC法测定不同产地甘草中甘草苷、甘草酸的含量。
方法以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以0.05﹪磷酸溶液为流动相B；流速1.0ml/min，柱温30℃，紫外检测波长为237nm。
0.1630-0.8149ug范围内呈良好的线性关系（r=0.9999）。
其平均加样回收方法简单可靠，重现性好，可作为甘草苷及甘草酸的质量控制方法。
关键词：甘草；甘草苷；甘草酸；HPLC；含量测定Determination of the contents of glycyrrhizic acid and liquiritin in licorice from different regions by HPLCCUI WuchuanDepartment of Pharmacy，Baotou Medical University，Baotou 014040【Abstract】 Objective To set up a HPLC method for the determination of the glycyrrhizic acid and liquiritin in licorice from different regions.Methods AC18 column was used with the mobile phase consisting of acetonitrileA and 0.05﹪phosphoric acidB.The flow rate was1.0mL/min，the temperature of column was 30℃，and the detection wavelength was at 237nm.To determinate the quantitative assay using external satadard method.Results The linear of glycyrrhizic acid was good in the range of 0.1630-0.8149ug（r=0.9999）with the average recovery 99.76﹪and RSD 0.96﹪.Conclusion This method was simple，convenient，and was appropriate to control the quality of licorice.【Key words】licorice，liquiritin，glycyrrhizic acid，HPLC，determination甘草为豆科多年生草本植物，始载于《神农本草经》，素有“囯老”之称，是我国一味非常重要的中药材，具补脾益气、清热解毒、祛痰止咳、缓急止痛、调和诸药之功效[1~2]。
反相高效液相色谱法同时测定甘草酸单铵盐原料药主成分及有关物质含量赵燕燕;刘丽艳;韩媛媛;李月秋;王艳;石敏健【摘要】建立了同时测定甘草酸单铵盐原料药中主成分18α-甘草酸、18β-甘草酸及其有关物质A、有关物质B含量的高效液相色谱法,并川于其质量标准的建立采用Durashell C18色潜柱(250 mm ×4.6 mm,5μm),以10mmol/L高氯酸铵(氨水调节pH 8.20)-甲醇(48∶52,v/v)为流动相,流速0.80 mL/min,检测波长 254 nm,柱温50℃,进样量10 μL.在优化的色谱条件下,18α-甘草酸、18β-甘草酸、有关物质A、有关物质B在0.50～ 100 mg/L范围内线性关系良好(r＞0.9999),检出限分别为0.15、0.10、0.10、0.15 mg/L,平均回收率在97.32％～99.33％之间(n=3),相对标准偏差(RSD)在0.05％～1.06％之间.本方法检测灵敏、重现性好,结果准确可靠,可川于甘草酸单铵盐原料药主成分及有关物质的检测分析,有利于其原料药的质量控制.【期刊名称】《色谱》【年(卷),期】2013(031)009【总页数】6页(P869-874)【关键词】反相高效液相色谱法;甘草酸单铵盐;主成分;有关物质;原料药【作者】赵燕燕;刘丽艳;韩媛媛;李月秋;王艳;石敏健【作者单位】河北大学医学实验中心,河北保定071000;河北大学化学与环境科学学院,河北省分析科学技术重点实验室,河北省化学生物学重点实验室,河北保定071002;河北大学医学实验中心,河北保定071000;河北大学医学实验中心,河北保定071000;河北大学医学实验中心,河北保定071000;河北大学化学与环境科学学院,河北省分析科学技术重点实验室,河北省化学生物学重点实验室,河北保定071002;河北大学化学与环境科学学院,河北省分析科学技术重点实验室,河北省化学生物学重点实验室,河北保定071002【正文语种】中文【中图分类】O658甘草酸单铵盐1992年被国家卫生部定为治疗慢性肝炎的首选药物，其原料药主成分是18α-甘草酸（18α-glycyrrhizic acid，18α-Gly）和18β-甘草酸（18β-glycyrrhizic acid，18β-Gly），以及2个主要的有关物质，分别命名为有关物质A和有关物质B。
RP—HPLC法测定复方甘草酸单铵注射液中甘草酸单铵的含量目的建立RP-HPLC法测定复方甘草酸单铵注射液中甘草酸单铵含量的方
法。
方法色谱柱：Waters C18（5 μm，4.6 mm×150 mm）；流动相：乙腈-水（35∶65），用H3PO4调pH值为3.0；柱温：25 ℃；流速：1.0 ml/min；检测波长：252 nm；进样体积：20 μl。
结果甘草酸单铵线性范围：0.16048～3.2096 μg （r=0.9999，n=5）；甘草酸单铵加样回收率平均值为99.4%（RSD=0.72%，n=9）。
结论该方法灵敏、专属性强、准确、重现性好，可用于复方甘草酸单铵注射液中甘草酸单铵的含量测定。
[Abstract] Objective To establish a method for the determination of ammonium glycyrrhetate in compound ammonium glycyrrhetate injection by RP-HPLC. Methods The determination was performed on a Waters C18 column（5 μm，4.6 mm×150 mm）with the mobile phase consisted acetonitrile：water（35∶65，adjusted to pH 3.0 with phosphoric acid）.The column temperature was 25 ℃.The flow rate was 1.0 ml/min.The detective wavelength was 252 nm.The injection volume was 20 μl. Results The liner range of ammonium glycyrrhetate was 0.16048-3.2096 μg （r=0.9999，n=5）.The average recovery was 99.4%（RSD=0.72%，n=9）for the added amount of ammonium glycyrrhetate. Conclusion This method is sensitive，specific，accurate and reproducible.It can be used for determination of ammonium glycyrrhetate in compound ammonium glycyrrhetate injection.
