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⽣物化学实验实验⼀1、糖类的颜⾊反应1. α-萘酚反应糖在浓⽆机酸（硫酸或盐酸）作⽤下，脱⽔⽣成糠醛及糠醛衍⽣物，后者能与α-萘酚⽣成紫红⾊物质。
注意：因糠醛及糠醛衍⽣物对此反应均呈阳性，不是糖类的特异反应。
2. 间苯⼆酚反应在酸作⽤下，酮糖脱⽔⽣成羟甲基糠醛，后者再与间苯⼆酚作⽤⽣成红⾊物质。
此反应是酮糖的特异反应。
因为醛糖在同样条件下呈⾊反应缓慢，只有在糖浓度较⾼或煮沸时间较长时，才呈微弱的阳性反应。
2、还原作⽤许多糖类由于其分⼦中含有⾃由的或潜在的醛基或酮基，因此在碱性溶液中能将铜、铁、银等⾦属离⼦还原，同时糖类本⾝被氧化成糖酸及其他产物。
糖类这种性质常被利⽤于检测糖的还原性及还原糖的定量测定。
本实验所⽤的试剂为斐林试剂和本尼迪克特试剂。
它们都是Cu2＋的碱性溶液，能使还原糖氧化⽽本⾝被还原成红⾊（颗粒⼤）或黄⾊（颗粒⼩）的Cu2O沉淀。
实验⼆脂肪碘值的测定碘值（价）是指100g脂肪在⼀定条件下吸收碘的克数。
碘值是鉴别脂肪的⼀个重要常数，可⽤以判断脂肪所含脂肪酸的不饱和程度。
脂肪中常含有不饱和脂肪酸，不饱和脂肪酸具有⼀个或多个双键，能与卤素起加成作⽤⽽吸收卤素。
常⽤碘与脂肪中不饱和脂肪酸的双键起加成作⽤。
脂肪的不饱和程度越⾼，所含的不饱和脂肪酸越多，与其双键起加成作⽤的碘量就越多，碘值就越⾼。
故可⽤碘值表⽰脂肪的不饱和度。
I2+－CH=CH－－CHI－CHI－本实验⽤溴化碘(Hanus试剂)代替碘。
⽤⼀定量(必须过量)溴化碘和待测的脂肪作⽤后，⽤硫代硫酸钠滴定的⽅法测定溴化碘的剩余量，然后计算出待测脂肪吸收的碘量，求得脂肪的碘值。
加成作⽤：IBr+－CH=CH－－CHI－CHBr－剩余溴化碘中碘的释放：IBr + KI KBr + I2再⽤硫代硫酸钠滴定释放出来的碘：I2 +2Na2S2O3 2Na2S4O6+2NaI思考题：何谓空⽩溶液和空⽩实验？空⽩实验有何意义？在各种分析⽅法中，为消除⼲扰，⽤与测定试样时完全⼀致的条件进⾏测定的溶液。
糖的呈色反应实验原理
糖的呈色反应实验是一种常用的化学试验，用于检测糖的存在与分析糖的含量。
该实验基于糖与氧化剂之间的化学反应，根据反应产生的颜色变化来判断糖的存在和含量。
实验中常用的氧化剂是酸性高锰酸钾溶液（KMnO4），它是一种强氧化剂。
高锰酸钾溶液的呈色是紫色的。
当高锰酸钾溶液与糖发生反应时，糖会被氧化成酸，并还原高锰酸钾为无色或淡紫色的氧化锰(IV)离子（Mn2+）。
反应的化学方程式如下：
糖+ 2KMnO4 + 3H2SO4 →糖酸+ K2SO4 + 2MnSO4 + 3H2O
在实验中，通常在含有糖的溶液中加入适量的高锰酸钾溶液后，溶液的颜色会发生变化。
根据溶液颜色的深浅可以大致判断糖的含量，颜色越浅糖的含量越高。
需要注意的是，该实验只能检测一些还原性较强的糖类，例如葡萄糖、果糖等，而不能检测非还原性糖类，如蔗糖。
此外，该实验的结果受到多种因素的影响，包括反应时间、反应温度、试剂浓度等，因此在实际应用中需要进行标定和对照实验来确保准确性。
一、实验目的1. 掌握糖类化合物的主要化学性质。
2. 熟悉糖类物质的颜色反应原理和实验方法。
3. 学会使用显色试剂鉴定糖类，区分还原糖和非还原糖。
二、实验原理糖类是一类重要的有机化合物，包括单糖、双糖和多糖。
根据糖分子中是否存在醛基或酮基，可以将糖类分为还原糖和非还原糖。
