巴氏染色液EA 染色液使用说明书

精子形态学染色液(巴氏法)简介：细胞学常规染色普遍使用巴氏(Papanicolaou)法，Papanicolaou Stain 最初仅用于检测阴道上皮雌激素水平以及生殖道念珠菌、滴虫等病原体。

橘黄G6与EA36或EA50联合使用，可将胞浆染成颜色鲜明的绿色、蓝色和粉色。

目前大多数实验室采用成品染液，所以每种染液应注意其改良后的最佳条件。

最终胞浆染色应透明可见，核染色质应很容易辨别出来。

目前改良的巴氏染色液含有多种离子，具有多色性染色效能。

染色后胞质鲜艳、透明性好以及核膜、核仁、染色质结构清晰。

Leagene 精子形态学染色液(巴氏法) 因精子及细胞内不同等电点的蛋白质在相同的酸度下带不同的电荷，能选择性地结合相应的染料而着色。

胞核由酸性物质组成，它与碱性染料的亲和力较强；而胞浆则相反，它含有碱性物质和酸性染料的亲和力较大细胞质染色特别采用针对于精子染色的改良EA50染色液，细胞核染色采用Leagene 自主研发的无毒改良型苏木素染色液，特别适用于精子的染色，亦可用于胸水、腹水、痰液等细胞样本的染色。

组成：自备材料：1、 固定液(如95%乙醇-乙醚固定液)2、 系列乙醇3、 0.5%盐酸乙醇分化液操作步骤(仅供参考)：1、 细胞涂片用等量95%乙醇-冰乙酸固定液固。

2、 80%的乙醇浸泡1min 。

3、 70%的乙醇浸泡1min 。

4、 50%的乙醇浸泡1min 。

编号 名称DA0191 4×20ml DA0191 4×100ml Storage 试剂(A): Lea 苏木素染色液 20ml 100ml RT 避光 试剂(B): 蓝化液20ml 100ml RT 试剂(C): 橘黄G6染色液 20ml100ml RT 避光使用说明书1份5、 蒸馏水或自来水浸泡或冲洗。

6、Lea 苏木素染色液染色。

7、自来水冲洗。

8、盐酸乙醇分化液分化或盐酸水溶液分化。

9、自来水冲洗。

10、蓝化液中蓝化4min 。

巴氏染色液说明书【产品名称】巴氏染色液【产品名称】巴氏染色液PAP Staining Solutions【产品编号】PAP-500ml,PAP-1000ml,PAP-2500ml【包装规格】苏木素染色液500ml、1000ml 2500ml；橘黄G6染色液500ml、1000ml 2500ml；EA50染色液500ml、1000ml 2500ml。

【预期用途】主要用于对脱落细胞的组织细胞学染色。

【检验原理】巴氏染色液由3部分组成：苏木素染色液、橘红G6染色液和EA50染色液。

苏木素染色液，是一种针对正常以及变态细胞学涂片染料，对核膜、核质、核仁染色效果非常清晰。

涂片标本可是妇科或非妇科的，如痰液，尿液及细胞学穿刺样本。

为获得优质的染色效果，苏木素染液技术完全按照帕氏染色法，以及OG-6染液；EA 31染液；同时供应选择性多色复染染料，如EA50试剂；EA65试剂，满足细胞学染色需求。

橘黄G6染色液，是橘黄G (Orange G) 染料添加磷酸（PMA）后的酒精溶液。

Papanicolaou染色，首先用苏木素将细胞核染色，之后用OG-6 试剂和EA试剂继续染色。

橘黄G染料对细胞质染色，并保持在成熟细胞和角质化细胞。

之后的EA试剂对未染色的细胞组分染色，如鳞状细胞，核仁，纤毛，红细胞。

测试样本可为妇科细胞样本和非妇科细胞样本，如痰液，尿液，细胞穿刺等。

为获得优质的染色效果，OG-6试剂特性与其他用于Papanicolaou染色法中染色试剂-苏木素试剂，EA 31试剂，及对比染色试剂EA50试剂，EA65试剂相符。

EA50染色液,为伊红Y和亮绿SF酸（加入了磷钨酸，PTA）染液的酒精溶液。

Papanicolaou染色，首先用苏木素将细胞核染色，之后用OG-6 试剂和EA试剂继续染色。

橘黄G染料对细胞质染色，并保持在成熟细胞和角质化细胞。

之后的EA试剂对未染色的细胞组分染色，如鳞状细胞，核仁，纤毛，红细胞。

巴氏染色步骤
1．将涂片置于95%酒精固定15分钟以上。

2．水洗后，用苏木素染液3—5分钟，直到染色明显为止后用清水冲洗。

3．置于稀碳酸锂溶液1—2分钟。

使涂片返蓝后用水冲洗。

4．放入95%乙醇中脱水1分钟，水洗甩干。

5．在橘黄G6染色3分钟，水洗。

6．依次放入80%、95%、95%乙醇中各10秒、脱水。

7．水洗后放入EA36染液中染色5分钟左右，至胞浆着色鲜明为止，再水洗。

8．用95%酒精洗涤2—3次，再置于纯酒精中脱水
9．晾干或吹干后用树胶封片固定即可。

注：①一套染液可根据染色深浅情况更换，一般为3—5月更换一次
②更换染液时，苏木素及EA36染液可适量加入10ml冰醋酸，
③春冬两季及温度较低时，可适当延长染色时间。

