实验4离体家兔肠肌运动 (1)
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一、实验目的1. 观察家兔小肠平滑肌的生理特性,了解其在消化过程中的作用。
2. 探讨pH、AD、Ach等因素对离体家兔肠肌运动的影响。
3. 分析不同药物对家兔小肠平滑肌的激动和阻断作用。
二、实验原理家兔小肠平滑肌具有自动节律性运动的特性,其产生机理源于肌肉细胞本身的自发缓慢放电,并受中枢神经系统及体液因素的调节。
本研究通过观察离体家兔小肠平滑肌在不同理化刺激下的收缩幅度变化,分析探讨各种理化刺激引起循环、呼吸、泌尿等功能的适应性改变。
三、实验材料与仪器1. 实验动物:健康家兔1只2. 实验器材:解剖盘、手术刀、手术剪、镊子、注射器、微机生物信号采集处理系统、试管、试管架、pH试纸、肾上腺素、乙酰胆碱等。
3. 实验试剂:生理盐水、HCl、NaOH、肾上腺素、乙酰胆碱等。
四、实验方法1. 家兔处死:采用空气栓塞法处死家兔,使其心脏停止跳动。
2. 小肠平滑肌制备:迅速取出家兔小肠,置于生理盐水中洗净,剪成1-2cm长的肠段,放入浴槽中。
3. pH值测定:用pH试纸测定浴槽中生理盐水的pH值,确保pH值在7.2-7.4之间。
4. 理化刺激:分别向浴槽中加入不同pH值的溶液(HCl、NaOH)、肾上腺素和乙酰胆碱,观察小肠平滑肌的收缩幅度变化。
5. 数据记录:使用微机生物信号采集处理系统,记录各项处理前后的收缩幅度变化。
五、实验结果1. pH值对小肠平滑肌的影响:当pH值低于7.2时,小肠平滑肌收缩幅度降低;当pH值高于7.4时,小肠平滑肌收缩幅度升高。
2. 肾上腺素对小肠平滑肌的影响:肾上腺素对小肠平滑肌有阻断作用,使小肠平滑肌收缩幅度降低。
3. 乙酰胆碱对小肠平滑肌的影响:乙酰胆碱对小肠平滑肌有激动作用,使小肠平滑肌收缩幅度升高。
六、实验讨论1. pH值对小肠平滑肌的影响:pH值是调节消化系统功能的重要因素。
在本实验中,pH值的变化对小肠平滑肌的收缩幅度产生了明显的影响,说明pH值对小肠平滑肌的生理功能具有重要调控作用。
家兔离体肠实验报告家兔离体肠实验报告摘要:家兔离体肠实验是一种常用的研究消化系统功能的方法。
本实验以家兔的离体小肠为研究对象,通过观察不同条件下小肠的活动情况,探究消化系统的生理机制。
实验结果表明,家兔离体小肠对不同刺激物有不同的反应,这对于深入研究消化系统的功能具有重要意义。
引言:消化系统是人和动物体内的一个重要系统,负责食物的摄取、消化和吸收。
了解消化系统的功能和机制对于人类健康和动物生长发育具有重要意义。
家兔是一种常见的实验动物,其消化系统与人类相似,因此常被用于消化系统的研究。
本实验旨在通过观察家兔离体小肠的活动情况,探究消化系统的生理机制。
材料与方法:1. 实验动物:家兔2. 实验器材:离体小肠、组织离心机、温度控制器、刺激物溶液等3. 实验步骤:a. 将家兔处死,迅速取出小肠并放入生理盐水中清洗。
b. 将小肠切成相等长度的片段,并用丝线固定在实验器具上。
c. 将小肠装入温度控制器中,保持恒定的温度。
d. 分别给小肠注入不同刺激物溶液,如胃液、胰液等。
e. 观察小肠的活动情况,并记录相关数据。
结果与讨论:实验结果显示,家兔离体小肠对不同刺激物有不同的反应。
在注入胃液后,小肠开始出现蠕动运动,推动食物向前进。
这表明胃液的刺激可以促进小肠的蠕动活动,帮助食物的消化和吸收。
而注入胰液后,小肠的活动情况则有所不同。
胰液的刺激使小肠放松,这可能是为了提供更好的环境,促进胰液的吸收和利用。
此外,实验还观察到小肠对温度的敏感性。
当温度较高时,小肠的蠕动活动更加剧烈,而温度较低时则相对减弱。
实验结果表明,家兔离体小肠对不同刺激物和环境因素有明显的反应。
这一发现对于深入研究消化系统的功能和机制具有重要意义。
进一步的研究可以探究不同刺激物对小肠的作用机制,以及小肠在消化过程中的调节机制。
此外,通过比较不同动物的离体小肠实验结果,可以进一步了解消化系统在不同物种中的差异和相似之处。
结论:家兔离体小肠实验是一种常用的研究消化系统功能的方法。
家兔离体肠肌活动的影响实验【摘要】目的研究乙酰胆碱〔Ach〕、肾上腺素〔E〕、HCl、NaOH溶液25℃台氏液及缺氧复氧等条件对家兔离体肠肌运动的影响。