还原糖在特定条件下可以与某些显色试剂发生反应，产生颜色变化，从而实现对糖类的鉴定。
本实验主要利用斐林试剂和苏丹Ⅲ试剂进行糖类的显色反应。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 纯葡萄糖- 果糖- 麦芽糖- 蔗糖- 淀粉- 水浴锅- 试管- 移液器- 显微镜2. 实验试剂：- 斐林试剂：将0.1g NaOH溶于50ml蒸馏水中，加入0.05g CuSO4，混匀。
- 苏丹Ⅲ试剂：将1g苏丹Ⅲ溶于100ml 95%乙醇中。
四、实验步骤1. 还原糖的鉴定：- 取一定量的葡萄糖、果糖、麦芽糖溶液分别置于试管中。
- 向各试管中加入等量的斐林试剂，混匀。
- 将试管放入水浴锅中加热至沸腾，观察颜色变化。
- 若产生砖红色沉淀，则表明该溶液中含有还原糖。
2. 非还原糖的鉴定：- 取一定量的蔗糖、淀粉溶液分别置于试管中。
- 向各试管中加入等量的苏丹Ⅲ试剂，混匀。
- 将试管放入水浴锅中加热至沸腾，观察颜色变化。
- 若溶液颜色变为红色，则表明该溶液中含有非还原糖。
3. 鉴定结果的观察：- 使用显微镜观察产生的沉淀或颜色变化，记录实验结果。
五、实验结果与分析1. 葡萄糖、果糖、麦芽糖溶液与斐林试剂反应后，均产生砖红色沉淀，表明它们是还原糖。
2. 蔗糖、淀粉溶液与苏丹Ⅲ试剂反应后，溶液颜色变为红色，表明它们是非还原糖。
六、实验结论1. 本实验成功实现了对还原糖和非还原糖的鉴定。
2. 斐林试剂和苏丹Ⅲ试剂是常用的糖类显色试剂，可用于糖类的鉴定和分析。
七、实验注意事项1. 实验过程中要注意安全，避免接触化学试剂。
2. 实验操作要规范，避免误差产生。
3. 实验结果要及时记录，以便分析。
生物化学实验一、糖的颜色反应及还原作用实验一：糖的颜色反应实验1.1 莫氏实验一、目的掌握莫氏（molisch）实验鉴定糖的原理和方法。
二、原理糖经浓无机酸（浓硫酸、浓盐酸）脱水产生糠醛或糠醛衍生物，后者在浓无机酸作用下，能与α-萘酚生成紫红色缩合物，在糖液和浓硫酸的液面间形成紫环，因此又称“紫环反应”，其反应如下图：利用这一性质可以鉴定糖。
三、实验器材1、棉花或滤纸。
2、吸管1.0ml(*4)、2.0ml(*1)。
3、试管1.5*15cm(*4)。
四、实验试剂1、莫氏试剂：称取α-萘酚5g，溶于95%乙醇并稀释至100ml。
此试剂需新鲜配置，并贮于棕色试剂瓶中。
2、1%蔗糖溶液：称取蔗糖1g，溶于蒸馏水并定容至100ml。
3、1%葡萄糖溶液：称取葡萄糖1g，溶于蒸馏水并定容至100ml.4、1%淀粉溶液：讲1g可溶性淀粉与少量冷蒸馏水混合溶液合成薄浆状物，然后缓缓倾入沸蒸馏水中，边加边搅。
最后以沸蒸馏水稀释至100ml。
五、操作于4支试管中，分别加入1ml1%葡萄糖溶液、1%蔗糖溶液、1%淀粉溶液和少许纤维素（棉花或滤纸浸在1ml水中）。
然后各加莫氏试剂2滴1，摇匀，讲试管倾斜，沿管壁慢慢加入浓硫酸1.5ml(切勿振摇！)硫酸层沉于试管底部与糖溶液分成两层，观察液面交界处有无紫色环出现。
六、注意事项1、试管中加入各种糖后，应做好标记，浓硫酸加入的方式应保持一致。
2、莫氏反应非常灵敏，所用的试剂应洗净，不可再样品中混入纸屑等杂物。
3、当糖浓度过高时，由于浓硫酸对他的焦化作用，将呈现红色及褐色而不呈现紫色，需稀释后再做。
思考题：1、解释α-苯酚反应的原理。
2、用莫氏试验鉴定糖时需注意哪些？试验1.2 塞氏试验一、目的掌握塞氏（Seliwanoff）实验鉴定酮糖的原理和方法。