快速染色法
苏木素色精染色液1-2min水洗晾干，苏木素分色液3s水洗晾干，苏木素返蓝液5s水洗晾干，苏木素多彩染液1-2min,水洗吹干，封片。

如有侵权请联系告知删除，感谢你们的配合！
如有侵权请联系告知删除，感谢你们的配合！。

1.目的用于测定人类精子形态。

2.范围适用于男性精子畸形率测定。

3.原理细胞中的细胞核是由酸性物质组成，它与碱性染料的亲和力较强；而细胞浆则相反，它含有碱性物质和酸性染料的亲和力较大。

巴氏染色液利用这一特性对细胞进行多色性染色，细胞经染色后能清晰地显示细胞的结构，胞质透亮鲜丽，各种颗粒分明，细胞核染色质非常清楚，从而较容易发现异常细胞。

通过巴氏染色可反映出细胞在炎症刺激下和癌变后的形态学变化，对早期发现和诊断一些病变和肿瘤具有较重要意义。

4.试剂4.1本试剂由珠海贝索生物技术有限公司提供【医疗器械生产企业许可证编号】粤食药监械生产许20010407号【医疗器械注册证书编号】粤珠食药监械（准）字2013第1400001号【产品标准编号】YZB/粤珠0010-2013【说明书批准日期】2013年1月23日4.2试剂盒组成应避免不同批次试剂盒中的各组分混用（型号EA36、EA50） 试剂组成规格 主要成分 苏木素（Harris ）染液1vial ×250ml 苏木素 橘黄G 染液1vial ×250ml 橘黄G EA36染液或EA50染液1vial ×250ml 亮绿、曙红 4.3试剂储存及效期：4.3.1有效期：未开封试剂有效期为18个月，其中EA36染液，EA50染液最佳使用时间为启用后5个月内。

4.3.2储存条件：本试剂盒应贮存于相对湿度不大于80%，无腐蚀性气体和通风良好的5O C-30O C 室温环境。

题目：精子形态学巴氏染色标准操作规程 编号：JY-3-GC- 文件检审： 页数：3附件：0 发布部门：质量管理科首次发布日期：2015-08-01 版本号：02本版发布日期：2015-08-01拟定部门：检验科审核：分管院长批准：院长5.实验设备及材料5.1奥林巴斯CX31显微镜5.2精密移液器规格：5-50μl和200-1000μl5.3载玻片5.4生理盐水、盐酸5.5移液器吸头5.6酒精5.7染缸6.样本6.1采集方法：以手淫法采集禁欲2-7天精液于采样杯,注意收集完全。

第1页，共1页EA65染色液使用说明书
货号：G1615
规格：100ml /500ml
有效期：6个月有效。

产品说明：
细胞学常规染色普遍使用巴氏(Papanicolaou)法。

Papanicolaou Stain 最初仅用于检测阴道上皮雌激素水平以及生殖道念珠菌、滴虫等病原体。

橘黄G6与EA36或EA50联用使用，可将胞浆染成颜色鲜明的绿色、蓝色和粉色。

目前大多数实验室采用成品染液，所以每种染液应注意其改良后的最佳条件。

最终胞浆染色应透明可见，核染色质应很容易辨别出来。

目前改良的巴氏染色液含有多种离子，具有多色性染色效能。

染色后胞质鲜艳、透明性好以及核膜、核仁、染色质结构清晰。

细胞核染色液主要为Harris 苏木素染液，细胞质染色液主要为EA36染液、EA50染液。

巴氏染色液用于细胞脱落标本，细胞核呈蓝色或黑色，角化鳞状细胞胞浆呈粉红或橘红色。

巴氏染色液(Papanicolaou EA65)细胞质染液采用EA65，细胞核染色采用自主研发的无毒改良型苏木素染色液，EA65更适用于非妇科细胞学涂片染色。

自备材料：
1、固定液(如95%乙醇-冰乙酸固定液)
2、系列乙醇
3、显微镜
4、盐酸乙醇分化液
操作步骤及染色结果：
本试剂为G1614-巴氏染色液（EA65）的试剂D，操作步骤及染色结果参考G1614。