方法制备家兔离体小肠平滑肌标本,放置于灌流浴槽中,生物信号采集处理系统记录在不同因素作用下张力曲线。
结果滴加乙酰胆碱〔Ach〕、NaOH溶液后,肠肌运动张力和频率都增大;滴加肾上腺素〔E〕、HCl、肠肌运动张力和频率迅速降低;25℃台氏液刺激离体肠肌时,肠肌运动张力和频率先迅速下降后逐渐增大;停止通氧后,肠肌运动张力和频率逐渐降低,复氧后肠肌运动张力和频率恢复。
结论乙酰胆碱〔Ach〕、NaOH溶液刺激能促进肠肌运动,肾上腺素〔E〕、HCl能抑制肠肌运动,短时低温能使肠肌运动稍降后又加强直至正常,缺氧使肠肌运动减弱。
关键词:HCl、NaOH、离体肠肌、乙酰胆碱、肾上腺素、氧气消化道平滑肌与骨骼肌、心肌一样具有肌肉组织共有的特性。
但消化道平滑肌兴奋性较低,收缩缓慢,富有伸展性,具有紧张性、自动节律性,对化学、温度和机械张力刺激较为敏感。
给予离体肠肌以接近在体情况的适宜环境,消化道平滑肌可保持良好的生理特性。
1 实验材料与方法1.1实验材料1.1.1实验动物:家兔,雌雄不限,浙江中医药大学动物实验中心提供1.1.2实验材料与器械:麦氏浴槽、超级恒温器、张力换能器、铁支架、电脑、、木锤、止血钳、手术刀、20ml注射器、手术剪、持针器、手术圆针、缝线、烧杯、手术盘、搪瓷碗等。
蒂罗德液〔即台氏液〕:0.8%NaCl、0.02%KCl、0.026%MgSO477H2O、0.0065%NaH2PO4、0.02%CaCl2、0.1%NaHCO3、0.1%葡萄糖溶液。
肾上腺素、乙酰胆碱、HCl、NaOH溶液。
1.2实验方法1.2.1将台氏液快速充满空气小泡后,分成两份,一份置于25℃恒温水浴中,使其温度保持在25℃;另一份放放入恒温水泵中的不锈钢槽内预热至37 ~38 ℃。
实验4:某些因素对离体家兔肠肌的影响(浙江中医药大学第一临床医学院)关键词:离体家兔肠肌因素一、实验目的学习麦氏浴槽的使用方法及离体肠肌的实验方法。
观察酸、碱、低温、肾上腺素、乙酰胆碱对离体肠肌的影响,并分析作用机制。
二、实验材料(1)动物:家兔(2)器械:动物手术器材(手术刀、手术剪、止血钳、弹簧夹、丝线、皿、注射器、手术缝针)供氧器、麦氏浴槽、张力换能器、RM6240微机生物信号采集处理系统。
(3)药品和试剂:HCl、NaOH、(25度)台氏液、肾上腺素、乙酰胆碱溶液三、实验方法(1)实验装置准备和仪器参数设置:麦氏浴槽中加固定量(10~15ml)的台氏液,调节超级恒温器的温度,使麦氏浴槽内温度稳定在37.5度。
通气管接空气管道。
用螺丝夹调节气体管道的气体流量,调节至浴槽中气泡一个个逸出为止。
换能器输出线接微机生物信号采集处理系统:打开RM6240系统,“实验”-“药理学专用试验”-“离体家兔肠肌运动”(2)离体家兔肠肌标本制备:取家兔一只,用木槌击其头部致昏,立即剖开腹腔,找到回盲部,然后,在回盲部1cm处剪断,取出回肠约10cm左右一段,置于氧饱和的台氏液培养皿中,沿肠壁除去肠系膜,用5ml注射器吸取台氏液将肠内容物冲洗干净,然后将回肠剪成数段(约1~1.5cm),换以新鲜的台氏液备用。
取小段肠管置于盛有台氏液的培养皿中,在其两端对角壁处,分别用缝针穿线并打结。
(3)实验观察:1)加入乙酰胆碱溶液2~5滴左右,观察其收缩幅度,反应稳定后换液冲洗。
2)加入肾上腺素溶液2~5滴左右,观察其收缩幅度,反应稳定后换液冲洗。
3)滴加NaOH后,观察其收缩幅度,反应稳定后换液冲洗。
4)滴加HCl后,观察其收缩幅度,反应稳定后换液冲洗。
5)用25度台氏液灌流肠肌,观察其收缩幅度。
四、实验结果:某些因素对家兔离体肠肌的影响实验结论(1)加入乙酰胆碱溶液使家兔肠肌兴奋,张力增大,曲线幅度增大。
(2)加入肾上腺素溶液使家兔肠肌抑制,张力减小,曲线幅度变小。
一、实验目的1. 了解离体肠肌运动的生理特性;2. 掌握离体肠肌实验装置的使用方法;3. 观察不同因素对离体肠肌运动的影响;4. 分析实验结果,探讨相关生理机制。
二、实验原理离体肠肌是指从动物体内取出的一小段肠管,经过一定的处理,使其在体外保持一定生理功能。
离体肠肌运动实验可以模拟体内肠肌的生理活动,为研究肠肌生理特性及药物作用提供有力手段。
三、实验材料1. 家兔;2. 恒温浴槽;3. 木槌;4. 麦氏浴槽;5. 棉线若干;6. 手术剪;7. 氧气泵;8. 微机生物信号采集处理系统;9. 张力传感器;10. 缝针;11. 培养皿;12. 乙酰胆碱;13. 肾上腺素;14. 氢氧化钠溶液;15. 盐酸溶液;16. 台式液。
