实验5不同因素对家兔离体肠肌运动的影响
浙江中医药大学第二临床医学院
【摘要】目的：观察盐酸(HCl)、氢氧化钠(NaOH )、温度、肾上腺素(E)、乙酰胆碱(Ach)、缺空气对家兔离体肠肌运动的影响。
方法：分别给予离体家兔肠肌标本HCl、NaOH、低温、肾上腺素、乙酰胆碱、缺氧刺激，完成每次刺激并出现明显现象后用37℃台氏液冲洗肠肌标本，观察其收缩活动的特点并记录。
结果：滴加Ach、NaOH 后，肠肌运动张力和频率都增大；滴加E、HCl、阿托品后肠肌运动张力与频率迅速降低；停止通空气后，肠肌运动张力先迅速增强后逐渐降低和频率逐渐降低。
结论：HCl和肾上腺素可抑制离体肠肌的运动,NaOH、乙酰胆碱和阿托品可增强离体肠肌的运动。
1.材料和方法
1.1实验材料：家兔。
1.2实验仪器：恒温浴槽、木槌、麦氏浴槽、棉线若干、手术剪、氧气泵、微
机生物信号采集处理系统、张力传感器、缝针、培养皿。
1.3实验药品：台式液、乙酰胆碱、肾上腺素、氢氧化钠溶液、盐酸溶液。1.4离体家兔肠肌制备：
取家兔一只，将其倒提，用木锤猛击后脑勺，使之昏迷，将其仰卧位固定，用手术剪从剑突下沿腹部白线向耻骨联合方向剪开皮肤约5cm长，打开腹壁，暴露腹腔，顺着胃找到与胃相连的十二指肠，沿十二指肠向空肠的方向取出小肠段约30cm，放入一小手术盘中，用注射器抽取预冷台氏液冲洗肠内容物，直至冲洗干净为止。将干净的小肠段放入另一盛有预冷台氏液的小手术盘中，用手术刀刮去肠管外的血管和系膜，将小肠段切割成小段，每小段肠约2cm 长，并在小段肠的两端、距断端约1mm处各穿约30cm长的线。
1.5标本固定
1.5.1取出固定架，将肠段的下端的线头尽量靠近并牢固地绑紧在固定架的
小钩，将固定架放回内槽，使小钩尽量靠近槽底（尽量减少台式液
的使用），重新用张力微调器固定固定架，将空气泵重新连接至固
定架，并通过固定架将空气输入内槽的台氏液中。
1.5.2将肠段的上端的线头与张力换能器的应变梁连接, 用张力微调器缓慢
升降拉线，保持线有一定紧张度，肠段、线应与地平面垂直，同时，
肠段及上端的线头不得碰及槽壁和固定架。
1.5.3换液：打开灌流槽的内槽排水阀门，排去原来的台氏液，用20ml注
射器从恒温水泵的小烧杯中抽取被加温的台氏液放入灌流槽的内槽
中，其每次用量以淹过肠段的量为准。调节位于固定架尾部的空气流
量调节旋钮，使气泡即细小、均匀，又不影响肠段的运动。
1.6实验观察
1.6.1记录一段37℃的台氏液环境中小肠平滑肌收缩活动曲线，观察其收缩
活动的特点。
1.6.2待肠活动恢复后，向台氏液中加入0.01%乙酰胆碱（Ach）1滴，观察
小肠收缩活动的改变, 待反应稳定后冲洗1遍，再加入等量的37℃的
台氏液。
1.6.3待肠活动恢复后，向台氏液中加入0.01%肾上腺素(E)1滴，观察小肠
活动的改变，待反应稳定后冲洗1遍，再加入等量的37℃的台氏液。
1.6.4待肠活动恢复后，向台氏液中加入NaOH 1滴，观察小肠收缩活动的
改变，待.反应稳定后冲洗1遍，再加入等量的37℃的台氏液。
1.6.5待肠活动恢复后，向台氏液中加入HCl 1滴，观察小肠收缩活动的改