[Key words] RP-HPLC；Compound ammonium glycyrrhetate injection；Content determination
复方甘草酸单铵注射液为甘草酸单铵、盐酸半胱氨酸、甘氨酸的灭菌水溶液，适用于急、慢性肝炎引起的肝功能异常；对中毒性肝炎有一定的辅助治疗作用；亦可用于食物中毒、药物中毒、药物过敏等[1]，其现行标准为国家药品监督管理局国家药品标准WS-10001-（HD-0347）-2002，采用紫外分光光度法（吸收系数法）测定甘草酸单铵的含量[2]，专属性不强，本文建立了反相高效液相色谱法[3-18]测定复方甘草酸单铵注射液中甘草酸单铵的含量，方法专属性强，重现性好，结果准确，可用于复方甘草酸单铵注射液中甘草酸单铵的含量测定。
1 仪器与试剂
Waters e2695-2489型高效液相色谱仪；甘草酸单铵对照品（中国食品药品检定研究院，批号：Y0000433；复方甘草酸单铵注射液（江苏正大天晴药业股份有限公司，批号：20140217、20140321、20131203）；乙腈：色谱纯；磷酸：分析纯。
2 方法与结果
2.1 系统适用性
色谱柱：Waters C18（5 μm，4.6 mm×150 mm）；流动相：乙腈-水（35∶65），用H3PO4调pH值为3.0；柱温：25 ℃；流速：1.0 ml/min；检测波长：252 nm；进样体积：20 μl。
在此色谱条件下，理论塔板数以甘草酸单铵峰计：4500；拖尾因子：1.01；甘草酸单铵与相邻杂质峰的分离度均符合要求。
2.2 制备溶液
精称甘草酸单铵对照品40.12 mg，加水溶解并稀释至50 ml，摇匀，作为对照品储备液；精取对照品储备液5 ml，加水稀释至50 ml，摇匀，作为对照品溶液；取供试品，制备40 μg/ml供试品溶液。
2.3 专属性
取复方甘草酸单铵注射液适量（约相当于甘草酸单铵 4 mg），分别经 1.0 mol/L盐酸、1.0 mol/L氢氧化钠、强热（160 ℃，1 h）、氧化（30%过氧化氢）得各破坏产物，制备溶液，进样，由色谱图得知甘草酸单铵与各降解产物分离良好，专属性强（图1）。
时间（min）
A时间（min）
B
时间（min）
C
时间（min）
D
图1 专属性色谱图
A.酸破坏；
B.碱破坏；
C.热破坏；
D.氧化破坏
2.4 标准曲线制备
精取对照品储备液1、2、5、10、20 ml，分别加水稀释至置50 ml，摇匀，进样。
以峰面积为纵坐标，进样量为横坐标，作回归曲线：Y=13423.19X-7067.18，r=0.9999（n=5），表明甘草酸单铵在0.16048～3.2096 μg范围内与峰面积有良好线性关系。
2.5 精密度
精取对照品溶液20 μl进样，测定峰面积，重复进样5次，计算峰面积的RSD=0.76%，说明仪器精密度符合要求。
2.6 稳定性
取同一份供试品溶液，分别于0、2、4、6、8、10 h测定峰面积，RSD=0.65%（n=5），说明供试品溶液在12 h内稳定。
2.7 重现性
取同一样品（批号：20140217），制备供试品溶液5份，测定含量，平均值=98.0%，RSD=0.78%，说明重现性符合要求。
2.8 加样回收率
精取样品（批号：20140217，含量98.9%）适量各9份，每三份一组，每组精密加入对照品贮备液3、5、7 ml，制备低、中、高（80%、100%、120%）3个浓度的溶液，测定加样回收率，结果见表1。
表1 加样回收率测定结果（n=9）
2.9 样品含量测定
取对照品溶液及供试品溶液，依法测定，按外标法计算，测定结果见表2。
表2 样品测定结果
3 讨论
检测波长的选择：以流动相为溶剂，用岛津UV-2550紫外分光光度计测定，甘草酸单铵在252 nm波长处有最大吸收，故选定在此波长处测定含量，方法灵敏。
流动相的确定：本法流动相是乙腈-水（35∶65），用H3PO4调pH值为3.0，不含缓冲盐，对色谱系统的损害程度较小，且峰型对称（拖尾因子为1.01）。
流动相的选择符合《中国药典》2010年版二部附录新增要求尽可能少用含有缓冲液流动相的原则。
本法具有较宽的线性范围和较高的回收率，结果简便、可靠准确。
通过专属性实验可以得出，甘草酸单铵主峰能与各种条件破坏后的降解产物峰良好分离，专属性强，可以作为复方甘草酸单铵注射液含量测定的方法。
[参考文献]
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