四、实验方法1. 家兔处死,取出一段小肠,置于麦氏浴槽中;2. 用棉线将小肠两端固定,连接张力传感器;3. 将麦氏浴槽置于恒温浴槽中,保持水温在37℃;4. 通入氧气,维持肠道通气;5. 连接微机生物信号采集处理系统,记录肠肌运动;6. 分别给予以下刺激:(1)滴加乙酰胆碱溶液;(2)滴加肾上腺素溶液;(3)滴加氢氧化钠溶液;(4)滴加盐酸溶液;(5)降低温度;7. 观察并记录肠肌运动的变化;8. 用37℃台式液冲洗肠肌标本,重复上述步骤。
五、实验结果1. 滴加乙酰胆碱溶液后,肠肌运动张力和频率都增大;2. 滴加肾上腺素溶液后,肠肌运动张力和频率迅速降低;3. 滴加氢氧化钠溶液后,肠肌运动张力和频率都增大;4. 滴加盐酸溶液后,肠肌运动张力和频率迅速降低;5. 降低温度后,肠肌运动张力和频率逐渐降低。
六、分析与讨论1. 乙酰胆碱为神经递质,可激活肠肌细胞膜上的乙酰胆碱受体,导致肠肌收缩。
实验结果显示,滴加乙酰胆碱溶液后,肠肌运动张力和频率都增大,说明乙酰胆碱具有增强肠肌运动的作用。
2. 肾上腺素为儿茶酚胺类物质,可激活肠肌细胞膜上的β受体,导致肠肌舒张。
实验结果显示,滴加肾上腺素溶液后,肠肌运动张力和频率迅速降低,说明肾上腺素具有抑制肠肌运动的作用。
离体家兔肠肌运动一、摘要支配肠道平滑肌的神经有内在神经系统和外来神经系统两大部分,离体肠段虽然失去外来神经的支配,但肠壁神经丛仍存在,在适宜的条件下,仍能保持平滑肌收缩的特性及肠壁神经丛的作用,因此有自动节律性收缩的特性。
内在神经系统在调解胃肠运动和分泌以及胃肠血流中起重要作用。
平滑肌对某些化学物质(如:酸、碱等)及消化道神经释放的递质的刺激具有较强的敏感性。
小肠平滑肌的电活动有快波和慢波两种基本形式。
慢波是平滑肌本身所具有的自发的缓慢电变化,是一种肌源性的电活动,不依赖植物神经系统的支配,慢波的存在是使平滑肌保持一种起步的机能状态。
二、关键词收缩性、乙酰胆碱、肾上腺素、氢氧化钠、盐酸、室温、缺空气三、引言本文在肠段表面依次给予0.01%乙酰胆碱(Ach)、0.01%肾上腺素(E)、1mol/L NaOH、1mol/L HCl、25℃台氏液、缺氧等因素刺激,观察、记录其对小肠收缩情况的影响,为探讨某些体液因素对小肠平滑肌的收缩活动的影响,提供理论依据。
四、材料和方法1、材料:家兔;麦氏浴槽、超级恒温箱、张力换能器、生物信号采集处理系统;25℃、38℃台式溶液、0.01%乙酰胆碱、0.01%肾上腺素、1mol/L NaOH、1mol/L HCl。
2、方法2.1实验装置准备和仪器参数设置在麦氏浴槽中加固定量的(10-15ml)台氏液,调节超级恒温箱的温度,使麦氏浴槽内温度稳定在38℃左右。
用螺旋夹调节气体管道的气体流量,调节至浴槽中气泡一个个逸出为止。
换能器输出线连接微机生物信号采集处理系统,仪器参数:RM6240系统,点击“实验”菜单中的“肠肌记录”,通道时间常数为直流,滤波频率30Hz,速度为25ms。
2.2家兔离体肠肌标本制备取家兔一只,用木槌击其头部至晕,立即剖开腹腔,找到回盲部,然后在离回盲部1cm处剪断,取出回肠10cm左右一段,置于冰冷的氧饱和的台氏液培养皿中,用5ml注射器吸取台氏液将肠内容物冲洗干净,沿肠壁除去肠系膜,然后将回肠剪成1-2cm数小段,换以新鲜台氏液备用。
实验4 离体家兔肠肌运动[摘要] 目的:观察HCl、NaOH、18摄氏度台氏液和肾上腺素乙酰胆碱对离体家兔肠肌运动的影响。
方法:利用RM6240系统采集实验数据,并进行统计分析。
结果:统计分析得最大张力较对照组的P<0.01,最小张力的P<0.05,张力差值>0.05, 说明8个小组的最大张力和最小张力较对照组差异显著,张力差值差异不显著。
结论:肠肌易受到离子环境、神经递质、激素和温度影响,HCl、乙酰胆碱对肠肌收缩有加强作用,NaOH、肾上腺素、18℃台氏液对肠肌收缩有抑制作用。
[关键词] 离体家兔肠肌;张力;1材料1.1实验动物家兔。
1.2主要仪器张力换能器,微机生物信号采集处理系统,麦氏浴槽,超级恒温器;兔手术台,通气管,手术器械。
1.3主要试剂台氏液,HCl,NaOH,肾上腺素,乙酰胆碱溶液。