二、原理酮糖在浓酸的作用下，脱水生产5-羟甲基糠醛，后者与间苯二酚作用，呈红色反应，有时亦同时产生棕色沉淀，此沉淀溶于乙醇，呈鲜红色沉淀2，以果糖为例，其反应如下：三、实验器材1、吸管0.5ml(*3)、5.0ml(*1)。
糖的颜色反应实验报告糖的颜色反应实验报告引言：糖是我们日常生活中不可或缺的食品之一，它不仅为我们提供了能量，还能给食物增添甜味。
然而，糖的颜色却因其不同种类而有所差异。
本实验旨在探究糖的颜色反应，通过实验观察和数据分析，进一步了解糖的性质和特点。
实验材料和方法：实验所需材料包括：白砂糖、红糖、蜂蜜、盐、碘酒、试管、滴管、烧杯、酒精灯等。
实验方法如下：1. 准备工作：将试管、烧杯等实验器具清洗干净，确保无残留物。
2. 实验步骤：a. 将白砂糖、红糖、蜂蜜分别放入三个烧杯中，每个烧杯中放入适量的糖。
b. 分别加入适量的水搅拌均匀，使糖完全溶解。
c. 取三个试管，分别将溶解后的白砂糖水、红糖水和蜂蜜倒入试管中。
d. 在另外三个试管中分别放入适量的盐。
e. 分别将碘酒滴入每个试管中，观察颜色反应。
结果和讨论：通过以上实验操作，我们观察到了不同糖类在碘酒的作用下产生了不同的颜色反应。
白砂糖水在加入碘酒后呈现出淡黄色，红糖水呈现出深褐色，而蜂蜜则呈现出深红色。
相比之下，盐在碘酒的作用下则没有产生颜色反应。
这种颜色反应的差异是由于不同糖类的化学结构和性质不同所致。
白砂糖是蔗糖的一种，其化学结构简单，只由葡萄糖和果糖组成。
因此，当碘酒与白砂糖水中的葡萄糖和果糖反应时，会产生淡黄色的颜色反应。
红糖则是通过蔗糖经过炼制而成，其中含有大量的糖蜜和糖浆。
这些糖蜜和糖浆中的有机物质与碘酒反应后产生了深褐色的颜色反应。
这也是为什么红糖的颜色较深的原因。
蜂蜜是由蜜蜂采集花蜜经过酶的作用和蜜蜂的蒸发而成。
蜂蜜中含有多种有机物质，包括葡萄糖、果糖、蔗糖等。
当碘酒与蜂蜜中的这些有机物质反应时，会产生深红色的颜色反应。
而盐则是无机物质，其化学结构与糖类不同。
因此，当碘酒与盐反应时，没有产生颜色反应。
结论：通过本实验，我们可以得出以下结论：不同糖类在碘酒的作用下产生了不同的颜色反应。
白砂糖水呈现淡黄色，红糖水呈现深褐色，蜂蜜呈现深红色。
糖的呈色反应和还原糖的检验（讲稿）本次实验目的是了解鉴定糖和还原糖的原理以及方法，并通过实验操作予以验证。
2人一组，前1-18组1个实验室。
二、实验原理。
糖的鉴定：糖经浓无机酸处理，脱水产生糠醛或糠醛衍生物。
戊糖形成糠醛，己糖则形成羟甲基糠醛。
这些糠醛和糖醛衍生物在浓无机酸作用下，能与酚类化合物缩合生成有色物质。
与一元酚如α-萘酚作用，形成三芳香环甲基有色物质。
与多元酚如间苯二酚作用，则形成氧杂蒽有色物质。
通常使用的无机酸为硫酸。
如用盐酸，则必须加热。
常用的酚类为α-萘酚、甲基苯二酚、间苯二酚和间苯三酚等，有时也用芳香胺、胆酸、某些吲哚衍生物和一些嘧啶类化合物等。
还原糖和非还原糖的鉴别：含有自由醛基(-CHO)或酮基(>C=O)的单糖和二糖为还原糖。
在碱性溶液中，还原糖能将金属离子(铜、铋、汞、银等)还原，糖本身被氧化成酸类化合物，此性质常用于检验糖的还原性，并且常成为测定还原糖含量的各种方法的依据。
三、实验内容本次实验一共采用了6种糖液作为测试糖液，2％葡萄糖，果糖，麦芽糖，蔗糖，1％淀粉溶液和1种未知糖液，每种糖液均有专门的移液管移取（贴有标签，有些实验可能只需加几滴，可以在移液管头部套上胶头滴加），不要弄混，所有试剂都有相应的移液管移取（大概4个组公用1套），用后请放回原位，方便别的同学使用。