注意事项：
1、染液均需过滤，需经常更换染液。

2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

巴氏染色步骤
1．
2．将涂片置于95%酒精固定15分钟以上。

3．水洗后，用苏木素染液3—5分钟，直到染色明显为止后
用清水冲洗。

4．置于稀碳酸锂溶液1—2分钟。

使涂片返蓝后用水冲洗。

5．放入95%乙醇中脱水1分钟，水洗甩干。

6．在橘黄G6染色3分钟，水洗。

7．依次放入80%、95%、95%乙醇中各10秒、脱水。

8．水洗后放入EA36染液中染色5分钟左右，至胞浆着色鲜明
为止，再水洗。

9．用95%酒精洗涤2—3次，再置于纯酒精中脱水10．晾干或吹干后用树胶封片固定即可。

注：①一套染液可根据染色深浅情况更换，一般为3—5月更换一次
②更换染液时，苏木素及EA36染液可适量加入
10ml冰醋酸，
③春冬两季及温度较低时，可适当延长染色时间。

快速染色法
苏木素色精染色液1-2min水洗晾干，苏木素分色液3s 水洗晾干，苏木素返蓝液5s水洗晾干，苏木素多彩染液1-2min,水洗吹干，封片。

巴氏染色液(Papanicolaou EA65)操作步骤及注意事项货号：G1614规格：4×100ml/4×500ml有效期：6个月有效。

产品内容：产品组成4×100ml4×500ml Storage试剂(A):苏木素染色液100ml500ml RT避光试剂(B):蓝化液100ml500ml RT试剂(C):橘黄G6染色液100ml500ml RT避光试剂(D):EA65染色液100ml500ml RT避光产品说明：细胞学常规染色普遍使用巴氏(Papanicolaou)法。

Papanicolaou Stain最初仅用于检测阴道上皮雌激素水平以及生殖道念珠菌、滴虫等病原体。

橘黄G6与EA36或EA50联用使用，可将胞浆染成颜色鲜明的绿色、蓝色和粉色。

目前大多数实验室采用成品染液，所以每种染液应注意其改良后的最佳条件。

最终胞浆染色应透明可见，核染色质应很容易辨别出来。

目前改良的巴氏染色液含有多种离子，具有多色性染色效能。

染色后胞质鲜艳、透明性好以及核膜、核仁、染色质结构清晰。

细胞核染色液主要为Harris苏木素染液，细胞质染色液主要为EA36染液、EA50染液。

巴氏染色液用于细胞脱落标本，细胞核呈蓝色或黑色，角化鳞状细胞胞浆呈粉红或橘红色。

巴氏染色液(Papanicolaou EA50)细胞质染色采用EA50染色液，细胞核染色采用无毒改良型苏木素染色液，不仅适用于妇科细胞学涂片染色如筛查宫颈癌和癌前病变，也适用于胸水、腹水、痰液等非妇科细胞样本的染色。

自备材料：1、固定液(如95%乙醇-冰乙酸固定液)2、系列乙醇3、显微镜4、盐酸乙醇分化液操作步骤(仅供参考)：1、细胞涂片用95%乙醇-冰乙酸固定液固定10～15min。

2、95%的乙醇浸泡1min。

3、80%的乙醇浸泡1min。

4、70%的乙醇浸泡1min。

5、蒸馏水或自来水浸泡或冲洗1min。

6、苏木素染液染色5～10min。

什么是巴氏染色巴氏染色的操作方法巴氏染色有4个步骤，分别是固定、核染色、胞浆染色和透明，那么你对巴氏染色了解多少呢?以下是由店铺整理关于什么是巴氏染色的内容，希望大家喜欢!巴氏染色的操作方法及注意事项染色有4个步骤：1、固定;2、核染色;3、胞浆染色;4、透明。

主要达到以下要求：1、核的结构清晰;2、透明度高;3、分色恰当。

固定固定的目的细胞制片的迅速固定是制片过程中关键的一步，否则会影响细胞学诊断的准确性。

对于不同的标本需要不同的固定方法。

最为常用的固定方法是95%酒精作为固定液的湿固定法。

酒精作为一种脱水剂能够防止细胞内的酶捋蛋白质分解而自容，并凝固细胞内的物质如蛋白质、脂肪和糖类等，使其保持与组织生活相仿的成分，从而使细胞各部分，尤其核染色质易于着色。