2方法2.1体家兔肠肌标本制备:取健康家兔一只,用木槌击其头部致昏,立即剖开腹部,找到十二指肠取出15cm左右一段,置于氧饱和的台氏液培养皿中,,沿肠壁除去肠系膜,用5ml注射器吸取台氏液将肠内容物冲洗干净,然后将十二指肠剪成1.5cm8段,在台氏液培养皿中将每段肠肌在其两端对角壁处缝针穿线并打结。
注意保持肠管通畅,勿使其封闭。
2.2标本固定:肠管一端连线系于张力换能器的悬臂梁上,然后放入37氏度麦氏浴槽中,再将肠管另一端系于与曹固定钩上,调节肌张力至2-3g。
2.3实验系统连接及参数设置:(1)麦氏浴槽中加15ml台氏液,调节超级恒温器的温度,使麦氏浴槽内温度稳定在37±0.5摄氏度。
通气管接百分之95氧气+百分之5的二氧化碳混合气体管道。
用螺丝夹调节气体管道的气体流量,调节至浴槽中气泡一个个逸出为止。
(2)能器接输出线接微机生物信号处理系统,仪器参数:开启RM6240系统,点击第一通道,选择“张力”。
3 实验观察3.1 滴加HCl,观察并记录其收缩幅度,反应稳定后换液冲洗。
离体家兔肠肌运动【摘要】目的:观察乙酰胆碱、肾上腺素、盐酸、氢氧化钠、温度和缺氧对离体家兔肠肌运动的影响。
方法:向浸润的离体家兔肠肌的台氏液中依次滴加乙酰胆碱、肾上腺素、盐酸、氢氧化钠、38℃的台氏液迅速换成25℃的台式液,停止通气5min后恢复通气,生物信号处理系统记录肠肌的收缩情况。
结果:乙酰胆碱溶液,氢氧化钠溶液,肠肌运动张力和频率都增;肾上腺素溶液,盐酸溶液,使肠肌运动张力和频率都降低;低温能使肠肌运动张力和频率稍下降但很快恢复正常;停止通气也会使肠肌运动张力和频率减弱。
结论:一定浓度乙酰胆碱、氢氧化钠可促进肠肌的运动;一定浓度的肾上腺素、盐酸l 可以抑制肠肌的运动;短时低温能使肠肌运动减少,降低后又加强直至正常;短时缺氧能使肠肌运动减弱,恢复通气之后运动加强直至正常。
【关键词】离体肠肌;台氏液;乙酰胆碱;肾上腺素;氢氧化钠;盐酸;缺氧1材料和方法1.1材料1.1.1实验材料:家兔的十二指肠1.1.2实验器械:微机生物信号处理系统、麦氏浴槽、张力换能器、固定钩、通气管、超级恒温器、木槌、剪刀、缝针、棉线、镊子。
1.1.3实验药品和试剂:乙酰胆碱、肾上腺素、盐酸、氢氧化钠、25℃的台式液。
1.2方法1.2.1离体家兔十二指肠标本制作1.2.1.1取家兔一只,有木槌击其头部致昏,立即剖开腹腔,找到胃,然后在离胃1CM 处剪断,取出十二指肠约20CM左右的一段,置于氧饱和的台式液培养皿中,延肠壁除去肠系膜,用注射器吸取台式液将肠内容物冲洗干净。
1.2.1.2然后将十二指肠剪成数小段(约1~1.5cm),换以新鲜的台式液备用(注意操作时勿牵拉肠段以免影响收缩功能)。
取小段肠管置于盛有台式液的培养皿中,在其两端对角壁处,分别用缝针穿线并打结。
注意保持肠管通畅,勿使其封闭。
1.2.2标本固定肠管一端连线系于浴槽的固定钩上,然后放入38℃麦氏浴槽中。
再将肠管的另一端系在张力换能器的悬臂梁上。
1.2.3实验装置准备和仪器参数设置把台式液在恒温器中加热并保持到38℃左右,然后在麦氏浴槽中加入一定量的38℃左右的台式液。
离体家兔肠肌运动一、实验目的学习制备离体肠肌运动的实验方法。
观察乙酰胆碱,肾上腺素,氢氧化钠,氯化氢,25℃台氏液分别对离体家兔肠肌运动的影响。
二、实验材料家兔,麦氏浴槽,恒温器,张力换能器,PM6240生物信号采集处理系统,台氏溶液,乙酰胆碱,氢氧化钠,氯化氢,25℃台氏液,肾上腺素,手术器械一套,榔头一个,缝针一个,线诺干,注射器,换气泵。
三、实验方法1.、用榔头将家兔敲晕,迅速打开腹腔,取出小肠,剪一段长约18厘米放入生理盐水中,每个小组剪去一段长约2厘米的小肠,用缝针和线将小肠的两端固定,并有开口。
同时连接麦氏浴槽与恒温器、换气泵。
将小肠在麦氏浴槽固定后用台氏液冲洗,小肠的另一端固定在张力换能器上,连接PM6240生物信号采集处理系统。
观察并记录小肠肌收缩幅度。
2.、在麦氏浴槽中加入乙酰胆碱两滴,观察并记录小肠肌收缩幅度,反应稳定后用恒温台氏液换液冲洗两遍。
3、在麦氏浴槽中加入肾上腺素两滴,观察反应,并记录小肠肌收缩幅度,反应稳定后用恒温台氏液换液冲洗两遍。
4、在麦氏浴槽中加入氢氧化钠两滴,观察并记录小肠肌收缩幅度,反应稳定后用恒温台氏液换液冲洗两遍。
5、在麦氏浴槽中加入氯化氢两滴,观察其反应,记录小肠肌收缩幅度,反应稳定后用恒温台氏液换液冲洗两遍。
6、在麦氏浴槽中换入25℃台氏液,观察并记录小肠肌收缩幅度,反应稳定后用恒温台氏液换液冲洗两遍。