变，反应稳定后冲洗1遍，再加入等量的37℃的台氏液。
1.6.6待肠活动恢复后，停止空气泵的工作，观察肠活动的改变，待其收缩
活动改变明显时反应稳定后冲洗1遍，再加入等量的37℃的台氏液
1.6.7待肠活动恢复后，向台氏液中加入Ach1滴，再加入阿托品1滴，观
察小肠收缩活动的改变，反应稳定后冲洗1遍，终止实验。
2.实验结果
图一正常状态下的肠肌运动
图二滴加乙酰胆碱后的肠肌运动
图三滴加肾上腺素后的肠肌运动
图四滴加氢氧化钠后的肠肌运动
图五滴加盐酸后的肠肌运动
图六缺氧及恢复供氧后的肠肌运动
图七滴加阿托品后的肠肌运动
滴加Ach、NaOH后，肠肌运动张力和频率都增大；滴加E、HCl、阿托品后肠肌运动张力与频率迅速降低；停止通氧后，缺氧后肠肌开始一段有增强的现象，而后肠肌运动张力和频率逐渐恢复正常；恢复通氧后，肠肌运动张力和频率先降低而后恢复正常。
3分析与讨论
3.1 Ach可明显兴奋胃肠道平滑肌，故：①收缩频率增高：Ach与肌膜上的M
受体结合，使生电性钠泵活动减弱，从而使静息电位升高，平滑肌兴奋性提高。②收缩幅度增加：平滑肌钙离子专用通道开放，钙离子内流，一方面使收缩频率增加，另一方面可以增加肌浆钙离子浓度。
3.2肾上腺素作用于肌膜，一方面使生电性钠泵活动增强，另一方面结合膜受
体。其中α受体使钾离子外流增加，β受体使钾、钙离子外流增加，同时增强钙泵活动。其中生电性钠泵活动增强、钾、钙离子外流增加导致细胞膜超级化，平滑肌兴奋性降低，收缩频率降低。钙离子外流、钙泵活动增强导致肌浆钙离子浓度下降，收缩幅度下降。
3.3消化道平滑肌对化学刺激敏感，小肠的PH约为7.0～8.0,过高或过低的PH
都会影响肠肌的收缩。滴加NaOH 后，台氏液的PH值处于7.0～8.0 之间，处于肠肌收缩的最适PH，肠肌运动加强。由于[H+] 浓度降低：①使钙离子通道活性受抑制减弱，钙离子内流，平滑肌兴奋性增高，故收缩频率增高，收缩幅度增强；②肌浆网钙离子释放增加，平滑肌收缩幅度增强。张力曲线而后下降，说明肠肌对PH值变化有一定的适应力。
3.4消化道平滑肌对化学刺激敏感，滴加HCl 后，台氏液的PH低于最适范围
（7.0～8.0），胞外[H+]升高：①抑制钙通道的活性，钙离子内流减少，肌肉收缩减弱。②干扰肌肉的代谢和肌丝滑行的生化过程，氢离子与钙离子竞争钙调蛋白的结合位点而使肌球蛋白ATP酶活性降低，使肌原纤维对钙离子的敏感性和钙离子从肌质网的释放量减少。收缩减弱。
3.5停止通氧后，肠肌运动得不到能量供给，故肠肌运动在缺氧开始一段时间
代偿性增强；由于ATP有限，故随后运动张力和收缩幅度减弱。恢复通氧后，肠肌得到能量供给，肠肌代偿运动消失，故造成运动张力和频率短暂降低，由于ATP充足，故随后运动张力和频率逐渐升高。
3.6阿托品是拮抗剂，可明显抑制肠肌的活动,出现收缩曲线的频率减慢,振幅
减小。
4.结论一定浓度Ach、NaOH通过增强钙离子通道活性而促进肠肌的运动；一定浓度的E、HCl、阿托品通过减弱钙离子通道活性而抑制肠肌的运动；短时缺氧能使肠肌运动暂时代偿性增强，随后减弱。