实验包括2个部分，共7个实验。
（一）糖的呈色反应1．Molish反应(α-萘酚反应)本实验是鉴定糖类最常用的颜色反应。
糖在浓酸作用下形成的糠醛及其衍生物与α-萘酚作用，形成红紫色复合物。
在糖溶液与浓硫酸两液面间出现紫环，因此又称紫环反应。
自由存在和结合存在的糖均呈阳性反应。
此外，各种糠醛衍生物、葡萄糖醛酸、丙酮、甲酸、乳酸等皆呈颜色近似的阳性反应。
因此，阴性反应证明没有糖类物质的存在；而阳性反应，则说明有糖存在的可能性，需要进一步通过其他糖的定性试验才能确定有糖的存在。
步骤：取6支已标号的试管，分别加入各种测试糖液lmL(约15滴)，再各加入Molish 试剂2滴，摇匀。
生物化学实验一、糖的颜色反应及还原作用实验一：糖的颜色反应实验1.1 莫氏实验一、目的精品文档，你值得期待掌握莫氏（molisch）实验鉴定糖的原理和方法。
二、原理糖经浓无机酸（浓硫酸、浓盐酸）脱水产生糠醛或糠醛衍生物，后者在浓无机酸作用下，能与α-萘酚生成紫红色缩合物，在糖液和浓硫酸的液面间形成紫环，因此又称“紫环反应”，其反应如下图：利用这一性质可以鉴定糖。
三、实验器材1、棉花或滤纸。
2、吸管1.0ml(*4)、2.0ml(*1)。
3、试管1.5*15cm(*4)。
四、实验试剂1、莫氏试剂：称取α-萘酚5g，溶于95%乙醇并稀释至100ml。
此试剂需新鲜配置，并贮于棕色试剂瓶中。
2、1%蔗糖溶液：称取蔗糖1g，溶于蒸馏水并定容至100ml。
3、1%葡萄糖溶液：称取葡萄糖1g，溶于蒸馏水并定容至100ml.4、1%淀粉溶液：讲1g可溶性淀粉与少量冷蒸馏水混合溶液合成薄浆状物，然后缓缓倾入沸蒸馏水中，边加边搅。
最后以沸蒸馏水稀释至100ml。
五、操作于4支试管中，分别加入1ml1%葡萄糖溶液、1%蔗糖溶液、1%淀粉溶液和少许纤维素（棉花或滤纸浸在1ml水中）。
然后各加莫氏试剂2滴1，摇匀，讲试管倾斜，沿管壁慢慢加入浓硫酸1.5ml(切勿振摇！)硫酸层沉于试管底部与糖溶液分成两层，观察液面交界处有无紫色环出现。
六、注意事项1、试管中加入各种糖后，应做好标记，浓硫酸加入的方式应保持一致。
2、莫氏反应非常灵敏，所用的试剂应洗净，不可再样品中混入纸屑等杂物。
3、当糖浓度过高时，由于浓硫酸对他的焦化作用，将呈现红色及褐色而不呈现紫色，需稀释后再做。
思考题：1、解释α-苯酚反应的原理。
2、用莫氏试验鉴定糖时需注意哪些？试验1.2 塞氏试验一、目的掌握塞氏（Seliwanoff）实验鉴定酮糖的原理和方法。
二、原理酮糖在浓酸的作用下，脱水生产5-羟甲基糠醛，后者与间苯二酚作用，呈红色反应，有时亦同时产生棕色沉淀，此沉淀溶于乙醇，呈鲜红色沉淀2，以果糖为例，其反应如下：三、实验器材1、吸管0.5ml(*3)、5.0ml(*1)。
一、实验目的1. 了解糖的颜色反应原理及实验方法；2. 掌握还原糖和非还原糖的鉴定方法；3. 熟悉实验操作技能，提高实验能力。
二、实验原理糖类在浓酸作用下，可发生脱水反应生成糠醛及其衍生物。
糠醛及其衍生物与某些试剂反应，可产生具有特定颜色的化合物，从而实现对糖类的鉴定。
1. 还原糖的鉴定：还原糖在浓酸作用下生成糠醛及其衍生物，与萘酚反应生成红紫色复合物。
在糖溶液与浓硫酸两液面间出现紫环，证明还原糖的存在。
2. 非还原糖的鉴定：非还原糖在同样条件下呈色反应缓慢，只有在糖浓度较高或煮沸时间较长时，才呈微弱的阳性反应。
在实验条件下蔗糖有可能水解而呈阳性反应。