四、实验结果五、实验结论加入乙酰胆碱后,肠段的收缩频率都较正常水平加快,振幅增大。
加肾上腺素后,小肠的收缩运动受到明显的抑制,收缩的强度大大降低。
加入氢氧化钠后,肠段的收缩频率都较正常水平加快,振幅增大。
加入HCl后,肠段的收缩活动减弱,收缩频率和幅度都下降。
用25℃台氏液灌流肠肌后,肠段的收缩活动减弱,收缩频率和幅度都下降。
六、实验讨论注意事项:1.控制浴槽中的水温,以保持肠段的收缩功能与药物反应不被影响。
2.供氧的气泡过大过急都会使悬线振动,导致标本较大幅度地摆动而影响记录结果。
实验四家兔离体小肠平滑肌生理特性及药物作用的观察实验目的:1. 了解兔小肠平滑肌的收缩特性;2. 观察不同剂量乙酰胆碱和异丙肾上腺素对小肠平滑肌的作用;3. 观察肉桂胺和地奥心明对小肠平滑肌的作用。
实验原理:1. 平滑肌收缩原理:平滑肌细胞中的钙离子可以进入肌浆高敏感度钙离子离子通道,钙离子进入细胞内后可激活肌球蛋白轻链激酶(MLCK),MLCK会通过磷酸化肌球蛋白轻链,使其与肌球蛋白重链结合,进而激活肌原纤维的收缩。
平滑肌的松弛则是通过激活肌球蛋白酶磷酸化酶(MLCP),使已经磷酸化的肌球蛋白轻链脱磷酸而实现的。
2. 乙酰胆碱和异丙肾上腺素作用机制:乙酰胆碱是一种促进胆碱能神经传递的神经递质,通过激活M3胆碱能受体激活平滑肌细胞内的MLCK,激活肌原纤维收缩而引起平滑肌收缩。
而异丙肾上腺素则是一种肾上腺素类神经递质,在平滑肌细胞内通过激活β2-肾上腺素能受体作用于肌浆高敏感度钙离子离子通道(L型钙通道),引起离子通道开放,钙离子进入细胞内,激活MLCK,MLCK活化肌原纤维,导致平滑肌收缩。
3. 肉桂胺和地奥心明作用机制:肉桂胺是一种抑制钙离子离子通道开放的钙离子通道阻滞剂,通过抑制平滑肌细胞内的钙离子进入细胞内而阻止平滑肌收缩。
而地奥心明则是一种肾上腺素能受体激动剂,与β2-肾上腺素能受体结合,促进L型钙通道开放,增加平滑肌细胞内的钙离子进入,从而导致平滑肌收缩。
实验步骤:1. 实验前准备:将兔子解剖,取出小肠,并将其中的粘膜和黏膜去除,切成宽约0.5cm,长约 3-4cm 的小块,用泡沫贴片固定于组织浴盆内。
组织浴盆中加入平衡液,使小块与平衡液分离,并置于37℃水浴2至3小时。
2. 实验操作:将小肠平滑肌组织块连接至力记录器,穿孔测压管插入,测压管注射平衡液,保持压力稳定后进行实验记录。
a. 观察小肠平滑肌的基础收缩情况,记录其基础张力;b. 每隔2分钟注射一次乙酰胆碱,初步测定其作用剂量,以其作用达到峰值的最小剂量为标准剂量,记录其作用前和作用峰值的收缩程度,记录对应的张力值;c. 注射不同剂量异丙肾上腺素,观察其作用,记录其作用时的收缩程度和张力;d. 注射肉桂胺,观察其作用,记录其作用时的收缩程度和张力;e. 注射地奥心明,观察其作用,记录其作用时的收缩程度和张力。
离体家兔肠肌运动一、实验摘要1.目的:观察乙酰胆碱、肾上腺素、NaOH 、HCl对肠道平滑肌收缩运动的影响并探究其原理和机制。
2.方法:分别给予离体家兔肠肌标本乙酰胆碱、肾上腺素、NaOH 、HCl刺激,完成每次刺激并出现明显现象后用37℃台氏液冲洗肠肌标本,并用生物信号采集处理系统记录其在不同因素作用下的张力曲线,观察其张力活动的特点并记录。
3.结果:实验结果显示当滴加乙酰胆碱、NaOH刺激离体肠肌时,张力曲线明显上升,且频率加快,当用肾上腺素、HCl条件刺激离体肠肌时,张力曲线则下降,且频率减慢。
4.结论:乙酰胆碱和NaOH可增强离体肠肌的运动,肾上腺素和HCl可抑制离体肠肌的运动。
二、关键词:肠肌、张力、肾上腺素、乙酰胆碱三、引言:消化道平滑肌与骨骼肌、心肌一样具有肌肉组织共有的特性,消化道细胞间的缝隙连接可使电信号在细胞间传递,如兴奋性、传导性和收缩性等。
给予离体肠肌以接近在体情况的适宜环境,消化道平滑肌仍可保持良好的生理特性。
离体肠段虽然失去外来神经的支配,但肠壁神经丛仍存在,在适宜的条件下,仍能保持平滑肌收缩的特性及肠壁神经丛的作用。
本次实验在肠段表面依次给予乙酰胆碱、肾上腺素、NaOH、HCl的因素刺激,观察、记录其对小肠收缩情况的影响。