对于巴氏染色来说，酒精固定最为重要的。

如果酒精浓度不足引起的固定不佳，可造成细胞的人为变化，并可导致假阳性或假阴性的诊断。

1、固定方法湿固定法：作为用95%酒精固定液固定的细胞学标本一定使用湿固定法。

制片制备完后，趁标本新鲜而又湿润时，立即放入盛有95%酒精的固定缸内。

制片在固定液内至少保持15-30min。

固定时间通常不超过1周。

这种制片染色后，颜色鲜艳，结构清晰。

如果细胞制片需要送至另一实验室或邮寄他处染色时，可以固定15min后，把制片取出后立即密封的容器中或者使用甘油防止制片干燥。

因为无论固定前或固定后的制片，如果发生干燥后都会影响染色的效果。

2、固定注意事项固定液的过滤：为了防止细胞污染，凡是使用过的固定液，必须过滤后才能再使用。

使用过长的固定液，必须用酒精相对密度计测定，酒精浓度低于90%时应该及时更换新液。

湿固定的重要性：标本再新鲜时及时固定时保证染色效果的重要因素。

如苏木素对细胞核的染色，巴氏染色中胞浆的特殊着色作用，均可因标本干燥后固定而大受影响。

制片标本的邮寄：标本再固定15min后取出，立即加甘油数滴于制片上，装入密封的小盒中。

巴氏染色步骤
1．
2．将涂片置于95%酒精固定15分钟以上。

3．水洗后，用苏木素染液3—5分钟，直到染色明显为止后
用清水冲洗。

4．置于稀碳酸锂溶液1—2分钟。

使涂片返蓝后用水冲洗。

5．放入95%乙醇中脱水1分钟，水洗甩干。

6．在橘黄G6染色3分钟，水洗。

7．依次放入80%、95%、95%乙醇中各10秒、脱水。

8．水洗后放入EA36染液中染色5分钟左右，至胞浆着色鲜明
为止，再水洗。

9．用95%酒精洗涤2—3次，再置于纯酒精中脱水10．晾干或吹干后用树胶封片固定即可。

注：①一套染液可根据染色深浅情况更换，一般为3—5月更换一次
②更换染液时，苏木素及EA36染液可适量加入10ml冰醋酸，
③春冬两季及温度较低时，可适当延长染色时间。

快速染色法
苏木素色精染色液12min水洗晾干，苏木素分色液3s 水洗晾干，苏木素返蓝液5s水洗晾干，苏木素多彩染液12min,水洗吹干，封片。

巴氏染色原理及操作步骤巴氏染色法就是脱落细胞染色中最好得染色方法.苏木素染液，细胞核内得染色质主要就是去氧核糖核酸（DNA，DNA得双螺旋结构中,两条链上得磷酸基向外，带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷得苏木素精碱性染料以离子或氢键结合而被染色。

苏木精在碱性溶液中呈蓝色，所以细胞核被染成蓝色。

分化：苏木素染色之后，用水洗去未结合在细胞上得染液，但就是在细胞核中结合过多得染料与细胞浆中吸附得染料必须用分化液 1 %盐酸酒精脱去，才能保证细胞核与细胞浆染色得分明，把这个过程称为染色得分化作用.因酸能破坏苏木素得醌型结构，使色素与组织解离，分化不可过度。

蓝化：分化之后苏木素在酸性条件下处于红色离子状态，在碱性条件下处于蓝色离子状态，而呈蓝色，所以分化之后用水洗去酸而中止分化，再用弱碱性水使苏木精染上得细胞核变呈蓝色，称蓝化作用,一般多用自来水浸洗即可变蓝，也可用温水（50度温水最佳）变蓝。

E A50 染液得酸碱度对于巴氏染色得成功起着关键作用,EA50染液由伊红、亮绿、等染料配成。

伊红、亮绿、橘黄等属于酸性染料，在溶解媒中其发色团就是负离子部分，发色团可与蛋白质中带正电得氨基结合，从而就是胞浆显蓝色、绿色、橘黄色或红色，但蛋白质所带正负电荷得多少就是随溶液得PH值而改变得，在偏碱环境中,蛋白质得羧基游离增多（带负电），在偏酸环境中蛋白质氨基游离增多（带正电），磷钨酸在染色过程中，不但作为媒染剂可增加染料得着色力，同时磷钨酸与碳酸锂还就是一对弱酸弱碱，实际上就是一对缓冲剂，可中与分化及蓝化时可能留下得少量酸或碱，保证染色达到理想效果，其适用于上皮细胞及间皮组织得标本,就是阴道脱落细胞检查中最常用得染色方法，该染色法不但具有显示细胞核结构清晰、分色明显、透明度好、胞浆受色鲜艳等特点•巴氏染色法将胞核染为深蓝色；鳞状上皮底层、中层及表层角化前细胞胞质染绿色，表层不全角化细胞胞质染粉红色，完全角化细胞胞质呈桔黄色；细菌:灰色；滴虫：淡蓝灰色；黏液：淡蓝色或粉红色；中性粒细胞与淋巴细胞、吞噬细胞胞质均为蓝色；红细胞染粉红色；高分化鳞癌细胞可染成粉红色或桔黄色；腺癌胞质呈灰蓝色。