三、实验材料与试剂1. 实验材料：苹果或梨匀浆，花生种子，鸡蛋清，马铃薯匀浆。
2. 试剂：浓硫酸，萘酚，蒸馏水，NaOH溶液，CuSO4溶液，3，5-二硝基水杨酸，苯酚，亚硫酸钠，酒石酸钾钠，葡萄糖，碘液。
四、实验步骤1. 还原糖的鉴定：（1）取两支试管，分别加入2mL苹果或梨匀浆和2mL马铃薯匀浆。
（2）向两支试管中分别加入2mL浓硫酸。
（3）振荡均匀，观察两支试管液面间是否出现紫环。
2. 非还原糖的鉴定：（1）取两支试管，分别加入2mL花生种子和2mL鸡蛋清。
（2）向两支试管中分别加入2mL浓硫酸。
（3）振荡均匀，观察两支试管液面间是否出现紫环。
3. 还原糖和非还原糖的进一步鉴定：（1）取两支试管，分别加入2mL葡萄糖溶液和2mL淀粉溶液。
（2）向两支试管中分别加入2mLNaOH溶液和1mLCuSO4溶液。
（3）将两支试管放入沸水浴中加热2分钟。
（4）观察两支试管中是否产生砖红色沉淀。
五、实验结果与分析1. 还原糖的鉴定：在苹果或梨匀浆和马铃薯匀浆中加入浓硫酸后，液面间出现紫环，证明其中含有还原糖。
2. 非还原糖的鉴定：在花生种子和鸡蛋清中加入浓硫酸后，液面间未出现紫环，证明其中不含还原糖。
3. 还原糖和非还原糖的进一步鉴定：在葡萄糖溶液中加入NaOH溶液和CuSO4溶液后，产生砖红色沉淀，证明葡萄糖为还原糖；在淀粉溶液中加入NaOH溶液和CuSO4溶液后，未产生砖红色沉淀，证明淀粉为非还原糖。
生物化学实验Ⅰ实验一糖的制备、定性及含量分析（4课时）一、实验目的1.学会糖的制备；2.利用糖的呈色反应来粗略的定性糖类；3.糖的含量测定4.学会使用分光光度计。
二、实验原理还原糖溶于水，非还原糖被酸水解后一般也溶于水，故可用水提取。
而原料中的蛋白质可用调PH值的方法除去或用沉淀剂，糖的进一步纯化可采用乙醇沉淀糖。
糖的呈色反应有：Molisch反应、Fehling反应、Benedict反诉反应等多种呈色反应。
可粗略的定性，较精确则是TCL（单糖，多糖需水解）、GC、HPLC、IR、UV、GC/HPLC－MS来定性。
本实验用Molisch反应粗略的定性。
还原糖的测定是糖定量测定的基本方法，对没有还原性的双糖和多糖，可用酸水解法使其降解成有还原性的单糖进行测定，再分别求出样品中还原糖和总糖的含量（还原糖以葡萄糖含量计）。
还原糖在碱性条件下加热被氧化成糖酸及其它产物，3,5-二硝基水杨酸则被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。
在一定范围内，还原糖的量与棕红色物质颜色的深浅成正比关系，利用分光光度计，在540nm波长下测定光密度值，查对标准曲线并计算，便可求出样品中还原糖和总糖的含量。
由于多糖水解为单糖时，每断裂一个糖苷键需加入一分子水，所以在计算多糖含量时应乘以0.9。
三、实验材料、主要仪器和试剂1．实验材料小麦面粉或罗望子；精密pH试纸。
2．主要仪器（1）具塞玻璃刻度试管：20mL×11（2）大离心管：50mL×2（3）烧杯：100mL×1（4）三角瓶：100mL×1（5）容量瓶：100mL×3（6）刻度吸管：1mL×1；2mL×2；10mL×1（7）恒温水浴锅（8）沸水浴（9）离心机（10）电子天平（11）分光光度计3．试剂（1）1mg/mL葡萄糖标准液准确称取80℃烘至恒重的分析纯葡萄糖100mg，置于小烧杯中，加少量蒸馏水溶解后，转移到100mL容量瓶中，用蒸馏水定容至100mL，混匀，4℃冰箱中保存备用。