四、材料和方法1.实验对象:家兔的十二指肠段2.实验仪器:麦氏浴槽、超级恒温箱、张力换能器、生物信号采集处理系统电脑、生物信号采集处理系统、木槌、手术器械3.实验药品和试剂:乙酰胆碱、肾上腺素、NaOH、HCl、台氏液4.实验方法:1)在麦氏浴槽中加15ml台氏液,调节超级恒温箱的温度,使麦氏浴槽内温度稳定在37℃。
通气管连接95%O2+5%CO2混合气体通道,用螺旋夹调节气体管道的气体流量,调节至浴槽中有气泡出来。
2)RM6240系统:点击“实验”菜单中的“肠肌记录”,仪器参数:通道时间常数为直流,滤波频率10HZ,灵敏度3g,采样频率200HZ,扫描述度1s/div。
离体家兔肠肌运动1.实验目的:学习哺乳动物离体肠标本制备方法,观察消化道平滑肌的一般生理特性及某些因素对舒缩活动的影响。
2.实验原理:消化道平滑肌和骨骼肌、心肌一样,也具有兴奋性、传导性和收缩性,有些也具有自律性。
相比之下消化道平滑肌的兴奋性低,收缩慢,伸展性大,具有紧张性收缩,对化学物质、温度变化等刺激较敏感的特性。
本实验选取家兔十二指肠。
十二指肠离体后,将其置于38℃台氏液中,观察其收缩活动及环境变化的影响,观察分析上述生理特性。
3.实验材料:1、实验动物:家兔。
2、实验器械: 电热恒温水浴锅、麦氏浴槽、张力换能器、生物记录系统、注射器、培养皿、烧杯、螺丝夹3、实验药品:0.001%乙酰胆碱、0.001%肾上腺素、1N NaOH溶液、lN HCl溶液。
4..实验方法:4.1、标本制备(肠肌标本)①击昏家兔:用木槌猛击兔头枕部,使其昏迷。
②剖开腹腔快速取出肠管:立即剖开腹腔,找出胃幽门与十二指肠交界处,快速取长20~30cm的肠管(十二指肠),先将与该肠管相连的肠系膜沿肠缘剪去,置于供氧台氏液中轻轻漂洗,把肠内容物基本洗净。
4.2、标本固定制作离体肠标本:将肠管分成数段,每段长1-2cm,上端用线连接张力换能器,下端用线固定于固定钩,保存于供氧的38℃左右的台氏液中,调节肌张力至2~3g。
4.3、仪器连接及参数(仪器定标)张力换能器与生物信号采集处理系统第一通道,生物信号采集处理系统(RM6240系统)参数设置:直流,滤波频率10Hz,灵敏度3g,采样频率200Hz,扫描速度1s/div4.4、实验观察1待标本稳定后,记录十二指肠平滑肌收缩的对照曲线。
2乙酰胆碱的作用:用滴管吸入0.01%乙酰胆碱(Ach)向灌流浴槽内滴1~2滴。
观察到明显效应后,立即从排水管放出浴槽内含乙酰胆碱的台氏液,加入新鲜温台氏液,以洗涤或稀释残留的乙酰胆碱,使之达到无效浓度,待十二指肠运动恢复后进行下一项。
3肾上腺素的作用:按上述方法将0.01%肾上腺素加入浴槽内1~2滴,观察十二指肠运动的反应。
一、实验目的1. 了解肠肌收缩的基本原理和过程。
2. 掌握观察肠肌收缩的方法和技巧。
3. 分析不同刺激对肠肌收缩的影响。
二、实验原理肠肌是一种平滑肌,其收缩受到神经和体液调节的影响。
在实验中,通过给予肠肌不同的刺激,观察其收缩反应,从而了解刺激对肠肌收缩的影响。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:家兔离体肠肌标本、恒温浴槽、木槌、麦氏浴槽、棉线若干、手术剪、氧气泵、微机生物信号采集处理系统、张力传感器、缝针、培养皿。
2. 实验药品:台式液、乙酰胆碱、肾上腺素、氢氧化钠溶液、盐酸溶液。
四、实验方法1. 准备离体肠肌标本:取家兔一只,用木槌猛击后脑勺,使之昏迷。
将其仰卧位固定,用手术剪从剑突下沿腹部白线向耻骨联合处切开,取出肠肌标本。
2. 将肠肌标本放入恒温浴槽中,用37℃的台式液进行灌流,保持肠肌活性。
3. 将肠肌标本一端固定在麦氏浴槽的支架上,另一端连接张力传感器。
4. 调节微机生物信号采集处理系统,实时监测肠肌收缩情况。
5. 分别给予肠肌标本以下刺激:(1)乙酰胆碱刺激:将乙酰胆碱溶液滴加到肠肌标本上,观察其收缩反应。
(2)肾上腺素刺激:将肾上腺素溶液滴加到肠肌标本上,观察其收缩反应。
(3)氢氧化钠溶液刺激:将氢氧化钠溶液滴加到肠肌标本上,观察其收缩反应。
(4)盐酸溶液刺激:将盐酸溶液滴加到肠肌标本上,观察其收缩反应。
6. 记录不同刺激下肠肌的收缩张力、频率和持续时间。
五、实验结果与分析1. 乙酰胆碱刺激:滴加乙酰胆碱溶液后,肠肌运动张力和频率都增大,说明乙酰胆碱可增强肠肌收缩。
2. 肾上腺素刺激:滴加肾上腺素溶液后,肠肌运动张力与频率迅速降低,说明肾上腺素可抑制肠肌收缩。
3. 氢氧化钠溶液刺激:滴加氢氧化钠溶液后,肠肌运动张力和频率都增大,说明氢氧化钠可增强肠肌收缩。
4. 盐酸溶液刺激:滴加盐酸溶液后,肠肌运动张力与频率迅速降低,说明盐酸可抑制肠肌收缩。
六、实验结论1. 乙酰胆碱、氢氧化钠溶液可增强肠肌收缩,肾上腺素、盐酸溶液可抑制肠肌收缩。
实验4 离体家兔肠肌运动[摘要] 目的:观看HCl、NaOH、18摄氏度台氏液和肾上腺素乙酰胆碱对离体家兔肠肌运动的阻碍。
方式:利用RM6240系统搜集实验数据,并进行统计分析。
结果:统计分析得最大张力较对照组的P<0.01,最小张力的P<0.05,张力差值>0.05, 说明8个小组的最大张力和最小张力较对照组不同显著,张力差值不同不显著。
结论:肠肌易受到离子环境、神经递质、激素和温度阻碍,HCl、乙酰胆碱对肠肌收缩有增强作用,NaOH、肾上腺素、18℃台氏液对肠肌收缩有抑制作用。
[关键词] 离体家兔肠肌;张力;1材料1.1实验动物家兔。
1.2要紧仪器张力换能器,微机生物信号搜集处置系统,麦氏浴槽,超级恒温器;兔手术台,通气管,手术器械。
1.3要紧试剂台氏液,HCl,NaOH,肾上腺素,乙酰胆碱溶液。
2方式2.1体家兔肠肌标本制备:取健康家兔一只,用木槌击其头部致昏,当即剖开腹部,找到十二指肠掏出15cm左右一段,置于氧饱和的台氏液培育皿中,,沿肠壁除去肠系膜,用5ml注射器吸取台氏液将肠内容物冲洗干净,然后将十二指肠剪成 1.5cm8段,在台氏液培育皿中将每段肠肌在其两头对角壁处缝针穿线并打结。
注意维持肠管通畅,勿使其封锁。
2.2标本固定:肠管一端连线系于张力换能器的悬臂梁上,然后放入37氏度麦氏浴槽中,再将肠管另一端系于与曹固定钩上,调剂肌张力至2-3g。
2.3实验系统连接及参数设置:(1)麦氏浴槽中加15ml台氏液,调剂超级恒温器的温度,使麦氏浴槽内温度稳固在37±0.5摄氏度。
通气管接百分之95氧气+百分之5的二氧化碳混合气体管道。
用螺丝夹调剂气体管道的气体流量,调剂至浴槽中气泡一个个逸出为止。
(2)能器接输出线接微机生物信号处置系统,仪器参数:开启RM6240系统,点击第一通道,选择“张力”。
3 实验观看3.1 滴加HCl,观看并记录其收缩幅度,反映稳固后换液冲洗。
实验4 离体家兔肠肌运动
[摘要] 目的:观察HCl、NaOH、18摄氏度台氏液和肾上腺素乙酰胆碱对离体家兔肠肌运动的影响。
方法:利用RM6240系统采集实验数据,并进行统计分析。
结果:统计分析得最大张力较对照组的P<0.01,最小张力的P<0.05,张力差值>0.05, 说明8个小组的最大张力和最小张力较对照组差异显著,张力差值差异不显著。
结论:肠肌易受到离子环境、神经递质、激素和温度影响,HCl、乙酰胆碱对肠肌收缩有加强作用,NaOH、肾上腺素、18℃台氏液对肠肌收缩有抑制作用。
[关键词] 离体家兔肠肌;张力;
1材料
1.1实验动物家兔。
1.2主要仪器张力换能器,微机生物信号采集处理系统,麦氏浴槽,超级恒温器;兔手术台,通气管,手术器械。
1.3主要试剂台氏液,HCl,NaOH,肾上腺素,乙酰胆碱溶液。
2方法
2.1体家兔肠肌标本制备:取健康家兔一只,用木槌击其头部致昏,立即剖开腹部,找到十二指肠取出15cm左右一段,置于氧饱和的台氏液培养皿中,,沿肠壁除去肠系膜,用5ml注射器吸取台氏液将肠内容物冲洗干净,然后将十二指肠剪成1.5cm8段,在台氏液培养皿中将每段肠肌在其两端对角壁处缝针穿线并打结。
注意保持肠管通畅,勿使其封闭。
2.2标本固定:肠管一端连线系于张力换能器的悬臂梁上,然后放入37氏度麦氏浴槽中,再将肠管另一端系于与曹固定钩上,调节肌张力至2-3g。
2.3实验系统连接及参数设置:
(1)麦氏浴槽中加15ml台氏液,调节超级恒温器的温度,使麦氏浴槽内温度稳定在37±0.5摄氏度。
通气管接百分之95氧气+百分之5的二氧化碳混合气体管道。
用螺丝夹调节气体管道的气体流量,调节至浴槽中气泡一个个逸出为止。
(2)能器接输出线接微机生物信号处理系统,仪器参数:开启RM6240系统,点击第一通道,选择“张力”。
3 实验观察
3.1 滴加HCl,观察并记录其收缩幅度,反应稳定后换液冲洗。
3.2 滴加NaOH,观察并记录其收缩幅度,待曲线恢复至基线或基本稳定后换液冲洗。
3.3用18摄氏度的台氏液灌流肠肌,观察并记录其收缩幅度,待恢复正常。
3.4加入肾上腺素溶液后,观察其反应。
反应稳定后换液冲洗。
3.5 加入乙酰胆碱溶液,观察并记录其反应。
3.6 统计方法结果以+ S 表示,用Excel统计函数进行数据统计。
4. 实验结果
数据分析统计结果如下表:
得结果当p<0.05差异显著;p>0.05差异不显著。
与对照组比较:*P<0.01 , **P<0.05 , ***P>0.05,前两者差异显著,后一者差异不显著。
5.讨论
1正常情况下,我们观察到离体十二指肠平滑肌在台氏液中可以自动地、缓慢地收
缩。
2、在浴槽中加入0.001%乙酰胆碱(Ach)2滴后,可见离体肠管活动增强,描记曲线出现收缩频率变快,幅度增加。
机制如下:①Ach与肌膜M受体结合,使平滑肌Ca2+专用通道开放,Ca2+内流上升,一方面使肌浆[Ca2+]上升,收缩幅度上升;另一方面,使平滑肌兴奋性上升,直接或间接使其收缩频率上升。
②Ach与肌膜M受体结合,引起生电性钠泵活动,使静息点位下降,最终引起平滑肌兴奋性上升,使其收缩频率上升。
.3、在浴槽中加入0.001%肾上腺素2滴(约0.2ml)后,可见离体肠管活动减弱,描记曲线出现收缩频率变慢,幅度减小以及基线下移。
机制如下:①肾上腺素与肠肌细胞膜上的α和β两种受体共同结合,使K+、Ca2+外流增多,细胞膜发生超极化,肠肌兴奋性降低,收缩频率下降。
②同时,肾上腺素还单独作用于β受体,使Ca2+泵活动上升,还可以使Ca2+外流增加,使肌浆[Ca2+]下降,使收缩频率下降。
③此外,肾上腺素还能使生电钠泵活动上升,引起细胞膜发生超极化,肠肌兴奋性降低,收缩频率下降。
.4、消化道平滑肌对温度刺激敏感,将38度的台氏液迅速换成25度的台氏液,前期肠肌的代谢水平尚未适应新环境,随后肠肌的代谢逐渐升高至超过正常水平,最后趋于正常。
.5、在浴槽中加入1NNaOH溶液2滴后,离体肠管活动增强,描记曲线出现收缩幅度增加。
机制如下:NaOH可以中和H+,使[H+]下降,使得Ca2+内流上升使平滑肌兴奋性上升,同时使肌浆网[H+]上升并使Ca2+与肌钙蛋白结合上升,最后使得其收缩频率和幅度上升。
.6、在浴槽中加入1N盐酸溶液2滴后,离体肠管活动减弱,描记曲线出现收缩幅度降低,频率变慢。
机制如下:①细胞外[H+]升高时,Ca2+通道的活性受到抑制,使得Ca2+内流减少,使肠肌兴奋性降低,收缩频率下降。
②同时使肌浆网[H+]上升,使肌浆网[H+]下降,Ca2+与肌钙蛋白结合下降,使收缩幅度下降。
另外
家兔离体小肠各段平滑肌尽管失去外来神经支的支配, 但壁内神经丛依然存在。
由位于环行肌粘膜下边缘与肠肌丝Cajal 间质细胞是小肠慢波活动的起搏器和传导者。
由Cajal 间质细胞自发活动的产生和传导易受到离子环境、神经递质和激素等
(1).加入HCl后,对小肠的收缩活动有增强效应,由此可见,酸性环境有助于小肠平滑肌的运动。
(2).加入氢氧化钠后,肠段的收缩频率都较正常水平减慢,振幅减小。
(3).温度对于肠段的运动也有影响。
当将体外环境温度改变至28℃时,肠段的活动明显加强;而当将体外环境的温度改变至45℃时,肠段的活动明显减弱。
加入18摄氏度台氏液后,温度较原先37℃下降,故肠肌收缩略有下降。
(4).加肾上腺素后,小肠的收缩运动受到抑制,收缩的强度降低。
(5).加入乙酰胆碱后,肠段的收缩幅度明显变大,即乙酰胆碱促进了肠段的收缩。
这是因为乙酰胆碱与肠道的平滑肌细胞上的特殊位点结合,促进钙离子在肌浆网中的传递,从而增强平滑肌的收缩。
肠的平滑肌有神经调节的作用。
小肠平滑肌的肌间神经丛中主要有两类神经元。
一类神经元含血管活性肠肽、腺苷酸环化酶激活肽、一氧化氮合成酶等,它们可以使中间神经元或抑制性运动神经元;另一类神经元含乙酰胆碱、速激肽、P物质等,它们可以使中间神经元或兴奋性运动神经元。
这些神经元通过他们末梢释放的递质,调节小肠平滑肌的活动。
故加入乙酰胆碱,实际上是通
过其对于神经元的作用来调节肠段的运动,加快加剧肠段的收缩。
[1]
6.结论
肠肌易受到离子环境、神经递质、激素和温度影响,HCl、乙酰胆碱对肠肌收缩有加强作用,NaOH、肾上腺素、18℃台氏液对肠肌收缩有抑制作用。
7.参考文献
[1] 夏树林, 朱道立(南通大学生命科学学院)撰写的《化学药物对家兔离体小肠平滑肌电生理特性的影响》
[2] 陆源,林国华,杨武鸣主编《机能学实验教程》(第二版)北京:科学出版社,2010
原始数据。